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    FISH檢測(cè)糾正核型分析18—三體誤報(bào)1例

    2014-08-25 03:41:38李會(huì)平
    關(guān)鍵詞:著絲粒疾病診斷核型

    李會(huì)平

    (邢臺(tái)市人民醫(yī)院 檢驗(yàn)二科,河北 邢臺(tái)054001)

    1 臨床資料

    患兒男,因出生后呼吸稍促2.5 h入院?;純合档诙サ谝划a(chǎn),足月兒,無(wú)誘因自然分娩,出生體重2 350 g。入院時(shí)查體:頭頂部突出,前囟平坦,張力不高,口周無(wú)發(fā)青,口唇無(wú)發(fā)紺,高顎弓,無(wú)鼻翼,耳位低,頸部粗短,吸氣性三凹征弱陽(yáng)性,雙手通貫掌,雙手緊握,拇指內(nèi)收,中指壓在食指上,足趾背曲,四肢肌張力低,原始反應(yīng)弱。

    2 外周血染色體分析

    無(wú)菌抽取患兒外周血常規(guī)進(jìn)行G顯帶染色體核型分析,發(fā)現(xiàn)一衍生染色體,疑似18號(hào)衍生染色體der(18)(Y;18)(q11;q23),核型暫定為46,X,+18,der(18)(Y;18)(q11;q23)。具體核型如圖1。為查找該衍生染色體來(lái)源,建議患兒父母做染色體核型分析,父母雙方均拒絕檢測(cè)。為此對(duì)在染色體核型分析中留取的細(xì)胞懸液進(jìn)行分子學(xué)水平18、X、Y染色體熒光原位雜交(FISH)檢測(cè)。檢測(cè)試劑采用北京金菩嘉醫(yī)療科技有限公司試劑盒,18號(hào)、X、Y染色體相應(yīng)標(biāo)記顏色為藍(lán)色、綠色、紅色,具體探針標(biāo)記位置為:18號(hào)染色體(18p11.1-q11.1),X染色體(Xp11.1-q11.1),Y染色體(Yp11.1-q11.1)。FISH檢測(cè)結(jié)果如圖2。FISH結(jié)果顯示一個(gè)紅信號(hào)和一個(gè)綠色信號(hào)及兩個(gè)藍(lán)色信號(hào),這三個(gè)不同顏色的信號(hào)分別是一個(gè)帶有著絲粒的Y染色體和X染色體及兩個(gè)均帶有著絲粒的18號(hào)染色體,說(shuō)明該患兒染色體核型分析圖中的衍生染色體是Y染色體而不是18號(hào)染色體。按照原暫定核型46,X,+18,der(18)(Y;18)(q11;q23),F(xiàn)ISH結(jié)果應(yīng)顯示三個(gè)藍(lán)色信號(hào)(即三個(gè)均含有著絲粒的18號(hào)染色體)和一個(gè)藍(lán)色信號(hào),說(shuō)明我們所暫定的染色體核型分析是錯(cuò)誤的,具體核型應(yīng)該是46,XY,add(Y)(q12),即兩條正常的18號(hào)染色體、一條正常X染色體和一條未知來(lái)源附加物的Y染色體。

    圖1(a) 圖1(b)

    3 討論

    18—三體綜合征是僅次于先天愚型的一種常見染色體三體綜合征,主要臨床表現(xiàn)為多發(fā)畸形,如早產(chǎn),過(guò)期產(chǎn),出生體重低,小于胎齡兒,頭顱小,眼裂小,耳位低,小下頜,顎弓高,胸廓畸形,先天性心臟病以及手足異常等,通常表現(xiàn)為手指緊握,拇指壓于食指,無(wú)名指和小指壓于中指,或者食指疊壓于中指上,小指壓于無(wú)名指上,患兒大多于生后數(shù)周死亡[1]。該患兒具有典型的18—三體臨床特征,并且其染色體核型中未知來(lái)源附加物的Y染色體酷似18號(hào)染色體q23位置附加外來(lái)物質(zhì),造成核型暫定為18三體的錯(cuò)誤核型。后經(jīng)分子學(xué)水平FISH檢測(cè)后證實(shí)原暫定核型錯(cuò)誤,說(shuō)明傳統(tǒng)的細(xì)胞遺傳學(xué)水平核型分析技術(shù)也有一定的瑕疵,并不能百分之百確認(rèn),對(duì)于復(fù)雜的、難于確認(rèn)的染色體需和分子學(xué)水平的FISH檢測(cè)技術(shù)相互結(jié)合才能互補(bǔ)優(yōu)缺、完成對(duì)染色體核型的準(zhǔn)確分析。

    染色體核型分析是傳統(tǒng)的染色體疾病診斷技術(shù),既可檢測(cè)染色體數(shù)目異常,也可檢測(cè)染色體結(jié)構(gòu)異常,是臨床篩查染色體疾病的傳統(tǒng)有效方法。然而因其受到細(xì)胞培養(yǎng)周期的限制,不利于快速診斷,且操作技術(shù)要求高,影響試驗(yàn)因素多,有些染色體重排由于涉及的片斷太小或具有相似的帶型,一些微畸變、微缺失往往在常規(guī)染色體核型分析技術(shù)中不能夠檢出,造成診斷上的誤差。染色體熒光原位雜交(FISH)技術(shù)是近年發(fā)展的針對(duì)特定染色體進(jìn)行數(shù)目結(jié)構(gòu)異常診斷的一種新方法,用于染色體疾病診斷具有快速,特異,定位準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn),該技術(shù)能識(shí)別微小染色體易位、缺失,確定附加染色體、標(biāo)記染色體、衍生染色體的組成和來(lái)源[2-3],是常規(guī)染色體核型分析的有利補(bǔ)充。FISH技術(shù)用于染色體疾病診斷也有一定的局限性,因?yàn)樗鼘?duì)診斷染色體疾病的可靠性在很大程度上依賴于探針的特異性,受特異性探針的制約僅能提供有限的染色體信息,即用一種探針只能檢測(cè)一種異常,不利于常規(guī)檢測(cè)。對(duì)懷疑存在多種異常染色體需采用多個(gè)探針進(jìn)行檢測(cè),造成成本增加,另外,F(xiàn)ISH對(duì)相互易位等染色體結(jié)構(gòu)異常檢出有一定困難,這是由于斷裂點(diǎn)的不可預(yù)見性很難制備適宜的探針,再次,目前用于染色體異常檢測(cè)的商品化FISH探針多數(shù)屬于著絲粒探針,該類探針不能對(duì)染色體結(jié)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)[4],易造成染色體結(jié)構(gòu)異常漏診。

    該患者染色體核型分析暫定核型屬于誤報(bào),經(jīng)FISH糾正仍不能確定附加物質(zhì)來(lái)源,是由于我實(shí)驗(yàn)室FISH探針針對(duì)點(diǎn)位的局限性,僅憑一兩組探針無(wú)法完成對(duì)該Y染色體附加物的確認(rèn),該患者Y染色體上的附加物質(zhì)來(lái)源進(jìn)一步確認(rèn)需對(duì)該患兒父母進(jìn)行染色體核型分析。

    總之,對(duì)于染色體核型分析復(fù)雜的,難于確定的染色體,應(yīng)選擇FISH進(jìn)一步檢測(cè),可以防止錯(cuò)報(bào)、漏報(bào)。二者有機(jī)結(jié)合將大大提高染色體疾病診斷的準(zhǔn)確性及誤診率,為臨床提供更加準(zhǔn)確可靠的診斷依據(jù)。

    參考文獻(xiàn):

    [1]張美和.檢驗(yàn)與臨床診斷兒科學(xué)分冊(cè)[M].第1版.北京:人民軍醫(yī)出版社,2006:87-88.

    [2]肖云山,張靜引.熒光原位雜交檢測(cè)在產(chǎn)前診斷中的臨床價(jià)值[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志,2010,18(3):57.

    [3]王 華,林 梅.產(chǎn)前染色體疾病診斷方法的研究進(jìn)展[J].中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志,2011,7(4):366.

    [4]宋蘭林,熊 麗,劉思平,等.FISH技術(shù)在快速診斷自然流產(chǎn)胚胎染色體數(shù)目異常中的應(yīng)用[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,31(9):1605.

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