3種丙肝病毒檢測方法在丙型肝炎診斷和療效監(jiān)測中的臨床價值

鄧兆享

(武警廣東省邊防總隊醫(yī)院,廣東 深圳 518029)

3種丙肝病毒檢測方法在丙型肝炎診斷和療效監(jiān)測中的臨床價值

鄧兆享

(武警廣東省邊防總隊醫(yī)院,廣東 深圳 518029)

目的 探討HCV-cAg、HCV-Ab和HCV RNA在丙型肝炎診療中的臨床價值，并分析HCV-cAg和HCV RNA的相關(guān)性。方法 采用ELISA法和RT-PCR法檢測221例疑似丙肝患者血清HCV-cAg、HCV-Ab和HCV RNA含量。結(jié)果 單個方法檢測時其陽性率分別為HCV RNA 47.5%、HCV-cAg 48.4%、HCV-Ab 84.1%，聯(lián)合檢測時其陽性率分別為HCV-Ab+HCV-cAg 98.2%、HCV-Ab+HCV RNA 97.7%；HCV-cAg檢測的敏感性為91.4%，特異性為90.5%，且與HCV RNA的相關(guān)系數(shù)r=0.997；當(dāng)HCV-cAg 的S/CO≥3時，與HCV RNA陽性的符合率為98.8%。結(jié)論 HCV-Ab聯(lián)合HCV-cAg或者HCV RNA檢測比單項檢測陽性率更高(P均<0.05),可防止窗口期丙肝患者漏診； HCV-cAg出現(xiàn)早且和HCV RNA的相關(guān)性高，可用于窗口期丙肝患者的篩查和療效監(jiān)測，但是不可以作為停藥治療的指標,當(dāng)其S/CO≥3時可作為判斷丙肝感染較可靠的指標。

丙型肝炎；丙型肝炎病毒；HCV-cAg；HCV-Ab；HCV RNA

丙型肝炎病毒(HCV)是嚴重威脅人類健康的傳染病之一，全球約有1億人感染,我國的感染率約為3.2%。丙肝患者大部分是通過血液和血制品感染，因此實驗室對丙肝的早期篩查顯得尤為重要。目前實驗室診斷丙肝的主要方法為檢測丙肝病毒抗體(HCV-Ab)和丙肝病毒核酸(HCV RNA)。近些年來丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)的檢測越來越引起人們的重視[1-3]。本研究將用HCV-cAg、HCV-Ab和HCV RNA 3種方法對221例臨床疑似丙肝患者血清進行檢測，評價3種方法在丙型肝炎的診斷和療效監(jiān)測中的臨床價值以及探索提高丙肝診斷效率的方法，并對HCV-cAg和HCV RNA的相關(guān)性進行分析?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 收集2011年5月—2013年11月我院門診和住院患者中疑似丙肝的患者血清221份，并將血清置于-20 ℃冰凍保存。其中男127例，女94例；年齡16～78(45.2±23.1)歲。

1.2 主要儀器 HCV RNA檢測儀器為ABI7500熒光定量分析儀(RT-PCR)，HCV-Ab和HCV-cAg的檢測儀器為尤瑞納斯150全自動酶免分析儀。

1.3 試劑 HCV-Ab試劑來源于英科新創(chuàng)，HCV-cAg試劑來源于湖南康潤，HCV RNA核酸擴增PCR熒光檢測試劑盒來源于湖南圣湘，質(zhì)控品來源于衛(wèi)生部臨檢中心，所有試劑和質(zhì)控品均在有效期內(nèi)。

1.4 方法 HCV-Ab和HCV-cAg檢測用ELISA法，采用尤瑞納斯150全自動酶免分析儀進行檢測，所得到的結(jié)果為吸光度值與臨界值之比，用S/CO表示，所有陽性結(jié)果均需二次復(fù)查；HCV RNA用RT-PCR分析儀檢測，嚴格進行操作，所得結(jié)果單位用IU/mL表示。

1.5 結(jié)果判定 HCV-Ab和HCV-cAg的S/CO≥1為陽性，S/CO<1為陰性；HCV RNA≥500IU/mL為陽性，HCVRNA<500 IU/mL為陰性。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 用SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行分析，相關(guān)系數(shù)用r表示，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 3種方法檢測丙肝的結(jié)果比較 用3種方法單獨檢測時的陽性率分別是HCV RNA 47.5%，HCV-cAg 48.4%，HCV-Ab 84.1%。若將HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-Ab、HCV RNA 2種方法聯(lián)合檢測，則得到的陽性率分別為98.2%(217/221)和97.7%(216/221)。107例HCV-cAg陽性結(jié)果中HCV RNA的陽性符合率為89.7%。47例HCV-Ab結(jié)果為弱陽性和35例HCV-Ab為陰性標本中HCV RNA的陽性率分為46.8%和85.7%。見表1。

表1 3種方法檢測丙肝的結(jié)果比較 例

2.2 HCV-cAg和HCV-RNA檢測結(jié)果的相關(guān)性分析 有11例標本HCV-cAg檢測結(jié)果為陽性而HCV RNA結(jié)果呈陰性，有9例標本HCV cAg結(jié)果為陰性而HCV RNA結(jié)果呈陽性,當(dāng)以HCV RNA診斷的結(jié)果為標準時，HCV-cAg檢測的敏感性為91.4%,特異性為90.5%,與HCV RNA的符合率為91%。當(dāng)HCV RNA的濃度值(IU/mL)在500～103，103～104，104～106和>106時，HCV-cAg的陽性率分別為70.6%，85.7%，94.4%和100%，隨著HCV RNA濃度的升高，HCV-cAg的陽性率也在增加。經(jīng)相關(guān)性分析，2種檢測方法的相關(guān)系數(shù)r=0.997，說明2種檢測方法顯著相關(guān)。當(dāng)HCV-cAg 的S/CO值為≥3，2～3和1～2時與HCV RNA陽性的符合率分別為98.8%，80%和52.9%。 見表2。

表2 HCV RNA在不同濃度的情況下與HCV-cAg吸光度值的關(guān)系 例

3 討 論

目前HCV-Ab 檢測多采用第三代技術(shù)，具有了更高的特異性,但是由于各廠家所包被的抗原質(zhì)量和抗原片段比例不同導(dǎo)致HCV-Ab檢測結(jié)果不一致[4]。本研究HCV-Ab結(jié)果為弱陽性和陰性標本中HCV RNA的陽性率分別為46.8%和85.7%，這是因為人體感染丙肝病毒約70 d后才能在血清中檢測到HCV-Ab[5],所以窗口期的患者無法檢測到HCV-Ab ，還有些免疫缺陷患者則要12個月才能檢測到抗體，部分免疫缺陷和免疫功能紊亂的患者感染 HCV后也無法檢測到HCV-Ab，且大部分經(jīng)過治療后處于靜止期的丙肝患者其檢測結(jié)果也為陽性。所以僅檢測HCV-Ab容易漏診窗口期患者，且不能反映丙肝病毒的活動情況。

HCV RNA陽性是病毒感染和復(fù)制的直接標志，是診斷HCV感染的金標準[6],可在患者感染HCV后1～2周內(nèi)檢測出[7]。HCV-cAg的出現(xiàn)時間比HCV-Ab要早5～7 周,且比HCV RNA晚1～2 d[8]，所適合于感染丙肝病毒后的14～80 d進行檢測。本組研究顯示當(dāng)以HCV RNA檢測為標準時，HCV-cAg檢測的敏感性為91.4%,特異性為90.5%。這與文獻[9]結(jié)果相似。本研究中HCV-cAg 陽性樣品中HCV RNA陽性率為89.7%，這比Ergunay等[10]報道的81.3%稍高。若將HCV-Ab與HCV-cAg或HCV RNA兩種方法聯(lián)合檢測時其陽性率分別為98.2%和97.7%，與單獨檢測HCV-Ab的陽性率性84.1%比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義,這與李育芬等[11]研究相似。

本研究還顯示，隨著HCV RNA濃度的增加，HCV-cAg的陽性率也在增加，兩者的相關(guān)系數(shù)r=0.997，表明2種方法顯著相關(guān)，這與Vermehren等[3]的報道相似。當(dāng)HCV RNA的濃度值>106IU/mL時，HCV-cAg檢測的靈敏度為100%，這與Veillon等[12]的報道的結(jié)果相同；HCV RNA的濃度值在500～103IU/mL時HCV-cAg的陽性率為70.6%，此外還有11例HCV-cAg結(jié)果呈陽性而HCV RNA結(jié)果呈陰性，說明HCV-cAg的靈敏度和特異性還有待提高；當(dāng)HCV-cAg 的S/CO值≥3時與HCV RNA陽性的符合率為98.8%，所以在實驗過程中可以將HCV-cAg 的S/CO值為3作為判斷HCV感染較可靠的指標，這比楊杰等[13]將S/CO值為2時作為有判斷點要高。

本研究發(fā)現(xiàn)HCV-Ab和HCV-cAg結(jié)果為陽性而HCV RNA結(jié)果為陰性的標本有6例，HCV-Ab和HCV-cAg結(jié)果為陰性而HCV RNA結(jié)果為陽性的有4例,有可能是因為丙肝RNA病毒容易被血細胞的RNA酶降解且易與血中脂質(zhì)及脂蛋白結(jié)合造成結(jié)果呈假陰性，也可能因為患者體內(nèi)免疫條件變化、藥物或者試劑和操作等原因造成的漏診或者誤診，所以3種方法均有其局限性。

綜上所述，聯(lián)合檢測HCV RNA、HCV-Ab或HCV-Ab、HCV-cAg可提高丙肝檢測的敏感性和特異性，防止窗口期患者漏診；HCV-cAg與HCV RNA的相關(guān)性高，可將HCV-cAg 的S/CO值≥3作為判斷丙肝感染的較可靠標準；在基層醫(yī)院可將HCV-cAg代替HCV RNA對窗口期丙肝患者進行篩查和療效監(jiān)測，但是不可以作為停藥的標準。

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1008-8849(2014)34-3854-03

2014-01-03