具有抗腫瘤血管生成作用的三大類中藥研究現(xiàn)狀和思考

程磊++++鄧玉華

[摘要] 腫瘤新生血管的生成是腫瘤生長(zhǎng)、復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移過(guò)程中不可缺少的生物過(guò)程，因此，抗腫瘤血管生成是目前治療腫瘤的重要方式。隨著對(duì)中醫(yī)藥研究的進(jìn)一步深入，發(fā)現(xiàn)諸多中藥在抗腫瘤血管生成方面有顯著作用。本文就目前研究較多的活血藥、清熱藥、攻毒藥等三類具有抗腫瘤血管生成作用的中藥作分析和思考。

[關(guān)鍵詞] 腫瘤；抗血管生成；中藥

[中圖分類號(hào)] R285 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2014）07（a）-0187-05

在腫瘤的生長(zhǎng)、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移過(guò)程中，腫瘤新生血管的生成起著非常重要的作用，同時(shí)其也是一個(gè)復(fù)雜的生理病理過(guò)程。自1971年美國(guó)Folkman[1]提出“腫瘤血管依賴性假說(shuō)”以來(lái)，人們對(duì)腫瘤血管生成的認(rèn)識(shí)也逐漸加深，腫瘤生長(zhǎng)需要豐富的血液供應(yīng)，這就要求有新的血管生成和增加，一旦血管長(zhǎng)入腫瘤，腫瘤的血液供應(yīng)由彌散獲取變?yōu)楣嘧?，腫瘤生長(zhǎng)的體積將難以控制。同時(shí)，在腫瘤轉(zhuǎn)移方面也同樣依賴血管生成，因此，阻止新生腫瘤血管的生成和破壞已有的腫瘤血管，從而切斷腫瘤的營(yíng)養(yǎng)供給，起到抑制腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的作用，已成為治療腫瘤的研究熱點(diǎn)。

1 中醫(yī)學(xué)對(duì)腫瘤血管生成機(jī)制的認(rèn)識(shí)

腫瘤屬中醫(yī)“瘸積”“巖”的范疇。祖國(guó)傳統(tǒng)中醫(yī)理論認(rèn)為腫瘤系正氣不足、外邪侵襲致體內(nèi)痰飲、血瘀等多種病理產(chǎn)物搏結(jié)而成。腫瘤血管生成屬于中醫(yī)學(xué)“絡(luò)病”范疇。中醫(yī)“絡(luò)”的概念在形態(tài)和功能上與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的微血管與微循環(huán)概念相似。祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，絡(luò)脈是經(jīng)絡(luò)系統(tǒng)的分支，猶如網(wǎng)絡(luò)，縱橫交錯(cuò)，遍及全身，內(nèi)絡(luò)五臟，外連肢節(jié)，具有貫通表里上下、環(huán)流氣血津液及滲灌臟腑組織等生理功能。正如《靈樞·經(jīng)脈》所言：“經(jīng)脈十二者，伏行分肉之間，深而不見，……諸脈之浮而常見者，皆絡(luò)脈也。”腫瘤的微血管生成過(guò)程，即中醫(yī)“久病入絡(luò)”而形成絡(luò)脈病變的過(guò)程。絡(luò)脈的損傷既是其病機(jī)演變過(guò)程的主要病理產(chǎn)物，又是其病變漸次深入、變生諸病導(dǎo)致病情進(jìn)一步惡化的途徑和必要條件。因此，針對(duì)腫瘤血管生成的治療應(yīng)著力恢復(fù)與暢達(dá)絡(luò)脈至生理狀態(tài)。對(duì)于腫瘤治療用藥，即可在攻毒扶正之味的基礎(chǔ)上佐以治療絡(luò)病之藥。近年來(lái)在中藥抗腫瘤血管方面研究表明活血藥、清熱藥、攻毒藥等三類中藥應(yīng)用及研究較多。

2 三大類中藥抗腫瘤血管生成的研究

2.1 活血類

2.1.1 莪術(shù) 莪術(shù)具有活血化瘀、消積止痛的功效。莪術(shù)油和莪術(shù)醇都是從中藥莪術(shù)中提取的有效成分。馮剛等[2]實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，莪術(shù)油對(duì)小鼠S180肉瘤有一定的抑制作用，對(duì)腫瘤微血管密度（microvessel density，MVD）均有明顯的抑制作用，并可降低血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）的表達(dá)。莪術(shù)可有效抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和成管，溫莪術(shù)還能促進(jìn)細(xì)胞中一氧化氮（NO）和一氧化氮酶（NOS）的生成，也證實(shí)了莪術(shù)的抗腫瘤及抗血管生成效果[3]。唐淵等[4]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，莪術(shù)醇和莪術(shù)油可能是通過(guò)抑制HepG2細(xì)胞環(huán)氧化酶2（COX-2）和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子基因表達(dá)，誘導(dǎo)瘤細(xì)胞凋亡，減少腫瘤血管形成等機(jī)制而發(fā)揮抗腫瘤作用。

2.1.2 紅花 紅花具有活血通經(jīng)、祛瘀止痛的功效。王文杰[5]實(shí)驗(yàn)證明一定濃度的紅花水煎劑可以使腫瘤組織中血管分布減少，從而抑制瘤細(xì)胞分裂增殖。中劑量（每只老鼠0.3 g/d灌胃）的紅花水煎劑可以明顯減少腫瘤組織微血管生成，這可能是其抑制腫瘤生長(zhǎng)的重要機(jī)制。羥基紅花黃色素A是從紅花中提取分離的，張前等[6]還證明羥基紅花黃色素A對(duì)人胃癌細(xì)胞株（BGC803）刺激下異常增殖人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（EVC304）生長(zhǎng)的抑制作用，發(fā)現(xiàn)其對(duì)正常EVC304作用不明顯，對(duì)異常增殖內(nèi)皮細(xì)胞呈現(xiàn)出很強(qiáng)的抑制作用。張前等[7]利用雞胚絨毛尿囊膜（CAM）實(shí)驗(yàn)觀察羥基紅花黃色素A能顯著抑制CAM新生血管生成，其作用機(jī)制之一是通過(guò)抑制堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子bFGF、VEGF及血管內(nèi)皮因子受體（vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR）flt1的mRNA表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的，提示羥基紅花黃色素A可能是很有潛力的血管生成抑制劑。

2.1.3 丹參 丹參具有活血調(diào)經(jīng)、祛瘀止痛、涼血消癰等功效，為常用的活血藥。鄭蘭東等[8]研究結(jié)果顯示，丹參可以降低肝癌及癌周組織的VEGF水平。經(jīng)丹參治療后的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)不良，細(xì)胞形態(tài)趨向良性分化，部分恢復(fù)正常細(xì)胞的形態(tài)。由此證明，丹參對(duì)腫瘤細(xì)胞有較強(qiáng)的誘導(dǎo)分化作用，同時(shí)降低VEGF水平，抑制腫瘤血管的生成。丹參酮ⅡA是中藥丹參的有效活性成分，最早用于心血管疾病，近年來(lái)發(fā)現(xiàn)具有明顯的抗腫瘤作用。高麗等[9]發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA能抑制乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231細(xì)胞的體外血管生成擬態(tài)的形成和細(xì)胞增殖，并抑制體外管道形成和腫瘤細(xì)胞VEGF的mRNA表達(dá)。周利紅[10]研究表明，丹參酮ⅡA能夠抑制人腸癌細(xì)胞增殖，丹參酮ⅡA對(duì)小鼠血清VEGF表達(dá)、MVD和壞死面積的影響呈劑量依賴關(guān)系。推測(cè)丹參酮ⅡA抑制腸癌血管生成的作用機(jī)制可能是通過(guò)調(diào)控腸癌細(xì)胞COX-2基因水平，下調(diào)VEGF的表達(dá)，抑制腸癌微血管生成。

2.1.4 姜黃 姜黃可以行氣活血，通經(jīng)止痛。姜黃素提取自中藥姜黃，具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤等作用。黃東生等[11]的研究表明姜黃素能通過(guò)降低VEGF和bFGF的表達(dá)水平，抑制S180肉瘤腫瘤血管形成。有研究表明姜黃素可通過(guò)降低金屬基質(zhì)蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）的活性、抑制VEGF的表達(dá)、促進(jìn)血管生成抑制因子糖化蛋白G（TSP）的表達(dá)等多種途徑抑制腫瘤血管生成[12]。Aggarwal等[13]篩選20種不同的姜黃類似物，顯示姜黃素抑制腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）誘導(dǎo)的NF-κB活性作用最強(qiáng)。姜黃素還能抑制NF-κB調(diào)節(jié)基因如腫瘤壞死因子1（TNFR1）、TNFR2、NF-κB誘導(dǎo)激酶、IκB激酶復(fù)合物（IKK）和NF-κB p53亞單位。通過(guò)抑制IKK和TNF誘導(dǎo)的Akt活性來(lái)抑制NF-κB活性和NF-κB調(diào)節(jié)基因表達(dá)，以抑制腫瘤血管生成基因（VEGF、MMP-9和細(xì)胞黏附分子）。姜黃素還可通過(guò)阻斷促分裂素原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）途徑下調(diào)COX-2的表達(dá)，從而抑制人腸內(nèi)皮細(xì)胞的血管生成[14]。endprint

2.1.5 川芎 川芎辛散溫通，功能活血祛瘀，臨床應(yīng)用甚廣。川芎嗪為川芎主要有效成分之一。馬軍[15]研究發(fā)現(xiàn)，川芎嗪可明顯抑制裸鼠腫瘤新生血管的形成，川芎嗪能下調(diào)乳腺癌VEGF-A和VEGF-C的蛋白及mRNA的表達(dá)，可能是其抑制腺癌生長(zhǎng)和血管生成的主要機(jī)制。李雷宇等[16]實(shí)驗(yàn)表明，與生理鹽水組相比，川芎嗪中、高劑量組大腸癌sw620移植瘤的體積和質(zhì)量明顯減小，其瘤體內(nèi)CD34、VEGF、HIF-1α的表達(dá)明顯降低，提示川芎嗪能抑制大腸癌sw620裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)，其作用機(jī)制可能與改善腫瘤組織的乏氧狀況、抑制腫瘤血管生成有關(guān)。Zou等[17]檢測(cè)川芎嗪對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）的細(xì)胞毒作用，結(jié)果表明川芎嗪對(duì)HUVECs有明顯的生長(zhǎng)抑制作用。

2.2 清熱類

2.2.1 白花蛇舌草 白花蛇舌草具有清熱解毒、活血化瘀、利尿消腫和抗癌腫等功效，是自古以來(lái)治療癌腫常用的單味中藥，臨床主要用于治療腫瘤和炎性疾病[18]。劉巖等[19]的實(shí)驗(yàn)表明，白花蛇舌草提取物可以下調(diào)MMP-2及MMP-9的表達(dá)，抑制新生血管生成，起到抗腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移作用。同時(shí)白花蛇舌草還能下調(diào)血管內(nèi)皮細(xì)胞和結(jié)腸癌細(xì)胞VEGF的表達(dá)，對(duì)腫瘤血管的生成有明顯的抑制作用[20]。肖云等[21]對(duì)白花蛇舌草的提取物進(jìn)行了抗小鼠結(jié)直腸癌血管生成的研究，發(fā)現(xiàn)白花蛇舌草中的槲皮素可明顯下調(diào)腫瘤組織中VEGF的表達(dá)，熊果酸能抑制MMPs-2的表達(dá)，故白花蛇舌草抗結(jié)腸癌機(jī)制之一可能是通過(guò)下調(diào)腫瘤組織VEGF等促血管生成因子的表達(dá)，抑制MMP-2表達(dá)，降低其活性，阻止血管基底膜和細(xì)胞基質(zhì)的降解等途徑抑制腫瘤血管的生成而實(shí)現(xiàn)的。

2.2.2 半枝蓮 半枝蓮具有清熱解毒、散瘀活血之功效。半技蓮黃酮化合物在體外具有抑制腫瘤細(xì)胞Survivin蛋白表達(dá)、促進(jìn)PTEN蛋白表達(dá)的作用，其作用機(jī)制可能是通過(guò)下調(diào)Survivin，上調(diào)PTEN，抑制Survivin對(duì)VEGF的正調(diào)控，增強(qiáng)PTEN對(duì)VEGF的負(fù)調(diào)控，借以達(dá)到下調(diào)VEGF的表達(dá)，抑制腫瘤細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，從而實(shí)現(xiàn)抑制腫瘤細(xì)胞遷移和阻斷腫瘤血管生成[22]。半枝蓮黃酮類化合物c在體外具有抑制VEGF及MMP-2表達(dá)的作用，并抑制內(nèi)皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞對(duì)基底膜的黏附能力，其機(jī)制可能通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞黏附分子和其他促血管生成相關(guān)因子的表達(dá)，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，抑制內(nèi)皮細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞的增殖從而阻斷腫瘤血管生成，抑制腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及侵襲[23]。

2.2.3 蒲公英 蒲公英具有清熱解毒、利濕散結(jié)之功效。研究顯示蒲公英提取物大劑量組[200 mg/（kg·d）灌胃]干預(yù)的裸鼠膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)后期逐漸趨緩，可能與蒲公英提取物對(duì)VEGF/VEGFR的抑制有關(guān)，從而減緩了在體裸小鼠膠質(zhì)瘤腫瘤的生長(zhǎng)，免疫組織化學(xué)結(jié)果同樣顯示VEGF/VEGFR 在蒲公英提取物大劑量組中表達(dá)明顯下降，與對(duì)照組[生理鹽水組50 mg/（kg·d）]及小劑量組[50 mg/（kg·d）]比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示VEGF/VEGFR的表達(dá)可能受到了抑制從而阻礙了腫瘤新生血管的生長(zhǎng)，削弱了腫瘤的血液供應(yīng)[24]。

2.2.4 垂盆草 垂盆草具有清熱解毒、消腫利尿、排膿生肌之功效。通過(guò)檢測(cè)經(jīng)不同濃度垂盆草醇提物處理后HepG2細(xì)胞中VEGF基因及蛋白表達(dá)量的變化，發(fā)現(xiàn)隨著藥物濃度的增加，HepG2細(xì)胞VEGF的陽(yáng)性表達(dá)率顯著下降，說(shuō)明其能有效抑制HepG2細(xì)胞分泌VEGF，為垂盆草在體外的抗血管生成作用提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)[25]。

2.2.5 穿心蓮 穿心蓮具有清熱解毒、涼血消腫、燥濕等功效。相關(guān)機(jī)制研究表明，穿心蓮內(nèi)酯（AD）衍生物AD-2和AD-3能夠顯著下調(diào)S180小鼠血清中白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、前列腺素E2（PGE2）及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）的表達(dá)，抑制腫瘤組織中NF-κB的核位移，從而抑制促腫瘤發(fā)生發(fā)展的NF-κB通路，同時(shí)AD-2、AD-3通過(guò)上調(diào)腫瘤微環(huán)境中基質(zhì)金屬蛋白酶-1抑制劑（TIMP-1）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的表達(dá)，發(fā)揮其抗血管新生、抑制腫瘤的生長(zhǎng)及擴(kuò)散等抗腫瘤作用，而且無(wú)明顯毒副作用[26]。

2.2.6 山慈菇 山慈菇為中醫(yī)常用抗癌中藥，《中國(guó)藥典》2005年版收錄了蘭科植物中的杜鵑蘭、獨(dú)蒜蘭及云南獨(dú)蒜蘭作為山慈菇的3種基原植物。Shim等[27]利用活性跟蹤法發(fā)現(xiàn)從杜鵑蘭假鱗莖的乙醇提取物中分離出5，7-dihydroxy-3-（3-hydroxy-4-methoxybenzyl）-6-methoxychromatt-4-one，無(wú)論在體外還是在體內(nèi)試驗(yàn)中都表現(xiàn)出很強(qiáng)的抗血管生成活性。在體外試驗(yàn)中，它對(duì)bFGF誘導(dǎo)的HUVECs增殖表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制作用，其活性大小與劑量呈依賴關(guān)系。在提取物濃度為0.5 μmol/L時(shí)仍有抑制作用，而在沒有bFGF存在的情況下，則不抑制HUVECs的增殖。同時(shí)該成分可以抑制bFGF誘導(dǎo)的HUVECs毛細(xì)血管的生成，抑制程度呈劑量依賴關(guān)系，且在任何濃度下都未表現(xiàn)出細(xì)胞毒性。在體內(nèi)試驗(yàn)中，用該成分處理成長(zhǎng)的CAM，根據(jù)濃度不同，則表現(xiàn)出不同程度的抑制毛細(xì)血管生成的作用。

2.2.7 其他 白頭翁具有清熱解毒、涼血止痢、燥濕殺蟲之功效。朱麗晶等[28]發(fā)現(xiàn)白頭翁醇提物在小鼠體內(nèi)具有明顯的腫瘤抑制作用，而在較低劑量（每只小鼠10 g/kg）時(shí)即可顯著抑制MVD的生成。苦參具有清熱燥濕、殺蟲利尿之功效?？鄥ⅫS酮（kusheearpin D，KD）是一種從苦參中提取的新型黃酮類化合物。KD的抗血管生成作用可能與細(xì)胞周期阻滯于G2/M期以及抑制胞內(nèi)H2O2的產(chǎn)生有關(guān)[29]。

2.3 攻毒類

2.3.1 蜈蚣 蜈蚣具有息風(fēng)鎮(zhèn)痙、攻毒散結(jié)、通絡(luò)止痛等功效?，F(xiàn)代藥理研究表明蜈蚣還具有抗真菌和抗腫瘤作用。有研究顯示，蜈蚣提取液能抑制裸鼠肝癌Bel-7404移植瘤[30]和裸鼠MCF-7人異位乳腺癌模型種植瘤[31]的生長(zhǎng)，其機(jī)制與抑制腫瘤血管生成、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡有關(guān)。endprint

2.3.2 蟾酥 蟾酥具有解毒消腫、強(qiáng)心止痛等功效?，F(xiàn)代研究還廣泛用于對(duì)癌癥的治療。華蟾酥毒基又名華蟾毒精，是蟾酥的主要活性單體之一，具有與蟾酥相類似的藥理學(xué)活性。經(jīng)圖像分析儀定量檢測(cè)，8 nmol/L的華蟾酥毒基即可顯著抑制毛細(xì)血管的生成[32]。王南瑤等[33]研究發(fā)現(xiàn)華蟾酥毒基在體外可以抑制內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)，在體內(nèi)外均可下調(diào)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子和表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子的表達(dá)。另外，華蟾酥毒基對(duì)雞胚尿囊膜及裸鼠肝癌移植瘤新生血管形成也具有明顯的抑制作用。

2.3.3 斑蝥 斑蝥具有攻毒蝕瘡、逐瘀散結(jié)之功效。斑蝥中的有效成分是斑蝥素，可抑制細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成，影響細(xì)胞的生長(zhǎng)分化，去甲斑蝥素（NCTD）是中藥抗癌活性成分斑蝥素去除1，2位兩個(gè)甲基合成而得，對(duì)常見腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)有抑制作用。范躍祖等[34]通過(guò)建立荷瘤裸鼠膽囊癌模型和膽囊癌GBC-SD細(xì)胞模型分別進(jìn)行血管生成隨機(jī)干預(yù)實(shí)驗(yàn)，證明NCTD可有效抑制、破壞膽囊癌腫瘤血管生成，進(jìn)而抑制膽囊癌的增殖與生長(zhǎng)，其機(jī)制可能與NCTD誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡、直接破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞、下調(diào)血管生成因子VEGF、Ang-2和上調(diào)血管抑制因子TSP、TIMP2表達(dá)有關(guān)。余濤等[35]實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，NCTD可以抑制HUVECS的遷移、黏附和管腔形成，下調(diào)促血管生成蛋白、VEGFR、VE-cadherin的表達(dá)水平，對(duì)抗促血管生成的細(xì)胞行為和因素，可能是其體內(nèi)抗腫瘤血管的機(jī)制之一。林曉燕等[36]研究證明NCTD能明顯抑制CAM新生血管的生成，同時(shí)能抑制人乳腺癌MCF-7細(xì)胞雞胚移植腫瘤的血管生成，認(rèn)為其抗腫瘤作用與抑制腫瘤血管生成有關(guān)。

2.3.4 蝎毒 蝎毒作為一種傳統(tǒng)中藥，被應(yīng)用于冠心病、心肌梗死、腦梗死、癌癥等十多種疾病的治療。張?jiān)掠⒌萚37]認(rèn)為，蝎毒多肽提取物可通過(guò)抑制前列腺癌細(xì)胞MMP-9蛋白及血管生成因子COX-2的表達(dá)而發(fā)揮其抗血管生成作用。張維東等[38]研究報(bào)道蝎毒多肽提取物具有良好的體內(nèi)和體外抗腫瘤血管生成的活性，并借此抑制腫瘤的生長(zhǎng)。

2.3.5 地鱉蟲 地鱉蟲具有破瘀血、續(xù)筋骨之功效。李穗晶[39]研究表明，地鱉蟲纖溶活性蛋白組分具有抑制血管生成的作用，可用于腫瘤治療。

2.3.6 壁虎 壁虎具有祛風(fēng)活絡(luò)、散結(jié)之功效，可用于治療食道癌、腸癌、原發(fā)性肝癌、肺癌等。劉菲等[40]實(shí)驗(yàn)證實(shí)壁虎可減少腫瘤小鼠VEGF、bFGF的表達(dá)，抗腫瘤血管生成，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡。

3 討論

3.1 目前抗腫瘤血管生成研究的不足之處

腫瘤血管生成是一個(gè)復(fù)雜的多步驟過(guò)程，是各種因素共同作用的結(jié)果。因此，對(duì)抗腫瘤血管生成中藥的研究不應(yīng)僅局限于某一個(gè)層面，而應(yīng)從分子、細(xì)胞、組織、腫瘤模型甚或腫瘤轉(zhuǎn)移模型等不同層面進(jìn)行其機(jī)制以及各信號(hào)通路的探討，才是比較系統(tǒng)和科學(xué)的研究方法。從前面的文獻(xiàn)資料可以看出，前人在中藥抗腫瘤血管生成方面雖做了大量的研究工作，但多是證明其有抗血管生成的功效，多集中在藥效學(xué)方面，而對(duì)其機(jī)制以及信號(hào)通路的研究不夠深入。而中藥又具有多靶點(diǎn)、多層次的優(yōu)勢(shì)，其既可作用于相關(guān)的基因，也可作用于相應(yīng)的蛋白及受體。因此，從中醫(yī)藥抗腫瘤血管生成的各個(gè)環(huán)節(jié)、各個(gè)層面進(jìn)行深入研究，和腫瘤血管的發(fā)病機(jī)制相結(jié)合，找到更立體、更全面的研究方法。

3.2 應(yīng)加強(qiáng)對(duì)中藥復(fù)方的研究

目前中藥抗腫瘤血管生成的研究大多集中在對(duì)單藥及其有效成分單體的研究，對(duì)中藥復(fù)方的研究較少，而中藥復(fù)方恰恰體現(xiàn)了中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的整體觀和辨證論治的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)，是中醫(yī)臨床治療疾病最主要的方式和手段。從組分配伍方面講：以抗腫瘤血管生成為例，如果某一處方具有此效應(yīng)，在研究此處方時(shí)應(yīng)從組分配伍中首先找出對(duì)抗血管生成起主要作用的組分，再找出對(duì)此主要作用有協(xié)同增效和減輕毒副作用的組分，進(jìn)而強(qiáng)化其主效應(yīng)并優(yōu)化主效應(yīng)的最佳劑量，然后對(duì)其機(jī)制進(jìn)行深入探討，這些工作仍需進(jìn)行大量后續(xù)的研究。因此，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)中藥復(fù)方在抗腫瘤血管生成方面的深入研究。

3.3 應(yīng)尋找合適的抗血管生成動(dòng)物模型

目前在血管新生研究方面CAM模型是應(yīng)用較多的，但其有一些不足之處：人體內(nèi)環(huán)境與CAM模型有很大差異，血管生成物必須植入絨毛尿膜囊使之誘導(dǎo)血管生成，難免產(chǎn)生人為因素誘導(dǎo)的血管生成。盡管CAM上腫瘤細(xì)胞存活率相對(duì)較高，但在CAM上傳代，其生長(zhǎng)模式和腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特性是否已經(jīng)改變，這些問題都有待進(jìn)一步研究。

中藥單味藥即包含各種成分，都可看成一個(gè)復(fù)方；中藥復(fù)方由多種藥味組成，而對(duì)每個(gè)復(fù)方進(jìn)行藥物加減，又生成新的處方，如此眾多的藥味和不同的組方形式，使這種研究模式工作量大，因此尋找并建立合理的藥理模型顯得十分必要。斑馬魚屬于脊椎動(dòng)物，是一種活體研究體系，其具有以下優(yōu)點(diǎn)[41-44]。①篩選周期短：斑馬魚的胚胎發(fā)育期短，一般24～30 h即可得到試驗(yàn)結(jié)果；②胚胎透明、易觀察：斑馬魚從胚胎到幼魚期是透明的，很容易觀察其活體狀態(tài)下藥物作用狀態(tài)；③樣品用量少，且為活體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：斑馬魚的胚胎很小，每次測(cè)定只需要很少量的樣品，但所進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)卻是活體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)；④用藥簡(jiǎn)單：待測(cè)化合物可以直接溶于水中并擴(kuò)散到胚胎中，也可直接注射到胚胎；⑤與人類高相關(guān)性，篩選準(zhǔn)確率高：目前已經(jīng)廣泛用于研究人類疾病和高通量藥物篩選。因此，斑馬魚是目前極為理想的用于研究中藥單體及復(fù)方對(duì)血管生成影響的研究模型。

4 結(jié)論

隨著中醫(yī)藥研究的深入，其在抗腫瘤方面越來(lái)越多地受到國(guó)際社會(huì)的關(guān)注，中藥在抗腫瘤血管生成方面的功效，必將成為中醫(yī)藥治療腫瘤的一個(gè)重要手段。若將中醫(yī)藥研究與現(xiàn)代分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、基因工程學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)等學(xué)科相互結(jié)合，共同探討中醫(yī)藥抗腫瘤血管生成的機(jī)制，必將改善中醫(yī)“療效確切，機(jī)制不明”的尷尬境地，這對(duì)發(fā)展中醫(yī)藥的現(xiàn)代化以及使中醫(yī)走向國(guó)際化均有極其重要的意義。

[參考文獻(xiàn)]endprint

[1] Folkman J.Tumor angiogenesis：therapeutic implications[J].N Engl J Med，1971，285（21）：1182-1186.

[2] 馮剛，黃濤，盧宏達(dá)，等.莪術(shù)油注射液對(duì)小鼠移植性Sl80肉瘤血管形成的抑制作用[J].腫瘤研究與臨床，2005，17（4）：233.

[3] 馮海紅.莪術(shù)三個(gè)不同品種抗卵巢癌理論及藥效比較研究初探[D].南京：南京中醫(yī)藥大學(xué)，2008.

[4] 唐淵，李曉輝.莪術(shù)提取物對(duì)肝癌細(xì)胞系HepG2的抗癌作用及機(jī)制研究[J].中圍藥理學(xué)通報(bào)，2007，23（6）：790-794.

[5] 王文杰.紅花水煎劑對(duì)腫瘤組織病理學(xué)改變及血管生成的影響[J].山西中醫(yī)，2007，23（6）：59-60.

[6] 張前，張瑋，解華.羥基紅花黃色素A抑制胃癌細(xì)胞培養(yǎng)液刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華中醫(yī)藥雜志（原中國(guó)醫(yī)藥學(xué)報(bào)），2006，21（增刊）：174-176.

[7] 張前，牛欣，金鳴，等.羥基紅花黃色索A抑制新生血管形成的機(jī)制研究[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，27（3）：25-29.

[8] 鄭蘭東，夏榮龍，展鵬遠(yuǎn)，等.丹參對(duì)肝臟腫瘤發(fā)展的影響[J].醫(yī)藥論壇雜志，2005，26（11）：35-39.

[9] 高麗，徐長(zhǎng)亮，何贅綿，等.丹參酮ⅡA對(duì)乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231體外血管生成擬態(tài)的抑制作用[J].藥學(xué)與臨床研究，2011，19（4）：315-317.

[10] 周利紅.丹參酮ⅡA調(diào)控COX-2基因抑制結(jié)腸癌微血管生成的機(jī)制研究[D].上海：上海中醫(yī)藥大學(xué)，2009.

[11] 黃冬生，張磊，鄺浩斌.姜黃素對(duì)小鼠S180肉瘤腫瘤血管形成抑制作用研究[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，2009，9（5）：15-16.

[12] Shankar S，Ganapathy S，Chen Q，et al.Curcumin sensitizes TRAIL-resistant xenografts：molecular mechanisms of apoptosis，metastasis and angiogenesis[J].Mol Cancer，2008，7：16.

[13] Aggarwal S，Ichikawa H，Takada Y，et al.Curcumin （diferuloylmethane） down-regulates expression of cell proliferation and antiapoptotic and metastatic gene products through suppression of I {kappa} B {alpha} kinase and Akt activation[J].Mol Pharmacol，2006，69（1）：195-206.

[14] Binion DG，Otterson M F，Rafiee P，et al.Curcum in inhibits VEGF-mediated angiogenesis in human intestinal microvascular endothelial cells through COX-2 and MAPK inhibition[J].Gut，2008，57（11）：1509-1517.

[15] 馬軍.川芎嗪對(duì)乳腺癌的作用及機(jī)制的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究[D].蘇州：蘇州大學(xué)，2012.

[16] 李雷宇，張俊華，張銀旭，等.川芎嗪抗大腸癌sw620裸鼠移植瘤血管生成及抑瘤機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[J].東南大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，29（5）：519-523.

[17] Zou Y，Jiang W，Chiou GC，et al.Effect of tranmethylpyrazine on rat experimental choroidal neovascularization in vivo and endothe lial cell cultures in vitro[J].Curr Eye Res，2007，32（1）：71-75.

[18] 陳秀珍，朱大誠(chéng)，王艷輝.白花蛇舌草藥理作用及臨床應(yīng)用研究新進(jìn)展[J].中藥材，2009，32（1）：157-161.

[19] 劉巖，張春陽(yáng)，張大田，等.白花蛇舌草提取物誘導(dǎo)人腎癌GRC-1細(xì)胞凋亡及抑制血管生成的實(shí)驗(yàn)研究[J].山東醫(yī)藥，2011，51（8）：97-98.

[20] Lin J，Wei L，Xu W，et al.Effect of Hedyotis Diffusa Willd extract on tumor angiogenesis[J].Mol Med Report，2011，4（6）：1283-1288.

[21] 肖云，伍治平，金從國(guó)，等.白花蛇舌草提取物抗小鼠結(jié)直腸癌血管生成的實(shí)驗(yàn)研究[J].昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，34（10）：53-57.

[22] 王笑娜，卜平.半枝蓮黃酮化合物調(diào)控胃癌細(xì)胞Survivin、PTEN蛋白表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[D].揚(yáng)州：揚(yáng)州大學(xué)，2010.

[23] 李瑤瑤，卜平.半枝蓮黃酮類化合物抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移與基底膜黏附的實(shí)驗(yàn)研究[D].揚(yáng)州：揚(yáng)州大學(xué)，2008.

[24] 黃小平，劉剛，汪佳，等.蒲公英對(duì)荷膠質(zhì)瘤裸小鼠的抑瘤機(jī)制探討[J].中國(guó)醫(yī)療前沿，2013，8（11）：15-16 .

[25] 黃丹丹，張偉云.垂盆草醇提物對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2的抑制作用及其機(jī)制初探[J].東南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）2009，28（4）：302-306.endprint

[26] 董瑞靜.新型穿心蓮內(nèi)酯衍生物抗腫瘤作用及其機(jī)制研究——調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境[D].鄭州：鄭州大學(xué)，2011.

[27] Shim JS，Kim JH，Lee J，et al.Anti-angiogenic activity of a homoisoflavanone from Cremastra，appendiculata[J].Planta Med，2004，70（2）：171-173.

[28] 朱麗晶，錢曉萍，李敏.白頭翁醇提物抗荷瘤鼠腫瘤血管生成作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2011，19（12）：2382-2385.

[29] 蒲麗平.苦參黃酮Kusheearpin D的抗血管生成作用及自由基相關(guān)機(jī)制研究[D].蘭州：蘭州大學(xué)，2010.

[30] 劉細(xì)平.蜈蚣提取液治療肝細(xì)胞肝癌的實(shí)驗(yàn)研究[D].長(zhǎng)沙：中南大學(xué)，2007.

[31] 盧云峰.蜈蚣提取液治療乳腺癌的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D].長(zhǎng)沙：中南大學(xué)，2008.

[32] 張建國(guó)，蘇永華.華蟾酥毒基藥理作用及劑型研究進(jìn)展[J].浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，33（4）：608-610.

[33] 王南瑤，李蘇宜，趙偉，等.華蟾素聯(lián)合三氧化二砷抑制雞胚尿囊膜血管生成的實(shí)驗(yàn)研究[J].臨床腫瘤學(xué)雜志，2006，11（7）：494-496.

[34] 范躍祖，陳春球，趙澤明，等.去甲斑蝥素對(duì)膽囊癌腫瘤血管生成的作用及機(jī)制研究[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2006，86（10）：693-699.

[35] 余濤，劉曼曼，李丹.去甲斑蝥素對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞遷移、黏附、管腔形成能力及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體、內(nèi)皮細(xì)胞鈣黏著蛋白表達(dá)的影響[J].中國(guó)癌癥雜志，2012，22（3）：232-235.

[36] 林曉燕，宋和平，胡赟宏.去甲斑蝥素對(duì)人乳腺癌血管生成的抑制作用[J].中國(guó)癌癥雜志，2007，17（11）：847-850.

[37] 張?jiān)掠?，張維東，賈青，等.蝎毒多肽提取物抑制DU-145細(xì)胞COX-2和MMP-9表達(dá)的研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2006，6（5）：8-10.

[38] 張維東，崔亞洲，姚成芳，等.蝎毒多肽提取物抗腫瘤血管生成作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2005，21（6）：708-710.

[39] 李穗晶.地鱉纖溶活性蛋白（EFP）分離純化、紅外光譜分析及抑制雞胚尿囊膜（CAM）血管生成的研究[D].廣州：廣東工業(yè)大學(xué)，2009.

[40] 劉菲，王建剛，席守民，等.中藥壁虎抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2008，19（4）：957-959.

[41] Lessman CA.The developing zebrafish （Danio rerio）：a vertebrate model for high-throughput screening of chemical libraries[J].Birth Defects Res C Embryo Today，2011，93（3）：268-280.

[42] Delvecchio C，Tiefenbach J，Krause HM.The zebrafish：a powerful platform for in vivo，HTS drug discovery[J].Assay Drug Dev Technol，2011，9（4）：354-361.

[43] Lieschke GJ，Currie PD.Animal models of human disease：zebrafish swim into view[J].Nat Rev Genet，2007，8（5）：353-367.

[44] Berghmans S，Butler P，Goldsmith P，et al.Zebrafish based assays for the assessment of cardiac，visual and gut function-potential safety screens for early drug discovery[J].J Pharmacol Toxicol Methods，2008，58（1）：59-68.

（收稿日期：2014-04-16 本文編輯：郭靜娟）endprint