三個(gè)云南地方雞種組織營養(yǎng)成分、骨骼礦化程度和血清氧化應(yīng)激參數(shù)的比較

李彥宣，安清聰，張春勇，李美荃，陳克嶙，郭榮富

(云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 云南省動(dòng)物營養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650201)

三個(gè)云南地方雞種組織營養(yǎng)成分、骨骼礦化程度和血清氧化應(yīng)激參數(shù)的比較

李彥宣，安清聰△，張春勇，李美荃，陳克嶙，郭榮富*

(云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 云南省動(dòng)物營養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650201)

試驗(yàn)通過測定血清氧化應(yīng)激參數(shù)，胸肌、腿肌營養(yǎng)成分及肝臟、脛骨、中趾骨中礦物質(zhì)含量，旨在比較云南普洱瓢雞、騰沖雪雞、無量山綠耳烏雞的組織營養(yǎng)成分、骨骼礦化程度和抗氧化應(yīng)激參數(shù)。結(jié)果表明，三黃雞血清T-AOC、T-SOD極顯著低于三種地方雞種(P<0.01)，而MDA顯著高于地方雞種(P<0.05)；三種地方雞種中，瓢雞T-AOC、T-SOD和GSH-px 最高，綠耳雞MDA最低。普洱瓢雞、騰沖雪雞和無量山綠耳雞胸肌、腿肌DM極顯著高于三黃雞(P<0.01)；普洱瓢雞胸肌和腿肌CP均極顯著高于騰沖雪雞、無量山綠耳雞和三黃雞(P<0.01)；三黃雞腿肌EE極顯著高于三種地方雞種(P<0.01)。三黃雞肝臟Fe和 Zn極顯著低于三種地方雞種(P<0.01)、而肝臟Cu和Mn極顯著或顯著高于三種地方雞種(P<0.05)；三種地方雞種脛骨、中趾骨灰分、Ca、P、Fe、Cu、Mn、Zn均顯著高于三黃雞(P<0.05)。本試驗(yàn)證明，地方雞種與三黃雞之間血清T-AOC、T-SOD、GSH-Px和MDA具有明顯差異；雞肉營養(yǎng)成分、肝臟和骨骼中礦物質(zhì)含量均有明顯差異。結(jié)果提示，地方雞種骨骼具有良好的礦化程度，中趾骨可作為高原地方雞種骨骼礦化程度的標(biāo)識(shí)；地方雞種具有較強(qiáng)的抗氧化能力；地方雞種肉品質(zhì)值得進(jìn)一步研究。

普洱瓢雞；騰沖雪雞；無量山綠耳烏雞；抗氧化作用；骨骼礦化程度；雞肉品質(zhì)

在云南高原立體環(huán)境下，自繁自養(yǎng)的本地雞種通過生物進(jìn)化形成了獨(dú)特的優(yōu)質(zhì)特性。云南地方雞種肉香味美、肉質(zhì)細(xì)嫩，抗病力強(qiáng)，抗氧化特性較培育雞種高。普洱瓢雞生長在海拔較高、氣候冷涼的山區(qū)，具有體型矮小細(xì)致的體征特點(diǎn)，瓢雞腹脂較厚、易于沉積脂肪，肉味細(xì)嫩鮮美[1]。騰沖雪雞產(chǎn)于冬季積雪的高黎貢山西麓，羽毛潔白、肉骨烏黑，肉質(zhì)鮮美香甜，還可作為補(bǔ)肝養(yǎng)腎的藥用，騰沖雪雞對一般疾病如雞白痢、球蟲病有較強(qiáng)的抵抗力，是我國地方優(yōu)良雞種[2]。無量山綠耳烏雞是南澗的地方特色產(chǎn)品，其特點(diǎn)是皮、肉、骨和內(nèi)臟均為黑色，耳呈綠色，多分布在無量山山系，無量山綠耳烏雞肉質(zhì)細(xì)嫩、口感佳、營養(yǎng)價(jià)值高[3]。本試驗(yàn)旨在研究普洱瓢雞、騰沖雪雞、無量山綠耳烏雞的肉質(zhì)特性、骨骼礦化程度和抗氧化能力差異。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

本試驗(yàn)以云南特有成年普洱瓢雞、騰沖雪雞、無量山綠耳烏雞為研究對象，以三黃雞為試驗(yàn)對照，飼喂相同日糧組成(玉米-豆粕型日糧)，雞場實(shí)施正常免疫程序和飼養(yǎng)管理。每個(gè)雞種由原產(chǎn)地雞場各隨機(jī)取12只體重相近的雞(1/2♂；1/2♀)，共48只試驗(yàn)雞。

1.2 樣品收集

采用頸部錯(cuò)位法屠宰試驗(yàn)雞，心臟采血5 mL，分離血清備用?？焖俨杉丶?、腿肌，分離脛骨、中趾骨，塑料袋封裝，組織樣品于-20 ℃低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 測定指標(biāo)與方法

1.3.1 血清氧化應(yīng)激參數(shù)測定 氧化應(yīng)激參數(shù)包括總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MAD)。氧化應(yīng)激參數(shù)均采用試劑盒測定，由南京建成生物技術(shù)公司提供試劑盒，按說明書進(jìn)行測定。

1.3.2 胸肌、腿肌營養(yǎng)成分分析 肌肉化學(xué)成分測定指標(biāo)包括粗蛋白(凱式半微量定氮法)、粗脂肪(乙醚索式抽提法)、水分及其干物質(zhì)。營養(yǎng)成分指標(biāo)分別根據(jù)GB/T 6432-94、GB/T 6433-2006、GB/T 6435-2006進(jìn)行測定。

1.3.3 肝臟Fe、Cu、Mn、Zn測定 采用干法消化，根據(jù)GB/T 6436-2002進(jìn)行試樣的干法處理肝臟，肝臟試樣分解液微量元素銅、鐵、錳、鋅的測定用IRIS/AP13543000機(jī)器進(jìn)行測定。

1.3.4 脛骨、中趾骨灰分、Ca、P、Fe、Cu、Mn和Zn含量測定 采用灼燒重量法進(jìn)行脛骨、中趾骨的灰分含量測定；采用EDTA法進(jìn)行脛骨、中趾骨的鈣含量測定；采用鉬黃法進(jìn)行脛骨、中趾骨的磷含量測定；采用干法消化，脛骨、中趾骨試樣分解液微量元素銅、鐵、錳、鋅的測定用IRIS/AP13543000機(jī)器進(jìn)行測定。

1.4 資料處理與分析

所有試驗(yàn)資料經(jīng)Excel處理，采用SAS 8.2軟件統(tǒng)計(jì)處理，試驗(yàn)結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié) 果

2.1 氧化應(yīng)激參數(shù)檢測結(jié)果

由表1可知， T-AOC水平：無量山綠耳烏雞>普洱瓢雞>騰沖雪雞>三黃雞，差異極顯著(P<0.01)。MDA水平：三黃雞>騰沖雪雞>普洱瓢雞>無量山綠耳烏雞，差異顯著(0.01無量山綠耳烏雞>騰沖雪雞>三黃雞，差異極顯著(P<0.01)。GSH-px水平：普洱瓢雞>騰沖雪雞>無量山綠耳烏雞>三黃雞，差異不顯著(P>0.05)。

表1 不同雞種血清氧化應(yīng)激參數(shù)分析結(jié)果Table 1 The result of analysis on oxidative stress parameters of different serum

注：同行肩標(biāo)不同小寫字母者表示差異顯著(P<0.05)，相同字母或未標(biāo)字母者差異不顯著(P>0.05)。肩標(biāo)不同大寫字母者表示差異極顯著 (P<0.01)。

Note：Values with different superscripts within a row mean significant difference(P<0.05)，those with same superscripts or without superscripts mean insignificant difference(P>0.05)，those with different superscripts means extreme difference(P<0.01)．

2.2 不同雞種肌肉化學(xué)成分分析結(jié)果

表2表明，普洱瓢雞、騰沖雪雞和無量山綠耳雞胸肌、腿肌DM極顯著高于三黃雞(P<0.01)，而普洱瓢雞和無量山綠耳雞DM極顯著高于騰沖雪雞(P<0.1)。普洱瓢雞胸肌和腿肌CP均極顯著高于騰沖雪雞、無量山綠耳雞和三黃雞(P<0.01)，每種雞胸肌CP均極顯著高于腿肌(P<0.01)。三黃雞腿肌EE極顯著高于三種地方雞種(P<0.01)，騰沖雪雞腿肌EE極顯著低于瓢雞和綠耳雞(P<0.01)，所有雞種腿肌EE均極顯著高于胸肌(P<0.01)。

2.3 不同雞種肝臟Fe、Cu、Mn與Zn含量測定結(jié)果

三黃雞肝臟Fe和 Zn極顯著低于三種地方雞種(P<0.01)、而肝臟Cu和Mn極顯著或顯著高于三種地方雞種(P<0.01,P<0.05)，普洱瓢雞肝臟Fe和Zn極顯著高于騰沖雪雞和無量山綠耳烏雞(P<0.01)。

2.4 不同雞種脛骨礦物質(zhì)分析結(jié)果

三種地方雞種脛骨、中趾骨灰分、Ca、P、Fe、Cu、Mn、Zn均顯著或顯著高于三黃雞(P<0.01,P<0.05)，脛骨與中趾骨間差異不顯著(P>0.05)。

3 討 論

3.1 血清氧化應(yīng)激參數(shù)變化規(guī)律

超氧化物歧化酶(SOD)廣泛在各種生物體內(nèi)存在，是防御機(jī)體由于氧代謝接受電子不足形成的超氧自由基損害的主要防御性酶[4]。所以，超氧化物歧化酶含量越高，機(jī)體抗氧化能力越強(qiáng)谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)是細(xì)胞內(nèi)抗脂質(zhì)過氧化作用的酶性保護(hù)系統(tǒng)的主要成分之一，它能與維生素E協(xié)同地保護(hù)細(xì)胞使脂質(zhì)免受過氧化損傷[5]。正常動(dòng)物機(jī)體內(nèi)有比較完善的抗氧化系統(tǒng)，如谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)等，可以保護(hù)組織細(xì)胞不受氧化物和自由基的損傷[6]，故GSH-Px和SOD的活性能直接反映機(jī)體抗氧化功能的狀態(tài)。自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)，氧化終產(chǎn)物是丙二醛，能夠引起蛋白質(zhì)、核酸等生命大分子的交聯(lián)聚合，且具有細(xì)胞毒性[7]。因此，血液中丙二醛含量越高，其抗氧化能力越弱。T-AOC對機(jī)體酶和非酶系統(tǒng)抗氧化能力綜合評判具有重要意義[8]。本試驗(yàn)抗氧化應(yīng)激參數(shù)顯示：抗氧化能力T-AOC水平：無量山綠耳烏雞>普洱瓢雞>騰沖雪雞>三黃雞，差異極顯著(P<0.01)。丙二醛MDA水平：三黃雞>騰沖雪雞>普洱瓢雞>無量山綠耳烏雞，差異顯著(0.01無量山綠耳烏雞>騰沖雪雞>三黃雞，差異極顯著(P<0.01)。谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px水平：普洱瓢雞>騰沖雪雞>無量山綠耳烏雞>三黃雞，差異不顯著(P>0.05)。說明云南普洱瓢雞、騰沖雪雞、無量山綠耳烏雞的抗氧化能力比三黃雞的抗氧化能力強(qiáng)。

表2 不同雞種胸肌和腿肌化學(xué)成分分析結(jié)果(鮮樣基礎(chǔ))Table 2 The result of analysis on chemical composition in chest muscle and leg muscle of different breeds(fresh sample basis )

注：同列肩標(biāo)大寫字母不同者表示差異極顯著(P<0.01),同列肩標(biāo)小寫字母不同者表示差異顯著(P<0.05),*表示同雞種胸肌與腿肌差異顯著，(P<0.05),** 表示同雞種胸肌與腿肌差異極顯著，(P<0.01)。

Note：The different capital letter superscripts in the same row mean extreme difference (P<0.01)， those with different lowercase superscripts mean significant difference(P>0.05),* means significant difference between chest muscle and leg muscle of the same breed (P<0.05),** means extreme difference between chest muscle and leg muscle of the same breed(P<0.01).

表3 不同雞種肝臟Fe、Cu、Mn、Zn含量分析結(jié)果Table 3 The result of analysis on Fe,Cu,Mn and Zn content in the liver of different chicken

注：同行肩標(biāo)不同小寫字母者表示差異顯著(P<0.05)，相同字母或未標(biāo)字母者差異不顯著(P>0.05)，肩標(biāo)不同大寫字母者表示差異極顯著 (P<0.01)。下同。

Note：Values with different lowercase superscripts within a row mean significant difference(P<0.05)，those with same letter superscripts or without superscripts mean insignificant difference(P>0.05),those with different capital letter superscripts mean extreme difference(P<0.01)．The same below.

表4 不同雞種脛骨灰分、Ca、P、Fe、Cu、Mn和Zn含量分析結(jié)果(鮮樣基礎(chǔ))Table 4 The result of analysis on ash,Ca,P,Fe,Cu,Mn and Zn content inthe tibia of different chicken (Fresh-like basis)

表5 不同雞種中趾骨灰分、Ca、P、Fe、Cu、Mn和Zn含量分析結(jié)果(鮮樣基礎(chǔ))Table 5 The result of analysis on ash,Ca,P,Fe,Cu,Mn and Zn content in phalangesof different chicken (Fresh-like basis)

3.2 不同雞種胸肌與腿肌營養(yǎng)成分比較

粗蛋白(DM)是飼料、食品中一種蛋白質(zhì)含量的度量，是含氮化合物的總稱，其中即包括真蛋白又包括非蛋白含氮化合物[9]。干物質(zhì)(CP)是指有機(jī)體在60 ℃～90 ℃的恒溫下，充分干燥，余下有機(jī)物的重要，干物質(zhì)(CP)是衡量動(dòng)物有機(jī)物積累、營養(yǎng)成分多寡的一個(gè)重要指標(biāo)[10]。粗脂肪(EE)是飼料、動(dòng)物組織、動(dòng)物排泄物中脂溶性物質(zhì)的總稱[11]。結(jié)果表明，所有雞種的胸肌中的DM、CP含量均比腿肌高，所有雞種的胸肌中的EE含量均比腿肌低。結(jié)果證實(shí)，胸肌營養(yǎng)價(jià)值高，而腿肌口感更加細(xì)嫩的特點(diǎn)。本試驗(yàn)結(jié)果指出，普洱瓢雞、騰沖雪雞和無量山綠耳雞胸肌、腿肌DM極顯著高于三黃雞(P<0.01)，普洱瓢雞胸肌和腿肌CP均極顯著高于騰沖雪雞、無量山綠耳雞和三黃雞(P<0.01)，三黃雞腿肌EE極顯著高于三種地方雞種(P<0.01)，騰沖雪雞腿肌EE極顯著低于瓢雞和綠耳雞(P<0.01)。說明云南地方雞種肌肉的營養(yǎng)價(jià)值高于普通雞種三黃雞，胴體品質(zhì)優(yōu)良，值得進(jìn)一步研究。

3.3 不同雞種肝臟微量元素含量變化規(guī)律

肝臟是動(dòng)物機(jī)體重要的代謝器官，對機(jī)體微量元素的平衡起關(guān)鍵作用。肝臟是微量元素進(jìn)入體內(nèi)的第一站，微量元素的盈缺，能導(dǎo)致體內(nèi)元素不平衡，使得內(nèi)分泌系統(tǒng)紊亂，最終引起肝臟病變[12]。云南地方雞種產(chǎn)自云南特殊高原環(huán)境下，多采取自繁自養(yǎng)的飼喂方式，飼養(yǎng)周期長，飼養(yǎng)環(huán)境天然無污染[13]。試驗(yàn)結(jié)果表明，三黃雞肝臟Fe和 Zn極顯著低于三種地方雞種(P<0.01)，證明云南地方雞種的營養(yǎng)價(jià)值較培育雞種三黃雞高，抗病力強(qiáng)。對照雞種三黃雞經(jīng)過長期的人工培育之后形成，多為人工飼喂，而云南地方雞種多采取散養(yǎng)的飼喂方式，飼養(yǎng)環(huán)境相對簡單。試驗(yàn)結(jié)果顯示，三黃雞肝臟Cu和Mn的含量極顯著或顯著高于三種地方雞種(P<0.01,P<0.05)，我們推測可能因?yàn)轱暳咸砑觿┑木壒识谷S雞中的Cu、Mn含量較高。

3.4 不同雞種骨骼的礦化程度

三種地方雞種脛骨、中趾骨灰分、Ca、P、Fe、Cu、Mn、Zn均顯著或顯著高于三黃雞(P<0.01,P<0.05)，試驗(yàn)證明，云南地方雞種的礦物質(zhì)含量較三黃雞高，肉質(zhì)細(xì)嫩且營養(yǎng)價(jià)值豐富，是中國優(yōu)良地方雞種。脛骨是小腿雙骨之一，位于小腿的內(nèi)側(cè)，是小腿骨中主要的承重骨，畜禽的脛骨多需屠宰才能采取[14]。趾骨是腳趾上各塊骨的統(tǒng)稱，中趾骨即為趾骨的中節(jié)，不需屠宰也能采取[15]。試驗(yàn)結(jié)果證明，云南地方雞種脛骨與中趾骨間礦物質(zhì)含量差異不顯著(P>0.05)，中趾骨可代替脛骨作為高原地方雞種骨骼礦化程度的標(biāo)識(shí)，這樣一方面可以節(jié)約試驗(yàn)成本便于操作，一方面也可利于試驗(yàn)的持續(xù)進(jìn)行。

4 結(jié) 論

普洱瓢雞、騰沖雪雞與三黃雞的血清T-AOC、T-SOD和MDA氧化應(yīng)激參數(shù)存在明顯差異，云南地方特種雞的抗氧化能力優(yōu)于培育雞種三黃雞，普洱瓢雞抗氧化能力強(qiáng)于騰沖雪雞。云南地方雞種肌肉的營養(yǎng)成分含量高于三黃雞，且肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美，有利于高端雞肉開發(fā)。云南普洱瓢雞、騰沖雪雞骨骼礦化程度較好，中趾骨可替代脛骨作為高原地方雞種骨骼礦化程度研究的標(biāo)識(shí)之一。

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StudyonTissueNutrition,BoneMineralizationandtheOxidativeStressedParametersofSerumofThreeLocalChickenBreedsinYunnan

LI Yan-xuan，AN Qing-cong△，ZHANG Chun-yong，LI Mei-quan，CHEN Ke-lin，GUO Rong-fu*

(YunnanKeyLaboratoryofAnimalNutritionandFeed,YunnanAgriculturalUniversity，Kunming，Yunnan650201，China)

In this experiment,the tissue nutrients,the degree of bone mineralization and the oxidative stressed parameters of Puerpiao chicken,Tengchongxue chicken and Wuliangshan green-ear black bone chicken were compared through determining the oxidative stressed parameters of serum,compositions in pectoral muscle and leg muscle,the content of minerals in the liver,tibia and phalanges.The results showed that the T-AOC,T-SOD in serum of Sanhuang chicken were significantly lower than those of three local breeds (P<0.01),while MDA significantly higher than those of local breeds (P<0.05).Among the three local breeds,the T-AOC,T - SOD and GSH -Px of Piao chicken were the highest,and the MDA of green-ear black bone chicken was the lowest.DM in breast muscle and leg muscle of Puerpiao chicken,Tengchongxue chicken and Wuliangshanlver chicken were significantly higher than those of Sanhuang chicken (P<0.01),CP in breast muscle and leg muscle of Puerpiao chicken were significantly higher than other three breeds (P<0.01).EE in leg muscle of Sanhuang was remarkably higher than that of three local breeds (P<0.01).Fe and Zn in liver of Sanghuang chicken were remarkably lower than those of the three local breeds (P<0.01),while Cu and Mn in the liver were extremely or significantly higher than those of three local breeds(P<0.05).The ash,Ca,P,Fe,Cu,Mn and Zn in the tibia and phalanges of three local breeds were extremely or significantly higher than those of Sanghuang chicken(P<0.05).This experiment proves that there are obvious differences on T-AOC、T-SOD、GSH-Px and MDA of serum between the local breeds and Sanhuang chicken.And obvious difference exists among nutrients,mineral concents in Liver and bone.These results suggest that the bone of local chicken breeds has a better degree of mineralization,and the phalanges can be used as an identity for bone mineralization degree for plateau local breeds.Local breeds have strong antioxidant capacity,and further study on meat quality of local breeds needs to be conducted.

Puerpiao chicken；Tengchongxue chicken；Wuliangshan green-ear black bone chicken；antioxidation； degree of bone mineralization；meat quality

2013-05-20，

2013-10-08

云南校企科技合作項(xiàng)目：天然植物抗病功效組分萃取與產(chǎn)業(yè)化創(chuàng)新研發(fā)重大專項(xiàng)(KX140564)

李彥宣(1989-)，女，江西萍鄉(xiāng)人，碩士，主要從事單胃動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)研究。E-mail：17908028@qq.com △與第一作者同等貢獻(xiàn)。

*[通訊作者]郭榮富(1956-)，男，云南曲靖人，博士，教授，博士生導(dǎo)師，主要從事單胃動(dòng)物營養(yǎng)與資源利用。E-mail: rongfug@163.com

S811.6

A

1005-5228(2014)03-0027-05