健脾益氣方對化療性胃腸功能紊亂大鼠血清GASEGF水平的影響

林錦春+++張衛(wèi)華+++彭樹靈

[摘要] 目的 探討健脾益氣方（JPYQ）防治大鼠化療性胃腸功能紊亂的效果及作用機制。 方法 將48只大鼠按隨機原則分為6組：空白對照組、化療模型組、枸櫞酸莫沙必利組（陽性藥對照組）、化療+JPYQ高劑量組（高劑量組）、化療+JPYQ中劑量組（中劑量組）、化療+JPYQ低劑量組（低劑量組），每組8只。采用環(huán)磷酰胺制備大鼠化療模型，在實驗的第1、3、5天，空白對照組給予生理鹽水腹腔注射，其余5組給予環(huán)磷酰胺注射液腹腔注射，造模后每組給予相應(yīng)的藥物灌胃。檢測各組大鼠血清胃泌素（GAS）與表皮生長因子（EGF）的水平。 結(jié)果 與空白對照組比較，化療模型組大鼠血清EGF水平明顯降低，GAS含量則明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；與模型組比較，JPYQ高劑量組和陽性藥對照組大鼠血清EGF含量顯著升高（P<0.05），而中、低劑量組大鼠血清EGF含量差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；各給藥組大鼠血清GAS水平與模型組及與空白對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。 結(jié)論 JPYQ防治化療性胃腸功能紊亂的效果明顯，其作用機制主要與影響血清EGF水平相關(guān)。

[關(guān)鍵詞] 健脾益氣方；大鼠；環(huán)磷酰胺；表皮生長因子；胃泌素

[中圖分類號] R-33[文獻標識碼] A[文章編號] 1674-4721（2014）06（a）-0016-03

Effect of Jianpi yiqi recipe on serum GAS and EGF concentrationof rats with gastrointestinal dysfunction caused by chemotherapy

LIN Jin-chun ZHANG Wei-hua PENG Shu-ling

Department of Traditional Chinese Medicine,the Second People′s Hospital of Foshan City in Guangdong Province,Foshan 528000,China

[Abstract] Objective To investigate the effect of Jianpi yiqi recipe (JPYQ) on the gastrointestinal functional disorder in rat receiving chemotherapy. Methods Forty-eight rats were equally randomized into 6 groups,and they were blank control group,chemotherapy model group,mosapride citrate group (positive control group),chemotherapy+JPYQ high-dose group (high-dose group),chemotherapy+JPYQ middle-dose group (middle-dose group),chemotherapy+JPYQ low-dose group (low-dose group),each group of 8 animals.Preparation of rat chemotherapy model was used cyclophosphamide,rats in the blank control group were given intraperitoneal injection of normal saline while the rats in the other groups were given intraperitoneal injection of cyclophosphamide on experimental day 1,3 and 5.During the modeling,the rats in the medication groups were given the corresponding medicine according to the experimental design.The levels of serum gastrin(GAS) and epidermal growth factor (EGF)in rats were determined. Results Compared with blank control group,the level of EGF in model group was significantly decreased,while the level of GAS was significantly increased (P<0.05).Compared with model group,the levels of EGF in high-dose JPYQ group and mosapride group were significantly increased (P<0.05),while the levels of EGF in middle-dose JPYQ group and low-dose JPYQ group were no significant difference (P>0.05).The level of GAS was insignificant between the medicated groups and model group and blank control group (P>0.05). Conclusion There is evident therapeutic effect of Jianpi yiqi recipe on gastrointestinal dysfunction caused by chemotherapy.And it′s mechamism is

[Key words] Jianpi yiqi recipe;Rats;Cyclophosphamide;Epidermal growth factor;Gastrin

化療在惡性腫瘤的治療過程中可導致胃腸功能紊亂，嚴重干擾化療進程，影響預(yù)后[1]，中醫(yī)學在長期臨床實踐中積累了寶貴的經(jīng)驗，有著獨特的療效，健脾益氣方經(jīng)多年臨床實踐，對氟尿嘧啶、環(huán)磷酰胺、順鉑等多種化療藥物引起的胃腸功能紊亂有確切療效，早期實驗證實，對環(huán)磷酸胺化療所致的小鼠胃排空及腸推進功能障礙具有顯著的改善作用[2]，而胃泌素（gastrin，GAS）和表皮生民因子（epidermal growth factor，EGF）被認為是胃腸黏膜損傷愈合過程中的防御因子，發(fā)揮重要的作用[3-4]。本研究旨在探討健脾益氣方（JPYQ）對化療性胃腸功能紊亂大鼠血清GAS、EGF的影響，進一步研究本方發(fā)揮治療作用的機制，為臨床提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥材及試劑

JPYQ（組成：太子參30 g、白術(shù)12 g、云苓15 g、甘草3 g、陳皮5 g、法夏15 g、靈芝20 g、川樸12 g、生黃芪30 g、砂仁5 g）藥材由佛山第二人民醫(yī)院中藥房提供。注射用環(huán)磷酰胺（0.2 g/瓶）批號：32020857，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，用生理鹽水配成4.5 mg/ml溶液。枸櫞酸莫沙必利片批號：19990315，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，用蒸餾水配成0.15 mg/ml的溶液。EGF試劑盒（美國進口分裝），批號：R20131221；GAS試劑盒（美國進口分裝），批號：R20131219。以上4個試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 實驗動物

SPF級SD大鼠48只，雌雄各半，由南方醫(yī)科大學實驗動物中心提供，實驗動物許可證號：SCXK粵2011-0015。實驗溫度21～24℃，濕度50%～70%，動物自由飲食。

1.3 儀器

752N紫外-可見分光光度計，上海菁華科技儀器有限公司產(chǎn)品；iMARK酶標儀，美國Bio-Rad公司生產(chǎn)；BA 110S萬分之一電子天平，Sartorius公司產(chǎn)品；YP10002小動物電子稱，上海佑科儀器儀表有限公司；TDL-40B低速大容量離心機，上海安亭科學儀器廠生產(chǎn)；HC-3018R高速離心機，安徽中科科學儀器有限公司產(chǎn)品。

1.4 分組

取SPF級SD大鼠48只，雌雄兼半。適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d后，按隨機化原則分為6組：空白對照組、化療模型組、枸櫞酸莫沙必利組（陽性藥對照組）、化療+JPYQ高劑量組（高劑量組）、化療+JPYQ中劑量組（中劑量組）、化療+JPYQ低劑量組（低劑量組），每組8只動物。

1.5 JPYQ水煎液的制備

按處方取5倍量藥材，除砂仁外其他藥材加蒸餾水至藥材總重的10倍量，浸泡30 min，武火煎至沸騰，調(diào)文火保持沸騰狀態(tài)40 min后，加入搗碎的砂仁，繼續(xù)煎煮5 min，濾出藥液。藥渣加8倍量的蒸餾水，再次煎煮，過濾。合并兩次藥液，濃縮成含原生藥2.0 g/ml，于4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.6 造模與給藥

在實驗的第1、3、5天，空白對照組給予生理鹽水腹腔注射，其余5組給予環(huán)磷酰胺注射液（45 mg/kg）腹腔注射，1次/d。在第2天開始，對藥物組大鼠按下述劑量灌胃給藥：枸櫞酸莫沙必利1.5 mg/kg、高劑量組20 g/kg、中劑量組10 g/kg、低劑量組5 g/kg，空白組和模型組灌胃等體積的蒸餾水，連續(xù)給藥10 d。

1.7 大鼠血清GAS與EGF的檢測

于末次灌胃給藥24 h后，按1.0 g/kg的劑量用烏拉坦麻醉大鼠，自腹主動脈取血約5 ml，靜置2 h，以3000 r/min，離心10 min。取血清分別按GAS試劑盒和EGF試劑盒的方法（ELISA法）測定大鼠血清中GAS及EGF的含量。

1.8 統(tǒng)計學處理

本研究所得數(shù)據(jù)均采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間多重比較采用單因素方差分析，方差齊時用LSD方法，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

與空白對照組比較，化療模型組大鼠血清EGF水平明顯降低，GAS含量則明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；與化療模型組比較，高劑量組和陽性藥對照組大鼠血清EGF含量顯著升高（P<0.05），而中、低劑量組大鼠血清EGF含量差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；各給藥組大鼠血清GAS水平與化療模型組及與空白對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）（表1）。

表1 JPYQ 對化療大鼠血清GAS與EGF水平的影響（x±s，n=8）

與空白對照組比較，*P<0.05，**P<0.01；與化療模型組比較，#P<0.05

3 討論

胃腸功能紊亂是化療引起的常見毒副反應(yīng)，主要表現(xiàn)為食欲不振、惡心嘔吐、脘腹脹痛、腹瀉或便秘等，甚至可導致水、電解質(zhì)紊亂，酸堿平衡失調(diào)及營養(yǎng)不良，嚴重影響化療的進程、療效及患者的生存質(zhì)量、預(yù)后等[5]。

本實驗所采用JPYQ中太子參為君藥，起益氣健脾、補氣生津、雙向調(diào)節(jié)免疫功能，能提高抗應(yīng)激能力[6-8]。黃芪補中益氣而不燥，有扶正抗癌、增強免疫、防治骨髓抑制、清除有毒自由基的作用[9]，能升高白細胞，并能提高單核-吞噬細胞系統(tǒng)的功能，增T細胞、LAK細胞、NK細胞活性及L-2抗癌活性[10]。法夏、厚樸能有效防治化療所致的嘔吐，可能與其能有效的抑制胃腸分泌胃酸，加快胃腸排空，增加黏膜血流，保護胃腸黏膜微血管有關(guān)[11]。綜合全方能有效治療化療藥物引起的胃腸功能紊亂。

在正常情況下，胃腸黏膜的完整性較好，所以血中EGF水平較低。而當胃腸黏膜存在炎癥和潰瘍時，受損的胃腸黏膜通透性增加，加之此時胃腔內(nèi)EGF增加，便有較多的EGF進入血液循環(huán)，血清EGF水平會上升，而GAS具有強大的刺激胃酸分泌效應(yīng)[12-13]。EGF是一種具有廣泛生物學效應(yīng)單鏈多肽[14]，具有抑制胃酸、促進腸蠕動和保護胃腸黏膜的功能[15]，其可增加組織DNA、RNA及蛋白質(zhì)的合成，刺激組織生長和修復(fù)[16]。本研究結(jié)果顯示，與空白對照組比較，化療模型組大鼠血清EGF水平明顯降低，GAS含量則明顯升高（P<0.05或P<0.01），因而考慮化療后出現(xiàn)食欲差、惡心、嘔吐、腹脹等胃腸功能紊亂與EGF下降、GAS升高有關(guān)。在實驗過程觀察到JPYQ各給藥組惡心、嘔吐、腹瀉癥狀最輕，食欲恢復(fù)也最快，精神較好，與化療模型組比較，各JPYQ給藥組和陽性藥對照組大鼠血清EGF含量升高，其中以高劑量組升高最顯著（P<0.05）；各給藥組大鼠血清GAS水平與化療模型組對比有所降低，但差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），表明JPYQ治療胃腸功能紊亂主要是通過升高EGF發(fā)揮效應(yīng)。

綜上所述，JPYQ防治大鼠化療性胃腸功能紊亂的效果確切，其作用機制與升高血清EGF有關(guān)，其分子水平機制有待進一步研究。

[參考文獻]

[1]林千鶴子.抗癌藥物毒副反應(yīng)的對策[J].日本醫(yī)學介紹，2001，22（11）：491-492.

[2]張衛(wèi)華，彭樹靈.健脾益氣方對化療小鼠胃排空及腸推進功能的影響[J].新中醫(yī)，2013，（7）：171-173.

[3]劉偉. EGF與胃腸關(guān)系的研究新進展[J].國外醫(yī)學·消化系疾病分冊，2002，22（4）：207.

[4]孫鳳蓬，宋于剛，覃漢榮.胃潰瘍大鼠胃泌素、生長抑素和GD細胞的變化[J].世界華人消化雜志，2004，12（2）：363.

[5]王哲海，于金明，孔莉.腫瘤化療不良反應(yīng)及其對策[M].濟南：山東科學技術(shù)出版社，2002：2.

[6]高月娟，孟妍，張艷麗.太子參抗應(yīng)激作用的實驗研究[J].齊齊哈爾醫(yī)學院學報，2011，32（12）：1886-1887.

[7]晏春耕.藥用植物太子參的研究及應(yīng)用[J].現(xiàn)代中藥研究與實踐，2008，22（2）：61-65.

[8]王文凱，賈靜，丁仁偉，等.太子參近年研究概況[J].中國實驗方劑學雜志，2011，17（12）：264-265.

[9]董菊，呂海燕，毛靜娥.黃芪注射液在腫瘤化療中增效減毒作用的meta分析[J].中醫(yī)藥導報，2010，16（3）：87-92.

[10]王英姿，金常光.參芪扶正注射液配合化療治療惡性腫瘤臨床觀察[J].實用中醫(yī)藥雜志，2008，24（10）：644-645.

[11]黃仕文，袁冬平，吳顥昕，等.半夏厚樸湯對化療嘔吐家兔外周血中EGF及GAS的影響[J].浙江中醫(yī)藥大學學報，2010，34（1）：60-61.

[12]陳欣，劉曉偉，陳窕圓，等.維胃方對乙酸誘導大鼠胃潰瘍愈合效果及血清GAS、EGF水平的影響[J].時珍國醫(yī)國藥，2007，18（10）：2333-2335.

[13]周呂.胃腸生理學[M].北京：科學出版社，1998：102.

[14]Milani S，Calabro A.Role of growth factors and the irreceptors in gastric ulcer healing[J].Microsc Res Tech，2001，53（5）：360.

[15]Yanaka A，Suzuki H，Shibahara T，et al.EGF promotes gastric mucosal restitution by activating Na+/H+ exchange of epithelial cells[J].Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol，2002，282（5）：866-876.

[16]唐星火，韓萍，陳振儂，等.十二指腸潰瘍患者治療前后血清GAS，MTL，EGF及CGRP水平的變化[J].廣西醫(yī)科大學學報，1998，15（2）：8-11.

（收稿日期：2014-04-18本文編輯：林利利）

1.2 實驗動物

SPF級SD大鼠48只，雌雄各半，由南方醫(yī)科大學實驗動物中心提供，實驗動物許可證號：SCXK粵2011-0015。實驗溫度21～24℃，濕度50%～70%，動物自由飲食。

1.3 儀器

752N紫外-可見分光光度計，上海菁華科技儀器有限公司產(chǎn)品；iMARK酶標儀，美國Bio-Rad公司生產(chǎn)；BA 110S萬分之一電子天平，Sartorius公司產(chǎn)品；YP10002小動物電子稱，上海佑科儀器儀表有限公司；TDL-40B低速大容量離心機，上海安亭科學儀器廠生產(chǎn)；HC-3018R高速離心機，安徽中科科學儀器有限公司產(chǎn)品。

1.4 分組

取SPF級SD大鼠48只，雌雄兼半。適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d后，按隨機化原則分為6組：空白對照組、化療模型組、枸櫞酸莫沙必利組（陽性藥對照組）、化療+JPYQ高劑量組（高劑量組）、化療+JPYQ中劑量組（中劑量組）、化療+JPYQ低劑量組（低劑量組），每組8只動物。

1.5 JPYQ水煎液的制備

按處方取5倍量藥材，除砂仁外其他藥材加蒸餾水至藥材總重的10倍量，浸泡30 min，武火煎至沸騰，調(diào)文火保持沸騰狀態(tài)40 min后，加入搗碎的砂仁，繼續(xù)煎煮5 min，濾出藥液。藥渣加8倍量的蒸餾水，再次煎煮，過濾。合并兩次藥液，濃縮成含原生藥2.0 g/ml，于4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.6 造模與給藥

在實驗的第1、3、5天，空白對照組給予生理鹽水腹腔注射，其余5組給予環(huán)磷酰胺注射液（45 mg/kg）腹腔注射，1次/d。在第2天開始，對藥物組大鼠按下述劑量灌胃給藥：枸櫞酸莫沙必利1.5 mg/kg、高劑量組20 g/kg、中劑量組10 g/kg、低劑量組5 g/kg，空白組和模型組灌胃等體積的蒸餾水，連續(xù)給藥10 d。

1.7 大鼠血清GAS與EGF的檢測

于末次灌胃給藥24 h后，按1.0 g/kg的劑量用烏拉坦麻醉大鼠，自腹主動脈取血約5 ml，靜置2 h，以3000 r/min，離心10 min。取血清分別按GAS試劑盒和EGF試劑盒的方法（ELISA法）測定大鼠血清中GAS及EGF的含量。

1.8 統(tǒng)計學處理

本研究所得數(shù)據(jù)均采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間多重比較采用單因素方差分析，方差齊時用LSD方法，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

與空白對照組比較，化療模型組大鼠血清EGF水平明顯降低，GAS含量則明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；與化療模型組比較，高劑量組和陽性藥對照組大鼠血清EGF含量顯著升高（P<0.05），而中、低劑量組大鼠血清EGF含量差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；各給藥組大鼠血清GAS水平與化療模型組及與空白對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）（表1）。

表1 JPYQ 對化療大鼠血清GAS與EGF水平的影響（x±s，n=8）

與空白對照組比較，*P<0.05，**P<0.01；與化療模型組比較，#P<0.05

3 討論

胃腸功能紊亂是化療引起的常見毒副反應(yīng)，主要表現(xiàn)為食欲不振、惡心嘔吐、脘腹脹痛、腹瀉或便秘等，甚至可導致水、電解質(zhì)紊亂，酸堿平衡失調(diào)及營養(yǎng)不良，嚴重影響化療的進程、療效及患者的生存質(zhì)量、預(yù)后等[5]。

本實驗所采用JPYQ中太子參為君藥，起益氣健脾、補氣生津、雙向調(diào)節(jié)免疫功能，能提高抗應(yīng)激能力[6-8]。黃芪補中益氣而不燥，有扶正抗癌、增強免疫、防治骨髓抑制、清除有毒自由基的作用[9]，能升高白細胞，并能提高單核-吞噬細胞系統(tǒng)的功能，增T細胞、LAK細胞、NK細胞活性及L-2抗癌活性[10]。法夏、厚樸能有效防治化療所致的嘔吐，可能與其能有效的抑制胃腸分泌胃酸，加快胃腸排空，增加黏膜血流，保護胃腸黏膜微血管有關(guān)[11]。綜合全方能有效治療化療藥物引起的胃腸功能紊亂。

在正常情況下，胃腸黏膜的完整性較好，所以血中EGF水平較低。而當胃腸黏膜存在炎癥和潰瘍時，受損的胃腸黏膜通透性增加，加之此時胃腔內(nèi)EGF增加，便有較多的EGF進入血液循環(huán)，血清EGF水平會上升，而GAS具有強大的刺激胃酸分泌效應(yīng)[12-13]。EGF是一種具有廣泛生物學效應(yīng)單鏈多肽[14]，具有抑制胃酸、促進腸蠕動和保護胃腸黏膜的功能[15]，其可增加組織DNA、RNA及蛋白質(zhì)的合成，刺激組織生長和修復(fù)[16]。本研究結(jié)果顯示，與空白對照組比較，化療模型組大鼠血清EGF水平明顯降低，GAS含量則明顯升高（P<0.05或P<0.01），因而考慮化療后出現(xiàn)食欲差、惡心、嘔吐、腹脹等胃腸功能紊亂與EGF下降、GAS升高有關(guān)。在實驗過程觀察到JPYQ各給藥組惡心、嘔吐、腹瀉癥狀最輕，食欲恢復(fù)也最快，精神較好，與化療模型組比較，各JPYQ給藥組和陽性藥對照組大鼠血清EGF含量升高，其中以高劑量組升高最顯著（P<0.05）；各給藥組大鼠血清GAS水平與化療模型組對比有所降低，但差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），表明JPYQ治療胃腸功能紊亂主要是通過升高EGF發(fā)揮效應(yīng)。

綜上所述，JPYQ防治大鼠化療性胃腸功能紊亂的效果確切，其作用機制與升高血清EGF有關(guān)，其分子水平機制有待進一步研究。

[參考文獻]

[1]林千鶴子.抗癌藥物毒副反應(yīng)的對策[J].日本醫(yī)學介紹，2001，22（11）：491-492.

[2]張衛(wèi)華，彭樹靈.健脾益氣方對化療小鼠胃排空及腸推進功能的影響[J].新中醫(yī)，2013，（7）：171-173.

[3]劉偉. EGF與胃腸關(guān)系的研究新進展[J].國外醫(yī)學·消化系疾病分冊，2002，22（4）：207.

[4]孫鳳蓬，宋于剛，覃漢榮.胃潰瘍大鼠胃泌素、生長抑素和GD細胞的變化[J].世界華人消化雜志，2004，12（2）：363.

[5]王哲海，于金明，孔莉.腫瘤化療不良反應(yīng)及其對策[M].濟南：山東科學技術(shù)出版社，2002：2.

[6]高月娟，孟妍，張艷麗.太子參抗應(yīng)激作用的實驗研究[J].齊齊哈爾醫(yī)學院學報，2011，32（12）：1886-1887.

[7]晏春耕.藥用植物太子參的研究及應(yīng)用[J].現(xiàn)代中藥研究與實踐，2008，22（2）：61-65.

[8]王文凱，賈靜，丁仁偉，等.太子參近年研究概況[J].中國實驗方劑學雜志，2011，17（12）：264-265.

[9]董菊，呂海燕，毛靜娥.黃芪注射液在腫瘤化療中增效減毒作用的meta分析[J].中醫(yī)藥導報，2010，16（3）：87-92.

[10]王英姿，金常光.參芪扶正注射液配合化療治療惡性腫瘤臨床觀察[J].實用中醫(yī)藥雜志，2008，24（10）：644-645.

[11]黃仕文，袁冬平，吳顥昕，等.半夏厚樸湯對化療嘔吐家兔外周血中EGF及GAS的影響[J].浙江中醫(yī)藥大學學報，2010，34（1）：60-61.

[12]陳欣，劉曉偉，陳窕圓，等.維胃方對乙酸誘導大鼠胃潰瘍愈合效果及血清GAS、EGF水平的影響[J].時珍國醫(yī)國藥，2007，18（10）：2333-2335.

[13]周呂.胃腸生理學[M].北京：科學出版社，1998：102.

[14]Milani S，Calabro A.Role of growth factors and the irreceptors in gastric ulcer healing[J].Microsc Res Tech，2001，53（5）：360.

[15]Yanaka A，Suzuki H，Shibahara T，et al.EGF promotes gastric mucosal restitution by activating Na+/H+ exchange of epithelial cells[J].Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol，2002，282（5）：866-876.

[16]唐星火，韓萍，陳振儂，等.十二指腸潰瘍患者治療前后血清GAS，MTL，EGF及CGRP水平的變化[J].廣西醫(yī)科大學學報，1998，15（2）：8-11.

（收稿日期：2014-04-18本文編輯：林利利）

1.2 實驗動物

SPF級SD大鼠48只，雌雄各半，由南方醫(yī)科大學實驗動物中心提供，實驗動物許可證號：SCXK粵2011-0015。實驗溫度21～24℃，濕度50%～70%，動物自由飲食。

1.3 儀器

752N紫外-可見分光光度計，上海菁華科技儀器有限公司產(chǎn)品；iMARK酶標儀，美國Bio-Rad公司生產(chǎn)；BA 110S萬分之一電子天平，Sartorius公司產(chǎn)品；YP10002小動物電子稱，上海佑科儀器儀表有限公司；TDL-40B低速大容量離心機，上海安亭科學儀器廠生產(chǎn)；HC-3018R高速離心機，安徽中科科學儀器有限公司產(chǎn)品。

1.4 分組

取SPF級SD大鼠48只，雌雄兼半。適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d后，按隨機化原則分為6組：空白對照組、化療模型組、枸櫞酸莫沙必利組（陽性藥對照組）、化療+JPYQ高劑量組（高劑量組）、化療+JPYQ中劑量組（中劑量組）、化療+JPYQ低劑量組（低劑量組），每組8只動物。

1.5 JPYQ水煎液的制備

按處方取5倍量藥材，除砂仁外其他藥材加蒸餾水至藥材總重的10倍量，浸泡30 min，武火煎至沸騰，調(diào)文火保持沸騰狀態(tài)40 min后，加入搗碎的砂仁，繼續(xù)煎煮5 min，濾出藥液。藥渣加8倍量的蒸餾水，再次煎煮，過濾。合并兩次藥液，濃縮成含原生藥2.0 g/ml，于4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.6 造模與給藥

在實驗的第1、3、5天，空白對照組給予生理鹽水腹腔注射，其余5組給予環(huán)磷酰胺注射液（45 mg/kg）腹腔注射，1次/d。在第2天開始，對藥物組大鼠按下述劑量灌胃給藥：枸櫞酸莫沙必利1.5 mg/kg、高劑量組20 g/kg、中劑量組10 g/kg、低劑量組5 g/kg，空白組和模型組灌胃等體積的蒸餾水，連續(xù)給藥10 d。

1.7 大鼠血清GAS與EGF的檢測

于末次灌胃給藥24 h后，按1.0 g/kg的劑量用烏拉坦麻醉大鼠，自腹主動脈取血約5 ml，靜置2 h，以3000 r/min，離心10 min。取血清分別按GAS試劑盒和EGF試劑盒的方法（ELISA法）測定大鼠血清中GAS及EGF的含量。

1.8 統(tǒng)計學處理

本研究所得數(shù)據(jù)均采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間多重比較采用單因素方差分析，方差齊時用LSD方法，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

與空白對照組比較，化療模型組大鼠血清EGF水平明顯降低，GAS含量則明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；與化療模型組比較，高劑量組和陽性藥對照組大鼠血清EGF含量顯著升高（P<0.05），而中、低劑量組大鼠血清EGF含量差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；各給藥組大鼠血清GAS水平與化療模型組及與空白對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）（表1）。

表1 JPYQ 對化療大鼠血清GAS與EGF水平的影響（x±s，n=8）

與空白對照組比較，*P<0.05，**P<0.01；與化療模型組比較，#P<0.05

3 討論

胃腸功能紊亂是化療引起的常見毒副反應(yīng)，主要表現(xiàn)為食欲不振、惡心嘔吐、脘腹脹痛、腹瀉或便秘等，甚至可導致水、電解質(zhì)紊亂，酸堿平衡失調(diào)及營養(yǎng)不良，嚴重影響化療的進程、療效及患者的生存質(zhì)量、預(yù)后等[5]。

本實驗所采用JPYQ中太子參為君藥，起益氣健脾、補氣生津、雙向調(diào)節(jié)免疫功能，能提高抗應(yīng)激能力[6-8]。黃芪補中益氣而不燥，有扶正抗癌、增強免疫、防治骨髓抑制、清除有毒自由基的作用[9]，能升高白細胞，并能提高單核-吞噬細胞系統(tǒng)的功能，增T細胞、LAK細胞、NK細胞活性及L-2抗癌活性[10]。法夏、厚樸能有效防治化療所致的嘔吐，可能與其能有效的抑制胃腸分泌胃酸，加快胃腸排空，增加黏膜血流，保護胃腸黏膜微血管有關(guān)[11]。綜合全方能有效治療化療藥物引起的胃腸功能紊亂。

在正常情況下，胃腸黏膜的完整性較好，所以血中EGF水平較低。而當胃腸黏膜存在炎癥和潰瘍時，受損的胃腸黏膜通透性增加，加之此時胃腔內(nèi)EGF增加，便有較多的EGF進入血液循環(huán)，血清EGF水平會上升，而GAS具有強大的刺激胃酸分泌效應(yīng)[12-13]。EGF是一種具有廣泛生物學效應(yīng)單鏈多肽[14]，具有抑制胃酸、促進腸蠕動和保護胃腸黏膜的功能[15]，其可增加組織DNA、RNA及蛋白質(zhì)的合成，刺激組織生長和修復(fù)[16]。本研究結(jié)果顯示，與空白對照組比較，化療模型組大鼠血清EGF水平明顯降低，GAS含量則明顯升高（P<0.05或P<0.01），因而考慮化療后出現(xiàn)食欲差、惡心、嘔吐、腹脹等胃腸功能紊亂與EGF下降、GAS升高有關(guān)。在實驗過程觀察到JPYQ各給藥組惡心、嘔吐、腹瀉癥狀最輕，食欲恢復(fù)也最快，精神較好，與化療模型組比較，各JPYQ給藥組和陽性藥對照組大鼠血清EGF含量升高，其中以高劑量組升高最顯著（P<0.05）；各給藥組大鼠血清GAS水平與化療模型組對比有所降低，但差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），表明JPYQ治療胃腸功能紊亂主要是通過升高EGF發(fā)揮效應(yīng)。

綜上所述，JPYQ防治大鼠化療性胃腸功能紊亂的效果確切，其作用機制與升高血清EGF有關(guān)，其分子水平機制有待進一步研究。

[參考文獻]

[1]林千鶴子.抗癌藥物毒副反應(yīng)的對策[J].日本醫(yī)學介紹，2001，22（11）：491-492.

[2]張衛(wèi)華，彭樹靈.健脾益氣方對化療小鼠胃排空及腸推進功能的影響[J].新中醫(yī)，2013，（7）：171-173.

[3]劉偉. EGF與胃腸關(guān)系的研究新進展[J].國外醫(yī)學·消化系疾病分冊，2002，22（4）：207.

[4]孫鳳蓬，宋于剛，覃漢榮.胃潰瘍大鼠胃泌素、生長抑素和GD細胞的變化[J].世界華人消化雜志，2004，12（2）：363.

[5]王哲海，于金明，孔莉.腫瘤化療不良反應(yīng)及其對策[M].濟南：山東科學技術(shù)出版社，2002：2.

[6]高月娟，孟妍，張艷麗.太子參抗應(yīng)激作用的實驗研究[J].齊齊哈爾醫(yī)學院學報，2011，32（12）：1886-1887.

[7]晏春耕.藥用植物太子參的研究及應(yīng)用[J].現(xiàn)代中藥研究與實踐，2008，22（2）：61-65.

[8]王文凱，賈靜，丁仁偉，等.太子參近年研究概況[J].中國實驗方劑學雜志，2011，17（12）：264-265.

[9]董菊，呂海燕，毛靜娥.黃芪注射液在腫瘤化療中增效減毒作用的meta分析[J].中醫(yī)藥導報，2010，16（3）：87-92.

[10]王英姿，金常光.參芪扶正注射液配合化療治療惡性腫瘤臨床觀察[J].實用中醫(yī)藥雜志，2008，24（10）：644-645.

[11]黃仕文，袁冬平，吳顥昕，等.半夏厚樸湯對化療嘔吐家兔外周血中EGF及GAS的影響[J].浙江中醫(yī)藥大學學報，2010，34（1）：60-61.

[12]陳欣，劉曉偉，陳窕圓，等.維胃方對乙酸誘導大鼠胃潰瘍愈合效果及血清GAS、EGF水平的影響[J].時珍國醫(yī)國藥，2007，18（10）：2333-2335.

[13]周呂.胃腸生理學[M].北京：科學出版社，1998：102.

[14]Milani S，Calabro A.Role of growth factors and the irreceptors in gastric ulcer healing[J].Microsc Res Tech，2001，53（5）：360.

[15]Yanaka A，Suzuki H，Shibahara T，et al.EGF promotes gastric mucosal restitution by activating Na+/H+ exchange of epithelial cells[J].Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol，2002，282（5）：866-876.

[16]唐星火，韓萍，陳振儂，等.十二指腸潰瘍患者治療前后血清GAS，MTL，EGF及CGRP水平的變化[J].廣西醫(yī)科大學學報，1998，15（2）：8-11.

（收稿日期：2014-04-18本文編輯：林利利）