糖化血紅蛋白檢測方法的標準化及其臨床診斷價值分析

唐炳群, 戴榮祥, 陳桂明

(江蘇省高郵市人民醫(yī)院, 江蘇 高郵, 225600)

目前糖尿病發(fā)生率逐年增加，其急性、慢性并發(fā)癥嚴重危害人類健康，因此糖尿病的早期診治成為預防糖尿病并發(fā)癥的重要途徑[1-2]。2010年糖尿病診斷新標準將HbA1c列入糖尿病診斷的有效檢測指標[3], 但在基層臨床上由于HbA1c檢測的方法原理不同，影響因素較多，難以標準化[4], 故測定方法的選擇是面臨的問題。長期以來HbA1c作為糖尿病診斷標準一直存在爭議，本文通過分析HbA1c標志物的性能，探討HbA1c診斷糖尿病的靈敏度、特異性以及診斷DM的最佳切點，從而判斷HbA1c在診斷糖尿病中的臨床價值。

1 資料與方法

方法學評價研究對象包括實驗組：本院2013年1—3月份50例住院糖尿病患者；對照組：本院2013年3月份參加健康體檢各項指標正常的30例正常人。HbA1c診斷性能研究對象：本院2013年7—9月份門診就診2型糖尿病疑似患者150例。

方法學研究檢測方法：離子交換HPLC法和免疫比濁法。 檢測過程：選擇HbA1c檢測結(jié)果高、中、低3份血清和高值校準品，對HPLC法和免疫比濁法進行性能比較，并對兩種方法進行相關性分析。HbA1c診斷性能研究檢測方法：研究對象夜間禁止飲食8 h以上，早晨進行OGTT試驗和HbA1c測定。對于單獨FPG≥7.0 mmol/L、單獨2hPG≥11.1 mmol/L、FPG<7.0 mmol/L且2hPG<11.1 mmol/L患者3 d后復檢FPG和(或)OGTT。

2 結(jié) 果

2.1 方法學研究結(jié)果

實驗組與對照組檢測結(jié)果Spearman相關分析顯示為直線正相關(r>0.95，P<0.01)。見表1。

表1 HPLC法與免疫比濁法檢測HGB的性能評價

注:脂血、黃疸干擾限值以線性回歸偏差≤5%為標準。

2.2 HbA1c診斷性能研究結(jié)果

2.2.1 研究人群的一般資料：本研究共計150例門診2型DM疑似患者進行OGTT試驗，其在FPG<7.0 mmol/L且2hPG<11.1 mmol/L者52例(第2次檢測FPG<7.0者46例)，單獨FPG≥7.0 mmol/L者18例(第2次檢測FPG≥7.0者12例)，單獨2hPG≥11.1 mmol/L者27例(第2次2hPG≥11.1者25例), FPG≥7.0 mmol/L且2hPG≥11.1 mmol/L者53例。根據(jù)DM診斷標準: 90例為2型DM, 占60%, 60例為非2型DM，占40%。90例2型DM患者HbA1c≥6.4%為61例，60例非2型DM患者HbA1c<6.4%為57例。DM組平均HbA1c為(6.8±1.9)%, 非DM組平均HbA1c為(5.6±0.5)%, DM組與非DM組HbA1c檢測結(jié)果存在明顯差異(P<0.01)。

2.2.2 HbA1c與FPG、2hPG相關性分析: DM組平均FPG、2hPG為(8.1±2.3) mmol/L、(13.4±3.9) mmol/L, 非DM組平均FPG、2hPG為(5.7±0.7) mmol/L、(8.8±1.6) mmol/L。HbA1c與FPG、2hPG經(jīng)Spearman相關分析為直線正相關(R=0.74,0.67,P<0.05)。HbA1c與FPG、2hPG診斷DM的診斷性能見表2。

表2 HbA1c與FPG、2hPG診斷DM的診斷性能評價

注: FPG≥7.0 mmol/L、2hPG≥11.1 mmol/L、HbA1c≥6.4%為判斷標準。

3 討 論

HbA1c是一項說服力較強，數(shù)據(jù)較客觀，穩(wěn)定性較好的生化指標，不受血糖偶爾升高、降低的影響，能反映糖尿病2～3月內(nèi)糖代謝的狀況，同時與糖尿病并發(fā)癥特別是微血管病變關系密切，在糖尿病學上有重要的臨床參考價值，但其檢測方法應標準化[5]，即應對其檢測方法進行評價，檢測方法選擇應保證實驗室檢測結(jié)果溯源性、可比性和較好的精密度，通常精密度不小于5%。從本文檢測結(jié)果分析，HPLC法和免疫比濁法測定GHb都能滿足臨床需求。免疫比濁法由于其操作簡單、自動化程度高，是目前臨床上使用較多的方法，但是該方法的準確性和重復性與HPLC法比較均有欠缺，離子交換HPLC法其精密度、準確性相對較高，是臨床上推薦方法，與相關報道相符[6]。

糖尿病的診斷多年來一直應用FPG和2hPG作為診斷指標 ，但是由于FPG的穩(wěn)定性較差，據(jù)報道FPG的個體變異達12%～15%[7]，且其檢測需患者空腹條件；OGTT在臨床上難以操作，特別是初診高度疑似高血糖病例，更不能行OGTT試驗，故HbA1c作為糖尿病診斷指標一直收到重視。HbA1c具有許多優(yōu)點[8]: ① HbA1c具有相當穩(wěn)定性; ② 其檢測過程干擾小; ③ 因其反映血糖升高2～3個的平均水平，對糖尿病治療監(jiān)測具有較大的臨床意義等優(yōu)勢，目前已作為糖尿病管理和治療監(jiān)測的理想標志物。

越來越多的證據(jù)[9]提示HbA1c可作為診斷、治療糖尿病的有效指標，但對其是否可以代替血糖監(jiān)測一直存在爭議。本文以1997年糖尿病WHO診斷標準，通過對HbA1c與FPG、2hPG在糖尿病診斷中的性能指標進行相關分析，以HbA1c≥6.4%為切點，此時HbA1c診斷糖尿病的靈敏度、特異性為67.7%、95%，其ROC曲線下面積(AUC)為0.919，是DM診斷理想指標，且數(shù)據(jù)顯示糖尿病(DM)組與非糖尿病組HbA1c檢測結(jié)果存在明顯差異(P<0.01); Spearman相關分析顯示HbA1c與FPG、2hPG為直線正相關(R=0.74,0.67,P<0.05); 雖然其診斷靈敏度低于FPG、2hPG，但特異性和ROC曲線下面積(AUC)高于FPG，而且如果HbA1c與FPG聯(lián)合檢測其靈敏度和特異性則高于2hPG，說明HbA1c在DM診療中具有較高臨床價值。

[1] Diabetes Program Research Group. Reduction in the incidence of type 2 diabetes with lifestyle intervention or metformin [J]. N Engl J Med, 2002, 346(6): 393.

[2] TUOMILEHTO J, LINDSTROM J, ERIKSSON JG, et al. Prevention of type 2 diabetes mellitus by changes in lifestyle among subjects with impaired glucose tolerance [J]. N Engl J Med, 2001, 344(18):1343.

[3] Herma WH,Fajans SS.Hemoglobin A1c for the diagnosis of diabetes :practical con sinderations[J].Pol Arch Med Vewn,2010,120:37.

[4] 羅莎，郭健.糖化血紅蛋白檢測標準化[J].實用臨床醫(yī)藥雜志,2012,16(3):23.

[5] KILPATRICK ES, MAYLOR PW, KEEVIL BG. Biological variation of glycated hemoglobin. Implications for diabetes screening and monitoring [J]. Diabetes Care, 1998, 21(2):261.

[6] 陳富, 廖煥蘭,熊小泉,等.兩種糖化血紅蛋白檢測系統(tǒng)的方法學比對和偏倚評估[J].實用醫(yī)學雜志,2009，25(18)：3146.

[7] Ragner Hanas ,Garry John.2010 Consensus Statement on the Worldwide Standardization of the Hemoglobin A1c Measurement[J].Clinical Chemistry,2010,56(8):1362.

[8] BENNETT C M, GUO M, DHARMAGE S C. HbA1c as a screening tool for detection of type 2 diabetes: a systematic review[J]. Diabetic Med, 2007, 24(4): 333.

[9] American Diabetes Association. Standards of medical care in diabetes 2007[J]. Diabetes Care, 2007, 30(1): S2.