基于開發(fā)產(chǎn)業(yè)化的蕎麥黃酮復(fù)合物對細菌性陰道炎療效評估

姜妍 高福佳　金玲　王妍　韓淑英

摘 要：以混合細菌感染建立大鼠細菌性陰道炎模型，以高、中、低劑量蕎麥黃酮復(fù)合物為受試藥物，以潔爾陰洗液作為對照，選擇大鼠一般狀態(tài)（體重）和陰道局部外觀、陰道分泌物、細菌及壞死的脫落細胞鏡檢及陰道組織的病理變化作為觀察指標。結(jié)果顯示：蕎麥黃酮復(fù)合物能有效地改善外陰腫脹和分泌物增多的現(xiàn)象，明顯抑制大鼠陰道組織病理學損傷，與模型組比較病理積分有明顯差異。表明蕎麥黃酮復(fù)合物對大鼠細菌性陰道炎有較好療效，具有開發(fā)生產(chǎn)的潛力。

關(guān)鍵詞：蕎麥黃酮復(fù)合物；金黃色葡萄球菌；綠膿桿菌；大腸桿菌；陰道炎

一、材料

SPF級SD大鼠，♀，無孕。蕎麥黃酮復(fù)合物：采用正交試驗法以水加分離劑（殼聚糖）提取蕎麥黃酮復(fù)合物（成熟技術(shù)），配伍葛根、天花粉、麥冬、玄參和麻仁的水提物制成；陽性對照藥潔爾陰洗液。金黃葡萄球菌，綠膿桿菌，大腸桿菌臨床新分離菌株，由開灤醫(yī)院檢驗科提供。

二、試驗方法

（一）模型制備。將3種菌株復(fù)蘇、傳代，用無菌營養(yǎng)肉湯將每種菌配制成各自濃度為1.0x109個/mL的菌液，之后將三種菌液按1：1：1的比例混合成感染菌液。用微量加樣器緩慢插入大鼠陰道約1 cm～1.5 cm，注入混合細菌液為50ul，1次/d，連續(xù)6天。模型鑒定成功后，成摸大鼠隨機分組。

（二）分組與給藥。雌性大鼠隨機分為正常對照組、模型組、陽性藥物潔爾陰洗液組以及蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量組（1.35g/kg/d）、中劑量組（0.27g/kg/d）、低劑量組（0.135g/kg/d），共6組n=12。除正常對照組和模型組大鼠每天陰道灌注0.5ml/100g生理鹽水， 其余各給藥組每天陰道灌注相應(yīng)藥物1次， 0.5ml/100g，連續(xù)7d。

（三）試驗觀察指標。（1） 一般狀態(tài)。試驗期間動態(tài)觀察各組大鼠精神狀態(tài)、活動、毛色、飲食、飲水、體重變化及大小便等有無改變。（2）外陰及陰道分泌物觀察。于給藥第0、5、8天觀察各組大鼠外陰紅腫及陰道分泌物情況。（3） 陰道灌洗液檢測。（a）鏡下觀察活動細菌量：各組大鼠均于給藥第0、5、8天用50ul

PBS灌洗陰道，置灌洗液于載玻片，即刻于40倍倒置顯微鏡下觀察活動細菌量。（b）鏡檢白細胞及陰道脫落細胞：各組大鼠均于給藥0、5、8天取PBS陰道灌洗液于載玻片上，40倍顯微鏡下鏡檢白細胞及陰道脫落上皮細胞。（c）G染色鏡檢細菌：分別于給藥0、5、8天取PBS陰道灌洗液涂片革蘭氏染色鏡檢。（4）陰道組織病理學檢查。于給藥8天陰道灌洗后，脫臼處死大鼠，隨機取6只大鼠陰道組織及其周圍組織作常規(guī)石蠟包埋，HE染色，鏡下觀察病理變化。

（四）統(tǒng)計分析方法。采用SPSS16.00統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以x±s表示。統(tǒng)計結(jié)果分別采用秩和檢驗和Ridit檢驗進行處理。

三、結(jié)果

（一）各組大鼠一般狀態(tài)。各組大鼠精神狀態(tài)、活動、毛色、飲食、飲水、體重變化及大小便均未見明顯改變，各組間無明顯差異。

（二）大鼠外陰肉眼觀察。正常對照組大鼠陰道外觀無充

血、紅腫，無膿性分泌物；模型對照組大鼠接種細菌第3天開始見陰道外觀充血、紅腫，隨時間逐漸加重，并有大量膿性分泌物。各治療組隨著給藥天數(shù)增加外陰紅腫明顯消失，分泌物明顯減少，給藥第8天多數(shù)大鼠陰道外觀于正常對照組大鼠相近。

（三）各組大鼠陰道灌洗液直接鏡檢混合菌量。給藥后第5、8天各組大鼠陰道灌洗液鏡檢。顯示：蕎麥黃酮復(fù)合物隨著劑量的增加及藥物應(yīng)用的時間延長，細菌檢出量逐漸減少，細菌轉(zhuǎn)陰率增加，高劑量組作用更明顯，與陽性對照藥潔爾陰相近；而模型對照組組無轉(zhuǎn)陰。

（四）各組大鼠陰道灌洗液G染色鏡檢細菌量。給藥后第

5、8天各組大鼠陰道灌洗液涂片G染色鏡檢細菌。表明：蕎麥黃酮復(fù)合物隨著劑量的增加及藥物應(yīng)用的時間延長，細菌檢出量逐漸減少，同時細菌轉(zhuǎn)陰率增加，高劑量組作用更明顯，與陽性對照藥潔爾陰相近；而模型對照組無轉(zhuǎn)陰。

（五）陰道灌洗液脫落上皮細胞檢查結(jié)果。給藥后第5、8天各組大鼠陰道灌洗液脫落上皮細胞直接鏡檢。結(jié)果：蕎麥黃酮復(fù)合物隨著劑量和應(yīng)用時間的增加，脫落上皮細胞檢出率逐漸減少，高劑量作用更明顯，與潔爾陰相近。

（六）陰道組織病理檢查結(jié)果。模型對照組大鼠病理組織學觀察為中度和重度充血、水腫，有大量炎細胞浸潤。蕎麥黃酮復(fù)合物高劑量組大鼠病理組織學觀察為輕度充血、水腫，少量炎細胞浸潤，其治療效果與陽性對照藥物組潔爾陰洗液相近。

結(jié)論：蕎麥黃酮復(fù)合物對混合細菌感染所致大鼠陰道炎有一定的療效，中、高劑量作用與陽性對照藥物潔爾陰治療效果相近。

蕎麥花葉總黃酮是經(jīng)過水加分離劑提取的蕎麥黃酮復(fù)合物的主要藥用成分，其來源于內(nèi)蒙古庫倫旗無果的霜凍后蕎麥花、葉，來源豐富，經(jīng)濟實惠，提取工藝簡單成熟，適合工業(yè)化生產(chǎn)，就有巨大的開發(fā)產(chǎn)業(yè)化的價值。

參考文獻：

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