不同化療方案對早期乳腺癌患者免疫功能的影響

董 力, 趙長嘯, 郝廣旭, 王 翔

(1. 江蘇省徐州市腫瘤醫(yī)院 乳腺科, 江蘇 徐州, 221005; 2. 江蘇省徐州市中心醫(yī)院 腫瘤內(nèi)科, 江蘇 徐州, 221005)

腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機體的免疫功能狀態(tài)密切相關(guān)，其中細胞免疫占主導(dǎo)地位[1]。輔助化療是提高手術(shù)治療早期乳腺癌的總生存率及無復(fù)發(fā)生存率的重要條件。乳腺癌術(shù)后輔助化療方案包括非蒽環(huán)類的環(huán)磷酰胺、甲氨蝶呤、氟尿嘧啶，含蒽環(huán)類的表柔比星、多柔比星，及紫杉醇類藥物等[2]。選擇能夠充分殺傷腫瘤細胞，且能最大限度保留患者免疫功能的化療藥物對提高乳腺癌患者生存率及生存質(zhì)量意義重大[3]。本研究選取FEC方案(5-氟尿嘧啶、表柔比星、環(huán)磷酰胺)與EC-P方案(表柔比星、環(huán)磷酰胺序貫紫杉醇)治療早期乳腺癌，觀察其對患者外周血T淋巴細胞、殺傷性T細胞、輔助性T細胞和NK細胞的影響，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

入組標準: ① 均經(jīng)病理組織學及影像學確診，術(shù)后病理證實為浸潤性導(dǎo)管癌; ② 病理分期為Ⅰ～ⅡB期，腫瘤大小為T1～T3; ③ 既往未接受化療及大面積放療; ④ 血常規(guī)、肝腎功能等各項檢查正常，無血液系統(tǒng)疾病; ⑤ 不存在曲妥珠單抗靶向治療適應(yīng)證; ⑥ 患者及家屬均知情同意。排除標準: ① 免疫系統(tǒng)疾病患者或過往有長期服用激素或免疫抑制劑者; ② 存在用藥禁忌證者; ③ 未能完成治療者。

選取2012年3月—2013年4月在徐州市腫瘤醫(yī)院乳腺科行乳腺癌改良根治術(shù)并輔助化療的患者68例，均為女性，并符合上述標準。隨機分為FEC組及EC-P組，各34例。FEC組患者年齡24～71歲，平均(46.2±7.6)歲；臨床分期：Ⅰ期19例，Ⅱ期15例；腫瘤大小: T130例，T23例，T31例；臨床分型: Luminal A型13例，Luminal B型5例，HER2+型14例，Basal-like型 2例。EC-P組患者年齡23～71歲，平均(46.5±7.1)歲；臨床分期：Ⅰ期18例，Ⅱ期16例；腫瘤大小: T129例，T24例，T31例；臨床分型: Luminal A型12例，Luminal B型4例，HER2+型15例，Basal-like型 3例。2組患者在年齡、臨床分期、腫瘤大小及臨床分型等無顯著差異(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 化療方案: FEC組患者給予FEC方案治療，即環(huán)磷酰胺500 mg/m2、表柔吡星80 mg/m2, 靜脈滴注，第1天; 氟尿嘧啶500 mg/m2, 靜脈滴注，第1～3天; 每21 d為1個周期，連續(xù)6個周期。EC-P組患者給予EC序貫P方案治療，即環(huán)磷酰胺500 mg/m2、表柔比星80 mg/m2, 靜脈滴注，第1天; 每21 d為1個周期，連續(xù)4個周期后，序貫紫杉醇脂質(zhì)體175 mg/m2, 緩慢靜脈滴注3 h; 每21 d為1個周期，連續(xù)4個周期。2組患者在化療期間，均給予止吐、保肝、營養(yǎng)細胞等支持治療，每個療程后服用粒細胞刺激因子1周。

1.2.2 檢測方法：分別于化療前、第3、5、6次化療前1 d清晨抽取患者空腹靜脈血，肝素抗凝，采用全自動血細胞分析儀計算淋巴細胞總數(shù)。同時留取25 μL抗凝血漿分別加入相應(yīng)單抗10 μL: 異硫氰酸熒光素(FITC)標記的CD3抗體、FITC標記的CD3抗體/藻紅蛋白(PE)標記的CD4抗體、FITC標記的CD3抗體/PE標記的CD8抗體、FITC標記的抗CD3抗體/PE標記的CD16抗體+PE標記的CD56抗體，分別代表CD3+T淋巴細胞、CD3+CD4+輔助性T淋巴細胞、CD3+CD8+殺傷性T淋巴細胞及NK細胞。避光靜置30 min，采用FACS Scan流式細胞儀檢測。

1.3 觀察指標

觀察化療前、第3、5、6次化療前1 d患者外周血中淋巴細胞總數(shù)及T淋巴細胞、輔助性T淋巴細胞、殺傷性T淋巴細胞、NK細胞比例。

2 結(jié) 果

2.1 2組淋巴細胞總數(shù)變化

化療開始前，2組患者外周血中淋巴細胞總數(shù)無顯著差異(P>0.05), 其中FEC組患者在第5次化療前及第6次化療前外周血中淋巴細胞總數(shù)顯著降低(P<0.01), EC-P組患者化療后外周血中淋巴細胞總數(shù)與治療前無顯著差異(P>0.05)。見圖1。

圖1 2組患者不同時間外周血中淋巴細胞總數(shù)比較

2.2 T淋巴細胞、輔助性T淋巴細胞、殺傷性T淋巴細胞、NK細胞比例

化療開始前，2組患者外周血T淋巴細胞、輔助性T淋巴細胞、殺傷性T淋巴細胞、NK細胞比例均無顯著差異(P>0.05)。2組患者T淋巴細胞及殺傷性T淋巴細胞比例與化療周期無相關(guān)性，不同周期間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。FEC組患者輔助性T淋巴細胞、NK細胞比例與化療周期無相關(guān)性，不同周期間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。EC-P組患者第6次化療前輔助性T淋巴細胞比例與化療前及第5次化療前比較均顯著下降(P<0.01), 而NK細胞顯著升高(P<0.01)。見表1。

表1 2組患者不同時間各指標比較

與化療前比較, **P<0.01; 與FEC組比較, #P<0.05, 與第5次化療前比較, △△P<0.01。

3 討 論

乳腺癌是女性易發(fā)的主要惡性腫瘤之一，尤其在發(fā)達國家發(fā)病率高，但近年來隨著中國人民生活質(zhì)量的提高，乳腺癌發(fā)病率明顯上升，在發(fā)達城市已成為發(fā)病率最高的女性惡性腫瘤[4]。隨著人們對乳腺腫瘤發(fā)生的生物學行為及轉(zhuǎn)移機制的了解，除了傳統(tǒng)的切除手術(shù)外，有效的藥物治療、放射治療、內(nèi)分泌及免疫治療對降低乳腺癌死亡率及提高生存質(zhì)量也已不可或缺。

Dunn等[5]提出的腫瘤免疫編輯學說，認為免疫系統(tǒng)具有監(jiān)視、清除腫瘤細胞的能力，同時對腫瘤具有塑型功能。機體免疫系統(tǒng)與腫瘤細胞的關(guān)系在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中有重要意義。有研究[6]表明，腫瘤患者普遍存在T淋巴細胞亞群狀態(tài)異常和比例失調(diào)的狀況。乳腺癌患者腫瘤免疫微環(huán)境與預(yù)后密切相關(guān)，且與化療療效相關(guān)，免疫功能的紊亂及低下，在一定程度上能夠預(yù)示著腫瘤的發(fā)展，提示預(yù)后較差[7-8]。因此，監(jiān)測不同免疫表型T淋巴細胞比例的意義重大，能夠提示疾病發(fā)展的動向，為臨床醫(yī)師選擇既能提高患者生存率及生存質(zhì)量，又能最大限度保留患者免疫功能的化療藥物提供參考[9-10]。

Wijayahadi 等[11-12]研究顯示，F(xiàn)EC方案化療能夠降低乳腺癌患者外周血淋巴細胞的數(shù)量。本研究結(jié)果顯示, FEC方案化療使得患者在第5次化療前及第6次化療前外周血中淋巴細胞總數(shù)顯著降低(P<0.01), 這與上述研究結(jié)果相似，而EC-P組患者化療后外周血中淋巴細胞總數(shù)與治療前無顯著差異(P>0.05), 提示相較于FEC方案, EC-P方案對機體免疫功能的影響較小。紫杉醇類藥物對癌癥患者的免疫功能影響在以往的研究中已有報道[13-18]。Tong等[14]報道，經(jīng)過1個療程的紫杉醇治療后，外周血T淋巴細胞、B淋巴細胞比例及CD4/CD8不變。羅光華等[19]研究也顯示，紫杉醇在乳腺癌化療過程中可以增強NK細胞的抗腫瘤活性。本次研究顯示, EP-C方案化療患者第6次化療前NK細胞比例與化療前及第5次化療前比較均顯著升高(P<0.01), 提示序貫紫杉醇化療在保留患者免疫功能方面優(yōu)于FEC方案。Melichar等[20]研究提示，多柔比星聯(lián)合紫杉醇化療使患者外周血T淋巴細胞、輔助性T細胞及殺傷性T細胞的比例升高，并能增強T淋巴細胞的活性。但本研究結(jié)果中顯示, EC-P組患者第6次化療前輔助性T淋巴細胞比例與化療前及第5次化療前比較均顯著下降(P<0.01), 提示序貫紫杉醇化療后使得患者輔助性T淋巴細胞比例下降，這可能與本次研究樣本數(shù)量較小有關(guān)，且目前尚缺乏輔助性T細胞對乳腺癌預(yù)后的影響的直接證據(jù)。

綜上所述，相較于FEC方案、EC-P方案對機體免疫功能的影響較小。但目前國內(nèi)相關(guān)大樣本的長期臨床研究鮮少，尚無統(tǒng)一、直接的證據(jù)能夠證明，需要臨床進一步證實。

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