半夏茯苓湯不同方法炮制半夏對小鼠生殖毒性的作用

王 浩，高思華

(北京中醫(yī)藥大學，北京 100029)

半夏有降逆止嘔、和胃消痞的藥理作用，但其在妊娠惡阻中的治療作用一直存有爭議。而運用半夏復方治療妊娠惡阻古已有之。《備急千金要方·婦人方上》有“半夏茯苓湯”治療惡阻的記載。

關于半夏是否為臨床妊娠禁忌藥的說法仍存在爭議，醫(yī)生對臨床采用半夏治療妊娠嘔吐也持慎重態(tài)度。但古有“醫(yī)師掌醫(yī)之政令，聚毒藥以供醫(yī)事”之記載，如何控制半夏生殖毒性?孕婦如何合理應用半夏抑或半夏是否應列為妊娠禁忌藥?這些問題都是目前半夏毒性研究中亟待解決的問題。因此“半夏動胎”理論值得深入探討。

1 材料與方法

所用飲片購自北京同仁堂藥店，生產(chǎn)批號Z43020138。分別按常規(guī)湯藥制備方法(浸泡，煎煮，過濾，濃縮等)，制得實驗所需湯藥。各藥濃度為含藥量1 g/mL(按生藥量算得),所得藥液放置于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。選取2月齡昆明雌鼠，體質(zhì)量(18±2) g 110只,2月齡昆明雄鼠，體質(zhì)量(20±2) g 55只。由北京中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供,清潔級動物,生產(chǎn)許可證號：SYXK(浙)2012-0117。飼養(yǎng)溫度：20～25 ℃，相對濕度28%～55%。照明時間:明暗10/14 h。飼料與飲水持續(xù)供給，不限量自由攝取。飼料名稱：鼠維特飼料。飼料來源:北京市食品藥品檢驗所動物中心。飼料的質(zhì)量:符合中華人民共和國國家標準GB14924-2010年規(guī)定。飲水為滅菌自來水。

實驗選取臨床治療妊娠惡阻應用頻率最高的復方—半夏茯苓湯(54.1%)[1]，進行不同炮制半夏生殖毒性的實驗研究。在成功建立昆明小鼠妊娠模型，并進行“預實驗”的基礎上，進行正式實驗。實驗中建立陽性對照組(即絲裂霉素C組)[2]、空白對照組(生理鹽水組)，實驗組(3組)等，從妊娠第1天起灌胃給藥，第20天將全部雌鼠摘眼取血處死[3]，解剖妊娠子宮。

正式實驗選取2月齡昆明雌鼠，體質(zhì)量(18±2) g 50只,隨機分為5組，每組10只。2月齡昆明雄鼠，體質(zhì)量(20±2) g 25只,隨機分為5組,每組5只。每組給予同等足量的食物和水。分別編號為實驗1組(半夏茯苓湯組中所用半夏為生半夏)、實驗2組(所用半夏為姜半夏)、實驗3組(所用半夏為法半夏)、空白對照組；陽性對照組，共5組。

造模：晚18：00將雌鼠∶雄鼠=2∶1合籠交配，自交配次日起，于每日早7：00,中午13：00，晚18：00檢查陰栓3次,發(fā)現(xiàn)陰栓日定為妊娠0天標志[4]。所有雌鼠均于妊娠第1天開始給藥，空白對照組采用生理鹽水灌胃給藥,陽性對照組采用絲裂霉素C灌胃給藥,給藥劑量以成人量，按小鼠表面積折算成有效劑量[5]。連續(xù)19 d。

待雌鼠妊娠期滿20 d[6](停藥24 h后),全部雌鼠摘除眼球放血處死，血用于試劑盒檢測及腎功能檢測(以測定肝、腎功能損壞程度)。處死后隨即解剖妊娠子宮[7]，觀察仔鼠形態(tài)，將仔鼠精細測量、稱重。詳細記錄仔鼠數(shù)、胚胎總數(shù)、發(fā)育正常數(shù)、發(fā)育正常率(%)、死胎數(shù)、死胎率(%)、畸形數(shù)(包括頭部畸形、四肢畸形、軀干畸形)、畸胎率(%)等實驗數(shù)據(jù)。

3 實驗結(jié)果

3.1 半夏茯苓湯不同炮制半夏對母鼠胚胎正常率、死胎率、畸胎率的影響。見表1。

表1 半夏茯苓湯不同炮制半夏對小鼠胚胎正常率、死胎率、畸胎率的影響 只(%)

注：與空白對照組比較,##P<0.01;與陽性對照組比較，□□P<0.01；與實驗1組比較，△△P<0.01；與實驗2組比較，▲P<0.05,▲▲P<0.01;與實驗3組比較，■P<0.05,■■P<0.01。實驗1、2、3組與陽性對照組、空白對照組的正常率、死亡率、畸形率之間均存在顯著差異(P<0.01)。

3.2 半夏茯苓湯不同炮制半夏對母鼠肝腎毒性的影響 見表2。

表2 半夏茯苓湯不同炮制半夏對母鼠肝腎毒性的影響

注：與陽性對照組、空白對照組比較，##P<0.01。與實驗1組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與實驗3組比較，▲P<0.05。結(jié)論：實驗1組、2組與實驗3組SCR、BUN、ALT、AKP之間差異比較具有統(tǒng)計學意義。

3 討論

本實驗通過實驗數(shù)據(jù)可以得出:半夏茯苓湯(法半夏)即實驗3組治療孕婦妊娠嘔吐最為安全，慎用未經(jīng)炮制的生半夏復方的結(jié)論。

此實驗以復方中進行半夏安全性評價研究，為半夏毒副作用研究打開一個新視角?；谥嗅t(yī)學“有故無殞”的基礎理論，結(jié)合目前臨床運用半夏所存在的實際且亟待解決的具體問題，選擇臨床治療妊娠惡阻確有療效的半夏復方—半夏茯苓湯，和代表性適應癥(妊娠惡阻)進行實驗研究。以現(xiàn)代醫(yī)學的定性定量研究豐富中醫(yī)“半夏動胎”的理論。

實驗研究著重探討不同炮制方法的半夏在復方中的胚胎毒性。尤其是應用半夏不同炮制方法的科學性、規(guī)律性。提出半夏茯苓湯(法半夏)組治療孕婦妊娠嘔吐最為安全，慎用未經(jīng)炮制的生半夏復方的結(jié)論[8-11]。

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