袋式培養(yǎng)在劍麻組培苗生產(chǎn)中的應(yīng)用

揭進(jìn)　李強(qiáng)有　張曼其等

摘 要 利用塑料薄膜袋代替玻璃瓶的袋式培養(yǎng)劍麻組培苗，降低了容器一次性投入的78.3 %，免去玻璃瓶的存儲(chǔ)倉(cāng)庫(kù)和玻璃瓶的搬運(yùn)、清洗等費(fèi)用。培養(yǎng)基節(jié)約33.3 %，配制與消毒人工費(fèi)節(jié)約40 %，消毒效率提高2.08倍，培養(yǎng)空間利用率提高46.8 %以上，接種效率提高12.5 %，組琣苗污染率降低7.1 %以上，生根苗的移栽成活率提高7.6 %以上，組培苗的出苗效率和運(yùn)輸效率提高2倍以上。

關(guān)鍵詞 劍麻 ；薄膜袋 ；袋式培養(yǎng) ；瓶式培養(yǎng) ；應(yīng)用 ；效率

中圖分類號(hào) S563.8

Abstract Bag-type tissue culture of using plastic film bags instead of glass bottles in sisal tissue culture， reduce 78.3% of the container one-time investment， free the glass storage warehouses and eliminate the bottle handling， cleaning and other expenses. The results show that， saving 33.3% medium， preparation and disinfection labor cost savings 40%， disinfection efficiency by 2.08 times， culture space utilization increased by 46.8% or more， the inoculation efficiency increased by 12.5%， tissue culture seedlings contamination rate decreased by 7.1% or more， rooting shift planting survival rate increased by 7.6% or more， tissue culture seedlings production efficiency and transport efficiency improved by 2 times or more.

Key words sisal ； plastic film bags ； bag-type tissue culture ； bottle-type tissue culture ； application ； efficiency

玻璃瓶已經(jīng)在組培工廠中廣泛用作培養(yǎng)容器，如各種大小的果醬瓶、廣口瓶、牛奶瓶等；在一些名貴花卉的組培生產(chǎn)中，也多有采用PVC材料培養(yǎng)瓶，這些容器的優(yōu)點(diǎn)有：便于操作，空間大，氣體條件好，較利于植物的生長(zhǎng)[1]。但PVC材料價(jià)格較貴，致使成本較高；玻璃制品易破損，不便于運(yùn)輸；在組培中常使用硼硅酸鈉玻璃容器，鈉玻璃對(duì)某些植物材料組織可能有毒，重復(fù)使用更加明顯。

近幾年，在國(guó)內(nèi)外流行一種新型的耐高溫、高壓的高分子聚丙烯透明塑料袋，作為培養(yǎng)容器使用在植物組織培養(yǎng)上（亦稱袋式培養(yǎng)）。它具有占用空間少、滅菌能耗低、便于運(yùn)輸?shù)戎T多優(yōu)點(diǎn)，從而可提高育苗效率，降低生產(chǎn)成本。1996-1997年，廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所在國(guó)內(nèi)率先將該技術(shù)成功應(yīng)用到香蕉的生根培養(yǎng)階段[2]。至今該技術(shù)已在香蕉、木瓜、石斛、紅掌等植物組培快繁上的生根培養(yǎng)階段研究應(yīng)用[1-6]，并以廣東、廣西、海南等地香蕉組培生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)用較多。目前，該技術(shù)還未有在劍麻組培中應(yīng)用的研究，更未在啟動(dòng)與增殖培養(yǎng)階段上研究與應(yīng)用。2009年10月，筆者開始嘗試將該技術(shù)應(yīng)用在劍麻組培中，到2013年9月，成功地將該技術(shù)應(yīng)用到劍麻組培苗包括啟動(dòng)、增殖和生根的全培養(yǎng)階段上，并使用該技術(shù)生產(chǎn)了560萬(wàn)株優(yōu)質(zhì)劍麻組培苗，其中出口到印尼65萬(wàn)株，取得了良好的效果與經(jīng)濟(jì)效益。

1 材料與方法

1.1 材料

供試的劍麻品種為東1號(hào)；包裝容器有：200 mL果漿玻璃瓶，12 cm×13 cm壁厚為0.06 mm、透光率為90 %的耐高溫高分子薄膜制成薄膜培養(yǎng)袋，常規(guī)組織培養(yǎng)所需的器材。由于薄膜袋薄而軟，在培養(yǎng)基分裝后難以固定，因此需要先用保鮮盒或方底牛皮紙袋包裝，才能放入高壓滅菌鍋消毒，同時(shí)也可防止滅菌后的培養(yǎng)基污染。保鮮盒的長(zhǎng)寬高一般為22 cm×16 cm×10 cm，四周和底部均勻鉆開約16-18個(gè)鉛筆大小的小孔；牛皮紙袋為底長(zhǎng)15 cm、底寬10 cm、高22 cm的頂部開口的方盒袋。

1.2 方法

按常規(guī)方法配制好培養(yǎng)基后，分裝入2種不同的培養(yǎng)容器中。使用玻璃瓶作培養(yǎng)容器方式（簡(jiǎn)稱瓶式）的，按常規(guī)方法分裝；使用薄膜袋作培養(yǎng)容器方式的，先將袋口搓開，用橡皮膠管進(jìn)行灌裝，將膠管引入袋底注入適量培養(yǎng)基（一般為20-25 mL），注意培養(yǎng)基不沾袋口，以免日后引起污染。分裝過(guò)程中應(yīng)不時(shí)地?cái)嚢璐盅b的培養(yǎng)基，使分裝的培養(yǎng)基均勻。將分裝好袋的袋口向上排放入保鮮盒內(nèi)，蓋上盒蓋；使用牛皮紙袋包裝的，則將紙袋口折疊后用夾子夾緊。培養(yǎng)基在壓力為1.1 kg/cm2、溫度為121 ℃的條件下滅菌25-30 min。取出后在無(wú)菌狀態(tài)下用常規(guī)方法接種不同培養(yǎng)階段的劍麻組培苗材料，玻璃瓶擰緊瓶蓋，薄膜袋容器用封口機(jī)進(jìn)行密封。袋式增殖材料的繼代轉(zhuǎn)接的袋口打開方法，采用經(jīng)酒精消毒的剪刀剪開袋口的辦法。

2種方式的培養(yǎng)基接種后，啟動(dòng)與增殖的材料及時(shí)擺放到培養(yǎng)室培養(yǎng)架上進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)室的培養(yǎng)條件為溫度（26±2） ℃、相對(duì)濕度40 %-60 %、光照強(qiáng)度為1 500-2 000 lx，光照10-12 h/d；袋式生根材料直接擺放到煉苗室進(jìn)行邊促根邊煉苗的培養(yǎng)，瓶式生根材料按常規(guī)方法先擺放在培養(yǎng)室培養(yǎng)架上培養(yǎng)20 d，再搬運(yùn)擺放到薄膜煉苗棚（室）進(jìn)行煉苗。煉苗棚（室）的培養(yǎng)條件為：溫度（25±3） ℃、相對(duì)濕度40 %-60 %、自然光照。

2 結(jié)果與分析

2.1 一次性投入成本的比較

一個(gè)玻璃瓶（含瓶蓋）的批發(fā)價(jià)格為0.8元，按生產(chǎn)100萬(wàn)株劍麻組培苗計(jì)，約需12萬(wàn)個(gè)，共9.6萬(wàn)元；而薄膜袋分別為0.026元，約需80萬(wàn)只，共2.08萬(wàn)元。生產(chǎn)同等數(shù)量的劍麻組培苗，袋式培養(yǎng)容器的投入成本只有玻璃瓶的21.7 %，降低了容器一次性投入的78.3 %。此外，袋式培養(yǎng)還免去玻璃瓶的存儲(chǔ)倉(cāng)庫(kù)，如堆放1萬(wàn)個(gè)玻璃瓶約需15-20 m3空間，而同樣數(shù)量的薄膜袋僅需0.1 m3的空間。而且袋式容器存取方便，不存在玻璃瓶每年5 %-10 %的使用損耗問題，同時(shí)免除了玻璃瓶的搬運(yùn)、清洗等費(fèi)用。這對(duì)生產(chǎn)中資金的有效使用及綜合成本的降低意義較大。

2.2 培養(yǎng)基配制、消毒和接種用工效率的比較

從表1中可以看出袋式培養(yǎng)是以培養(yǎng)溝的形式裝入培養(yǎng)基，單位容器只需裝22 mL就可達(dá)瓶式常規(guī)裝入30 mL時(shí)所達(dá)到的高度，每單位節(jié)省10 mL培養(yǎng)基，如按每毫升培養(yǎng)基成本0.006元計(jì)，每單位容器袋培所用培養(yǎng)基就比瓶式培養(yǎng)節(jié)約0.6元，培養(yǎng)基可節(jié)約33.3 %（表1）。

滅菌鍋每鍋可消毒薄膜袋1 350袋、玻璃瓶650個(gè)，按可接種苗數(shù)計(jì)算，塑料薄膜袋的消毒效率比玻璃瓶提高2.08倍。袋式培養(yǎng)基滅菌消毒的電費(fèi)為0.013元/袋，瓶式為0.023元/瓶，袋式可節(jié)約43 %消毒電費(fèi)。另外可節(jié)約配制與消毒人工費(fèi)40 %。

在接種操作上，每個(gè)熟練工人平均每小時(shí)可接種組培瓶40個(gè)，共400株芽苗，薄膜袋45個(gè)，共450株芽苗，袋式代替瓶式操作，接種數(shù)增加12.5 %。

結(jié)果表明，袋式培養(yǎng)基的配制、消毒效率效果顯著，提高了接種效率，這在劍麻組培苗大規(guī)模生產(chǎn)中，提高生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本顯得十分重要。

2.3 培養(yǎng)空間利用狀況的比較

培養(yǎng)室內(nèi)通常使用架層規(guī)格為150 cm×60 cm的5層培養(yǎng)架，每架層排放的培養(yǎng)瓶數(shù)量，瓶式采用單層擺放可擺放128個(gè)，雙層擺放225個(gè)，100 m2培養(yǎng)室分別擺放玻璃培養(yǎng)瓶數(shù)2.7、4.7萬(wàn)個(gè)。而培養(yǎng)袋容器的底面呈長(zhǎng)條形，擺放時(shí)可很好地利用空間，每層可排放與培養(yǎng)瓶單位材料數(shù)相同的袋培容器330袋，100 m2培養(yǎng)室可擺放6.9萬(wàn)個(gè)（見表2）。袋式培養(yǎng)空間利用率比單層擺放的瓶式提高了155.6 %，比雙層擺放的瓶式利用提高了46.8 %。袋式培養(yǎng)大幅度節(jié)省了培養(yǎng)空間，相應(yīng)減少了燈管、空調(diào)等用量，減少了電耗等支出，降低了生產(chǎn)成本，提高了擺放苗的效率。

由于袋式培養(yǎng)的光照強(qiáng)度較瓶式增加，更有利于劍麻組培苗培養(yǎng)，從而比瓶式特別是雙層擺放的瓶式提高了組培苗的增殖系數(shù)，降低了組培苗的玻璃化率。由表2可知，袋式劍麻組培叢芽玻璃化率為3.3 %，比瓶式單層擺放的（5.7 %）降低了42.1 %，比瓶式雙層擺放的（10.2 %）降低了67.6 %；袋式劍麻組培叢芽月增殖系數(shù)為2.5，比瓶式單層擺放的（2.2）提高了9.1 %，比瓶式雙層擺放的（1.8）提高了13.3 %。

2.4 污染率和移栽成活率的比較

從表3可以看出袋式組培苗污染率比瓶式降低了7.1 %-60.5 %，分析其主要原因是袋式培養(yǎng)在接種后即用封口機(jī)將袋口全部封死，避免了培養(yǎng)過(guò)程的二次污染。而瓶式培養(yǎng)則用塑料蓋擰緊后，通常有少許空隙出現(xiàn)，菌類容易潛入而導(dǎo)致污染率上升，尤其是塑料蓋和玻璃瓶反復(fù)多次高溫滅菌使用后，造成塑料蓋老化而失去密封性能，玻璃瓶出現(xiàn)瓶口不同程度磨損導(dǎo)致密封性差，污染情況就會(huì)明顯加重。且隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，袋式組培生根苗污染率的增幅明顯較瓶式小；袋式組培生根苗因密封性好，接種后可以直接搬到煉苗棚（室）進(jìn)行邊促根邊煉苗的培養(yǎng)，免除了瓶式生根苗先擺放在培養(yǎng)室培養(yǎng)的環(huán)節(jié)和費(fèi)用。又因透光性好，培養(yǎng)的生根苗較粗壯、葉色較綠，移栽成活率較高，且能夠在煉苗室培養(yǎng)更長(zhǎng)時(shí)間而移栽成活率不受太大影響。培養(yǎng)40 d的袋式生根苗移栽成活率比瓶式高7.6 %。而培養(yǎng)60 d的袋式組培生根苗移栽成活率則比瓶式高25.7 %（表3）。

2.5 組培苗的出苗及運(yùn)輸效率的比較

由表4可知袋式組培苗一般重35 g，1 m3體積可容納0.4萬(wàn)袋，共4萬(wàn)株芽苗，總重約140 kg；瓶式組培苗一般重230 g，1 m3體積可容納近0.2萬(wàn)瓶，共2萬(wàn)株芽苗，總重約460 kg。袋式組培苗的重量?jī)H占瓶式的16.7 %，體積不到瓶式的50 %，袋式的運(yùn)輸能力為瓶裝苗的6.5倍。因此，袋式組培苗在各生產(chǎn)流程中的挑選、裝箱（或裝籮）和搬運(yùn)擺放等操作十分方便，大幅度減輕了工人勞動(dòng)強(qiáng)度，組培苗的出苗效率和運(yùn)輸效率提高了2倍以上，且運(yùn)輸?shù)竭_(dá)目的地后無(wú)須返運(yùn)空容器，從而大幅度降低了生產(chǎn)成本，更有利于優(yōu)良種苗的遠(yuǎn)距離推廣，特別有利于組培苗的出口，為組培苗打入國(guó)際市場(chǎng)打下基礎(chǔ)（表4）。

3 討論與結(jié)論

本研究結(jié)果表明，利用具有一定透氣性的耐高溫的高分子薄膜袋為容器代替常規(guī)玻璃瓶容器進(jìn)行劍麻組培苗的生產(chǎn)， 在降低成本、降低勞動(dòng)強(qiáng)度、高效利用培養(yǎng)空間和提高生產(chǎn)效率上具有顯著優(yōu)勢(shì)，完全可取代玻璃瓶進(jìn)行生產(chǎn)應(yīng)用，較好地克服常規(guī)玻璃容器培養(yǎng)技術(shù)的不足，在劍麻組培苗規(guī)模繁殖優(yōu)質(zhì)種苗方面取得了突破，研究應(yīng)用獲得了成功。

袋式培養(yǎng)也存在不足之處，如在工序操作上的要求相對(duì)較高，接種等操作應(yīng)輕柔，操作不當(dāng)易劃破袋子引起污染；組培苗接種后應(yīng)及時(shí)密封袋口，放置太久不封袋口或袋口密封不嚴(yán)，也容易產(chǎn)生污染；組培苗對(duì)培養(yǎng)環(huán)境的光照和溫度較玻璃瓶敏感，遇上高溫、強(qiáng)光易出現(xiàn)灼傷苗現(xiàn)象，或溫度過(guò)低時(shí)較瓶式易受凍害；某些植物特殊的繁殖特性可能使得其無(wú)法在袋式容器中培養(yǎng)，或某些啟動(dòng)和增殖階段無(wú)法在袋式容器中培養(yǎng)，袋式培養(yǎng)方法可能存在一定的局限性。這些方面的問題有待于進(jìn)一步的研究解決。

參考文獻(xiàn)

[1] 張軍云，馮 斌. 組培袋在組織培養(yǎng)中的應(yīng)用[J]. 云南農(nóng)業(yè)科技，2007（5）：38- 40.

[2] 楊 護(hù)，許林兵，徐少峰，等. 香蕉組培容器的改良及其對(duì)生產(chǎn)效率的影響[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，1998，25（2）：20- 21.

[3] 鐘玉婷，冼 偉，蘇炳豪，等. 以袋換瓶促進(jìn)番木瓜組培苗的生根[J]. 植物生理學(xué)通訊，2008，44（2）：385.

[4] 仲 磊，徐宏強(qiáng)，劉海一. 鐵皮石斛蘭的袋式組織培養(yǎng)[J]. 林業(yè)科技開發(fā)，2006，20（4）：72-73.

[5] 仲 磊，梁珍海，朱 軍. 紅掌袋式與瓶式組織培養(yǎng)生產(chǎn)性指標(biāo)比較試驗(yàn)[J]. 江蘇林業(yè)科技，2002，29（3）：25-27.

[6] 廖 沙，饒佩蘭. 種苗袋培快速繁殖技術(shù)研究[J]. 廣東園林，2000（1）：25-26.

2 結(jié)果與分析

2.1 一次性投入成本的比較

一個(gè)玻璃瓶（含瓶蓋）的批發(fā)價(jià)格為0.8元，按生產(chǎn)100萬(wàn)株劍麻組培苗計(jì)，約需12萬(wàn)個(gè)，共9.6萬(wàn)元；而薄膜袋分別為0.026元，約需80萬(wàn)只，共2.08萬(wàn)元。生產(chǎn)同等數(shù)量的劍麻組培苗，袋式培養(yǎng)容器的投入成本只有玻璃瓶的21.7 %，降低了容器一次性投入的78.3 %。此外，袋式培養(yǎng)還免去玻璃瓶的存儲(chǔ)倉(cāng)庫(kù)，如堆放1萬(wàn)個(gè)玻璃瓶約需15-20 m3空間，而同樣數(shù)量的薄膜袋僅需0.1 m3的空間。而且袋式容器存取方便，不存在玻璃瓶每年5 %-10 %的使用損耗問題，同時(shí)免除了玻璃瓶的搬運(yùn)、清洗等費(fèi)用。這對(duì)生產(chǎn)中資金的有效使用及綜合成本的降低意義較大。

2.2 培養(yǎng)基配制、消毒和接種用工效率的比較

從表1中可以看出袋式培養(yǎng)是以培養(yǎng)溝的形式裝入培養(yǎng)基，單位容器只需裝22 mL就可達(dá)瓶式常規(guī)裝入30 mL時(shí)所達(dá)到的高度，每單位節(jié)省10 mL培養(yǎng)基，如按每毫升培養(yǎng)基成本0.006元計(jì)，每單位容器袋培所用培養(yǎng)基就比瓶式培養(yǎng)節(jié)約0.6元，培養(yǎng)基可節(jié)約33.3 %（表1）。

滅菌鍋每鍋可消毒薄膜袋1 350袋、玻璃瓶650個(gè)，按可接種苗數(shù)計(jì)算，塑料薄膜袋的消毒效率比玻璃瓶提高2.08倍。袋式培養(yǎng)基滅菌消毒的電費(fèi)為0.013元/袋，瓶式為0.023元/瓶，袋式可節(jié)約43 %消毒電費(fèi)。另外可節(jié)約配制與消毒人工費(fèi)40 %。

在接種操作上，每個(gè)熟練工人平均每小時(shí)可接種組培瓶40個(gè)，共400株芽苗，薄膜袋45個(gè)，共450株芽苗，袋式代替瓶式操作，接種數(shù)增加12.5 %。

結(jié)果表明，袋式培養(yǎng)基的配制、消毒效率效果顯著，提高了接種效率，這在劍麻組培苗大規(guī)模生產(chǎn)中，提高生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本顯得十分重要。

2.3 培養(yǎng)空間利用狀況的比較

培養(yǎng)室內(nèi)通常使用架層規(guī)格為150 cm×60 cm的5層培養(yǎng)架，每架層排放的培養(yǎng)瓶數(shù)量，瓶式采用單層擺放可擺放128個(gè)，雙層擺放225個(gè)，100 m2培養(yǎng)室分別擺放玻璃培養(yǎng)瓶數(shù)2.7、4.7萬(wàn)個(gè)。而培養(yǎng)袋容器的底面呈長(zhǎng)條形，擺放時(shí)可很好地利用空間，每層可排放與培養(yǎng)瓶單位材料數(shù)相同的袋培容器330袋，100 m2培養(yǎng)室可擺放6.9萬(wàn)個(gè)（見表2）。袋式培養(yǎng)空間利用率比單層擺放的瓶式提高了155.6 %，比雙層擺放的瓶式利用提高了46.8 %。袋式培養(yǎng)大幅度節(jié)省了培養(yǎng)空間，相應(yīng)減少了燈管、空調(diào)等用量，減少了電耗等支出，降低了生產(chǎn)成本，提高了擺放苗的效率。

由于袋式培養(yǎng)的光照強(qiáng)度較瓶式增加，更有利于劍麻組培苗培養(yǎng)，從而比瓶式特別是雙層擺放的瓶式提高了組培苗的增殖系數(shù)，降低了組培苗的玻璃化率。由表2可知，袋式劍麻組培叢芽玻璃化率為3.3 %，比瓶式單層擺放的（5.7 %）降低了42.1 %，比瓶式雙層擺放的（10.2 %）降低了67.6 %；袋式劍麻組培叢芽月增殖系數(shù)為2.5，比瓶式單層擺放的（2.2）提高了9.1 %，比瓶式雙層擺放的（1.8）提高了13.3 %。

2.4 污染率和移栽成活率的比較

從表3可以看出袋式組培苗污染率比瓶式降低了7.1 %-60.5 %，分析其主要原因是袋式培養(yǎng)在接種后即用封口機(jī)將袋口全部封死，避免了培養(yǎng)過(guò)程的二次污染。而瓶式培養(yǎng)則用塑料蓋擰緊后，通常有少許空隙出現(xiàn)，菌類容易潛入而導(dǎo)致污染率上升，尤其是塑料蓋和玻璃瓶反復(fù)多次高溫滅菌使用后，造成塑料蓋老化而失去密封性能，玻璃瓶出現(xiàn)瓶口不同程度磨損導(dǎo)致密封性差，污染情況就會(huì)明顯加重。且隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，袋式組培生根苗污染率的增幅明顯較瓶式??；袋式組培生根苗因密封性好，接種后可以直接搬到煉苗棚（室）進(jìn)行邊促根邊煉苗的培養(yǎng)，免除了瓶式生根苗先擺放在培養(yǎng)室培養(yǎng)的環(huán)節(jié)和費(fèi)用。又因透光性好，培養(yǎng)的生根苗較粗壯、葉色較綠，移栽成活率較高，且能夠在煉苗室培養(yǎng)更長(zhǎng)時(shí)間而移栽成活率不受太大影響。培養(yǎng)40 d的袋式生根苗移栽成活率比瓶式高7.6 %。而培養(yǎng)60 d的袋式組培生根苗移栽成活率則比瓶式高25.7 %（表3）。

2.5 組培苗的出苗及運(yùn)輸效率的比較

由表4可知袋式組培苗一般重35 g，1 m3體積可容納0.4萬(wàn)袋，共4萬(wàn)株芽苗，總重約140 kg；瓶式組培苗一般重230 g，1 m3體積可容納近0.2萬(wàn)瓶，共2萬(wàn)株芽苗，總重約460 kg。袋式組培苗的重量?jī)H占瓶式的16.7 %，體積不到瓶式的50 %，袋式的運(yùn)輸能力為瓶裝苗的6.5倍。因此，袋式組培苗在各生產(chǎn)流程中的挑選、裝箱（或裝籮）和搬運(yùn)擺放等操作十分方便，大幅度減輕了工人勞動(dòng)強(qiáng)度，組培苗的出苗效率和運(yùn)輸效率提高了2倍以上，且運(yùn)輸?shù)竭_(dá)目的地后無(wú)須返運(yùn)空容器，從而大幅度降低了生產(chǎn)成本，更有利于優(yōu)良種苗的遠(yuǎn)距離推廣，特別有利于組培苗的出口，為組培苗打入國(guó)際市場(chǎng)打下基礎(chǔ)（表4）。

3 討論與結(jié)論

本研究結(jié)果表明，利用具有一定透氣性的耐高溫的高分子薄膜袋為容器代替常規(guī)玻璃瓶容器進(jìn)行劍麻組培苗的生產(chǎn)， 在降低成本、降低勞動(dòng)強(qiáng)度、高效利用培養(yǎng)空間和提高生產(chǎn)效率上具有顯著優(yōu)勢(shì)，完全可取代玻璃瓶進(jìn)行生產(chǎn)應(yīng)用，較好地克服常規(guī)玻璃容器培養(yǎng)技術(shù)的不足，在劍麻組培苗規(guī)模繁殖優(yōu)質(zhì)種苗方面取得了突破，研究應(yīng)用獲得了成功。

袋式培養(yǎng)也存在不足之處，如在工序操作上的要求相對(duì)較高，接種等操作應(yīng)輕柔，操作不當(dāng)易劃破袋子引起污染；組培苗接種后應(yīng)及時(shí)密封袋口，放置太久不封袋口或袋口密封不嚴(yán)，也容易產(chǎn)生污染；組培苗對(duì)培養(yǎng)環(huán)境的光照和溫度較玻璃瓶敏感，遇上高溫、強(qiáng)光易出現(xiàn)灼傷苗現(xiàn)象，或溫度過(guò)低時(shí)較瓶式易受凍害；某些植物特殊的繁殖特性可能使得其無(wú)法在袋式容器中培養(yǎng)，或某些啟動(dòng)和增殖階段無(wú)法在袋式容器中培養(yǎng)，袋式培養(yǎng)方法可能存在一定的局限性。這些方面的問題有待于進(jìn)一步的研究解決。

參考文獻(xiàn)

[1] 張軍云，馮 斌. 組培袋在組織培養(yǎng)中的應(yīng)用[J]. 云南農(nóng)業(yè)科技，2007（5）：38- 40.

[2] 楊 護(hù)，許林兵，徐少峰，等. 香蕉組培容器的改良及其對(duì)生產(chǎn)效率的影響[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，1998，25（2）：20- 21.

[3] 鐘玉婷，冼 偉，蘇炳豪，等. 以袋換瓶促進(jìn)番木瓜組培苗的生根[J]. 植物生理學(xué)通訊，2008，44（2）：385.

[4] 仲 磊，徐宏強(qiáng)，劉海一. 鐵皮石斛蘭的袋式組織培養(yǎng)[J]. 林業(yè)科技開發(fā)，2006，20（4）：72-73.

[5] 仲 磊，梁珍海，朱 軍. 紅掌袋式與瓶式組織培養(yǎng)生產(chǎn)性指標(biāo)比較試驗(yàn)[J]. 江蘇林業(yè)科技，2002，29（3）：25-27.

[6] 廖 沙，饒佩蘭. 種苗袋培快速繁殖技術(shù)研究[J]. 廣東園林，2000（1）：25-26.

2 結(jié)果與分析

2.1 一次性投入成本的比較

一個(gè)玻璃瓶（含瓶蓋）的批發(fā)價(jià)格為0.8元，按生產(chǎn)100萬(wàn)株劍麻組培苗計(jì)，約需12萬(wàn)個(gè)，共9.6萬(wàn)元；而薄膜袋分別為0.026元，約需80萬(wàn)只，共2.08萬(wàn)元。生產(chǎn)同等數(shù)量的劍麻組培苗，袋式培養(yǎng)容器的投入成本只有玻璃瓶的21.7 %，降低了容器一次性投入的78.3 %。此外，袋式培養(yǎng)還免去玻璃瓶的存儲(chǔ)倉(cāng)庫(kù)，如堆放1萬(wàn)個(gè)玻璃瓶約需15-20 m3空間，而同樣數(shù)量的薄膜袋僅需0.1 m3的空間。而且袋式容器存取方便，不存在玻璃瓶每年5 %-10 %的使用損耗問題，同時(shí)免除了玻璃瓶的搬運(yùn)、清洗等費(fèi)用。這對(duì)生產(chǎn)中資金的有效使用及綜合成本的降低意義較大。

2.2 培養(yǎng)基配制、消毒和接種用工效率的比較

從表1中可以看出袋式培養(yǎng)是以培養(yǎng)溝的形式裝入培養(yǎng)基，單位容器只需裝22 mL就可達(dá)瓶式常規(guī)裝入30 mL時(shí)所達(dá)到的高度，每單位節(jié)省10 mL培養(yǎng)基，如按每毫升培養(yǎng)基成本0.006元計(jì)，每單位容器袋培所用培養(yǎng)基就比瓶式培養(yǎng)節(jié)約0.6元，培養(yǎng)基可節(jié)約33.3 %（表1）。

滅菌鍋每鍋可消毒薄膜袋1 350袋、玻璃瓶650個(gè)，按可接種苗數(shù)計(jì)算，塑料薄膜袋的消毒效率比玻璃瓶提高2.08倍。袋式培養(yǎng)基滅菌消毒的電費(fèi)為0.013元/袋，瓶式為0.023元/瓶，袋式可節(jié)約43 %消毒電費(fèi)。另外可節(jié)約配制與消毒人工費(fèi)40 %。

在接種操作上，每個(gè)熟練工人平均每小時(shí)可接種組培瓶40個(gè)，共400株芽苗，薄膜袋45個(gè)，共450株芽苗，袋式代替瓶式操作，接種數(shù)增加12.5 %。

結(jié)果表明，袋式培養(yǎng)基的配制、消毒效率效果顯著，提高了接種效率，這在劍麻組培苗大規(guī)模生產(chǎn)中，提高生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本顯得十分重要。

2.3 培養(yǎng)空間利用狀況的比較

培養(yǎng)室內(nèi)通常使用架層規(guī)格為150 cm×60 cm的5層培養(yǎng)架，每架層排放的培養(yǎng)瓶數(shù)量，瓶式采用單層擺放可擺放128個(gè)，雙層擺放225個(gè)，100 m2培養(yǎng)室分別擺放玻璃培養(yǎng)瓶數(shù)2.7、4.7萬(wàn)個(gè)。而培養(yǎng)袋容器的底面呈長(zhǎng)條形，擺放時(shí)可很好地利用空間，每層可排放與培養(yǎng)瓶單位材料數(shù)相同的袋培容器330袋，100 m2培養(yǎng)室可擺放6.9萬(wàn)個(gè)（見表2）。袋式培養(yǎng)空間利用率比單層擺放的瓶式提高了155.6 %，比雙層擺放的瓶式利用提高了46.8 %。袋式培養(yǎng)大幅度節(jié)省了培養(yǎng)空間，相應(yīng)減少了燈管、空調(diào)等用量，減少了電耗等支出，降低了生產(chǎn)成本，提高了擺放苗的效率。

由于袋式培養(yǎng)的光照強(qiáng)度較瓶式增加，更有利于劍麻組培苗培養(yǎng)，從而比瓶式特別是雙層擺放的瓶式提高了組培苗的增殖系數(shù)，降低了組培苗的玻璃化率。由表2可知，袋式劍麻組培叢芽玻璃化率為3.3 %，比瓶式單層擺放的（5.7 %）降低了42.1 %，比瓶式雙層擺放的（10.2 %）降低了67.6 %；袋式劍麻組培叢芽月增殖系數(shù)為2.5，比瓶式單層擺放的（2.2）提高了9.1 %，比瓶式雙層擺放的（1.8）提高了13.3 %。

2.4 污染率和移栽成活率的比較

從表3可以看出袋式組培苗污染率比瓶式降低了7.1 %-60.5 %，分析其主要原因是袋式培養(yǎng)在接種后即用封口機(jī)將袋口全部封死，避免了培養(yǎng)過(guò)程的二次污染。而瓶式培養(yǎng)則用塑料蓋擰緊后，通常有少許空隙出現(xiàn)，菌類容易潛入而導(dǎo)致污染率上升，尤其是塑料蓋和玻璃瓶反復(fù)多次高溫滅菌使用后，造成塑料蓋老化而失去密封性能，玻璃瓶出現(xiàn)瓶口不同程度磨損導(dǎo)致密封性差，污染情況就會(huì)明顯加重。且隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，袋式組培生根苗污染率的增幅明顯較瓶式??；袋式組培生根苗因密封性好，接種后可以直接搬到煉苗棚（室）進(jìn)行邊促根邊煉苗的培養(yǎng)，免除了瓶式生根苗先擺放在培養(yǎng)室培養(yǎng)的環(huán)節(jié)和費(fèi)用。又因透光性好，培養(yǎng)的生根苗較粗壯、葉色較綠，移栽成活率較高，且能夠在煉苗室培養(yǎng)更長(zhǎng)時(shí)間而移栽成活率不受太大影響。培養(yǎng)40 d的袋式生根苗移栽成活率比瓶式高7.6 %。而培養(yǎng)60 d的袋式組培生根苗移栽成活率則比瓶式高25.7 %（表3）。

2.5 組培苗的出苗及運(yùn)輸效率的比較

由表4可知袋式組培苗一般重35 g，1 m3體積可容納0.4萬(wàn)袋，共4萬(wàn)株芽苗，總重約140 kg；瓶式組培苗一般重230 g，1 m3體積可容納近0.2萬(wàn)瓶，共2萬(wàn)株芽苗，總重約460 kg。袋式組培苗的重量?jī)H占瓶式的16.7 %，體積不到瓶式的50 %，袋式的運(yùn)輸能力為瓶裝苗的6.5倍。因此，袋式組培苗在各生產(chǎn)流程中的挑選、裝箱（或裝籮）和搬運(yùn)擺放等操作十分方便，大幅度減輕了工人勞動(dòng)強(qiáng)度，組培苗的出苗效率和運(yùn)輸效率提高了2倍以上，且運(yùn)輸?shù)竭_(dá)目的地后無(wú)須返運(yùn)空容器，從而大幅度降低了生產(chǎn)成本，更有利于優(yōu)良種苗的遠(yuǎn)距離推廣，特別有利于組培苗的出口，為組培苗打入國(guó)際市場(chǎng)打下基礎(chǔ)（表4）。

3 討論與結(jié)論

本研究結(jié)果表明，利用具有一定透氣性的耐高溫的高分子薄膜袋為容器代替常規(guī)玻璃瓶容器進(jìn)行劍麻組培苗的生產(chǎn)， 在降低成本、降低勞動(dòng)強(qiáng)度、高效利用培養(yǎng)空間和提高生產(chǎn)效率上具有顯著優(yōu)勢(shì)，完全可取代玻璃瓶進(jìn)行生產(chǎn)應(yīng)用，較好地克服常規(guī)玻璃容器培養(yǎng)技術(shù)的不足，在劍麻組培苗規(guī)模繁殖優(yōu)質(zhì)種苗方面取得了突破，研究應(yīng)用獲得了成功。

袋式培養(yǎng)也存在不足之處，如在工序操作上的要求相對(duì)較高，接種等操作應(yīng)輕柔，操作不當(dāng)易劃破袋子引起污染；組培苗接種后應(yīng)及時(shí)密封袋口，放置太久不封袋口或袋口密封不嚴(yán)，也容易產(chǎn)生污染；組培苗對(duì)培養(yǎng)環(huán)境的光照和溫度較玻璃瓶敏感，遇上高溫、強(qiáng)光易出現(xiàn)灼傷苗現(xiàn)象，或溫度過(guò)低時(shí)較瓶式易受凍害；某些植物特殊的繁殖特性可能使得其無(wú)法在袋式容器中培養(yǎng)，或某些啟動(dòng)和增殖階段無(wú)法在袋式容器中培養(yǎng)，袋式培養(yǎng)方法可能存在一定的局限性。這些方面的問題有待于進(jìn)一步的研究解決。

參考文獻(xiàn)

[1] 張軍云，馮 斌. 組培袋在組織培養(yǎng)中的應(yīng)用[J]. 云南農(nóng)業(yè)科技，2007（5）：38- 40.

[2] 楊 護(hù)，許林兵，徐少峰，等. 香蕉組培容器的改良及其對(duì)生產(chǎn)效率的影響[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，1998，25（2）：20- 21.

[3] 鐘玉婷，冼 偉，蘇炳豪，等. 以袋換瓶促進(jìn)番木瓜組培苗的生根[J]. 植物生理學(xué)通訊，2008，44（2）：385.

[4] 仲 磊，徐宏強(qiáng)，劉海一. 鐵皮石斛蘭的袋式組織培養(yǎng)[J]. 林業(yè)科技開發(fā)，2006，20（4）：72-73.

[5] 仲 磊，梁珍海，朱 軍. 紅掌袋式與瓶式組織培養(yǎng)生產(chǎn)性指標(biāo)比較試驗(yàn)[J]. 江蘇林業(yè)科技，2002，29（3）：25-27.

[6] 廖 沙，饒佩蘭. 種苗袋培快速繁殖技術(shù)研究[J]. 廣東園林，2000（1）：25-26.