HLA-G在部分頭頸部惡性腫瘤中表達研究進展

徐喜龍 郭曉光 王龍龍

內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院2011 級腫瘤外科，內(nèi)蒙古包頭 014030

頭頸部腫瘤是包括原發(fā)于鼻腔、鼻竇及鼻咽、口咽、喉咽、頸段食管、甲狀腺、涎腺、口腔、喉、耳的腫瘤。全球每年新增約65 萬頭頸部惡性腫瘤病例，發(fā)病率約為14/10 萬，死亡率約50%，我國年發(fā)病率約為15.22/10 萬，占全身惡性腫瘤的5%.嚴重威脅人類健康。

人類白細胞抗原G（HLA-G）也被稱為非經(jīng)典HLA-Ⅰ類抗原分子，因為它不同于經(jīng)典的HLA 類I 類分子的遺傳多樣性，結(jié)構(gòu)，表達和功能。HLA-G 最初發(fā)現(xiàn)在母胎界面絨毛滋養(yǎng)層細胞中的表達，先后發(fā)現(xiàn)在黑色素瘤、乳腺癌、食道癌、胃癌、腎癌等惡性腫瘤中表達,可以誘導(dǎo)HLA-G 的表達的疾病，包括癌癥，肝移植，多發(fā)性硬化癥，炎癥性疾病和病毒感染（主要為人乳頭瘤病毒）。近年來，國內(nèi)外開展大量關(guān)于HLA-G 在腫瘤免疫過程中的作用及其在頭頸部惡性腫瘤中表達的研究。本文就HLA-G 分子特點、功能及其與腫瘤的相關(guān)性和在部分頭頸部惡性腫瘤中的表達進行綜述。

1 HLA-G 分子特點

HLA-G 位于HLA 基因復(fù)合體內(nèi)，位于人類6 號染色體，其不同于其他類HLA I 類分子，主要表現(xiàn)在[1]①限制蛋白質(zhì)變異；②存在一些膜結(jié)合和可溶性亞型所產(chǎn)生的初級轉(zhuǎn)錄的選擇性剪接；③獨特的分子結(jié)構(gòu)，有限多態(tài)性，它分布于α1，α2 和α3 結(jié)構(gòu)域有43 個等位基因多態(tài)性；④調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)；⑤限制在組織中的表達，分布較局限。此外它多態(tài)性可以使其產(chǎn)生7 種替代基因編碼四個膜結(jié)合型（HLA-G1-HLA-G4）和三個分泌亞型（可溶性HLA-G，HLA-G5 的HLA-G7），缺乏跨膜結(jié)構(gòu)域。另外，HLA-G1也可以被釋放到培養(yǎng)基中由蛋白水解裂解形成可溶性HLA-G1[2]。所有的HLA-G 異構(gòu)體都包含有α1 胞外結(jié)構(gòu)域，可能與HLA-G免疫抑制相關(guān)。在生理條件下，HLA-G 表達主要限制在胎兒組織如羊膜細胞，紅細胞前體細胞滋養(yǎng)細胞，包括角膜，胸腺，胰島細胞，血管內(nèi)皮細胞的前體和外周血淋巴細胞以及其他免疫細胞，如樹突狀細胞（DC）和巨噬細胞。

2 HLA-G 的功能特點

2.1 HLA-G 與免疫能力

HLA-G 可以通過直接結(jié)合各種抑制性受體從而起到免疫抑制作用，如免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄體2(ILT2/CD85j/LILRB1)、免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄體4(ILT4/CD58d/LILRB2)及殺傷細胞抑制性受體KIR2DL4/CD158d。這些受體除了表 在NK 細胞(KIR2DL4、ILT2) 上外，也在T 細胞和B 細胞(ILT2)、單核/ 巨噬細胞(ILT2、ILT4)、樹突狀細胞(ILT2、ILT4) 上表達[3]。HLA-G 與相應(yīng)受體結(jié)合后，抑制CD4 T細胞功能與增殖，減弱NK 細胞殺傷功能，使APC 抗原提呈和分泌細胞因子減少，抑制細胞免疫耐受功能。

2.2 HLA-G 與免疫應(yīng)答

HLA-G 可以直接與不同的免疫細胞亞群結(jié)合，其包括NK細胞，T 細胞和專業(yè)的抗原呈遞細胞（APC），以及通過這些受體內(nèi)皮細胞[3]。其中NK 細胞活性的平衡信號分別來自于刺激型和產(chǎn)生相反作用的抑制型，并在這方面，HLA-G 主要通過與抑制性受體LILRB1 的相互作用，抑制NK 細胞活性[4,5]。LILRB1 具有較高的親和力HLA-G 的比其他的HLA I 類分子的親和力增加的結(jié)果，形成為HLA-G 的二硫鍵的二聚體和三聚體。HLA-G 與不同的免疫細胞亞群結(jié)合相互作用是伴隨著在免疫反應(yīng)的不同階段，如分化，增殖，細胞溶解和細胞因子分泌的產(chǎn)生。

2.3 HLA-G 與免疫調(diào)節(jié)

HLA-G 對免疫系統(tǒng)的間接調(diào)節(jié)主要通過能使T 細胞分化成為抑制性T 細胞，起到免疫抑制作用。HLA-G1 能夠誘導(dǎo)T 細胞分化成CD3+、CD4low 或CD3+、CD8low 等具有免疫抑制作用的細胞，并依賴IL-10 發(fā)揮免疫抑制功能。Yu-HWA Huang[6]等人研究發(fā)現(xiàn)也證實HLA-G 的調(diào)節(jié)性T 細胞介導(dǎo)的抑制作用嚴重依賴于分泌的IL-10，而不是TGF-β。此外，HLA-G 還可以通過其反饋機制發(fā)揮其抑制活性。

3 HLA-G 與腫瘤發(fā)生的功能相關(guān)性

3.1 HLA-G 與腫瘤發(fā)生的功能基礎(chǔ)

越來越多的證據(jù)表明，疾病的產(chǎn)生是由基因和環(huán)境相互作用，包括癌癥的發(fā)生，其在病因?qū)W中起到重要作用。腫瘤微環(huán)境的變化可能參與HLA-G 的表達調(diào)控。然而，對于他們中的大多數(shù)的分子機制尚待闡明。在腫瘤中，已被證明能發(fā)揮重要的作用，HLAG 能夠產(chǎn)生介導(dǎo)的免疫抑制狀態(tài)的微環(huán)境，促使腫瘤浸潤，以及誘導(dǎo)免疫細胞產(chǎn)生免疫抑制的分子。

3.2 HLA-G 與腫瘤發(fā)生發(fā)展功能相關(guān)性

HLA-G 可能涉及到腫瘤免疫的免疫抑制、免疫監(jiān)視和免疫逃逸。①其第一個步驟是清除階段，涉及消除腫瘤細胞的適應(yīng)性和先天免疫系統(tǒng)的細胞。在這個階段，Th1 細胞因子如IFN-γ，腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL），NK 細胞可能在識別并殺死腫瘤細胞中起到十分重要作用。HLA-G 是能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生耐受性樹突狀細胞[7]，抑制NK 細胞或T 細胞[8]，從而產(chǎn)生免疫抑制，使腫瘤細胞存活。②第二步驟是保留腫瘤細胞的持久性的平衡階段，即一部分腫瘤細胞進入休眠，而一部分腫瘤細胞發(fā)生突變，使其具有新的免疫原性，宿主免疫系統(tǒng)降低對具有免疫原性的腫瘤增殖的選擇。使具有低免疫原性的腫瘤細胞得以生存，這個階段的特點是HLA-G的啟動子[9]，如去甲基化和組蛋白乙?；瘜?dǎo)致轉(zhuǎn)錄激活HLA-G的表達。免疫監(jiān)視在這一階段可能起到重要作用[10]。③最后一個階段，稱為免疫逃逸，突變的腫瘤細胞適應(yīng)宿主而生存，可能至少部分是由于免疫逃逸，促進腫瘤的發(fā)展。例如，慢性炎癥，與活化的NF-JB 增加了產(chǎn)生HLA-G 分子導(dǎo)致的蛋白水解脫落的結(jié)構(gòu)[11]。研究證實，腫瘤衍生的細胞因子IL-10 和TGFB，缺血、缺氧，均可誘導(dǎo)HLA-G 表達[12]。這些過程共同導(dǎo)致腫瘤促進腫瘤抗原特異性免疫應(yīng)答，促進腫瘤細胞的逃逸[10，13]。此外炎癥過程中，進一步誘發(fā)惡性轉(zhuǎn)化的HLA-G 在巨噬細胞浸潤。因此炎癥可能促進腫瘤的發(fā)展。使HLA-G 上調(diào)腫瘤細胞的增長。

最后，HLA-G 的功能相關(guān)性根據(jù)其表達的腫瘤細胞或腫瘤浸潤細胞的不同。當腫瘤細胞表達時，它構(gòu)成了一個有效的方式逃避免疫監(jiān)視發(fā)揮其免疫抑制特性。所以，當HLA-G 表達時則有益于腫瘤侵潤。因此，其對免疫細胞的影響可以促進腫瘤發(fā)生，并可能與腫瘤生長有關(guān)。

4 HLA-G 的表達在頭頸惡性腫瘤中的功能意義

4.1 鼻咽癌

鼻咽癌是頭頸部的一種惡性腫瘤，大多來源于鼻咽上皮，有明顯地域差異，我國南方發(fā)病率較高。由于鼻咽部解剖位置隱蔽，鼻咽癌早期癥狀不典型，所以早期診斷是鼻咽癌患者生存的關(guān)鍵。由于鼻咽部的淋巴組織豐富，免疫相關(guān)基因可能有助于鼻咽癌的發(fā)展。Man-Bo Ca[14]等人采用免疫組化對552例鼻咽癌患者研究發(fā)現(xiàn)，HLA-G 表達437例，占鼻咽癌患者總數(shù)79.2%，說明HLAG 蛋白的過度表達可能與鼻咽癌相關(guān)。HLA-G 蛋白的表達，此外在正常鼻咽上皮組織未見表達。因此，在鼻咽癌中HLA-G 可能發(fā)揮了重要作用。此外，另外觀察到187/552（33.9%）鼻咽癌組織高表達HLA-G。而這些鼻咽癌患者中，HLA-G 的高表達與腫瘤N分期，復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移及組織學(xué)類型相關(guān)（P＜0.05）。因此，HLA-G 表達與鼻咽癌的預(yù)后可能密切相關(guān)。

4.2 甲狀腺乳頭狀癌

甲狀腺乳頭狀癌（PTC）是最常見頭頸部惡性腫瘤，發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移早，具有高頻復(fù)發(fā)，遠處轉(zhuǎn)移特點，因此早期診斷和治療是改善預(yù)后較好的存活率的關(guān)鍵，NUNES LM[15]等人在石蠟包埋甲狀腺活檢70 甲狀腺乳頭狀癌患者（其中40 人已轉(zhuǎn)移）進行了評估。觀察甲狀腺乳頭狀癌腫瘤細胞中HLA-G 的染色，發(fā)現(xiàn)HLAG 在發(fā)生伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P=0.0006）和包膜浸潤（P=0.02）的PTC 腫瘤細胞中明顯表達。HLA-G 在甲狀腺癌表達可能會削弱PTC 高效的抗腫瘤免疫。這表明HLA-G 可能在甲狀腺乳頭狀癌有預(yù)后價值。此外，Dardano A[16]等人通過對甲狀腺乳頭狀癌患者中循環(huán)可溶性HLA-G 評估，認為甲狀腺乳頭狀癌的侵襲轉(zhuǎn)移與血漿可溶性HLA-G 水平存在相關(guān)關(guān)系。

4.3 口腔鱗狀細胞癌

在我國口腔癌并不少見，其發(fā)生率約占全身惡性腫瘤的1.75%～5.18%，并呈逐年上升的趨勢，溫州醫(yī)學(xué)院劉海鑫,施更生等人[17]用免疫組織化學(xué)法檢測口腔鱗狀細胞癌及正?？谇火つそM織HLA-G 的表達情況,發(fā)現(xiàn)HLA-G 分子在口腔鱗狀細胞癌組織中的陽性表達率為55.77%(29/52),在正常口腔黏膜組織中無表達(0/20)。HLA-G 分子表達與口腔鱗狀細胞癌臨床TNM 分期有相關(guān)性(P＜0.05),但與年齡、性別、腫瘤分化程度之間不能明確相關(guān)關(guān)系。HLA-G 分子可能與口腔鱗狀細胞癌細胞的免疫逃避有密切關(guān)系進而促進了口腔鱗狀細胞癌的發(fā)生發(fā)展。

4.4 喉癌

Silva TG[18]等人系統(tǒng)地比較了HLA-G 在良性，惡性和惡性喉癌病變的表達，收集喉部病變109例，其中27例喉乳頭狀瘤，17例發(fā)育異常，10例原位喉癌，27 喉癌無轉(zhuǎn)移，28例轉(zhuǎn)移性喉鱗癌和10例正常喉標本，采用免疫組化方法。結(jié)果顯示非經(jīng)典HLA 分子根據(jù)喉部病變不同表現(xiàn)出明顯的分布格局。在良性和癌前病變HLA-G 的表達增加，在浸潤性癌和相應(yīng)有轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中逐漸下降。實驗說明低表達HLA-G 的出現(xiàn)是喉部惡性病變的良好指標。

此外，研究發(fā)現(xiàn)HLA-G 在皮膚基底細胞癌、喉癌、黑色素瘤、視網(wǎng)膜腫瘤等頭頸部惡性腫瘤中均有陽性表達，而在頭頸部涎腺惡性腫瘤中未見報道。研究證實HLA-G 主要表達在實體腫瘤和血液系統(tǒng)惡性腫瘤[19]，隨著近年來頭頸部惡性腫瘤日趨增多，由于其廣泛的表達，HLA-G 的也可以作為癌癥患者的治療目標，這將作為一個長遠目標加以解決。并判斷其預(yù)后。

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