南通地區(qū)過敏兒童特異性過敏原檢測結(jié)果分析及臨床意義

劉春霞,顧 猛,張 虹,杭 杲

(1.江蘇省南通瑞慈醫(yī)院 檢驗科,江蘇 南通,226010; 2.江蘇省南通瑞慈醫(yī)院兒童醫(yī)院,江蘇 南通,226010)

過敏反應(yīng)是指機(jī)體受到同種抗原再刺激后產(chǎn)生的免疫病理反應(yīng)，即超敏反應(yīng)或變態(tài)反應(yīng)，引起過敏反應(yīng)的抗原即為過敏原，過敏原大都是外源性的蛋白質(zhì)[1]。近年來隨著生活質(zhì)量的提高和居住環(huán)境的改變，蛋白質(zhì)與人類的關(guān)系越來越密切，尤其是兒童。為了解南通地區(qū)過敏兒童的過敏原種類，指導(dǎo)臨床有針對性的診治，從2011年9月作者對218例不同年齡的過敏兒童血清中特異性過敏原進(jìn)行檢測，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2011年9月—2013年5月南通瑞慈醫(yī)院兒童醫(yī)院門診就診的過敏患兒218例，包括哮喘、過敏性咳嗽、過敏性鼻炎、蕁麻疹、濕疹及過敏性胃腸炎等，病前2周均未使用過糖皮質(zhì)激素和免疫調(diào)節(jié)劑，均為城區(qū)居留兒童。其中男123例，女95例；年齡0.5～18歲，≤1歲者40例,>1～3歲48例,>3～6歲52例,>6～12歲46例，>12歲32例。按年齡分為嬰幼兒組(<3歲)，兒童組(>3～12歲)和少年組(>12歲)，靜脈采血3 mL,均予以吸入性過敏原和食入性過敏原測定，同時檢測血清中的總IgE。健康對照組28例，其中男16例，女12例，來自正常體檢人群

1.2 方法與材料

1.2.1 血清特異性過敏原檢測：采用德國歐蒙Medizische Labordianostika AG的吸入性及食入性過敏原特異性IgE抗體檢測試劑盒，以免疫印跡法檢測血清中過敏原特異性IgE抗體。過敏原檢測20種，吸入性過敏原10種，包括戶塵螨組合(屋塵螨、粉塵螨)、屋塵、貓毛、狗上皮、蟑螂、普通豚草、艾蒿、樹組合(柳樹、楊樹、榆樹)、真菌組合(點青霉、分枝孢霉、煙曲霉、交鏈孢霉)、葎草；食入性過敏原10種，包括雞蛋白、牛奶、花生、黃豆、牛肉、羊肉、海魚組合(鱈魚、龍蝦、扇貝)淡水魚組合(鮭魚、鱸魚、鯉魚)、蝦、蟹。檢測步驟按試劑說明書進(jìn)行?？侷gE抗體檢測采用美國Banckman公司的Access2全自動免疫發(fā)光儀，為全定量檢測。

1.2.2 皮膚點刺試驗：過敏原皮試液由德國默克公司提供用生理鹽水作陰性對照，組胺作陽性對照。過敏原包括花粉、懸鈴木、植物纖維、禾本科/谷類、樹木、肉類、蝦、水果、咖喱食品、雜草、花生、牛奶、雞蛋、鯉魚/鱈魚、真菌、屋塵螨/粉塵螨、動物毛、大豚草共20種。檢測步驟和方法按說明書進(jìn)行。

1.3 評價標(biāo)準(zhǔn)

特異性IgE抗體(SIgE)為定量檢測，其濃度進(jìn)行0～Ⅵ分級，0級為陰性，Ⅰ～Ⅵ級為陽性。SIgE(kU/L)分級: 0級<0.35,Ⅰ級為0.35～0.7,Ⅱ級為0.7～3.5,Ⅲ級為3.5～17.5,Ⅳ級為17.5～50,Ⅴ級為 50～100,Ⅵ級>100。檢測結(jié)果正常參考范圍為<0.35 kU/L(陰性)?？侷gE抗體檢測結(jié)果報告分100 kU/L、100～200 kU/L、>200 kU/L共3種，正常參考值范圍為<100 kU/L(陰性)。皮膚點刺15 min后觀察結(jié)果：皮膚呈現(xiàn)淡黃色皮丘，其周圍有紅斑，為陽性反應(yīng)，陽性對照組胺平均風(fēng)團(tuán)直徑為4～6 mm,判斷為3+,皮膚反應(yīng)強(qiáng)度大于組胺反應(yīng)為4+,與組胺反應(yīng)相似為3+,反應(yīng)強(qiáng)度較組胺反應(yīng)弱為2+或+,無反應(yīng)的為陰性

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件對上述結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，采用χ2檢驗、線性趨勢檢驗。以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)。

2 結(jié) 果

在218例過敏患兒中，血清SIgE檢測陽性者149例(68.5%),總IgE陽性189例(86.7%),過敏原SIgE陽性的標(biāo)本占總IgE陽性78.8%。吸入性過敏原陽性者114例(52.4%),食入性過敏原陽性者101例(46.3%),吸入性與食入性過敏原混合性過敏者51例(23.4%)。在不同年齡階段，患兒的過敏情況不盡相同，嬰幼兒組(<3歲)食物過敏者45例(51.1%),吸入性過敏原只有17例陽性(19.3%),二者有顯著性差異(P<0.01); 兒童組(>3～12歲)，吸入性過敏明顯增多57例(58.2%),而食入性過敏47例(47.9%),二者無顯著差異(P>0.05); 少年組(>12歲)，吸入性過敏16例(50%),而食入性過敏12例(37.5%),二者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 218例特異性過敏原陽性結(jié)果的年齡組分布[n(%)]

通過本試驗218例過敏患兒的特異性過敏原檢測發(fā)現(xiàn)，其過敏原譜分別是：食入性過敏原為雞蛋白、海魚組合、蟹、牛奶、淡水魚組合、蝦、黃豆、花生、牛肉、羊肉；吸入性過敏原為塵螨、屋塵、蟑螂、豚草、艾蒿、狗上皮、霉菌組合、樹組合、貓毛、葎草。見表2。

表2 218例血清中特異性過敏原檢測陽性結(jié)果[n(%)]

本試驗選擇了28例患兒，體內(nèi)點刺和體外血清過敏原檢測同時進(jìn)行，比較了幾種相同的過敏原的檢測結(jié)果，包括屋塵螨/粉塵螨、動物上皮 、豚草、樹、真菌、雞蛋、牛奶、花生、鱈魚、鯉魚、蝦等，發(fā)現(xiàn)28例患兒中皮膚點刺25例陽性，血清特異性過敏原檢測22例陽性；正常對照組28例，皮膚點刺出現(xiàn)5例陽性，血清檢查1例陽性。計算兩種方法的敏感性與特異性以及ROC曲線等診斷特性參數(shù)見表3和圖1，兩種方法的ROC曲線下面積(AUC)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

表3 28例皮膚點刺和血清特異性過敏原檢測結(jié)果分析

圖1 2種過敏原檢測方法的ROC曲線圖

3 討 論

過敏反應(yīng)性疾病嚴(yán)重危害著人類的健康，明確診斷、及時規(guī)范治療非常重要，特別是過敏原的檢測，對預(yù)防和指導(dǎo)治療具有重要價值[2]。目前總IgE的檢測、體內(nèi)試驗(指皮膚點刺試驗)和體外試驗(指 SIgE的測定 )在臨床實驗室較為常用[3]。血清總 IgE檢測常作為過敏反應(yīng)的一種過篩試驗，但因種族、寄生蟲感染等許多因素的影響，致使總 IgE水平波動范圍大，總IgE陽性與過敏反應(yīng)并不是完全相符合。本試驗218例過敏患兒中總IgE陽性的只有189例，陽性率86.7%,過敏與否主要取決于SIgE的存在，因此血清中特異性IgE檢測才是一種有效的過敏原檢測試驗。兒童對外界過敏原形成的過敏反應(yīng)，隨年齡增長而不同[4],本組218例過敏患者中，嬰幼兒組(<3歲)主要表現(xiàn)為食物過敏，占85例中的45例(51.1%),吸入性過敏原只有17例陽性(19.3%)，二者具有顯著差異(P<0.01)。這與嬰兒出生后即食入大量蛋白質(zhì)、胃腸道功能未健全、分泌型 IgA呈低水平及同時伴腸道通透性較大有關(guān)。隨著年齡的增長，兒童戶外活動增多，吸入性過敏明顯增多，而食入性過敏的比例有所下降[5],故兒童組(>3～12歲)吸入性過敏為57例(58.2%)，而食入性過敏47例(47.9%),二者無顯著差異(P>0.05); 少年組(>12歲)吸入性過敏16例(50%),而食入性過敏12例(37.5%),二者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。檢測中還發(fā)現(xiàn)有51例(23.4%)過敏患者存在著混合過敏，這些人群可能為過敏高危人群，即屬于過敏體質(zhì)患兒。本組過敏患兒血清特異性過敏原檢測顯示，嬰幼兒期以食物過敏為主，排名前3位的為雞蛋白、海魚組合與牛奶，與國外報道一致[5]；兒童期食入性過敏原雞蛋白、海魚組合、蟹與少年組的過敏食物蝦、蟹和海魚與國外報道的海河鮮類過敏在兒童期較為多見，也基本一致，也可能與本地區(qū)瀕江臨海的環(huán)境、本地的食物烹調(diào)方法及該類食物的攝入較多有關(guān)。吸入性過敏嬰幼兒、兒童期和少年組排在前3位的均為塵螨、屋塵和蟑螂[6],表明本地區(qū)這三種物質(zhì)在空氣中較為常見。本試驗218例過敏患兒中過敏原譜分別是：食入性過敏原為雞蛋白、海魚組合、蟹、牛奶、淡水魚組合、蝦、黃豆、花生、牛肉、羊肉；吸入性過敏原為塵螨、屋塵、蟑螂、豚草、艾蒿、狗上皮、真菌組合、樹組合、貓毛、葎草。本試驗還將28例患兒的體內(nèi)試驗(指皮膚點刺試驗)和體外試驗(指SIgE的測定)進(jìn)行了比較，分別對兩種方法的敏感性與特異性以及ROC曲線等診斷特性進(jìn)行了分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩種方法無顯著差異，但是因為皮膚試驗不容易控制，具有一定的危險性，目前有逐漸被體外試驗取代的趨勢[3]。過敏原具有明顯的地域性差異，地區(qū)氣候環(huán)境的差異以及人們的飲食生活習(xí)慣不同，不同地區(qū)表現(xiàn)出的過敏譜可能也不完全一致[7-8]。本研究采用的吸入性與食入性過敏原檢測試驗是否包括了本地區(qū)常見過敏原有待進(jìn)一步研究證實[9-10],必要時應(yīng)調(diào)整過篩試驗所包括過敏原的組成種類，以提高診斷準(zhǔn)確度[11-12]。南通地區(qū)位于長江之濱、黃海之鄰，水網(wǎng)密布，氣候潮濕，水產(chǎn)品在飲食結(jié)構(gòu)中所占比例較大，大量的水產(chǎn)大分子蛋白質(zhì)的攝入易造成機(jī)體的過敏反應(yīng)，兒童尤其如此[13-15]。通過對本地區(qū)臨床過敏兒童過敏原的檢測，了解其過敏因素及其敏感程度，預(yù)防過敏原誘發(fā)過敏反應(yīng)，針對過敏患兒進(jìn)行合理的特異性治療有著十分重要的意義[16]。

[1]劉恩梅,楊錫強(qiáng).過敏性疾病研究進(jìn)展與展望[J].實用兒科臨床雜志,2007,22(21): 1603.

[2]nal A,Ahintas D U,Yilmaz M,et al.Prevention of new sensitizations by specific immunotherapy in children with rhinitis and/or asthma monosensitized to house dust mite[J].J Investig Allergol Clin Immunol,2007,17: 85.

[3]葉世泰.變態(tài)反應(yīng)學(xué)[M].北京: 科學(xué)出版社,1998: 118.

[4]Holt P G,Sly P D.Prevention of adult asthma by early intervention during childhood: potential value of new generation immunomodulatory drugs[J].Thorax,2000,55(8): 700.

[5]Eggesbo M,Botten G,Halvorsen R,et al.The prevalence of CMA/CMPI in young children: the prevalence of allergy to egg: a population-based study in young children[J].Allergy,2001,56: 403.

[6]Halken S,Host A,Niklassen U,et al.Effect of mattress and pillow encasings on children with asthma and house dust mite allergy[J].J Allergy Clin Immunol,2003,111(1): 169.

[7]趙凱,徐紅梅,葉侃,等.蘇州城區(qū)支氣管哮喘兒童特異性過敏原檢測的意義[J].實用兒科臨床雜志,2007,22(4): 279.

[8]張玲,吳麗華,肖晗.廣東地區(qū)11728例過敏原檢測結(jié)果分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(6): 42.

[9]張衛(wèi)珍,趙海金,鄒飛,等.Slingshot-1L在哮喘急性發(fā)作期外周血嗜酸粒細(xì)胞中的定位與表達(dá)變化[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2011,31(6): 928.

[10]陳曉,張融,徐金梅,等.165例5歲以下反復(fù)喘息癥狀患兒的相關(guān)過敏原檢測及意義[J].實用臨床醫(yī)藥雜志,2013,17(19): 172.

[11]萬夢智,許飛.樹突狀細(xì)胞在支氣管哮喘中的研究進(jìn)展[J].中華肺部疾病雜志(電子版),2013,6(4): 46.

[12]陶愛軍,蔡偉,張秀偉.支氣管哮喘急性發(fā)作期血清降鈣素原水平的臨床意義[J].實用臨床醫(yī)藥雜志,2011,15(23): 123.

[13]黃可,沈瑛,劉翱.調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在慢性阻塞性肺疾病與支氣管哮喘中的作用機(jī)制研究[J].中華肺部疾病雜志(電子版),2013,6(4): 67.

[14]楊俊莉,朱錦妍,黃晨娟.兒童哮喘急性發(fā)作期血清C反應(yīng)蛋白水平的意義[J].實用臨床醫(yī)藥雜志,2013,17(16): 115.

[15]江瑾王月,郭述瑯.成人過敏性鼻炎哮喘綜合征的協(xié)同診治研究進(jìn)展[J].中華肺部疾病雜志(電子版),2012,5(6): 46.

[16]趙立宇.辛芩霧化劑對支氣管哮喘患者肺功能、EOS及IgE的影響[J].實用臨床醫(yī)藥雜志,2013,17(11): 25.