宮頸癌新輔助化療前后Survivin、VEGF和Ki-67的表達及臨床意義

謝慧君, 袁明明, 王偉偉, 蔡德巍

(江蘇省南通瑞慈醫(yī)院 病理科, 江蘇 南通, 226000)

宮頸癌為女性多發(fā)惡性疾病，治愈率低，轉(zhuǎn)移率與復(fù)發(fā)率高，近年其發(fā)病率高居女性惡性腫瘤的第2位[1]。早期宮頸癌首選手術(shù)治療，術(shù)前行新輔助化療可使癌細胞局限，縮小腫瘤，殺滅腫瘤細胞，為手術(shù)創(chuàng)造條件，同時可提高患者的3年無瘤生存率[2]。對宮頸癌前病變及癌后的診斷, 對提高手術(shù)成功率及防止復(fù)發(fā)有重要意義。傳統(tǒng)方法主要采用宮頸細胞涂片和活體組織學(xué)檢查診斷宮頸癌，有一定局限性且易受觀察者主客觀因素的影響[3]。近年隨著細胞因子廣泛應(yīng)用于宮頸癌診斷與治療，將細胞學(xué)與免疫組化研究方法結(jié)合起來, 增加了宮頸癌診斷的準(zhǔn)確率，從而提高臨床治療效果。本組探討宮頸癌患者新輔助化療前后Survivin、VEGF、Ki-67的表達及其臨床意義，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本院自2010年1月—2013年10月收治43例宮頸癌患者，均經(jīng)病理學(xué)診斷確診且為初治者。年齡54～78歲，平均(64.1±2.3)歲。組織學(xué)分級：G1級,4例; G2級, 24例; G3級, 15例。組織分化：高分化12例，中分化23例，低分化8例。FIGO分期[4]: ⅠB2期 9例，ⅡA2期4例, ⅡB期 30例。病理報告：有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者18例，未發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者25例。按照腫瘤生長類型分為：內(nèi)生型11例，外生型18例，潰瘍型10例，頸管型4例。排除標(biāo)準(zhǔn)：化療禁忌證者；合并其他惡性腫瘤者；心電圖異常者；血白細胞計數(shù)<4×109/L, 血小板計數(shù)≥100×109。43例患者均簽署知情同意書，且經(jīng)本院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 新輔助化療方法：采用TP方案，第1天，紫杉醇脂質(zhì)體(160 mg/m2); 第2、3天奈達鉑(80 mg/m2); 給藥后間隔3周后，再給用1個療程，共用2個療程。療程結(jié)束后手術(shù)切除病灶，予子宮廣泛切除，同時行盆腔清掃術(shù)。

1.2.2 Survivin、VEGF和Ki-67檢測：化療前行宮頸組織活檢，術(shù)后標(biāo)本切片進行檢測。免疫組織化學(xué)試劑均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司，應(yīng)用SP法，按照試劑盒要求進行檢測。

1.3 療效標(biāo)準(zhǔn)[5]

臨床療效標(biāo)準(zhǔn)：完全緩解(CR), 腫瘤完全消退；部分緩解(PR)，腫瘤顯著減少且體積縮小大于50%; 無效(SD), 腫瘤體積有減少，但縮小不到50%; 進展(PD)，腫瘤變大，或者影像學(xué)檢查有新病灶出現(xiàn)?？傆行?完全緩解率+緩解率。Survivin、VEGF和Ki-67檢測陽性率：陽性，細胞質(zhì)或細胞核中可見棕黃色顆粒分；弱陽性(+), 黃色占0～5%; 陽性(2+)，黃色占26%～50%; 強陽性(3+)，黃色占> 50%。

1.4 觀察指標(biāo)

分析新輔助化療前、后Survivin、VEGF和Ki-67的表達；新輔助化療的臨床總有效率；療效與Survivin、VEGF和Ki-67的表達。

2 結(jié) 果

2.1 Survivin、VEGF和Ki-67表達

化療前Survivin、VEGF和Ki-67的陽性率分別為81.4%(35/43)、65.1%(28/43)、76.7%(33/43),化療后分別為44.2%(19/43)、18.6%(8/43)、20.9%(9/43),化療前與化療后比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.005)。見表1。

表1 新輔助化療前、后Survivin、VEGF和Ki-67表達情況(n)

2.2 新輔助化療的臨床總有效率

43例宮頸癌化療后, CR 14.0%(6/43), PR 65.1%(28/43), SD 18.6%(8/43)，PD 2.3%(1/43)，臨床總有效率達為79.1%(34/43)。

2.3 有效率與Survivin、VEGF和Ki-67表達

Survivin陽性率完全緩解患者為0%(0/6), 部分緩解為35.7%(10/28)，而無效100%(8/8)和進展中100%(1/1),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.005); VEGF完全緩解的患者陽性率為0%(0/6)，部分緩解為3.6%(2/28), 無效62.5%(5/8)和進展中100%(1/1),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.005); Ki67陽性率在完全緩解患者為16.7%(1/6)，部分緩解為3.6%(1/28), 無效100%(8/8)和進展中100%(1/1),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.005)。見表2。

表2 化療后有效率與Survivin、VEGF和Ki-67表達(n)

3 討 論

宮頸癌是發(fā)病率僅次于乳腺癌的女性常見惡性腫瘤，發(fā)展中國家發(fā)病率較多，且近年來發(fā)病有年輕化趨勢[6]，其治療目前多采用手術(shù)與新輔助化療聯(lián)合治療。新輔助化療是指在宮頸癌手術(shù)前或放療前，行2～3個療程化療，主要針對高危型宮頸癌進行治療，可減少宮頸癌患者盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、宮旁組織侵襲率和血管間隙受侵率等不良預(yù)后，目前被廣泛應(yīng)用[7]。本組采用新輔助化療即采用TP方案，給予紫杉醇脂質(zhì)體與奈達鉑聯(lián)合應(yīng)用。紫杉醇是目前唯一可促進微管聚合的新型抗腫瘤藥物，可使腫瘤細胞停止于G2和M期，抑制腫瘤細胞合成，促進其凋亡，其脂質(zhì)體具有靶向定位性。奈達鉑與紫杉醇配合可以提高抑瘤率，交叉使用無耐藥性、不良反應(yīng)發(fā)生率[8]。宮頸癌的發(fā)生不僅與癌細胞的異常增殖有關(guān)，與細胞分化水平的改變也具有密切關(guān)系，是細胞癌變的關(guān)鍵步驟[9]。因此近年有關(guān)細胞因子的異常表達研究也受到了關(guān)注。宮頸上皮內(nèi)瘤變與HPV感染、抑癌基因的失活、細胞癌基因的激活均有一定的相關(guān)性。Survivin是凋亡抑制蛋白(IAPs)家族的一員，參與宮頸癌細胞的激活。正常生理條件下胚胎發(fā)育受Survivin調(diào)控，同時在成人的大腸黏膜、子宮內(nèi)膜等組織中Survivin均有低表達。而在惡性腫瘤組織中，如卵巢癌、宮頸癌、乳腺癌中Survivin為異常表達增高,因此可用來預(yù)示診斷疾病及進展情況[11-12]。Survivin在正常宮頸組織中呈現(xiàn)低表達，在宮頸炎組織中略有升高為微量表達，而在宮頸上皮內(nèi)瘤變及早期宮頸癌中呈高表達，隨著宮頸病變的進展，表達增加，與CIN級別的升高呈正相關(guān)[13-14]。本組研究表明，化療前Survivin表達為81.4%，新輔助化療后陽性率為44.2%, 表明化療前惡性宮頸病變中Survivin為高表達，治療后完全緩解患者中Survivin陽性率為0%, 部分緩解為35.7%, 而在無效和進展中Survivin陽性率均為100%，表明Survivin可反映宮頸疾病的進展，可以作為宮頸癌的預(yù)測及診斷指標(biāo)。VEGF是重要的血管生成因子，VEGF可促進內(nèi)皮細胞發(fā)生有絲分裂，有較強地促進血管生長作用，對腫瘤新生血管生長起到重要的促進作用，在腫瘤增生及復(fù)發(fā)中可刺激腫瘤血管新生[15-16]。VEGF高表達可使腫瘤生長呈不可控性，同時新生血管結(jié)構(gòu)的不完整性和血管通透性增加，導(dǎo)致腫瘤細胞間隙增寬，腫瘤細胞更易進入血液循環(huán)，出現(xiàn)復(fù)發(fā)及遠處轉(zhuǎn)移。因此VEGF高表達不僅與癌癥發(fā)病有關(guān)，還與癌癥的復(fù)發(fā)和遠處轉(zhuǎn)移有顯著相關(guān)性[17]。本組研究表明，化療前VEGF表達為65.1%, 新輔助化療后陽性率為18.6%, 表明化療前惡性宮頸病變中VEGF為高表達，新輔助化療后完全緩解患者中VEGF陽性率為0%, 部分緩解為7.1%, 而在無效和進展中, VEGF陽性率分別為62.5%及100%, 表明VEGF可作為宮頸癌的診斷指標(biāo)。Ki67是一種細胞增殖標(biāo)記物,是一種在細胞G1、G2、S、M期均會出現(xiàn)的核抗原，是近年最有前途的腫瘤標(biāo)記物。正常生理條件下正常宮頸有表達, 在診斷宮頸病變時, Ki67常與其他抗體聯(lián)合診斷腫瘤[18-19]。Ki67水平變化與癌癥進展程度密切相關(guān)，可直接反映癌細胞增殖的程度，許多腫瘤研究中顯示與腫瘤的分化程度、浸潤、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)，因此被廣泛用于癌癥的基因檢測因子。本組研究表明，化療前Ki67表達為76.7%, 新輔助化療后陽性率為18.6%, 表明化療前的惡性宮頸病變中Ki67為高表達，新輔助化療后完全緩解患者中Ki67陽性率為16.7%, 部分緩解為3.6%, 而在無效和進展中, Ki67陽性率均為100%。

綜上所述, Survivin、VEGF和Ki-67在新輔助化療前陽性率顯著高于新輔助化療后，治療有效的患者陽性率明顯著低于無效患者。因此Survivin、VEGF和Ki-67在診斷宮頸癌疾病進展方

面有一定的應(yīng)用價值。但由于本組樣本量較小，且未比較不同病理分級、淋巴是否轉(zhuǎn)移、腫瘤大小與相關(guān)基因因子表達的關(guān)系，同時3個基因因子之間的表達有無關(guān)聯(lián)也暫未涉及，因此尚待進一步的研究探討。

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