木樨草素對高脂血癥模型大鼠血漿一氧化氮水平與抗氧化能力的影響

馬寶慧 高永勝 潘桂蘭 陳曉東 呂 軍

(包頭醫(yī)學院生理學教研室，內蒙古 包頭 014060)

木樨草素弱酸性四羥基黃酮類化合物，具有抗腫瘤、抗炎、抗菌等功效〔1〕。而關于木樨草素對高脂血癥大鼠血漿一氧化氮(NO)水平及氧化應激的影響鮮有報道。本文研究木樨草素對大鼠血漿NO水平及抗氧化能力的影響。

1 材料與方法

1.1藥物與試劑 木樨草素(分析純，陜西慧科植物開發(fā)有限公司，純度99%)，溶于DMSO(含量<0.1%)，去離子水稀釋；血漿一氧化氮(NO)、誘導型一氧化氮合酶(iNOS)、總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.2動物與飼料 Wistar大鼠24只，雄性，體重120～202 g，平均153 g，購自內蒙古大學動物實驗中心。高脂飼料由81.3%基礎飼料，0.5%膽鹽，10%豬油，3%膽固醇，0.2%丙基硫氧嘧啶，5%白糖組成。

1.3分組與方法 動物適應性飼養(yǎng)5 d后，隨機分為空白對照組(C組)，高脂血癥模型組(H組)，木樨草素治療組(L組)，每組8只，自由飲水；C組飼喂基礎飼料，H組和L組飼喂高脂飼料，30 d高脂血癥模型成功建立后，L組每天灌胃(5 mg/100 g)，C組和H組每天以同體積去離子水灌胃。治療時間30 d。30 d后眶靜脈采血，分離血漿，檢測血漿NO、iNOS和血漿T-AOC、GPX、SOD、MDA。

2 結 果

2.1高脂飼料飼喂對大鼠血漿膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平的影響 見表1，適應性喂養(yǎng)后H組和L組大鼠用高脂飼料飼喂1個月，血漿TC、TG含量顯著高于C組(P<0.05)，表明高脂血癥大鼠模型建立成功。

2.2木樨草素對大鼠血漿NO水平及iNOS活力的影響 H組大鼠血漿NO含量顯著增加，與C組相比具有明顯差異(P<0.05)。與H組相比，L組大鼠血漿NO含量明顯降低(P<0.05)，表明木樨草素治療可以降低大鼠血漿NO含量。iNOS活力在H組大鼠血漿顯著高于C組(P<0.05)。與H組相比，L組大鼠血漿NOS活力顯著下降(P<0.05)，表明木樨草素可以抑制iNOS活力，降低血漿NO含量。見表2。

2.3木樨草素對大鼠血漿抗氧化能力的影響 見表3，H組大鼠血漿T-AOC顯著降低，與C組相比具有顯著差異(P<0.05)；L組大鼠T-AOC顯著高于H組(P<0.05)，說明高脂血癥大鼠總抗氧化能力下降，木樨草素可以提高大鼠總抗氧化力。與C組相比，H組血漿GPX活力明顯下降(P<0.05)；L組大鼠血漿GPX和SOD活力顯著高于H組(P<0.05)。表明木樨草素可以使高脂血癥大鼠GPX、SOD活力顯著上升。高脂飼料飼喂可引起大鼠血漿MDA含量顯著高于C組，而木樨草素治療可以降低L組大鼠血漿MDA含量。

表1 高脂飼料飼喂1個月后大鼠血漿TC、TG測定結果

表2 實驗大鼠血漿NO水平及iNOS活力

表3 實驗大鼠抗氧化能力的測定結果

3 討 論

本實驗采用加喂膽固醇+豬油并輔以豬膽鹽的高脂飼料建立高脂血癥大鼠模型，通過檢測血漿TC、TG含量顯示30 d即造模成功。木樨草素是一種黃酮類物質，已被國外確認為一種法定的食品色素，表明其作為食品添加劑具有安全性。近年來，木樨草素作為食品添加劑的使用引起了國內外的廣泛重視。本研究旨在分析木樨草素對于治療高脂血癥的作用。

NO在體內廣泛參與多種生理過程。但在受到外界刺激時，體內多種細胞如巨噬細胞、肝細胞、軟骨細胞、滑膜細胞等可異常表達iNOS，產(chǎn)生比生理量大得多的NO〔2〕，且持續(xù)時間更長。本研究發(fā)現(xiàn)高脂血癥模型大鼠血漿NO含量顯著增加，推測高脂可能刺激細胞異常表達iNOS，產(chǎn)生大量NO，從而引起血漿NO含量明顯增高。本研究提示木樨草素可以抑制iNOS活性從而降低血漿NO含量。

NO可與超氧陰離子反應，生成一種強氧化劑過氧化亞硝酸(ONOOH)，誘導脂質過氧化反應。MDA是脂質過氧化的中間產(chǎn)物，常用于反映機體內脂質過氧化的程度，由于MDA可交鏈蛋白質和磷脂的氨基，使膜性結構的脆性增加，導致生物膜變性，因此可以間接反映細胞損傷的程度〔3〕。過多脂質沉積于血管表皮，使內皮產(chǎn)生的抗氧化酶含量下降，機體清除自由基的能力下降，產(chǎn)生大量自由基及脂質過氧化產(chǎn)物MDA〔4〕。本實驗提示木樨草素可以抑制自由基誘導的脂質過氧化反應。

正常情況下，體內存在一套有效的抗氧化防御系統(tǒng)如SOD、GPX等，能及時清除過量的自由基，從而保護細胞膜結構和功能的完整。某些病理情況下，機體產(chǎn)生的自由基超過機體的清除能力，促使疾病進一步發(fā)展。T-AOC是用于衡量機體抗氧化系統(tǒng)功能狀況的綜合性指標。T-AOC的大小可反映機體抗氧化系統(tǒng)對外來刺激的代償能力以及機體自由基代謝的狀態(tài)〔5〕。本實驗結果提示，高脂干擾了體內氧化與抗氧化系統(tǒng)的平衡，使抗氧化能力下降，脂質過氧化作用增強。龔志剛等〔6〕的體內實驗表明：葛根異黃酮(500 mg/kg)可明顯提高糖尿病大鼠血清抗氧化酶活性，降低脂質過氧化程度，改善胰島素和血糖水平。Wang等〔7〕的體外實驗發(fā)現(xiàn)，浮萍總黃酮可以明顯提高經(jīng)H2O2氧化損傷后人臍血管內皮細胞的總抗氧化活性以及SOD、CAT和GPX酶活性，降低MDA含量。本研究說明木樨草素可以增強機體的抗氧化能力，清除過量的自由基，維持機體氧化和抗氧化系統(tǒng)的平衡。

綜上，體脂過高時木樨草素可顯著提高SOD和GPX等抗氧化物酶活性，增加機體抗氧化能力，降低NO等自由基含量，從而抑制脂質過氧化，維持機體氧化和抗氧化系統(tǒng)的平衡。

4 參考文獻

1祝德秋，劉皋林.木樨草素的藥理作用研究進展〔J〕.中國藥房，2010；21(19):1807-10.

2陳樹君，孫玉敏，孟羽俊，等.慢性氟中毒大鼠睪丸組織總抗氧化能力與一氧化氮合酶和一氧化氮水平的變化〔J〕.環(huán)境與健康，2007；24 (8)：627-9.

3劉 連，徐園園，許 潔，等.氟中毒大鼠血清中NO和MDA及GSH-Px的研究〔J〕.現(xiàn)代預防醫(yī)學，2010；37(6)：1108-9.

4Aviram M.Review of studies on human oxidative damage and anti-oxidant protection related to cardiovascular diseases〔J〕.Free Radic Res,2000;33(1):85-97.

5孫玉敏，陳樹君，楊 揚，等.慢性氟中毒大鼠血清總抗氧化能力與一氧化氮水平的變化〔J〕.中國工業(yè)醫(yī)學雜志，2009；22(6)：445-6.

6龔志剛，朱 篤，張月華.葛根素干預對糖尿病運動大鼠血清抗氧化能力的影響〔J〕.食品科學，2008；29(9):567-70.

7Wang B，Peng L，Zhu L,etal.Protective effect of total flavonoids from Spirodela polyrrhiza(L.)Schleid on human umbilical vein endothelial cell damage induced by hydrogen peroxide〔J〕.Colloids Surf，2007;60(1):36-9.