柞蠶蠶種生產(chǎn)技術(shù)(二)
——春柞蠶制種

·栽桑養(yǎng)蠶·

柞蠶蠶種生產(chǎn)技術(shù)(二)
——春柞蠶制種

1 暖繭

暖繭是指人工加溫補(bǔ)濕,促使蛹體適時(shí)發(fā)育而羽化出蛾的技術(shù)措施。柞蠶滯育蛹經(jīng)過冬季的低溫保護(hù),滯育被解除而變?yōu)榛钚杂肌＝獬郎幕钚杂荚谶m宜的溫度、濕度條件下,就會(huì)逐漸發(fā)育而羽化出蛾。但初春時(shí)氣溫和室溫都比較低,蛹體在自然條件下發(fā)育緩慢,經(jīng)歷時(shí)間長,羽化出蛾、產(chǎn)卵較遲,不能適時(shí)孵化出蠶,不僅直接影響春柞蠶生產(chǎn),而且還對秋柞蠶產(chǎn)生不良影響。由于蛹體發(fā)育時(shí)間長、營養(yǎng)物質(zhì)消耗大,還會(huì)造成蛹、蛾體質(zhì)弱,影響卵及幼蟲的生命力；因此，需要人工加溫補(bǔ)濕暖繭,促使蛹體正常發(fā)育,保證按時(shí)羽化、制種、收蟻。

1.1 暖繭時(shí)期

暖繭時(shí)期的確定應(yīng)參照當(dāng)?shù)貧v年氣候情況、暖繭和羽化出蛾日期,再根據(jù)暖繭標(biāo)準(zhǔn)及天氣狀況預(yù)定孵化出蠶日期,然后按照暖繭、制種和卵期(保卵、暖卵)經(jīng)過時(shí)間進(jìn)行推算。例如,沈陽市預(yù)定5月1日出蠶,按標(biāo)準(zhǔn)溫濕度暖繭,蛹體發(fā)育需29 d,從出蛾到制種結(jié)束約需12 d,卵期為15 d,共計(jì)需要56 d,由預(yù)計(jì)出蠶日期向前推算56 d,即應(yīng)在3月6日加溫暖繭。

暖繭時(shí)期要掌握適當(dāng),保證適時(shí)羽化出蛾。暖繭過早,則卵期經(jīng)過長,卵內(nèi)營養(yǎng)消耗多,影響胚胎發(fā)育和幼蟲生命力;暖繭過遲,則不能按期羽化、制種和適時(shí)收蟻。

1.2 暖繭準(zhǔn)備

1.2.1 暖繭室 暖繭室是種繭加溫補(bǔ)濕的場所,選用保溫性能好、具有加溫設(shè)備、補(bǔ)濕容易、操作方便的房屋。可按每平方米暖繭3 000粒(約30～35 kg/m2)計(jì)算,有時(shí)保種室也可兼作暖繭室。

1.2.2 加溫設(shè)備 暖繭加溫有火墻、火爐、電暖氣加熱器等,加溫設(shè)備要求安全、成本低、加溫效果好。

1.2.3 暖繭用具 30 m2的暖繭室,需準(zhǔn)備繭床30張,干濕溫度計(jì)2支,還需要補(bǔ)濕設(shè)備，如加濕器等。

1.2.4 暖繭室和用具的消毒 暖繭7～10 d前,將暖繭室和用具洗刷干凈,并用含1%有效氯的漂白粉或3%的甲醛溶液噴霧消毒。

1.3 暖繭技術(shù)

1.3.1 種繭復(fù)搖 種繭經(jīng)過冬季保種,少部分未選出的劣繭此時(shí)已表現(xiàn)出如油爛繭、干涸繭等癥狀,暖繭前應(yīng)按選繭標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行復(fù)選,剔除不良繭,確保種繭質(zhì)量。復(fù)選時(shí),還應(yīng)注意雌、雄繭(圖1)比例,一般掌握雌∶雄=1∶1 (或雌繭45%,雄繭55%),選出的雄繭另作他用，或晚加溫暖繭,待制種后期雄蛾數(shù)量少時(shí)使用。

圖1 柞蠶雌繭(左)和雄繭(右)

1.3.2 調(diào)溫補(bǔ)濕 按照暖繭的標(biāo)準(zhǔn)及時(shí)間進(jìn)程及時(shí)調(diào)節(jié)溫濕度,防止溫度急劇變化影響蛹體發(fā)育。

1.3.3 繭床調(diào)位 暖繭過程中應(yīng)將繭床調(diào)位,使種繭感溫均勻一致、羽化集中。暖繭期間將繭床按上、下、左、右順序調(diào)位2～3次。

1.3.4 通風(fēng)換氣 由于蛹的呼吸作用及暖繭室空氣不流暢,會(huì)造成室內(nèi)氧氣含量下降而影響蛹體呼吸。暖繭前期每天換氣1～2次,暖繭后期每天換氣2～3次,換氣應(yīng)在室外溫度較高時(shí)進(jìn)行,注意保持室內(nèi)溫濕度。

1.3.5 穿掛種繭 暖繭開始后,要穿掛種繭,將繭串?dāng)[放在繭床內(nèi),羽化前掛繭,以利通風(fēng)透氣和羽化制種。

穿繭方法:繁育母種、一代雜交種時(shí)應(yīng)雌雄分開穿繭。穿繭針要斜穿繭底的繭衣(圖2),繭柄向外,以便蛾羽化后自繭內(nèi)爬出。繭串長約1.3 m,每串約300粒繭,繭串的兩端各綁1個(gè)約5 cm長的木棒,既方便掛繭,又可防止繭脫落。

圖2 穿繭

掛繭有橫掛和豎掛2種方法,種繭數(shù)量少時(shí),可采用橫掛,橫掛繭串上的繭感溫均勻,羽化集中;大批制種采用豎掛,豎掛掛繭數(shù)量多。母種、原種實(shí)行對交區(qū)間隔離,一代雜交種實(shí)行品種間隔離、雌雄間隔離,做到異區(qū)或異品種交配。繭串行距約50 cm,繭串距離15 cm,繭串下端距地面30 cm以上,掛繭高度約1.8 m。為避免羽化后期雄蛾數(shù)量少,可留10%左右的雄繭晚3～5 d進(jìn)入暖繭室。

1.4 暖繭的標(biāo)準(zhǔn)和方法

在適溫范圍內(nèi),蛹體發(fā)育速度隨溫度的升高而加快,蛹發(fā)育的時(shí)間經(jīng)過短,蛹體消耗少,蛾的生命力強(qiáng);適宜的濕度也是保證蛾體強(qiáng)健的環(huán)境因子之一。暖繭適宜溫度為18～22 ℃,相對濕度為65%～80%。柞蠶生產(chǎn)地區(qū)不同,其暖繭標(biāo)準(zhǔn)和方法也有差異。我國主要柞蠶產(chǎn)區(qū)的暖繭標(biāo)準(zhǔn)和方法如下。

1.4.1 遼寧省等東北柞蠶區(qū)暖繭標(biāo)準(zhǔn)和方法 暖繭前1 d將室溫升到10 ℃,使種繭先感受中間溫度。暖繭第1天溫度為11 ℃,以后每天升溫1 ℃,到19 ℃時(shí)保持至羽化出蛾。暖繭前期相對濕度為70%,暖繭中期相對濕度為75%,暖繭后期相對濕度為80%。暖繭28 d,有效積溫達(dá)到200 ℃時(shí)蛹開始羽化;暖繭33 d,有效積溫為 244 ℃時(shí)大批蛹羽化出蛾。

1.4.2 山東省暖繭標(biāo)準(zhǔn)和方法 從10 ℃開始每天升溫1 ℃,達(dá)15 ℃后每天升溫2 ℃,到21 ℃時(shí)保持平溫,約22 d羽化出蛾。每天5:00時(shí)開始升溫,10:00時(shí)升到當(dāng)天目的溫度,22:00時(shí)斷火保溫,次日仍按此法進(jìn)行,晝夜之間形成變溫。由于暖繭升溫進(jìn)程快;因此,每5 d應(yīng)倒床1次、換氣2次,后期相對濕度保持在72%～75%。

1.4.3 河南省暖繭標(biāo)準(zhǔn)和方法 從室內(nèi)自然溫度(18 ℃左右)起,每天升溫2 ℃,至22 ℃保持平溫,直至羽化出蛾。相對濕度保持在70%～75%,約需20 d出蛾制種。

1.5 羽化調(diào)節(jié)

暖繭過程中,應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)計(jì)劃及品種所需要的有效積溫及時(shí)調(diào)節(jié)羽化時(shí)間,保證種繭按預(yù)定時(shí)間羽化出蛾。特別是生產(chǎn)一代雜交種,更應(yīng)掌握蛹的發(fā)育進(jìn)程,對發(fā)育晚的品種及雌雄個(gè)體在適溫范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)節(jié),如適當(dāng)增加溫度或降低溫度,使之發(fā)育接近一致。

1.5.1 錯(cuò)開對交品種的加溫時(shí)間 根據(jù)柞蠶品種蛹期發(fā)育所需有效積溫的多少,對交品種采取不同的時(shí)間開始暖繭,使對交品種的羽化期相一致,保證一代雜交種生產(chǎn)的順利完成。

1.5.2 選出部分雄繭晚加溫或?qū)⒋菩劾O分別加溫暖繭 柞蠶蛾羽化前期雄蛾多雌蛾少,后期雌蛾多雄蛾少,為了使雌雄蛾同時(shí)羽化,暖繭開始前,選出部分雄繭晚加溫,即暖繭開始時(shí),選出10%的雄繭晚加溫2～3 d,使雄蛹感受的有效積溫少于雌蛹,保證制種期間羽化的雌雄蛾數(shù)量大體相等?；?qū)⒋菩劾O分別加溫暖繭。

1.5.3 定時(shí)解剖蛹體調(diào)節(jié)發(fā)育 暖繭后期定時(shí)解剖蛹體觀察內(nèi)部器官發(fā)育情況,判斷蛹體發(fā)育程度,參照有效積溫,通過調(diào)節(jié)溫度來調(diào)節(jié)羽化日期。

蛹體解剖方法:先將蛹體浸在開水中2～3 min固定內(nèi)部組織,取出蛹體撕開觸角部位,觀察頭胸部的變化;再撕開蛹體觀察體內(nèi)各組織器官的變化。暖繭后期可直接解剖蛹體觀察,先外觀蛹體各部位的發(fā)育情況,再用解剖針將蛹背部向上固定在蠟盤中,剪開蛹體壁觀察內(nèi)部器官發(fā)育情況。為了避免內(nèi)部組織器官和血淋巴因氧化而變黑,可滴入Bouin氏液固定數(shù)分鐘,再換入0.75%的氯化鈉溶液進(jìn)行解剖觀察。

2 制種

2.1 制種用房及環(huán)境條件

2.1.1 暖種(繭)室 暖繭室也稱發(fā)蛾室,要求便于升溫、保溫、通風(fēng)、換氣,溫度19 ℃(東北蠶區(qū))。

2.1.2 晾蛾室 雌蛾晾蛾室溫度18～20 ℃,空氣流暢;雄蛾晾蛾室溫度16～18 ℃,雄蛾低溫冷藏室溫度0～10 ℃。

2.1.3 交配室 交配室溫度18～20 ℃,光線均勻,空氣流暢。

2.1.4 產(chǎn)卵室 產(chǎn)卵室溫度18～20 ℃,補(bǔ)濕方便,空氣新鮮,光線黑暗。

2.1.5 保卵室 室溫保卵室溫度18～20 ℃,低溫保卵室溫度2～8 ℃。

2.1.6 鏡檢室 要求光線充足,并有照明設(shè)備。

2.2 制種技術(shù)

2.2.1 羽化 柞蠶蛹經(jīng)過暖繭加溫,感受到一定的有效積溫后便羽化為蛾。蛾由羽化孔破繭脫出的過程,又稱出蛾。大批制種從出蛾開始至羽化結(jié)束約需12 d。

柞蠶蛾的羽化規(guī)律為先出雄蛾,后出雌蛾,雄蛾羽化后易爬動(dòng)和飛翔,出蛾后易造成早交或在室內(nèi)飛舞,要注意羽化時(shí)刻并及時(shí)捉蛾。制種中采用調(diào)整溫度(“斷火”)控制出蛾。即每日4:00時(shí)升溫到18～20 ℃,14:00—15:00時(shí)開始羽化,16:00—19:00 時(shí)為盛出期,17:00時(shí)開門窗降溫至14～15 ℃,21:00時(shí)捉蛾結(jié)束。此方法的優(yōu)點(diǎn)是白天捉蛾,上午拆對選蛾,勞動(dòng)效率高;缺點(diǎn)是如捉蛾不及時(shí)易增加落地蛾和抓傷蛾，少數(shù)蛾因在繭串上交配時(shí)間過長而易散對。

2.2.2 捉蛾、晾蛾 捉蛾時(shí)先捉雄蛾、后捉雌蛾。捉蛾時(shí)遇有已交配的蛾對時(shí),可將蛾對提出單獨(dú)制種;對于交配時(shí)間短的蛾對可拆開使其另交。

雄蛾捉下放置在蛾筐內(nèi)晾蛾。將雄蛾均勻地懸掛在筐蓋上方(圖3-A),蛾與蛾之間保持一定的距離,防止擁擠相互抓傷。每個(gè)蛾筐(直徑80 cm)可晾雄蛾100只,待蛾翅展開后,送到4～6 ℃的低溫處控制。雌蛾捉下后放到晾蛾架的繩上晾蛾(圖3-B),蛾間距以2個(gè)雌蛾翅不相互接觸為宜,防止相互抓傷。每1晾蛾架(120 cm×85 cm)可晾雌蛾160只左右,晾蛾室溫度控制在16～18 ℃,使其鱗毛干燥、卵粒成熟以及產(chǎn)生求偶行為。

圖3 晾雄蛾(A)與晾雌蛾(B)

2.2.3 交配(交尾)與提對 柞蠶蛾交配又稱合筐,有當(dāng)日(夜)交配和隔日(夜)交配。

當(dāng)日交配:蛾羽化后在20 ℃溫度保護(hù)下,經(jīng)過5～6 h晾蛾即可進(jìn)行交配,一般于當(dāng)日23:00—24:00時(shí)開始交配,次日14:00—15:00時(shí)拆對,交配室溫度為18～19 ℃。河南、山東地區(qū)多采用當(dāng)日交配。交配適期為雌蛾4個(gè)翅完全展開,2個(gè)后翅邊緣相接,4個(gè)翅微微震動(dòng),尾部頻頻外伸;雄蛾在蛾筐內(nèi)震翅有聲,標(biāo)志著雄蛾體已發(fā)育成熟,此時(shí)為交配適期。

隔日交配:當(dāng)日羽化的蛾不進(jìn)行交配,于第2天13:00—14:00時(shí)交配,第3天8:00—9:00時(shí)拆對,交配時(shí)間16～17h。隔日交配的缺點(diǎn)是晾蛾室和晾蛾用具增多,雄蛾需要進(jìn)低溫保護(hù)室。

交配方法:交配前30 min,把雄蛾筐移入已加溫的交配室內(nèi),使之感溫活動(dòng)以利交配。再于交配前數(shù)分鐘振動(dòng)晾蛾架使雌蛾受刺激而排泄蛾尿,以保持交配時(shí)蛾筐清潔,交配效果好。采用木制晾蛾架晾蛾交配時(shí),1人手持晾蛾架(160只雌蛾),另2人每人各拿1筐雄蛾(100只雄蛾),提起約0.5 m高稍用力向下一振,或用力拍打筐蓋,使雄蛾受到振動(dòng)落入筐底,然后迅速打開筐蓋,將雌蛾抖落入筐內(nèi),蓋上筐蓋,轉(zhuǎn)動(dòng)蛾筐,使雌雄蛾均勻分散在筐內(nèi),任其自由交配。蛾筐放在18～20 ℃的交配室內(nèi),按先后順序放好,便于提對。

提對與涼對:雌蛾與雄蛾交配合筐20～30 min后,筐內(nèi)震翅聲逐漸變小,表明多數(shù)已交配不再飛舞求偶,此時(shí)可進(jìn)行提對。提對時(shí),打開筐蓋,先捉未交配的雄蛾或雌蛾放入空筐內(nèi)使其再交,再將已交配的蛾對輕輕提起放到晾對器具(塑料紗)上晾對,雌蛾在上方、雄蛾在下方;晾蛾密度以蛾翅間不相互接觸為宜(圖4A-B)。一批蛾應(yīng)提對2～3次,提對3次以后的蛾應(yīng)淘汰。晾對室要保持安靜,防止激烈震動(dòng);避免強(qiáng)光、高溫等刺激。晾對室溫度為16～18 ℃,相對濕度為75%。光線要均勻,保持空氣新鮮。隨時(shí)檢查室內(nèi)的情況,如有震翅飛舞的聲音,表明有散對的蛾在活動(dòng),應(yīng)及時(shí)巡視撿出,防止影響其它蛾對。

圖4 晾對(A晾蛾室,B晾在塑料紗上正在交配的柞蠶蛾)

2.2.4 拆對 左手輕壓雌蛾腹部背面,右手捏住雄蛾4個(gè)翅的基部,向雌蛾頭部方向一提即可開對。拆對后,選擇體色鮮明、鱗毛整齊、強(qiáng)健的雄蛾每120只為1筐,放到3～5 ℃的環(huán)境中保護(hù),以備再次利用交配。雌蛾每筐放90只左右送到選蛾室進(jìn)行選蛾。拆對時(shí)應(yīng)防止品種、批次混雜;拆對的速度應(yīng)與選蛾的進(jìn)度相一致,否則會(huì)因選蛾、裝袋不及時(shí)而損失蠶卵。

2.2.5 選蛾 選蛾的目的是淘汰病、劣蛾,提高柞蠶種質(zhì)量。健康雌蛾的特征:蛾體強(qiáng)健、體形端正,行動(dòng)活潑,體色鮮明;體形大而豐滿,鱗毛豐厚;四翅平展,質(zhì)地厚,翅脈挺直;腹大飽滿,環(huán)節(jié)緊湊,蛾尿乳白或淡黃色;透視體內(nèi),卵粒多且成熟卵多,血淋巴清晰為本品種固有特征,肌肉、脂肪體細(xì)膩。

選蛾應(yīng)先看外觀,從體形、體色、活動(dòng)狀態(tài)等方面來觀察。1只手輕捏蛾4個(gè)翅的基部,另1只手輕壓尾部背面,使尾部緩緩向腹面彎曲,透視腹部背面第3～5環(huán)節(jié)的節(jié)間膜,凡血淋巴顏色混濁、肌肉組織粗造、卵管、背血管、脂肪體或肌肉組織上有紅褐色或褐色針尖狀渣點(diǎn),手捏隨組織移動(dòng)者為可能感染柞蠶微粒子病的蛾,應(yīng)予以淘汰。蛾體內(nèi)部應(yīng)以血淋巴顏色、渾濁程度為主(圖5)。

圖5 選蛾

2.2.6 產(chǎn)卵 經(jīng)選留的雌蛾,剪去2/3左右的翅后,迅速投入產(chǎn)卵容器內(nèi)產(chǎn)卵,以避免蠶卵損失。

柞蠶蛾自然產(chǎn)卵的盛期在21:00—23:00時(shí),白天產(chǎn)卵很少,第1夜產(chǎn)卵量約占總產(chǎn)卵量的85%以上;第2夜產(chǎn)卵量約占總產(chǎn)卵量的10%。春季生產(chǎn)上多采用產(chǎn)2晝夜的卵,也可只采用產(chǎn)1晝夜的卵。

產(chǎn)卵室溫度為19～20 ℃,相對濕度為75%～85%,保持產(chǎn)卵室安靜和黑暗狀態(tài)能加速產(chǎn)卵并能增加產(chǎn)卵量和良卵率,產(chǎn)卵室保持空氣新鮮,適當(dāng)通風(fēng)換氣。

春季柞蠶蛾產(chǎn)卵主要采用塑料紗制成的產(chǎn)卵袋單蛾產(chǎn)卵。產(chǎn)卵袋規(guī)格為14 cm×16 cm或12 cm×15 cm的小袋,每袋裝1只雌蛾,用書夾、大頭針或橡皮筋等封好袋口,排列在繭床上或掛在產(chǎn)卵架上產(chǎn)卵。目的是為了便于顯微鏡檢查,防止微孢子蟲的母體傳染,保證蠶卵無病。

2.2.7 雌蛾微粒子病的顯微鏡檢查 顯微鏡檢查是在嚴(yán)格目選的基礎(chǔ)上,用顯微鏡檢查產(chǎn)卵后的雌蛾腹部組織,進(jìn)一步淘汰感染微粒子病的蛾卵,它是杜絕微粒子病母體傳染、提高蠶種質(zhì)量的重要措施之一。鏡檢方法如下。

制片:取已產(chǎn)卵雌蛾的腹部(第4～5環(huán)節(jié))放入含1%氫氧化鈉溶液的乳缽內(nèi),每孔用一對應(yīng)的乳棒研磨雌蛾的腹部至粘糊狀止,或直接用細(xì)木棍在雌蛾腹部背面第2～3環(huán)節(jié)處挑取不帶卵粒、蛾尿的內(nèi)部組織直接點(diǎn)片。點(diǎn)片標(biāo)本液的直徑約0.6 cm左右,如用木棍挑取雌蛾腹部組織,則直接點(diǎn)在事先點(diǎn)有1%氫氧化鈉的載玻片上即可。點(diǎn)片后蓋上蓋玻片,并用手指輕輕壓實(shí)。載玻片放在專設(shè)的檢種板上,每板點(diǎn)10～15蛾,蛾袋、乳棒(木棍)、載玻片要按一定順序排列,防止混雜。

鏡檢:將鏡檢的標(biāo)本按號取片檢查,每個(gè)標(biāo)本觀察3～5個(gè)視野。在600～700倍的顯微鏡下,柞蠶微孢子蟲孢子呈長橢圓形,前端稍細(xì),后端稍粗,大小為(4.57±0.49)μm×(1.88±0.26)μm,折光性強(qiáng),呈淡綠色,作布朗運(yùn)動(dòng)(圖6)。檢查后將“有毒”載玻片和蓋玻片分開放置,便于洗滌處理。將檢查結(jié)果記入檢種單,有柞蠶微孢子蟲孢子的樣本標(biāo)記為“○”,沒有柞蠶微孢子蟲孢子的樣本記為“×”。檢出有柞蠶微粒子孢子的卵袋和無柞蠶微粒子孢子的卵袋應(yīng)分別放置,合格的卵當(dāng)天傍晚前進(jìn)入保種室保護(hù),不合格的卵袋集中消毒處理。

圖6 鏡檢(A)與柞蠶微孢子蟲孢子(B)

洗滌:將乳缽、乳棒、載玻片、蓋玻片等用清水沖洗清潔,擦(晾)干待用;檢出有柞蠶微粒子孢子的玻片及乳缽、乳棒等浸入10%鹽酸中浸泡15 min以上再?zèng)_洗后晾干。

(王 勇 秦 利)