肺鱗癌術(shù)后組織中B7-H4、泛素特異性蛋白酶10和p53的表達(dá)及關(guān)系

王再紅

(秦皇島市海港醫(yī)院呼吸內(nèi)科，山東 秦皇島 066000)

肺鱗癌以中央型肺癌最多見。病變起源于支氣管黏膜柱狀上皮鱗化的上皮細(xì)胞。腫瘤的侵襲作用明顯，在此過程中，多種基因和蛋白均有明顯的促進(jìn)作用〔1〕。B7-H4是共刺激分子B7家族中的新成員〔2〕，在正常上皮中不表達(dá)或低表達(dá)，在多種腫瘤的表達(dá)上調(diào)，介導(dǎo)腫瘤的發(fā)生及發(fā)展〔3，4〕。泛素特異性蛋白酶(USP)10是一種泛素特異性蛋白酶，可以調(diào)控p53的功能，同時(shí)可以逆轉(zhuǎn)MDM2誘導(dǎo)的p53轉(zhuǎn)運(yùn)和降解過程〔5〕。本文關(guān)注肺鱗癌術(shù)后組織中B7-H4、USP10和p53的表達(dá)，關(guān)注其相關(guān)性。

1 材料和方法

1.1一般資料 2011年1月至2013年12月我院確診為肺鱗癌，并行根治手術(shù)的患者117例作為觀察組，均符合WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)。男70例，女47例；年齡51～85(平均66.5)歲。高分化67例，中分化33例，低分化17例。選取支氣管黏膜上皮鱗化組織共46例作為對(duì)照組，男30例，女16例；年齡52～80歲，平均69.7歲，兩組一般臨床資料無明顯差別，具有可比性。

1.2B7-H4、USP10和p53蛋白表達(dá)的檢測(cè) B7-H4、USP10和p53蛋白的濃縮液均購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司，按不同比例進(jìn)行稀釋后行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選取表達(dá)最理想的濃度用于正式實(shí)驗(yàn)。正式檢測(cè)均應(yīng)用免疫組化二步法。操作均由同一主管技師進(jìn)行，嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行操作，嚴(yán)格質(zhì)量控制。

1.3B7-H4、USP10和p53蛋白檢測(cè)結(jié)果的判定方法 B7-H4以細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞膜內(nèi)出現(xiàn)黃色顆粒為陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞，USP10以細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞，p53以細(xì)胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞。每張切片選擇5個(gè)400倍的高倍視野，取其平均值作為樣本最終的陽(yáng)性表達(dá)率，以陽(yáng)性細(xì)胞≥5％定為陽(yáng)性，以陽(yáng)性細(xì)胞<5％定為陰性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組B7-H4、USP10和p53蛋白表達(dá)陽(yáng)性率的比較 觀察組B7-H4和p53表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，USP10表達(dá)陽(yáng)性率明顯低于對(duì)照組(P<0.000 1)。見表1。

2.2B7-H4、USP10和p53在觀察組不同臨床特征中的表達(dá)比較 觀察組B7-H4、USP10和p53表達(dá)與腫瘤最大徑、分化程度、脈管浸潤(rùn)和是否伴有壞死密切相關(guān)。見表2。

表1 兩組B7-H4、USP10和p53蛋白表達(dá)陽(yáng)性率的比較〔n(％)〕

2.3觀察組B7-H4、USP10和p53的相關(guān)性 觀察組B7-H4和p53的表達(dá)正相關(guān)(r=0.47，P=0.025 4)，USP10和p53負(fù)相關(guān)(r=-0.49，P=0.019 8)。

表2 B7-H4、USP10和p53在觀察組不同臨床特征中的表達(dá)比較〔n(％)〕

3 討 論

肺鱗癌是肺組織發(fā)生的非小細(xì)胞肺癌中最常見的類型，占男性的44％和女性的25％，吸煙是重要的決定性危險(xiǎn)因素?；颊叱１憩F(xiàn)為進(jìn)行性氣短、咳嗽、胸痛、壓迫感、咯血等〔6〕。近來學(xué)者關(guān)注在鱗癌病變進(jìn)展中多種基因和蛋白的調(diào)控作用〔7〕。B7-H4是近年來關(guān)注的重要蛋白之一，其能抑制CD4和CD8陽(yáng)性的T細(xì)胞活化，減少機(jī)體IL-2和IL-4的分泌，阻斷細(xì)胞周期，使其停留在G0/G1期。從而負(fù)向調(diào)控T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫性功能〔8，9〕。也有研究顯示B7-H4是一種保守的抗原，由282個(gè)氨基酸組成，在胞外區(qū)存在一個(gè)Ig樣的結(jié)構(gòu)域，但是缺乏明顯的跨膜區(qū)〔10，11〕，此種結(jié)構(gòu)使其易于腫瘤基因結(jié)合，促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。USP家族可以與轉(zhuǎn)錄復(fù)合物SAGA的亞單位結(jié)合，促進(jìn)SAGA乙?；旧w上的組蛋白H2A表達(dá)，同時(shí)激活基因的轉(zhuǎn)錄，使細(xì)胞向G1/S的過渡，引發(fā)腫瘤的進(jìn)展〔12，13〕。USP10作為USP家族中的重要成員，可以引起p53的穩(wěn)定表達(dá)，此時(shí)p53可以引起USP10由胞質(zhì)向胞核移位〔14〕。USP10的此種功能受ATM介導(dǎo)的磷酸化調(diào)控，當(dāng)細(xì)胞質(zhì)中的USP10進(jìn)入細(xì)胞核，其構(gòu)型和成分發(fā)生變化，也使細(xì)胞丟失了USP10的基本功能，這是細(xì)胞惡變的潛在危險(xiǎn)因素〔15〕。p53分為野生型和突變型，野生型在實(shí)驗(yàn)中極難檢測(cè)到，因此p53常表達(dá)突變型〔16，17〕。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的亦為突變型。有學(xué)者認(rèn)為p53是細(xì)胞凋亡的調(diào)控因子〔18〕，在多種腫瘤中高表達(dá)，不僅引發(fā)腫瘤細(xì)胞的增殖，還可以促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展〔19〕。

本研究提示B7-H4和p53高表達(dá)、USP10低表達(dá)能促進(jìn)腫瘤的發(fā)生。B7-H4、USP10和p53三種蛋白異常表達(dá)引起腫瘤的快速生長(zhǎng)，加速腫瘤的進(jìn)展，提高腫瘤的臨床分期。B7-H4、USP10和p53參與腫瘤的分化過程，也提示三種蛋白是腫瘤內(nèi)在分化過程中的重要調(diào)節(jié)蛋白。三種蛋白參與腫瘤的播散過程，這種過程直接引起腫瘤的進(jìn)展，形成遠(yuǎn)隔器官的轉(zhuǎn)移灶。由于三種蛋白與腫瘤的壞死相關(guān)，提示B7-H4、USP10和p53的異常表達(dá)可以引起腫瘤性的壞死，也使腫瘤的惡性程度增加。腫瘤性的壞死是徹底的，因此形成壞死組織不能恢復(fù)，加劇病變的進(jìn)展及器官功能的喪失。B7-H4、USP10均與p53具有協(xié)同作用，也提示B7-H4、USP10的作用一定程度上是通過影響p53實(shí)現(xiàn)的。B7-H4、USP10在腫瘤進(jìn)展中還參與多種生物學(xué)過程，如多肽與蛋白質(zhì)激素的合成與分泌、膜受體的成熟過程及血漿蛋白前體的激活等〔20〕。近來學(xué)者認(rèn)為USP10可以調(diào)節(jié)細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化及過程，同時(shí)加速腫瘤細(xì)胞的侵襲和播散〔21〕，B7-H4、USP10在作用過程中均與增殖相關(guān)，由于p53是增殖有關(guān)的直接蛋白，因此其協(xié)同作用更明顯，作用通路更直接〔22〕。

總之，肺鱗癌術(shù)后組織中B7-H4、USP10和p53均異常表達(dá)，三者對(duì)腫瘤的進(jìn)展有明顯的促進(jìn)作用。B7-H4、USP10均可能通過對(duì)p53的調(diào)節(jié)發(fā)揮作用。

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