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    一種重組禽流感病毒疫苗應(yīng)用試驗報告

    2014-08-30 18:11:13郭耀明
    南方農(nóng)業(yè)·下旬 2014年6期
    關(guān)鍵詞:免疫禽流感疫苗

    郭耀明

    摘 要 由于禽流感毒株的不斷變異,為了有效防控禽流感疫情的發(fā)生,農(nóng)業(yè)部推廣使用重組禽流感病毒H 5亞型二價滅活(Re-4+Re-6)疫苗,為了保證該疫苗能夠安全有效的使用,福建省福安市溪潭鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站進行了小范圍應(yīng)用試驗。

    關(guān)鍵詞 高致病性;禽流感;疫苗;免疫;應(yīng)用試驗

    中圖分類號:S831.7 文獻標(biāo)志碼:A 文章編號:

    高致病性禽流感是一種人畜共患病,在特定環(huán)境下,可感染人,當(dāng)人感染高致病性禽流感后,死亡率較高,并且嚴(yán)重危害公共安全衛(wèi)生,去年農(nóng)業(yè)部推出重組禽流感病毒H 5亞型二價滅活(Re-4+Re-6)疫苗,為了保證新疫苗的安全使用,動物疫病預(yù)防控制中心在新疫苗大批使用前先做小范圍試驗。

    1 試驗材料

    1.1 試驗動物

    挑選一個1 000只蛋雞養(yǎng)殖戶進行免疫。

    1.2 實驗疫苗

    農(nóng)業(yè)部發(fā)放的重組禽流感病毒H 5亞型二價滅活 (Re-4+Re-6)疫苗(生產(chǎn)廠家:青島易邦生物工程有限公司批準(zhǔn)文號:獸藥生字(2012)150132192)。

    2 免疫步驟

    2.1 免疫前準(zhǔn)備

    在實驗前,將所用注射器采用高壓鍋滅菌的方法進行消毒,(121℃,30min),準(zhǔn)備一次用針頭共計1 100只,75%酒精棉球,免疫時使用一次性手套、防護帽子和腳套。進入養(yǎng)殖場的車輛要進行徹底消毒。

    2.2 免疫過程

    2012年6月19日夜晚,在雞群都上架且雞群安靜的情況下,對雞群免疫注射了重組禽流感病毒H 5亞型二價滅活(Re-4+Re-6) 疫苗,按照免疫注射規(guī)程進行免疫注射,注射免疫完成后觀察雞群有無異常情況。

    2.3 免疫時注意事項

    ①禽流感病毒疫苗感染雞或健康狀況異常的雞群切忌使用。

    ②在保存疫苗的過程中嚴(yán)禁凍結(jié)疫苗。

    ③疫苗若出現(xiàn)破損、異物或破乳等異?,F(xiàn)象切忌使用。

    ④使用前應(yīng)將疫苗恢復(fù)至常溫,使用時充分搖勻。

    3 免疫抗體監(jiān)測

    3.1 3-1采樣工作

    免疫完成21 d后,按照10%的比例隨機抽取100只雞進行翅靜脈采樣,準(zhǔn)備好無菌一次性試管和2 mL無菌注射器,按照北京市動物采血規(guī)程進行采樣,在采樣過程中,將血液擺放成一個斜邊,這樣能有利于血清的析出,采樣完成后要將采血的試管用酒精燈進行封口,防止在運輸途中出現(xiàn)灑漏現(xiàn)象,影響抗體檢測的準(zhǔn)確性。

    3.2 3-2抗體檢測

    3.2.1 3-2-1抗體檢測的試驗地點

    將采回的血樣送到動物疫病預(yù)防控制中心化驗室。

    3.2.2 3-2-2抗體檢測試劑

    試劑來源為:為中國農(nóng)科院哈爾濱獸醫(yī)研究所生產(chǎn)。AI-H5N1 Re-4批號是201001;陽性血清批號200601;AI-H5N1 Re-6批號是2012001;陽性血清批號2012001;稀釋液由有資質(zhì)的生產(chǎn)場家提供,并按試驗要求調(diào)好pH值。

    3.3 3-3-3抗體檢測的方法

    血凝試驗和血凝抑制試驗;嚴(yán)格按照國標(biāo)方法(GB/T18936-2003)進行檢測。

    4 免疫抗體判定

    ①禽流感抗體檢測水平,血凝抑制( HI)抗體水平大于或者等于4log2時,判定為免疫效力良好。

    ②血凝抑制(HI)抗體水平大于或者等于4log2的血樣占被檢測血樣數(shù)量≥70%,為雞群群體免疫合格。3-3-4抗體檢測結(jié)果如下。

    表1 抗體結(jié)果分析(表1)

    類型 ㏒1 ㏒2 ㏒3 ㏒4 ㏒5 ㏒6 ㏒7 ㏒8 ㏒9 ≥㏒10 合格率%

    AI-H5N1 Re-4 1 7 15 14 10 3 100

    AI-H5N1 Re-4 5 18 20 6 1 100

    5 實驗結(jié)論

    ①免疫重組禽流感病毒H 5亞型二價滅活(Re-4+Re-6)疫苗后,試驗雞雞群精神狀態(tài)良好、采食、飲水正常、產(chǎn)蛋率等指標(biāo)未發(fā)生明顯的變化,且雞群無死亡現(xiàn)象。

    ②通過此次試驗和免疫抗體的監(jiān)測可以看出,重組禽流感病毒H 5亞型二價滅活(Re-4+Re-6)疫苗對禽流感Re-4、Re-6毒株有保護作用,免疫合格率可以達到100%。

    (責(zé)任編輯:趙中正)

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