提高肉牛凍精人工授精受胎率的幾項措施

王鴻周，施巧婷，王二耀，馮亞杰，陳付英，吳 姣，趙洪昌，徐照學(xué)＊

（1.河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 畜牧獸醫(yī)研究所，河南 鄭州 450008；2.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 牧醫(yī)工程學(xué)院，河南 鄭州 450002）

國家“十二五”計劃鼓勵肉牛集中專業(yè)育肥，大力發(fā)展適度規(guī)模養(yǎng)殖，穩(wěn)步推進標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)，提高肉牛生產(chǎn)效率。人工授精技術(shù)是肉牛規(guī)?；a(chǎn)必備的技術(shù)，人工授精受胎率是反映人工授精技術(shù)高低的標(biāo)準(zhǔn)。為了響應(yīng)國家的號召，筆者通過對影響人工授精技術(shù)受胎率的因素進行了總結(jié)分析，提出了提高肉牛人工授精受胎率的幾項措施，以期為我國肉牛業(yè)的發(fā)展，盡一點綿薄之力。

1 加強對種牛的科學(xué)飼養(yǎng)管理

1.1 選擇優(yōu)良公、母牛做種牛

根據(jù)不同的肉牛品種、選擇本品種母牛時，應(yīng)注意挑選性成熟早、發(fā)情排卵情況正常、產(chǎn)犢間隔短，雙胎率和配種指數(shù)高的母牛，特別對于肉牛來說，選擇產(chǎn)犢間隔短、雙胎率和配種指數(shù)高的留做種用更好［1］。選擇公畜時，應(yīng)參考其親代的生產(chǎn)性能，并對肉牛個體的生殖系統(tǒng)發(fā)育情況、交配能力、性欲、射精量、精子形態(tài)、精子密度、和精子活力等進行檢查，然后采集公牛精液進行試配，根據(jù)試配結(jié)果再選擇是否留用。有研究表明，種公牛的精子形態(tài)與受胎率有一定關(guān)系，發(fā)現(xiàn)頭部越長越窄的精子，受胎率越高。在人工授精過程中應(yīng)注意對種公牛精子形態(tài)的選擇。

1.2 加強對種公牛的飼養(yǎng)管理

種公牛是人工授精技術(shù)的精液來源，高品質(zhì)的精液是保證人工授精受胎率的前提，應(yīng)加強對種公牛的飼養(yǎng)管理，以保證精液的優(yōu)良品質(zhì)。

應(yīng)根據(jù)所養(yǎng)肉牛品種生產(chǎn)情況及時檢查和調(diào)整種公牛日糧，以保持穩(wěn)定高產(chǎn)。種公牛飼料應(yīng)包含對種公牛的繁殖性能有重要作用的礦物質(zhì)、微量元素和維生素和蛋白質(zhì)，保證全價營養(yǎng)。應(yīng)選用適口性好、容易消化的飼料，精、粗飼料搭配比例適當(dāng)。種公牛對缺乏蛋白質(zhì)非常敏感，應(yīng)注意添加補充蛋白質(zhì)飼料。精飼料應(yīng)以蛋白質(zhì)含量高的優(yōu)質(zhì)豆科干草為主，搭配禾本科牧草，也可適當(dāng)添加經(jīng)過加工的優(yōu)質(zhì)玉米秸稈飼料，而不用酒糟、果渣及粉渣等粗料；青貯料喂量不能過多，應(yīng)和干草或揉搓玉米秸稈搭配飼喂，并以干草為主。冬、春季節(jié)可以用胡蘿卜補充維生素A。應(yīng)注意適量飼喂多汁飼料和粗飼料，以免種公牛長成“草腹”，另外，能量飼料也不可飼喂過量，飼喂過多易造成種公牛過肥而降低其生殖機能；由于菜籽餅、棉籽餅含有降低精液品質(zhì)的物質(zhì)，不宜用作種公牛的飼料；豆餅雖富含蛋白質(zhì)，但飼喂過多，易在種公牛體內(nèi)產(chǎn)生大量對精子形成不利的有機酸，因此應(yīng)控制喂量。一般在日糧中添加一定比例的動物性飼料來補充種公牛對蛋白質(zhì)的需要，主要有魚粉（進口的）、肉骨粉、蛋粉、蠶蛹粉，尤其在采精頻繁季節(jié)補加營養(yǎng)的情況下更是如此。一般當(dāng)粗飼料為豆科牧草時，種公牛的日糧精料中就不應(yīng)再補充鈣質(zhì)，特別是對老年公牛，日糧中的鈣不宜過多［2］。

針對公牛記憶力強、防御反射能力強和性反射能力強即“三強”的特點，必須指定專人飼養(yǎng)和管理.中途不要隨便更換飼養(yǎng)員。盡量不要讓飼養(yǎng)員、采精人員參加獸醫(yī)治療工作（如打針、灌藥等），平時更不可以虐待公牛，以免公牛報復(fù)。為保證種公牛行動活潑、體質(zhì)健康、性情溫順、生殖機能旺盛，必須讓種公牛有合理的運動，堅持每天上下午各運動1次，每次運動1h左右。要堅持每天定時刷拭牛體，加強對種公牛外生殖器官的護理，定期對種公牛的外生殖器官進行按摩，每次5至10min。種公牛易患蹄病而影響采精配種，應(yīng)經(jīng)常對種公牛的蹄趾進行檢查，平時注意清理牛蹄下附著的污物。發(fā)現(xiàn)蹄病要及時治療，并在每年春、秋兩季各進行一次修蹄并矯正蹄形。應(yīng)保證種公牛有充足潔凈的飲水，但在運動前和采精前后各30min內(nèi)，不要飲水，以免影響公牛健康，冬季最好喂給牛溫水。為防止牛脾氣變壞，應(yīng)定期進行采精。堅持防重于治的原則，做好消毒防疫與疾病防治工作。

1.3 加強對母牛的飼養(yǎng)管理

后備母牛最好在6月齡時與育成公牛分群飼養(yǎng)，避免母牛過早交配，另外，根據(jù)肉牛不同生長強度、發(fā)育情況進行轉(zhuǎn)群，同時稱重結(jié)合體尺測量，對生長發(fā)育不良的進行淘汰。后備母牛在不同年齡階段其生理變化與營養(yǎng)需求不同，應(yīng)按其各階段特點進行飼養(yǎng)管理。周歲以上后備母牛其消化器官已接近成熟，又沒有泌乳和妊娠任務(wù)，到初配之前的飼養(yǎng)可以粗放一些，若保證有充足的優(yōu)質(zhì)粗料，就可以滿足其營養(yǎng)需要，若飼喂條件差，應(yīng)加強母牛配前補飼，并注意補充維生素、礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，確保母牛繁殖機能正常，母牛正常的繁殖機能是母牛進行人工授精配種受胎的前提。繁殖母牛在配種前也應(yīng)具有中上等膘情，若飼料缺乏，母牛過于瘦弱，則會影響母牛的繁殖力，導(dǎo)致母牛不發(fā)情。在母牛前一個泌乳期間保證有足夠的平衡日糧，并且進行合理管理，能夠提高人工授精的受胎率［3］。

妊娠母牛飼養(yǎng)直接影響?zhàn)B牛者的經(jīng)濟效益，妊娠母牛的飼養(yǎng)決定生產(chǎn)和能出售的牛數(shù)。犢牛是肉牛場生產(chǎn)的后備力量，尤其是對雜交犢牛的早期培育直接影響其以后的生產(chǎn)性能。應(yīng)根據(jù)妊娠母牛、犢牛各階段的營養(yǎng)需要，供給均衡的蛋白質(zhì)、能量、礦物質(zhì)、維生素、微量元素等營養(yǎng)。禁止飼喂霉?fàn)€變質(zhì)、酸度過大、冰凍和有毒的飼料。嚴(yán)格禁止驚嚇、踢打孕牛，注意孕牛不可以用劇瀉藥或注射引起子宮強烈收縮的藥物，每天保持適量的運動，防止過役或重役，減少流產(chǎn)。做好牛的免疫預(yù)防工作。為促進母牛產(chǎn)后發(fā)情，應(yīng)做好犢牛早期斷奶工作，一般母牛在產(chǎn)后60～80d母牛發(fā)情已正常，可以進行輸精配種，減少空懷，尤其原始種群若在產(chǎn)后營養(yǎng)缺乏以及環(huán)境惡化會明顯地抑制發(fā)情，這種情況在放牧飼養(yǎng)的母牛群中也很明顯。應(yīng)及時把握空懷母牛的發(fā)情時間適時輸精牛，若產(chǎn)后情期增加，則情期受胎率會降低［4］。另外，做好犢牛初生護理工作，犢牛出生后應(yīng)立即用干抹布將口鼻黏液擦干凈，用手把口鼻中的黏液摳出來，軀體上的黏液可以讓母牛舔干凈，犢牛臍帶剪掉后用5%的碘酒消毒以防感染。保證犢牛及時吃上初乳，時間越早越好，最好能在出生后半小時到2h內(nèi)喂給，促進胎糞的排出和增強機體免疫能力，提高產(chǎn)犢成活率。應(yīng)盡早開始補飼，訓(xùn)練犢牛采食干草和飼料，補料量應(yīng)隨日齡的增加而逐漸增加，以促進犢牛消化系統(tǒng)的發(fā)育，增強利用犢牛粗飼料的能力，應(yīng)保證供給犢牛充足的營養(yǎng)，提高其生長速度，以提高養(yǎng)牛經(jīng)濟效益［5］。

2 人工授精技術(shù)

2.1 使用優(yōu)良凍精

目前，人工授精主要使用冷凍精液進行輸精，因此需要優(yōu)良的冷凍精液，品質(zhì)優(yōu)良的精液是獲得高受胎率的基礎(chǔ)，解凍后凍精質(zhì)量須達到中華人民共和國頒布的《牛冷凍精液》GB4143—84國家標(biāo)準(zhǔn)。凡細菌菌落數(shù)超標(biāo)的凍精堅決不用。因此，為了增加對優(yōu)秀種公畜的利用率，常將精液進行處理延長精子在體外的存活時間和受精力，以便于保存和運輸。人們一直對對冷凍技術(shù)、精子生理特性研究的不斷深入，稀釋液的成分和加工工藝不斷完善，國內(nèi)外已經(jīng)出現(xiàn)專業(yè)化和商業(yè)化的凍精生產(chǎn)，然而稀釋液對精子冷凍效果有重要的影響。國內(nèi)外所用的凍精稀釋液有所不同，陸漢希［6］運用 WLJY－9000偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)系統(tǒng)地檢測了用國內(nèi)外稀釋液處理的精子質(zhì)量特征，發(fā)現(xiàn)國產(chǎn)自制的稀釋液可和國外進口的稀釋液相媲美，但在生產(chǎn)中應(yīng)注意攪拌的程度，使其達到充分的混勻，但清潔度不如國外的好。張茂華等人［7］研究發(fā)現(xiàn)進口稀釋液和國內(nèi)稀釋液對奶牛和肉牛冷凍精液的活率和畸形率影響不大，但是使用國內(nèi)稀釋液稀釋的奶牛和肉牛精液的頂體完整率顯著高于使用進口稀釋液稀釋的奶牛和肉牛精液的頂體完整率，受胎率較好。考慮到稀釋液中添加卵黃會對精子的產(chǎn)生不利的影響，MOUSSAA 等［8］、胡建宏等［9］發(fā)現(xiàn)利用抗低溫打擊能力強的低密度脂蛋白（LDL）可以代替卵黃在牛精子冷凍過程中的作用，其冷凍精液效果比商業(yè)用的稀釋液要好。OLLERO等［10］研究發(fā)現(xiàn)，維生素E是機體中重要的抗氧化劑，能提高精子頂體完整率和降低精子畸形率，且能提高凍精解凍后的精子活力。趙憲林等［11］研究發(fā)現(xiàn)在我國秦川牛精子稀釋液中添加維生素E顯著提高了冷凍精液解凍后的精子活力，精液品質(zhì)明顯得到改善。并且，在我國秦川牛精子稀釋液中維生素E的適宜添加量為每毫升添加為0.04mg～0.08mg。目前市場上有細管凍精和顆粒凍精兩種，孫建忠等人［12］對循化縣使用細管凍精和顆粒凍精的使用效果進行了研究，發(fā)現(xiàn)與顆粒冷凍精液相比，細管凍精的受胎率高，并且具有省時、省力、操作簡便，所用設(shè)施投入少等特點。目前，我國大型的種公牛站的凍精生產(chǎn)存在管理效率低，產(chǎn)品質(zhì)量難以控制的現(xiàn)象，鄧福金等人［13］運用計算機技術(shù)，建立種公牛冷凍精液生產(chǎn)管理系統(tǒng)，運用強大的數(shù)據(jù)庫，預(yù)防凍精生產(chǎn)過程中可能出現(xiàn)的各種差錯，通過計算機編程，優(yōu)化生產(chǎn)工藝流程，減少精液浪費，提高凍精生產(chǎn)能力。實現(xiàn)從鮮精采集到凍精儲存完整的可追溯性生產(chǎn)鏈，從而為優(yōu)良凍精生產(chǎn)提供合適的環(huán)境保障。

2.2 適時輸精

做好母牛的發(fā)情鑒定，適時輸精配種，可提高肉牛的受胎率和牛場的經(jīng)濟效益［14］。不同品種和同一品種不同個體肉牛的發(fā)情情況不同，就算是同一個體但在不同季節(jié)，母牛的發(fā)情情況也不一樣。牛的發(fā)情時間短、情況復(fù)雜，應(yīng)根據(jù)母牛生理特點正確掌握母牛性周期的規(guī)律，根據(jù)發(fā)情各階段的特點，及時發(fā)現(xiàn)發(fā)情母牛，摸清排卵規(guī)律，識別異常發(fā)情，準(zhǔn)確判定母牛發(fā)情所處時期從而掌握配種時間，適時輸精，防止誤配漏配，是提高牛人工授精受胎率的關(guān)鍵。牛的發(fā)情時間短、情況復(fù)雜，通過觀察發(fā)情行為、性興奮和外陰變化癥狀來判定發(fā)情與階段。然后進行直腸檢查；手伸進牛直腸，觸摸子宮角判斷其長短、粗細、質(zhì)地。觸摸卵巢，檢查卵泡大小、質(zhì)地、發(fā)育程度來確定牛發(fā)情及階段。

母牛適宜輸精時間在發(fā)情旺期的5～18h期間。母牛實行兩次輸精，受胎率較高。一般情況下，母牛的發(fā)情持續(xù)期為18h，母牛在發(fā)情結(jié)束后平均10～15h排卵，卵子存活時間為18～20h，精子進入受精部位約2～13h，精子在生殖道內(nèi)保持受精能力約24～50h，精子獲能時間需3～4h。首次輸精應(yīng)在發(fā)情旺期的5～8h，即當(dāng)母牛出現(xiàn)爬跨，陰戶腫脹并分泌透明黏液，哞叫時可以輸精，當(dāng)陰戶濕潤、潮紅、輕度腫脹，黏液開始較稀不透明時為最佳輸精時間。第二次輸精應(yīng)在間隔8～12h后進行。大多數(shù)母牛常在夜間排卵，因此生產(chǎn)中應(yīng)夜間輸精或清晨輸精。尤其在夏季應(yīng)避免氣溫高時輸精，以提高受胎率。對老弱母牛，發(fā)情持續(xù)期短，輸精配種時間應(yīng)適當(dāng)提前［4］。做到老配早、小配晚、不老不小配中間。

2.3 輸精方法

人工授精的輸精方法有兩種包括陰道開張器輸精法和直腸把握輸精法。生產(chǎn)中陰道開張器輸精法存在輸精部位潛，受胎率低的缺點，一般用于新鮮精液的輸精，不適于冷凍精液的輸精。

生產(chǎn)中一般用直腸把握法進行人工輸精，其具體操作為：將發(fā)情母牛保定在配種架內(nèi)，熟練時可不保定，將牛拴系于牛舍內(nèi)或樹樁上。輸精員左手戴一次性塑料長臂手套，外面淋潤滑劑，如肥皂、石蠟油等，側(cè)身站立于牛體后面，先用手撫摸肛門，五指并攏成錐狀，以緩慢旋轉(zhuǎn)的動作伸入直腸內(nèi)，排除積糞。助手用清水洗凈外陰部并擦干，也可用一次性吸水巾擦干；或用75%酒精消毒并擦干：然后助手站牛體側(cè)面用雙手拇指和食指各捏一半陰唇向上提拉，使輸精員清楚看到陰道口，待輸精員將輸精器插入后，用手抓住牛尾向一邊拉，以免影響輸精員輸精操作。輸精員用右手持輸精器以30°角度（與水平面）通過陰唇插入陰道，當(dāng)輸精器碰到陰道上壁時，再以水平角度向前輕而緩慢地插入，避開尿道口，然后將左手伸入直腸內(nèi)，沿前下方輕輕觸摸，找到子宮頸并捏住子宮頸陰道端（注意不要把握過前，造成子宮口游離下垂，使輸精器不易插入），這時開始兩手配合，右手把輸精器前端送到左手所捏部位，然后左右手配合搖動，避免輸精器停留在陰道穹隆，使輸精器前端進入子宮頸口，有時陰道壁可阻止輸精器插入，通過后移輸精器或把子宮頸前移再插入。左手前移繼續(xù)改變子宮頸方向，使輸精器越過褶壁輪，插入子宮頸深部5～8cm深的部位。讓助手或自己用右手將輸精器內(nèi)精液緩慢推出，隨即慢慢抽出輸精器。若精液推出受阻，可以將輸精器稍向后退，并將精液注入。輸精器撤出后，左手最好在直腸內(nèi)停留幾秒，對子宮頸進行按摩，可防止精液逆流。

肉牛場實際輸精操作時，牛只較多，應(yīng)將配種架固定于牛舍一端或中間，在固定牛時牛屁股下面的繩子應(yīng)低些，防止在授精操作時牛蹄踢傷人。在驅(qū)趕牛群時，可以拿根棍子，但不可抽打牛只，以防造成應(yīng)激使受胎率下降，可以將發(fā)情牛集中起來，一次對一批牛進行輸精，并由配種員做好配種記錄，在牛身上可以用油漆在牛身上打好標(biāo)記，以區(qū)別于未配母牛，然后將輸過精的牛趕到運動場，再進行下一批牛的輸精。在凍精解凍時要做到“三快”：快取、快投、快融解。解凍的溫度應(yīng)均勻穩(wěn)定。應(yīng)注意輸精器械衛(wèi)生，每輸一頭牛，應(yīng)按規(guī)程對輸精器材消毒。為防止污染，已消毒好的器材，不得與未消毒的手套、抹布等接觸。在生產(chǎn)過程中若遇到子宮頸較細，尤其是處女牛，往往不容易將輸精器插入，應(yīng)有耐心，要防止粗暴，不可用力過大，以免損傷陰道壁和子宮頸。若子宮頸難以插入，可以用消過毒的擴宮棒進行擴張。實在難以插入就應(yīng)放棄，不可對一只牛操作時間過長。在生產(chǎn)中應(yīng)確保將精液輸在正確的輸精部位。

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