B7-H3和B7-H4在鼻咽癌組織中的表達及意義

鄭大勇 董少婷 陳錦章 呂成偉 黃振華 黃 娜 何本夫 石 敏

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)是我國廣東省高發(fā)的惡性腫瘤，其發(fā)生有明顯的地域性和家族集聚現(xiàn)象，是嚴重威脅我國人民生命健康的惡性腫瘤之一[1]。目前對于其發(fā)病原因研究顯示其與環(huán)境、飲食、EB病毒密切相關，但是上述因素不能完全解釋鼻咽癌發(fā)病和轉移的機制，近年來一些研究發(fā)現(xiàn)，惡性腫瘤的發(fā)生與免疫逃避有關[2]，其中共刺激分子B7家族的下調或缺失表達是腫瘤發(fā)生的重要因素之一。為此本研究對協(xié)同共刺激分子 B7-H3和協(xié)同共刺激分子 B7-H4在鼻咽癌患者中的表達情況進行了研究，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象

2012年1月-2013年10月，我院收治的并經(jīng)組織病理學檢查確診的60例鼻咽癌為病例組，均未進行化療和放療等治療；病例資料完整，未合并其他器官腫瘤，其中男性38例，女性22例，年齡45～63歲，平均年齡(53.2±7.5)歲，并且選擇同期來我院進行手術治療的30例為鼻咽部炎癥患者的鼻咽部組織作為對照組，對照組患者男性18例，女性12例，年齡42～64歲，平均年齡(53.4±7.5)歲，兩組患者年齡、性別比較無明顯的統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

所有鼻咽部組織標本均采用免疫組化法測定其中B7-H3和B7-H4的表達情況，并進行相關性分析，用PBS代替一抗作為陰性對照，操作全過程由同一病理技師完成，以避免人為誤差。

結果判斷按照免疫組化染色陽性腫瘤細胞比例和細胞膜染色強度進行評分，其中無陽性細胞為0分，陽性細胞數(shù)<10%為1分，10%～50%為2分，>50%為3分；無著色為0分，輕度著色為1分，中度著色為2分，重度著色為3分；上述兩項評分之和<3分為陰性(-)，≥3分為陽性(+)。

1.3 統(tǒng)計學方法

應用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件進行分析，計數(shù)資料采用卡方檢驗，以P<0.05認為有統(tǒng)計學差異。

2 結果

2.1 兩組B7-H3和B7-H4表達情況比較

B7-H3和B7-H4在鼻咽癌組織中的陽性率均明顯高于正常鼻咽組織，差異均有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)，見表1。

表1 兩組患者B7-H3和B7-H4表達情況比較(例，%)

2.2 B7-H3表達與鼻咽癌臨床病理特征的關系

B7-H3表達與鼻咽癌臨床分期和淋巴結轉移有關，Ⅲ+Ⅳ期及有淋巴結轉移患者B7-H3陽性率分別高于Ⅰ+Ⅱ期及無淋巴結轉移者，差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 B7-H3表達與鼻咽癌臨床病理特征的關系/例

2.3 B7-H4表達與鼻咽癌臨床病理特征的關系

B7-H4表達與鼻咽癌臨床分期和淋巴結轉移有關，Ⅲ+Ⅳ期及有淋巴結轉移患者B7-H4陽性率分別高于Ⅰ+Ⅱ期及無淋巴結轉移者，差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 B7-H4表達與鼻咽癌臨床病理特征的關系/例

3 討論

惡性腫瘤的發(fā)生、轉移、復發(fā)均與腫瘤細胞的免疫逃逸密切相關，腫瘤在其發(fā)生、發(fā)展過程中常常表達一些新的抗原，這些新的抗原應當被機體的免疫系統(tǒng)所識別，并發(fā)生免疫反應清除腫瘤細胞，但是事實上，幾乎在所有種類的腫瘤的組織中心及其周邊發(fā)現(xiàn)有大量免疫細胞浸潤，但是免疫系統(tǒng)為什么未發(fā)生免疫應答殺滅腫瘤細胞，一直是臨床研究的熱點問題。

近年來研究顯示腫瘤的免疫逃逸可能與協(xié)同刺激分子及其調節(jié)網(wǎng)絡密切相關，協(xié)同刺激分子主要分為B7/CD28和TNF/TNFR兩個超家族，其中協(xié)同刺激分子B7-H3和B7-H4與腫瘤發(fā)生密切相關，Luo等[3]對肥大細胞瘤小鼠模型的研究顯示.腫瘤細胞表面B7-H3可以增強腫瘤細胞的免疫原性，將轉染B7-H3的腫瘤細胞培養(yǎng)后注射到正常小鼠的體內，結果表明大約50%的小鼠產(chǎn)生了抗腫瘤效應，另一個研究顯示BT-H3的表達與胃癌患者的生存率密切相關[4]。Lu等[5]對食管癌患者的研究發(fā)現(xiàn)B7-H4在食管癌細胞表達明顯高于正常組織，并且B7-H4和CD3+和CD8+呈現(xiàn)明顯的負相關。Quandt等[6]對黑色素瘤患者中B7-H4的表達及預后相關性進行了研究，結果顯示B7-H4不但在黑色素瘤原發(fā)灶中高度表達，并且在轉移灶中高度表達，并且進一步的研究顯示B7-H4的表達水平與患者的生存時間程序明顯的負相關。但是目前國內外關B7-H3和B7-H4的表達及其和鼻咽癌轉移、預后關系的研究較少。本研究顯示Ⅲ期和IV期及有淋巴結轉移的患者B7-H3和B7-H4陽性率比例明顯高于B7-H3和B7-H4陰性患者，這一結果說明B7-H3和B7-H4與鼻咽癌患者臨床分期和淋巴結轉移密切相關，免疫逃逸機制在鼻咽癌的發(fā)病和淋巴轉移中具有發(fā)揮重要的臨床價值。到目前為止，聯(lián)合B7-H3和B7-H4 2種分子鼻咽癌癌組織中測定本研究尚屬首次開展，并且研究結果顯示鼻咽癌發(fā)病和轉移與B7-H3和B7-H4 2種分子，但是本研究也存在局限性，本研究研究尚屬組織病理學水平的一些初步探索，且僅停留于小樣本水平，采用的方案為免疫組化激素，陽性結果判斷標準不統(tǒng)一，且受到實驗條件等客觀因素的限制，難免會出現(xiàn)偏差，因此要闡明B7-H3和B7-H4在鼻咽癌癌中的具體作用機制還有待更全面、更深入的研究分析。

[1] Chee Ee Phua V,Loo WH,Yusof MM,et al.Treatment outcome for nasopharyngeal carcinoma in university malaya medical centre from 2004-2008〔J〕.Asian Pac J Cancer Prev，2013，14(8):4567-4570.

[2] Nagaraj S,Gupta K,Pisarev V,et al.Alterd recognition of antigen is a mechanism of CD8+T cell tolerance in cancer 〔J〕.Nat Med,2007,13(4)：828-835.

[3] Luo L，Qiao H，Meng F，et al.Arsenic trioxide synergizes with B7-H3 mediated immunotherapy to eradicate hepatocellular carcinomas〔J〕.Int J Cancer，2006，118(7)：1823-1830.

[4] Wu CP,Jiang JT,Tan M,et al.Relationship between costimulatory molecule B7-H3 expression and gastric carcinoma histology and prognosis〔J〕.World J Gastroenterol，2006，12(3)：457-459.

[5] Lu B,Chen L,Liu L,et.al.T-cell-mediated tumor immune surveillance and expression of B7 co-inhibitory molecules in cancers of the upper gastrointestinal tract〔J〕.Immunol Res,2011，50(2-3):269-275.

[6] Quandt D，F(xiàn)iedler E，Boettcher D，et al.B7-h4 expression in human melanoma:its association with patients' survival and antitumor immune response〔J〕.Clin Cancer Res，2011，17(10):3100-3111.