兒童血液中25-羥基維生素D3含量測定及臨床研究進(jìn)展

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1.昆明醫(yī)科大學(xué)研究生部，云南 昆明 650500；2.昆明醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院，云南 昆明 650228

兒童血液中25-羥基維生素D3含量測定及臨床研究進(jìn)展

孫幫燕1何文姬2楊曉紅2張楨2*

1.昆明醫(yī)科大學(xué)研究生部，云南 昆明 650500；2.昆明醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院，云南 昆明 650228

維生素D是一組具有生物活性的脂溶性類固醇衍生物，25-羥基維生素D3是它的代謝物中較為重要的一種，在兒童保健和多種兒童疾病的診療中具有重要意義。筆者就其含量測定及臨床研究進(jìn)展作一綜述。

25-羥基維生素D3；含量測定；臨床研究；兒童

維生素D是人體必須的營養(yǎng)素之一，對(duì)人體健康有重要意義。研究發(fā)現(xiàn)[1]，維生素D除具有傳統(tǒng)的調(diào)節(jié)鈣磷代謝和骨骼健康等作用外，還具調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、防治代謝綜合征等骨外生物效應(yīng)。有研究表明[2]，維生素D還具有抗炎、減少氣道重塑等能力。對(duì)于兒童，合理的維生素D濃度對(duì)預(yù)防兒童佝僂病、腫瘤、1型糖尿病、心臟疾病和骨質(zhì)疏松的發(fā)生有較大作用[3]。因此，實(shí)時(shí)對(duì)體內(nèi)的維生素D進(jìn)行含量檢測，并適時(shí)補(bǔ)充維生素D對(duì)兒童的健康尤為重要。

維生素D包括維生素D2(麥角骨化醇)和維生素D3(膽骨化醇)兩者。前者存在于植物中，后者系由人體或動(dòng)物皮膚中的7-脫氫膽固醇經(jīng)日光中紫外線的光化學(xué)作用轉(zhuǎn)變而成。維生素D在體內(nèi)必須經(jīng)過兩次羥基化作用后才能發(fā)揮生物效應(yīng)。首先，經(jīng)肝細(xì)胞發(fā)生第一次羥基化，生成25-羥基維生素D3(25-(OH)D3)，然后循環(huán)中的25-(OH)D3與α-球蛋白結(jié)合被運(yùn)載到腎臟，在近端腎小管上皮細(xì)胞線粒體中的1-α羥化酶的作用下再次羥化，生成有很強(qiáng)生物活性的1,25-二羥維生素D，即1,25-(OH)2D3[2]。雖然其代謝物中1,25-(OH)2D3的生物活性是最強(qiáng)的，但25-(OH)D3是循環(huán)中維生素D的主要形式，其含量在血液中相對(duì)較高，半衰期也較長，因此一般認(rèn)為臨床上可以通過測定血中25-(OH)D3的含量來了解維生素D的營養(yǎng)狀況[3,4]。

目前，國內(nèi)外對(duì)25-(OH)D3的含量監(jiān)測和臨床研究越來越多，但由于試劑盒之間的差異和方法不同，實(shí)驗(yàn)室之間結(jié)果也有一定的差異。本文就其研究進(jìn)展和存在的問題進(jìn)行綜述。

1 含量測定

25-(OH)D3的經(jīng)典測定法是競爭性蛋白結(jié)合測定法和放免法[5]。目前，國內(nèi)外測定25-(OH)D3的方法主要分兩類：酶聯(lián)免疫法和色譜法。酶聯(lián)免疫法有競爭性蛋白結(jié)合測定法和放免法，色譜法有高效液相色譜法、超高效液相色譜法和高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測法。酶聯(lián)免疫法的樣品處理過程較簡單，耗時(shí)少，但具有嚴(yán)重的交叉反應(yīng)現(xiàn)象，因此國內(nèi)外已使用較少。色譜法樣品處理過程相對(duì)復(fù)雜，但具有特異性高、靈敏度高、檢測速度快的優(yōu)點(diǎn)，是目前臨床使用較多的方法[5,6,7,8]。其中，高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測法的檢測時(shí)間最短，但成本高；高效液相色譜法檢測時(shí)間相對(duì)較長，成本較前兩者均低；而超高效液相色譜法的成本和檢測速度均介于兩者之間，可以在臨床上推廣使用。

2 臨床應(yīng)用

2.1 與兒童佝僂病的關(guān)系 第七版的《兒科學(xué)》中明確提出維生素D的含量檢測和骨骼X線的檢查為診斷維生素D缺乏性佝僂病的金標(biāo)準(zhǔn)，其中血清25-(OH)D3水平為最可靠的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。王曉燕等[9]的研究中佝僂病患兒血清25-(OH)D3水平明顯低于非佝僂病小兒，證實(shí)了它對(duì)兒童健康的重要性。

2.2 與兒童肥胖的關(guān)系 國內(nèi)外研究均表明，兒童肥胖與體內(nèi)缺乏25-羥基維生素有關(guān)，尤其是腹部脂肪積聚。分析其原因，一是肥胖兒童的戶外活動(dòng)時(shí)間少，皮膚暴露于紫外線中的時(shí)間亦少，其體內(nèi)合成的25-(OH)D3相應(yīng)減少；二是維生素D作為一種脂溶性分子，它在脂肪中的溶解和儲(chǔ)存也可能影響了循環(huán)水平，從而導(dǎo)致兒童體重增加。但目前對(duì)于補(bǔ)充維生素D是否改善肥胖及其合理劑量尚無定論，肥胖與維生素D的關(guān)系及前瞻性研究值得進(jìn)一步探討[10,11]。

2.3 與兒童免疫性疾病的關(guān)系 研究證實(shí)，25-(OH)D3可影響多種細(xì)胞的生長和分化，是一種重要的免疫調(diào)節(jié)劑，是類固醇激素超家族中的一員。研究發(fā)現(xiàn)維生素D受體的多樣性與T輔助淋巴細(xì)胞的發(fā)育失衡有關(guān)，從而引起免疫系統(tǒng)代謝性疾病，如兒童呼吸系統(tǒng)感染疾病(如支氣管炎[12]，支氣管哮喘[15,17]和肺炎[16])、Ⅰ型糖尿病[13]、白癜風(fēng)[18]等。

2.3.1 與兒童Ⅰ型糖尿病的關(guān)系 王凌飛等[13]的研究表明，Ⅰ型糖尿病(T1dM)患兒體內(nèi)的血清25-羥基維生素D的水平明顯低于正常健康兒童。基于糖尿病的流行病學(xué)及對(duì)T1dM動(dòng)物模型的研究表明，T1dM的發(fā)生、發(fā)展與Th1/Th2平衡狀態(tài)密切相關(guān)，而25-羥基維生素D可以糾正T1dM的這種免疫失衡狀態(tài)。這些研究預(yù)示，維生素D可能成為T1dM早期預(yù)防、干預(yù)的新手段[13,14]。

2.3.2 與人博卡病毒感染肺炎的關(guān)系 萬國鳳等[16]的研究表明，人博卡病毒感染肺炎患兒體內(nèi)的血清25-(OH)D3水平明顯低于正常健康兒童。25-(OH)D3對(duì)免疫系統(tǒng)有著重要的調(diào)節(jié)作用，其機(jī)制是維生素D的受體在體內(nèi)分布較廣，免疫細(xì)胞中均有表達(dá)，它作為一種調(diào)節(jié)劑，抑制炎性細(xì)胞因子及刺激抗微生物多肽的產(chǎn)生，從而發(fā)揮預(yù)防肺部感染的作用。

2.3.3 與兒童患白癜風(fēng)的關(guān)系 楊蘇等[18]的研究結(jié)果表明，白癜風(fēng)患兒體內(nèi)的25-(OH)D3含量顯著低于正常健康兒童。由于維生素D影響新陳代謝，尤其對(duì)免疫系統(tǒng)具有廣泛作用，且參與黑素合成，而白癜風(fēng)的發(fā)病與自身免疫及黑素細(xì)胞破壞有關(guān)，因此推測兒童白癜風(fēng)的發(fā)病可能與維生素D含量低有關(guān)，維生素D缺乏可能參與了白癜風(fēng)發(fā)病的某個(gè)環(huán)節(jié)，如免疫功能失調(diào)，黑色素合成障礙。但該研究樣本數(shù)尚小，有待于擴(kuò)大樣本數(shù)進(jìn)一步研究，對(duì)維生素D與疾病的嚴(yán)重性、活動(dòng)性的關(guān)系以及補(bǔ)充維生素D是否有助于白癜風(fēng)臨床改善尚有待于進(jìn)一步探討。

2.4 與兒童缺鐵性貧血的關(guān)系 缺鐵性貧血為兒童常見的營養(yǎng)缺乏性疾病之一，尤其是嬰幼兒期。黃梅等[19]的研究表明缺鐵也可能削弱腸道對(duì)維生素D的吸收而導(dǎo)致維生素D的缺乏。補(bǔ)充鐵劑能促進(jìn)維生素D在腸道的吸收，提高血清維生素 D水平，改善維生素D缺乏狀況。

3 25-羥基維生素D3的正常值范圍

到目前為止，國內(nèi)關(guān)于25-(OH)D3的正常值范圍暫無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，表1為部分文獻(xiàn)中25-羥基維生素D3的正常值范圍。究其原因，兒童體內(nèi)25-(OH)D3的值與年齡、居住環(huán)境、喂養(yǎng)方式、飲食習(xí)慣、戶外活動(dòng)、反復(fù)呼吸道感染有關(guān)，且個(gè)體差異較大[20,21,22,23]。如年齡越小越易發(fā)生維生素D缺乏，紫外線較強(qiáng)的地區(qū)維生素D吸收較多，夏秋季節(jié)25-(OH)D3含量的均值高于春冬。

表1 部分文獻(xiàn)中25-羥基維生素D3的正常值范圍參考值

綜上所述，25-(OH)D3的含量檢測及臨床研究對(duì)兒童的健康有重要意義，但仍有許多問題需要進(jìn)一步研究、探討，以便在臨床上為患兒的診治提供重要的理論依據(jù)。

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Theprogressforthedeterminationandclinicalstudyof25-HydroxyvitaminD3inchildren’sserum

SUN Bang-yan1HE Wen-ji2YANG Xiao-hong2ZHANG Zhen2

(1.Kunming Medical University postgraduate department,Kunming 650500,China;2.Department of Clinical Laboratory,Children Hospital of Kunming Medical University, Kunming 650228, China

Vitamin D is a group of fat-soluble steroid derivatives which have biological activity.25-(OH)-D3 is the relatively important one of the VitD’s metabolism substance, playing an critical role in the diagnosis and treatment of children diseases and healthy. This article is a review centering on the progress of determination and clinical study.

25-Hydroxyvitamin D3; determination; clinical application; children

孫幫燕(1991-)，女，昆明醫(yī)科大學(xué)2013級(jí)臨床藥理專業(yè)研究生。

張楨(1976-)，男，2012年云南省醫(yī)學(xué)學(xué)科帶頭人，醫(yī)學(xué)碩士,昆明醫(yī)科大學(xué)碩士研究生導(dǎo)師，昆明市兒童醫(yī)院副教授/副主任藥師。

R446.11

A

1007-8517(2014)15-0037-02

2014.05.13)