稀鹽溶液-孔雀綠法測(cè)定土壤速效磷的條件選擇

高雅麗，劉金山，官利蘭，張新明

(1 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 資源環(huán)境學(xué)院，廣東 廣州 510642； 2 國(guó)家林業(yè)局 中南林業(yè)調(diào)查規(guī)劃設(shè)計(jì)院，湖南 長(zhǎng)沙 410014)

稀鹽溶液-孔雀綠法測(cè)定土壤速效磷的條件選擇

高雅麗1?，劉金山1，2?，官利蘭1，張新明1

(1 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 資源環(huán)境學(xué)院，廣東 廣州 510642； 2 國(guó)家林業(yè)局 中南林業(yè)調(diào)查規(guī)劃設(shè)計(jì)院，湖南 長(zhǎng)沙 410014)

【目的】探討用孔雀綠比色法測(cè)定KCl稀鹽溶液浸提磷的適宜條件.【方法】利用標(biāo)準(zhǔn)溶液和不同利用方式的土樣，比較不同浸提和顯色條件對(duì)稀鹽溶液-孔雀綠法靈敏度和精密度的影響.【結(jié)果和結(jié)論】浸提適宜條件如下：土水比為1 g土∶20 mL水，震蕩時(shí)間為0.5 h，浸提劑(氯化鉀)濃度為0.02 mol·L-1；顯色體系中各溶質(zhì)適宜的最終濃度為：H2SO40.48 mo1·L-1、鉬酸銨0.024 mol·L-1、孔雀綠質(zhì)量濃度為0.06 g·L-1.締合物最大吸收波長(zhǎng)為620 nm，ρ(P)在0～0.2 mg·L-1范圍內(nèi)符合比耳定律，線性回歸方程為A=3.894 3C+0.001(R2=0.999**,A為D620 nm,C為磷質(zhì)量濃度)，ρ(P)檢出限為0.002 mg·L-1.測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度均較高，因此本法適宜于氯化鉀稀鹽溶液浸提液中磷的測(cè)定.

土壤； 速效磷； 稀鹽溶液； 孔雀綠比色法

了解土壤中速效磷的供應(yīng)狀況，對(duì)于施肥有著直接的指導(dǎo)意義.在土壤速效磷的測(cè)定方法中，化學(xué)方法是最普遍的，其中以Bray-I，Mehlich-I和Olsen法以及后來(lái)提出的Mehlich-3法最常用[1].在我國(guó)土壤養(yǎng)分研究工作中，各地常用0.5 mol·L-1NaHCO3提取中性及石灰性土壤有效磷，用0.25 mo1·L-1的HC1-0.03 mol·L-1的NH4F提取酸性土壤有效磷[2-3].

水或稀鹽溶液(如0.01 mol·L-1CaCl2)提取的磷具有與土壤溶液中的磷大致相當(dāng)?shù)奶攸c(diǎn)[4]，而且水或0.01 mol·L-1CaCl2溶液不僅可以提取磷，還可以提取其他元素如氮、鉀、鈉、鎂等.張新明等[5]曾使用0.02 mol·L-1KCl溶液進(jìn)行了磷酸鹽在水稻土中的等溫吸附試驗(yàn)，并結(jié)合盆栽試驗(yàn)確立了廣東省玄武巖母質(zhì)發(fā)育水稻土的“磷臨界平衡濃度”.那么能否用KCl稀鹽溶液作為土壤速效磷的通用提取方法值得研究.

溶液中磷的測(cè)定，一般都用鉬藍(lán)法.通常由于磷在土壤中具有很強(qiáng)的固定作用，鉬藍(lán)法對(duì)水或0.01 mol·L-1CaCl2的土壤提取液并不靈敏.孔雀綠法是一種比較簡(jiǎn)便的測(cè)定低濃度磷的方法，原理是磷鉬酸鹽在較低pH下與孔雀綠形成綠色的離子締合物，絡(luò)合物的結(jié)構(gòu)為(孔雀綠)3[PO4(Mo3O9)4].比色波長(zhǎng)為610或630 nm[6- 8]，檢出限為0.002 mg·L-1.它的靈敏度是鉬藍(lán)法的3倍多[9]，且測(cè)定需樣量小.因此0.01 mol·L-1CaCl2溶液等低提取能力提取劑的土壤提取液的測(cè)定適宜用孔雀綠法[7-9].

0.02 mol·L-1KCl溶液也是一種提取能力較弱的提取劑，適用于養(yǎng)分含量較高的土壤或者檢出限較低的分析.本研究采用KCl稀鹽溶液提取、孔雀綠比色法對(duì)不同利用方式土樣中的速效磷進(jìn)行測(cè)定，并在此基礎(chǔ)上對(duì)提取及測(cè)定條件進(jìn)行了選擇和優(yōu)化.

1 材料與方法

1.1 土樣采集

在3種利用方式的地塊上采集18個(gè)土樣.采樣深度0～20 cm，隨機(jī)采樣后將土壤混勻，用四分法取l kg左右，風(fēng)干后研磨并分別過(guò)2、1 mm篩，裝袋備用.土樣基礎(chǔ)性質(zhì)見(jiàn)表1.有機(jī)質(zhì)用重鉻酸鉀-硫酸消化法，速效鉀用中性醋酸銨-火焰光度法，堿解氮用堿解擴(kuò)散法，速效磷采用Bray I法, pH采用電位測(cè)定法.

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用Excel 2003及DPS 8.01統(tǒng)計(jì)軟件[10].

表1 供試土壤肥力指標(biāo)

1.2 主要儀器和試劑

往復(fù)振蕩機(jī)、UV-754分光光度計(jì).

試劑Ⅰ:4.0 mo1·L-1H2SO4、0.20 mo1·L-1鉬酸銨和0.5 g·L-1酒石酸銻鉀溶液.

濃H2SO4217 mL緩慢地倒入600 mL水中，攪拌，冷卻.17.66 g(NH4)6Mo7O24·4H2O和0.500 0 g KSbC4H4O7·1/2H2O溶解于約60 ℃的300 mL水中，冷卻.然后將H2SO4溶液緩緩倒入另一溶液中，稀釋定容至1 L，貯于聚乙烯試劑瓶中.

試劑Ⅱ：7.5 g·L-1聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA，乳化劑)和，1.0 g·L-1孔雀綠溶液.

7.5 g PVA溶解于約800 mL水中, 緩緩加熱并不停地?cái)嚢瑁敝寥咳芙?，冷卻.然后將1.000 0 g孔雀綠溶解于此溶液中，稀釋定容至1 L.

1.3 光密度測(cè)定方法

稱取過(guò)1 mm篩的風(fēng)干土樣2.500 0 g，置于250 mL振蕩瓶或三角瓶中，準(zhǔn)確加入50 mL 0.02 mo1·L-1KCl溶液，加塞，在(25±1) ℃下振蕩0.5 h后, 用無(wú)磷干濾紙過(guò)濾.

量取濾液8～40 mL置于50 mL容量瓶中，加入2滴20 g·L-1酒石酸銻鉀，然后加入“試劑Ⅰ”6.00 mL，搖勻，放置約10 min后，再加入“試劑Ⅱ”3.00 mL，搖勻后定容，30 min后測(cè)定620 nm處光密度(D620 nm).

2 結(jié)果與分析

2.1 分光光度法相關(guān)條件的探索

2.1.1 締合物吸收光譜 設(shè)置1組磷標(biāo)準(zhǔn)系列濃度，以試劑空白作為對(duì)照，在不同波長(zhǎng)下比色.

從表2可以看出，波長(zhǎng)在615～625 nm范圍內(nèi)，工作曲線的斜率較大，即相同質(zhì)量濃度磷溶液的孔雀綠-磷鉬雜多酸離子締合物在此波長(zhǎng)范圍內(nèi)光密度較大，且相關(guān)系數(shù)在0.999 2～0.999 4之間，差別很小.低于或高于此波長(zhǎng)范圍，工作曲線的相關(guān)系數(shù)均降低.因此，615～625 nm范圍內(nèi)的波長(zhǎng)均是適宜的.本文選擇620 nm為孔雀綠比色法的波長(zhǎng).

表2 不同波長(zhǎng)下工作曲線的參數(shù)Tab.2 Parameters of working curve with different waves

2.1.2 顯色條件的選擇 1)聚乙烯醇(PVA)用量的影響:在50 mL容量瓶中加入0.5 mL 質(zhì)量濃度為7.5 g·L-1的PVA溶液，顯色液微渾濁，而加入3.0～6.0 mL則吸光度恒定，且穩(wěn)定時(shí)間長(zhǎng).從圖1可以看出PVA不同用量對(duì)光密度無(wú)明顯影響，故本試驗(yàn)選擇加入的量為4.5 mL，其在顯色液中的最終質(zhì)量濃度為0.45 g·L-1.

圖1 PVA不同用量下的工作曲線Fig.1 Working curve with different doses of PVA

2)孔雀綠用量的影響：試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，隨著孔雀綠用量的增加，試劑空白相對(duì)于水的光密度均增加；孔雀綠相同用量條件下，締合物的光密度隨磷標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度增加呈線性變化(圖2).因孔雀綠是有色試劑，故加入的量應(yīng)適宜，且加入過(guò)程中應(yīng)保證操作的規(guī)范性，以減少試驗(yàn)誤差.在50 mL容量瓶中加1 g·L-1孔雀綠溶液3.00 mL,KCl 稀鹽溶液光密度的大小和穩(wěn)定性較理想.

2.1.3 提取劑用量對(duì)比色結(jié)果的影響 分別用0.02 mol·L-1的KCl溶液和蒸餾水配制0.25 mg·L-1的磷溶液，然后分別移取40 mL磷溶液到50 mL容量瓶中，按步驟加入試劑，顯色0.5 h后比色.經(jīng)多次試驗(yàn)表明，對(duì)于質(zhì)量濃度為0.2 mg·L-1的磷鉬酸締合物，加入KCl溶液和水二者的光密度的差值多在±0.01之內(nèi)，兩者的結(jié)果基本一致.因此在配制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)可以用蒸餾水代替0.02 mol·L-1的KCl溶液，在保證試驗(yàn)精確度的前提下簡(jiǎn)化試驗(yàn)步驟.

圖2 孔雀綠不同用量下的工作曲線Fig.2 Working curve with different doses of malachite green

2.1.4 工作曲線 配制標(biāo)準(zhǔn)曲線，發(fā)現(xiàn)ρ(P)在0～0.2 mg/L范圍內(nèi)符合比耳定律，回歸方程為A=3.8943C+0.001，相關(guān)系數(shù)(r)=0.999**(n=6,A為D620 nm，C為磷的質(zhì)量濃度).摩爾吸光系數(shù)為1.21×105L·mol-1·cm-1.

2.2 提取條件的確定

2.2.1 土水比 為了探討較為適宜的土水比，試驗(yàn)對(duì)比了土水比[m(土)/g∶V(水)/mL]分別為1∶20和1∶10 KCl (0.02 mol/L)溶液時(shí)的結(jié)果及二者的相關(guān)性.

對(duì)比土水比1∶20與1∶10時(shí)的結(jié)果(表3)可以發(fā)現(xiàn)，在2種條件下提取的速效磷量之間具有極顯著的相關(guān)性,但1∶20時(shí)提取的速效磷量明顯高于1∶10，故土水比1∶20為佳.

國(guó)內(nèi)外關(guān)于土壤速效養(yǎng)分測(cè)定的常規(guī)分析方法中，土水比一般為1∶5或1∶10，個(gè)別為1.0∶2.5或1∶20[2].對(duì)于大多數(shù)磷提取劑來(lái)說(shuō)，土水比和土壤酸堿性影響土壤磷提取效果,土壤pH高和較大的土水比均有可能降低磷的提取量[11-12].土水比影響CaCl2的提取效果，土水比減小，提取的P和K的數(shù)量增大，但不同土水比的提取數(shù)量間有較好的相關(guān)性[13-14].本試驗(yàn)用KCl溶液提取也得到了相似的結(jié)果.

表3 不同土水比條件下測(cè)定的速效磷含量

1) 土水比指m(土)/g∶V(水)/mL;表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤，n=4.

2.2.2 提取時(shí)間 分別在震蕩提取0.5、1.5、6、24、48、72 h后測(cè)定提取液的速效磷量，以尋找最佳振蕩時(shí)間.探討液相磷與固相磷處于動(dòng)態(tài)平衡所需的時(shí)間時(shí)，如果提取時(shí)間過(guò)短，少于平衡時(shí)間則速效磷不能完全被提取，使得結(jié)果小于實(shí)際情況；如果提取時(shí)間過(guò)長(zhǎng)則影響試驗(yàn)進(jìn)度，使得工作時(shí)間延長(zhǎng).

從表4可以看出，0.5 h后從各土壤中提取的速效磷基本上都達(dá)到了平衡，0.5 h后提取的磷量增加不顯著.有少量增加的原因可能是極少量緩效磷的釋放，而這部分增加值可能不屬于土壤速效磷的組成部分.

對(duì)不同振蕩時(shí)間測(cè)得的速效磷含量進(jìn)行回歸分析，可以看出0.5 h的振蕩時(shí)間與其他時(shí)間均有著很好的相關(guān)性，故選擇振蕩時(shí)間為0.5 h.

2.2.3 KCl溶液的濃度 分別用0.01、0.02和0.03 mol·L-1KCl溶液浸提3種土樣，發(fā)現(xiàn)當(dāng)KCl濃度在0.01～0.03 mol·L-1范圍內(nèi)時(shí)，從同一土樣中提取的速效磷量基本相等，故選擇濃度為0.02 mol·L-1的KCl溶液.磷的吸附解吸曲線中多選用0.01 mol·L-1CaCl2溶液，根據(jù)離子數(shù)大概等同原則，用0.02 mol·L-1KCl溶液替代0.01 mol·L-1CaCl2溶液，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)濃度為0.02 mol·L-1的KCl溶液適宜，這與張新明等[5]試驗(yàn)條件一致.

2.2.4 土壤粒度 任選幾個(gè)不同利用方式的土壤樣品，風(fēng)干磨碎，分別過(guò)2和1 mm篩，探討不同顆粒大小對(duì)提取結(jié)果的影響.表5中，2組數(shù)據(jù)t檢驗(yàn)的雙尾顯著性概率(P)= 0.091>0.05, 說(shuō)明2種粒徑下的速效磷值沒(méi)有顯著差異，且二者相關(guān)系數(shù)為1.0**(n=6)，說(shuō)明2組數(shù)據(jù)呈極顯著線性相關(guān)，故對(duì)于土樣速效磷的提取，土樣過(guò)2和1 mm篩均可.

表4 不同提取時(shí)間下測(cè)定的結(jié)果

1) 與0.5 h 平均值的相關(guān)系數(shù)，“**”表示在0.01水平極顯著相關(guān).

表5不同粒徑對(duì)速效磷的影響

Tab.5Influencesofdifferentparticlesizesonavailablephosphorusanalysis

粒徑/mm不同樣品編號(hào)的速效磷/(mg·kg-1)245618P相關(guān)系數(shù)1)22.7218.840.232.435.630.0911.0**12.9318.780.272.535.79

1)“**”表示在0.01水平顯著極相關(guān).

2.3 試驗(yàn)的精密度和準(zhǔn)確度及相關(guān)性分析

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)磷溶液的測(cè)定 按照孔雀綠比色方法的步驟，吸取磷標(biāo)準(zhǔn)溶液至25 mL容量瓶中，并按比例加入各種試劑進(jìn)行締合比色，溶液中最終的磷質(zhì)量濃度分別為0.02、0.06和0.10 mg·L-1，測(cè)定并計(jì)算6次平行測(cè)定的誤差大小，結(jié)果見(jiàn)表6.

表6標(biāo)準(zhǔn)磷溶液中磷的測(cè)定結(jié)果

Tab.6Measuredresultsofphosphorusinstandardsolution

樣品編號(hào)ρ(磷)/(mg·L-1)標(biāo)準(zhǔn)值測(cè)定值相對(duì)誤差/%10.020.02053.020.060.06081.730.100.10171.8

2.3.2 精密度 分別隨機(jī)選取各種利用方式的土樣各1個(gè)(編號(hào)分別為3、11和18)，然后對(duì)每個(gè)土樣進(jìn)行7次平行測(cè)定，3個(gè)土樣的精密度分別為0.733%、6.690%和1.550%.

2.3.3 速效磷測(cè)定的準(zhǔn)確度 向50 mL容量瓶分別加入質(zhì)量為1、3和5 μg磷，用去離子水定容，進(jìn)行回收率試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表7.由表7可見(jiàn)，加入不同量的標(biāo)準(zhǔn)磷，都得到較好的回收率，且基本無(wú)差異，通過(guò)對(duì)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(RSD)的計(jì)算可知，磷含量越低，RSD越大，但都在試驗(yàn)允許的誤差范圍內(nèi)，故該測(cè)定方法可靠.

表7不同添加量測(cè)定的磷回收率

Tab.7Therecoveryratesofdifferentaddingamountsofphosphorus

重復(fù)不同添加量測(cè)得磷量/μg磷回收率/%1μg3μg5μg1μg3μg5μg11.013.044.99101.0101.399.821.033.025.11103.0100.7102.231.043.075.04104.0102.3100.841.012.985.09101.099.3101.850.973.035.0897.0101.0101.6平均值1.013.035.06101.2100.9101.2

2.3.4 土壤提取液的磷回收率 吸取一定體積的土壤提取液(水稻土吸取20 mL,其他土吸取5 mL)于50 mL容量瓶中，然后加入3.00 μg磷,對(duì)各樣品的磷回收率測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表8.表8數(shù)據(jù)表明，加入土壤提取液后，磷的回收率在98%～101%之間，符合要求，說(shuō)明土壤溶液對(duì)速效磷的測(cè)定無(wú)影響，故該方法適合土壤速效磷的測(cè)定.

表8 土壤提取液對(duì)添加磷的回收率的影響Tab.8 Influences of soil extract on recovery rates of adding amounts phosphorus

2.3.5 與其他常用化學(xué)提取方法的相關(guān)性分析 由表9可見(jiàn)，各種測(cè)定方法之間均達(dá)極顯著相關(guān)，表明KCl稀鹽溶液提取易溶性磷的量與其他方法提取磷的量極顯著相關(guān)，因此可以使用KCl稀鹽溶液提取態(tài)磷表征土壤速效磷狀況，再根據(jù)土壤速效磷含量、土壤和植株之間的相互反應(yīng)制定磷素豐缺指標(biāo)，用于指導(dǎo)平衡施肥.

表9幾種提取方法有效磷之間的相關(guān)性1)

Tab.9Correlationshipbetweenavailablephosphorusconcentrationswithdifferentextractionmethods

提取方法OlsenBray-ⅠMehlich-3KCl稀鹽溶液Olsen1Bray-Ⅰ0.9869**1Mehlich-30.9835**0.9950**1KCl稀鹽溶液0.9433**0.9390**0.9210**1

1) “**”表示在0.01水平極顯著相關(guān).

3 討論與結(jié)論

孔雀綠法與傳統(tǒng)的鉬藍(lán)法相比，測(cè)定結(jié)果無(wú)明顯差異，但靈敏度明顯提高，檢測(cè)限降低.研究結(jié)果表明，磷鉬雜多酸-孔雀綠顯色體系的最大吸收波長(zhǎng)為620 nm，測(cè)定時(shí)選擇在615～630 nm之間均可，摩爾吸光系數(shù)為1.21×105L·mol-1·cm-1，ρ(P)在0～0.2 mg/L范圍內(nèi)符合比耳定律，線性回歸方程為A=3.894 3C+0.001(C為溶液中磷質(zhì)量濃度，A為620 nm處締合物的光密度)，相關(guān)性良好(r=0.999**).

聚乙烯醇存在的條件下，孔雀綠-磷鉬雜多酸離子締合物最大吸收峰位于635、645及590 nm處，這可能與比色液不同酸度及試劑的生產(chǎn)廠家不同有關(guān)，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)波長(zhǎng)在610～630 nm之間光密度差異不顯著，因此波長(zhǎng)在此范圍均可.

本試驗(yàn)所得摩爾吸光系數(shù)比其他報(bào)道(8.5×104L·mol-1·cm-1)[15]偏大，可能是孔雀綠用量的差異所致.在實(shí)際測(cè)定中由于個(gè)人習(xí)慣的差異，所加試劑也會(huì)稍有不同，因此需自行配制標(biāo)準(zhǔn)曲線而不能套用上述回歸方程和摩爾吸光系數(shù).

顯色液中各溶質(zhì)的最終濃度為：0.48 mol·L-1H2SO4、0.024 mol·L-1鉬酸銨，0.06 g·L-1酒石酸銻鉀，乳化劑為0.45 g·L-1PVA，孔雀綠為0.06 g·L-1.由于加入試劑較多，在不影響試驗(yàn)結(jié)果的前提下為了方便操作，可用4.0 mol·L-1H2SO4、0.20 mol·L-1鉬酸銨，0.05 g·L-1酒石酸銻鉀配制試劑 Ⅰ，用7.5 g·L-1PVA和1.0 g·L-1孔雀綠配制試劑Ⅱ.KCl溶液和水溶液比色結(jié)果基本一致.因此在配制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)可以用蒸餾水代替0.02 mol·L-1KCl溶液，在保證試驗(yàn)精確度的前提下簡(jiǎn)化試驗(yàn)步驟.

聚乙烯醇用量對(duì)顯色反應(yīng)的影響：聚乙烯醇保護(hù)膠存在下，堿性染料孔雀綠與磷鉬酸形成穩(wěn)定的締合物.聚乙烯醇對(duì)光密度無(wú)顯著影響，但是由于締合物具有疏水性，易凝聚沉淀致使光密度不穩(wěn)定，故加入適量聚乙烯醇從而起到促溶增穩(wěn)作用. 聚乙烯醇可使處于高黏度溶劑中的締合物上苯環(huán)的弛豫過(guò)程受阻，從而使溶液顏色不容易褪去[16].

孔雀綠用量對(duì)顯色反應(yīng)的影響：在磷鉬二元雜多酸中引入具有強(qiáng)共軛效應(yīng)的堿性染料大分子形成離子締合物，可使經(jīng)典的“鉬黃”或“鉬藍(lán)”光度法靈敏度大為改觀[17].加入孔雀綠后光密度明顯增加，該方法的靈敏度是鉬藍(lán)法的3倍多[8].但是由于孔雀綠本身是有色溶劑，加入孔雀綠過(guò)多會(huì)導(dǎo)致空白光密度陡增，故加入的量應(yīng)適宜.

提取劑用量對(duì)顯色反應(yīng)的影響:一般而言，配制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)也應(yīng)加入相應(yīng)的提取劑以與土壤提取液保持一致，消除由于提取劑影響產(chǎn)生的誤差.但經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)KCl溶液和水溶液比色結(jié)果基本一致，因此在配制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)可以用蒸餾水代替0.02 mol/L的KCl溶液，在保證試驗(yàn)精確度的前提下簡(jiǎn)化試驗(yàn)步驟.

在土水比1∶20、振蕩時(shí)間為0.5 h、 提取劑KCl的濃度為0.02 mol/L的提取條件下，KCl溶液提取土壤速效磷的準(zhǔn)確度和精密度都較高.提取結(jié)果與常規(guī)方法相關(guān)性顯著.本方法相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.0%～2.0%(n=6)，磷的回收率在97.0%～104%之間，土壤提取液的磷回收率在97.0%～102.3%之間，磷檢出限為0.002 mg/L.其準(zhǔn)確度和精密度均較高，因此是一種方便易行、準(zhǔn)確可靠的分析方法，適合KCl溶液提取磷的測(cè)定，即適合稀鹽溶液或水樣中微量磷的分析[6].且在配制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)可以用蒸餾水代替0.02 mol/L的KCl溶液.

需要注意的是孔雀綠具有高毒、高殘留、致癌、致畸、致突變等副作用，在人體殘留時(shí)間長(zhǎng)，對(duì)人體的危害是積蓄式的，應(yīng)用時(shí)應(yīng)加以防護(hù)，即使用該方法需戴上橡膠手套，妥善回收廢液并交有毒廢液回收站處理.

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【責(zé)任編輯周志紅】

Selectionofconditionsfordeterminingsoilavailablephosphorubydilutesaltsolution-malachitegreenmethod

GAO Yali1?, LIU Jinshan1,2?, GUAN Lilan1, ZHANG Xinming1

(1 College of Natural Resources and Environment, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China；2 Central South Forest Inventory and Planning Institute of State Forestry Administration; Changsha 410014, China)

【Objective】The method of available phosphorus characterized by phosphorus extracted in KCl dilute-salt solution was studied. 【Method】 By using standard solution and soil samples from different land use patterns, influences of different conditions during extracting and color-developing stages on the precision and accurancy of dilute-salt solution-malachite green method were studied. 【Result and conclusion】 The optimum conditions for extraction were as follows:1 g soil∶20 mL water for soil-water ratio, 0.5 h for oscillation, and 0.02 mol·L-1for concertration of KCl extracting solution; The optimum final concentrations of reagents for the color-developing system were as follows: H2SO40.48 mol·L-1，(NH4)6Mo7O24·4H2O 0.024 mol·L-1, malachite green 0.06 g·L-1. The association complex had a maximum absorption wavelength at 620 nm，and Beer’s law was obeyed in the P range of 0～0.2 mg·L-1with the linear regression equation beingA=3.894 3C+0.001(R2=0.999**)and P detection limit being 0.002 mg·L-1，and the method had high accurancy and precision as well. Thus the method is appropriate to determine phosphorus amount in KCl extracting solution.

soil; available phosphoru; dilute salt solution; malachite green spectrophotometry

2013- 02- 21優(yōu)先出版時(shí)間2014- 01- 06

優(yōu)先出版網(wǎng)址：http:∥www.cnki.net/kcms/detail/44.1110.S.20140106.1550.002.html

高雅麗(1984—)，女，碩士, E-mail: gaoyali2008@163.com；劉金山(1986—)，男，碩士, E-mail: xiaoshanzi00@126.com；?：對(duì)本文貢獻(xiàn)相同；通信作者：張新明(1965—)，男，副教授，博士，E-mail：xmzhang@scau.edu.cn

廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2012A020100004，2010B020310006)

高雅麗，劉金山，官利蘭，等.稀鹽溶液-孔雀綠法測(cè)定土壤速效磷的條件選擇[J].華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2014,35(2):40- 46.

S151.9

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1001- 411X(2014)02- 0040- 07