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    水牛精液品質(zhì)的研究

    2014-12-15 06:54:06趙家才毛翔光馬燕茹王春蘭何永富
    中國牛業(yè)科學(xué) 2014年4期
    關(guān)鍵詞:摩拉射精水牛

    趙家才,毛翔光,馬燕茹,李 雯,王春蘭,何永富

    (云南省種畜繁育推廣中心凍精站,云南 昆明小哨650212)

    水牛是熱帶、亞熱帶地區(qū)特有的畜種,具有乳、肉、役多種用途,飼養(yǎng)方便,成本低。河流型水牛適應(yīng)性好,生產(chǎn)性能優(yōu)良,具有體型較大,生產(chǎn)性能優(yōu)良,奶質(zhì)好,抗病力強(qiáng)等特點(diǎn)。摩拉水牛成年體重:公牛平均969kg、母牛平均647kg;尼里水牛成年體重:公牛平均800.0kg、母牛平均600kg[1];榔江水牛公牛36月齡體重709.5±34.65kg,12月齡平均體重達(dá)255±32.53kg。對河流型水牛精液質(zhì)量研究,目的在于提高其冷凍精液質(zhì)量,提高冷凍精液受胎率,充分發(fā)揮河流型水牛優(yōu)良的遺傳資源。

    1 材料和方法

    1.1 種公牛的來源

    我站先后從廣西水牛研究所引進(jìn)摩拉水牛和尼里水牛;2008年5月從騰沖縣引進(jìn)兩頭檳榔江水牛,檳榔江水牛(Bos bubalus)是我國發(fā)現(xiàn)的唯一的河流型水牛(2n=50),2008年已通過遺傳資源審定,2009年入選國家奶水牛良種補(bǔ)貼項(xiàng)目提供冷凍精液。摩拉水牛,尼里水牛和檳榔江水牛在云南省種畜繁育推廣中心凍精站飼養(yǎng)和生產(chǎn)冷凍精液。

    1.2 種公牛的調(diào)教與日常管理

    1.2.1 種公牛的飼養(yǎng)管理 水牛引進(jìn)經(jīng)隔離檢疫后實(shí)行單圈飼養(yǎng)選派責(zé)任心強(qiáng),經(jīng)驗(yàn)豐富的飼養(yǎng)員管理。定時(shí)定量飼喂,不飼喂霉?fàn)€變質(zhì)的飼草飼料,自由飲水,飲水保持清潔,運(yùn)動(dòng)場自由運(yùn)動(dòng),日糧結(jié)構(gòu)為:混合精料,成年公牛供給4~5kg,育成公牛供給3~4kg;粗飼料:常年飼喂羊草8~10kg;夏秋季飼喂羊草6~8kg,人工混播牧草30~50kg。保持牛體和圈舍清潔舒適,日常加強(qiáng)公牛肢蹄的護(hù)理和保健,定期免疫、驅(qū)蟲和環(huán)境消毒。

    1.2.2 公牛的調(diào)教與采精方法 水牛用假陰道法采精[2]待公牛性興奮強(qiáng)烈,爬跨臺(tái)畜,陰莖勃起充分時(shí)把陰莖導(dǎo)入假陰道公牛即可射精。假陰道采精時(shí),假陰道內(nèi)胎溫度為40~42℃,假陰道壓力和潤滑度適當(dāng)。采精時(shí)采精員要注意人畜安全、沉著冷靜、膽大心細(xì)、操作熟練、自然,讓公牛陰莖自主探尋插入假陰道,避免不良刺激造成公牛不快,防止形成惡癖,不利于正常采精,公牛射精后移開假陰道收集精液送入實(shí)驗(yàn)室處理。

    1.3 水牛精液品質(zhì)的檢測方法和指標(biāo)

    水牛精液品質(zhì)的檢測按照牛冷凍精液標(biāo)準(zhǔn)(GB4143-2008)及生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程進(jìn)行檢測,測定公牛的射精量、原精活力、原精精子密度、冷凍精液解凍活力和畸形率。

    1.4 水牛冷凍精液的制作流程

    采集的水牛精液,經(jīng)質(zhì)量檢測后,凡原精活力65%以上、精子密度為6.0億/mL以上其他指標(biāo)無異常的精液,在等溫條件下用冷凍稀釋液稀釋,稀釋后的水牛精液用MRS-3型塑料細(xì)管分裝噴字一體機(jī)進(jìn)行分裝、封口和噴字,分裝后的細(xì)管精液溫度降至室溫時(shí)放入+4℃的冰箱中持續(xù)降溫平衡4h,平衡后的細(xì)管精液在低溫操作柜中水平放于冷凍架上,然后用程控冷凍儀冷凍;最后把冷后的細(xì)管冷凍精液浸入液氮中,隨機(jī)抽樣解凍,解凍溫度為40±2℃,檢查解凍活力和畸形率,冷凍精液解凍活力35%以上,其他指標(biāo)均合格者入庫保存和使用。

    1.5 數(shù)據(jù)來源和處理方法

    數(shù)據(jù)來源于2008年至2013年的水牛采精記錄,用生物統(tǒng)計(jì)法對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析[3]。2月初至5月初為春季,5月初至8月初為夏季,8月初至11月初為秋季,11初至2月初為冬季。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 水牛原精液品質(zhì)

    摩拉水牛公牛的射精量為5.1±2.37mL(n=2688)、精子密度為7.8±3.68億/ml、原精活力57.4±16.42%;尼里水牛公牛的射精量為5.3±1.99mL(n=1370)、精子密度為8.4±3.54億/mL、原精活力62.7±12.51%;檳榔江水牛公牛的射精量為5.6±2.26mL(n=271)、精子密度為8.6±5.13億/mL、原精活力65.2±9.19%。

    2.2 水牛冷凍精液品質(zhì)

    水牛精液經(jīng)稀釋、分裝、平衡和冷凍解凍以后,解凍活力達(dá)到0.35以上,牛冷凍精液國家標(biāo)準(zhǔn)按(GB 4143—2008)要求的冷凍精液才能保存使用,摩拉牛精液報(bào)廢率為37.20%,尼里水牛精液報(bào)廢率為32.51%,檳榔江水牛精液報(bào)廢率為12.92%。摩拉水牛冷凍精液解凍活力平均36.0±2.13%(n=1680),畸形率為20.62±11.04%(n=873);尼里水牛冷凍精液解凍活力平均36.5±2.43%(n=1102),畸形率為15.2±5.71%(n=481);檳榔江水牛冷凍精液解凍活力平均37.2±2.48%(n=239),畸形率為19.6±6.08%(n=110)。

    2.3 不同品種水牛精液品質(zhì)分析

    水牛24~30月齡開始試采精,試采精初期(30月齡以前)每兩周采精一次,30~36月齡后,每周采精兩次。水牛精液品質(zhì)和精子冷凍解凍活力及畸形率詳見表1、表2、表3、表4、表5、表6和表7。

    表1 不同品種水牛凍精畸形率比較表

    表1的結(jié)果分析得出:春季尼里水牛冷凍精液解凍后畸形率極顯著(P<0.01)低于摩拉水牛和檳榔江水牛,摩拉水牛與檳榔江水牛間的差異不顯著;夏季尼里水牛冷凍精液解凍后畸形率極顯著(P<0.01)低于摩拉水牛和檳榔江水牛,摩拉水牛與檳榔江水牛間的差異顯著(P<0.05);秋季尼里水牛冷凍精液解凍后畸形率極顯著(P<0.01)低于摩拉水牛和檳榔江水牛,摩拉水牛與檳榔江水牛間的差異不顯著;冬季尼里水牛冷凍精液解凍后畸形率極顯著(P<0.01)低于摩拉水牛和檳榔江水牛,摩拉水牛與檳榔江水牛間的差異不顯著。

    表2 不同品種水牛射精量比較表

    表2的結(jié)果分析得出:春季摩拉水牛、檳榔江水牛和尼里水牛射精量差異均不顯著(P>0.05);夏季摩拉水牛和尼里水牛射精量均極顯著(P<0.01)低于檳榔江水牛,摩拉水牛和尼里水牛差異不明顯;秋季摩拉水牛射精量顯著低于尼里水牛(P<0.05),摩拉水牛和檳榔江水牛射精量的差異不明顯,尼里水牛與檳榔江水牛射精量差異亦不明顯(P>0.05);冬季摩拉水牛射精量顯著低于尼里水牛(P<0.05),摩拉水牛和檳榔江水牛射精量的差異不明顯,尼里水牛與檳榔江水牛射精量差異亦不明顯(P>0.01)。

    表3 不同品種水牛原精活力比較表

    表3的結(jié)果得出:春季摩拉水牛原精活力極顯著低于尼里水牛和檳榔江水牛(P<0.01),尼里水牛和檳榔江水牛間差異不顯著;夏季摩拉水牛原精活力極顯著低于檳榔江水牛(P<0.01),顯著低于尼里水牛(P<0.05),尼里水牛和檳榔江水牛間的差異不顯著;秋季摩拉水牛、尼里水牛和檳榔江水牛間原精活力差異均不明顯;冬季摩拉水牛原精活力極顯著(P<0.01)低于尼里水牛和檳榔江水牛,尼里水牛和檳榔江水牛間差異不顯著。

    表4 不同品種水牛精子密度比較表

    表4的結(jié)果同理得出:春季摩拉水牛和尼里水牛精子密度極顯著(P<0.01)低于檳榔江水牛,摩拉水牛和尼里水牛間精子密度不顯著(P>0.05);夏季尼里水牛精子密度極顯著(P<0.01)高于檳榔江水牛,顯著(P>0.05)高于摩拉水牛,摩拉水牛和檳榔江水牛間差異不明顯(P>0.05);秋季摩拉水牛、尼里水牛和檳榔江間精子密度差異不明顯(P>0.05);冬季尼里水牛和摩拉水牛精子密度極顯著(P<0.01)低于檳榔江水牛,摩拉水牛和尼里江水牛間差異不顯著。

    表5 不同品種水牛不同季節(jié)精子解凍活力比較表

    表5的結(jié)果得出:春季摩拉水牛冷凍精液解凍活力極顯著低于尼里水牛和檳榔江水牛,摩拉水牛冷凍精液解凍活力極顯著低于尼里水牛(P<0.01);夏季摩拉水牛和尼里水牛冷凍精液解凍活力極顯著(P<0.01)低于檳榔江水牛,摩拉水牛和尼里水牛冷凍精液解凍活力不顯著(P>0.05);秋季摩拉水牛和尼里水牛冷凍精液解凍活力極顯著低于檳榔江水牛,摩拉水牛冷凍精液解凍活力極顯著低于尼里水牛(P<0.01);冬季尼里水牛冷凍精液解凍活力顯著高于摩拉水牛和檳榔江水牛(P<0.05),摩拉水牛和檳榔江水牛間差異不顯著(P>0.05)。

    表6 不同月齡水牛精液品質(zhì)分析比較

    表7 不同年度水牛精液品質(zhì)分析比較表

    3 討論與小結(jié)

    公牛不同個(gè)體間、不同品種間、不同季節(jié)、不同年齡原精活力、凍精解凍活力、采精量和精子密度存在差異,部分公牛精液品質(zhì)低,個(gè)別公牛精子耐凍性差,這與王英群[4]報(bào)道相一致,水牛精子畸形率比較高,尼里水牛冷凍精液精子畸形率及顯著低于摩拉水牛,采精量較低。種公牛精液品質(zhì)的變化隨不同的采精年度,飼養(yǎng)管理水平和種公牛月齡的變化而變化,種公牛個(gè)體間的差異極為明顯,公牛射精量與精子密度呈負(fù)相關(guān)。

    3.1 季節(jié)對水牛精液品質(zhì)的影響

    雖然水牛是常年多次發(fā)情的動(dòng),但它們的繁殖效率在一年當(dāng)中的不同季節(jié)表現(xiàn)出很大的差異[5]。云南屬亞熱帶和熱帶高原季風(fēng)氣候,以亞熱帶氣候分布較廣,緯度較低,海拔較高,年溫差小,日溫差大,干濕季分明,但日照時(shí)間的季節(jié)變化明顯。水牛射精量、原精活力、精子密度、精子畸形率和冷凍精液解凍活力隨季節(jié)的節(jié)律變化而發(fā)生一定的變化。摩拉水牛,泥里水牛和檳榔江水牛精子畸形率夏季和秋季低于冬季和春季;摩拉水牛和檳榔江水牛射精量夏季和秋季較高,均高于冬季和春季,尼里水牛射精量秋季和冬季較高;原精活力摩拉水牛夏季和秋季較高,尼里水牛春季和秋季較高,檳榔江水牛秋季和冬季較高;精子密度摩拉水牛和尼里水牛夏季和秋季較高,檳榔江水牛春季和冬季較高;凍精解凍活力摩拉水牛和尼里水牛秋季和冬季較高,檳榔江水牛夏秋季較高。

    3.2 品種對精液品質(zhì)的影響

    尼里水牛冷凍精液解凍精子畸形率最低,摩拉水牛最高;檳榔江水牛原精活力、精子密度、冷凍精液解凍活力和射精量均高于摩拉水牛和尼里水牛,摩拉水牛最低,這與王英群[4]報(bào)道不一致。

    3.3 種公牛月齡對精液品質(zhì)的影響

    處于不同月齡的種公牛其精液品質(zhì)差異較大,采精量,原精活力和冷凍精液解凍活力隨月齡的增加而有所增加,精子密度則呈下降趨勢,61至84月齡射精量、原精活力和解凍活力較高,30至36月齡射精量最低,差異極顯著;61至84月齡精子密度最低,30至36月齡精子密度最高,差異極顯著,37至72月齡時(shí)比較穩(wěn)定。

    3.4 采精年度對種公牛精液品質(zhì)的影響

    不同的采精年度種公牛精液品質(zhì)具有不同的差異,2011年度射精量最高,2008和2009年度最低,原精活力2012年度最高,2008年度最低,精子密度2010年度最高,2013年度最低,冷凍精液解凍活力2013和2012年度最高,2009年度最低.2013年原精活力較低,試采精青年公牛比例較高,部分青年公牛原精精子活力低,報(bào)廢率高。2010年部分公牛每個(gè)采精日采精兩次,第一次和第二次采精間隔時(shí)間30~40min,對精液品質(zhì)無不良影響。

    總之,河流型水牛精液品質(zhì)較好,精子冷凍復(fù)蘇率高,解凍活力好,冷凍效果穩(wěn)定,種公??梢猿D赀B續(xù)采精。水牛品種、不同季節(jié)、個(gè)體和年度因素等對精液品質(zhì)具有影響。不同品種水牛精液品質(zhì)存在差異,檳榔江水牛精液品質(zhì)優(yōu)于尼里水牛和摩拉水牛。不同公牛個(gè)體間存在明顯差異,個(gè)別公牛精子活力極低,精子畸形率較高,有的生精微弱,往往終生都難于改變,精液品質(zhì)差的公牛應(yīng)及時(shí)淘汰。,水牛精液品質(zhì)隨季節(jié)的變化而發(fā)生一定程度的改變,極端天氣對公牛精液品質(zhì)具有明顯影響(在昆明的氣候環(huán)境下),導(dǎo)致大部分公牛精液活力大幅下降。不同年度由于受飼料供給、飼養(yǎng)管理、飼養(yǎng)方式、種公牛年齡結(jié)構(gòu)等因素的影響,精液品質(zhì)發(fā)生變化。水牛性成熟較晚,但也可適當(dāng)提早采精利用,摩拉水牛和尼里水牛一般30月齡可試采精,部分公牛在24月齡即能試采精,精液品質(zhì)良好。檳榔江水牛為地方品種,適應(yīng)性較強(qiáng),耐粗飼,主要生活在海拔較低的低熱河谷地帶,但在海拔500~2000m的地區(qū)也能正常生長繁殖,性成熟較早,24月齡即能順利采集到精液,可比摩拉水牛和尼里水牛提早6至12月齡采精。本研究未考慮疾病、應(yīng)激、飼養(yǎng)管理、采精和精液處理等因素對公牛精液品質(zhì)的影響,要進(jìn)一步加強(qiáng)水牛冷凍精液技術(shù)和機(jī)理的研究特別是水牛精子畸形率偏高的機(jī)理是目前亟待解決的課題。

    [1] 王根林.養(yǎng)牛學(xué)[J].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2000:9.

    [2] 趙家才.三種采精方法在種公牛上的應(yīng)用效果分析 [J].黃牛雜志,2001,27(1):48-50.

    [3] 明道緒.生物統(tǒng)計(jì)附試驗(yàn)設(shè)計(jì)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2004.

    [4] 王英群.河流型不同品系種公牛精液品質(zhì)的差異分析[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘,2012,28(11).

    [5] Antonio Borghese著 .世界水牛生產(chǎn)與研究進(jìn)展[M].趙開典,毛翔光,雷衡等編譯.昆明:云南出版集團(tuán)公司云南科技出版社,2012.12

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