高效液相色譜法測定脈絡通顆粒中葛根的含量

解朝霞沈麗娟

高效液相色譜法測定脈絡通顆粒中葛根的含量

解朝霞1沈麗娟2

目的 建立脈絡通顆粒中葛根的含量測定方法。方法 采用高效液相色譜法（HPLC）測定脈絡通顆粒葛根素的含量。結果 葛根素在0.04～0.82 μg范圍內呈良好的線性關系，方法學考察均符合要求。結論 所用方法操作簡便、準確、重復性好，可作為脈絡通顆粒的含量測定方法。

高效液相色譜法；脈絡通顆粒；葛根素；含量

脈絡通顆粒由丹參、葛根、川芎等多味中藥組成，主要用于瘀血阻滯所致的胸痹，癥見胸悶、心前區(qū)刺痛；腦血栓及冠心病、心絞痛等癥，具有活血通脈的功效[1-3]。本文參照中國藥典標準，采用高效液相色譜法（HPLC）測定脈絡通顆粒葛根素的含量，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試劑

Agilent 1100高效液相色譜儀，瑞士Satorious BP211電子分析天平；葛根素對照品（批號：110752-200511）購于中國藥品生物制品檢定所，規(guī)格：供含量測定用。脈絡通顆粒（批準文號：國藥準字Z32020371，批號：1400634551）購于揚子江藥業(yè)集團有限公司，規(guī)格：6 g/袋。乙腈為色譜級，水為二餾水。

2 方法與結果

2.1 對照品溶液的制備 精密稱取葛根素對照品，加入30%乙醇溶液溶解并稀釋，制成每毫升含葛根素40.8 μg的溶液。

2.2 供試品溶液制備 稱取裝量差異項下的供試品，研細，精密稱取約1 g，精密加入30%乙醇溶液50 ml，稱定重量，冷浸2 h后，超聲30 min，放至室溫，再稱定重量，加30%乙醇溶液補足重量，搖勻，過濾，即得。

2.3 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 色譜柱：Alltima HP C185 μm（250.0×4.6）mm；流動相：乙腈-水（10:90）；流速：0.8 ml/min；進樣量：10 μl；柱溫：40 ℃；檢測波長：250 nm。

2.4 陰性干擾試驗[4-5]處方除去葛根按供試品溶液的制備方法所制備樣品為陰性對照品溶液，精密吸取葛根素對照品、供試品、陰性對照品、空白等溶液，分別注入Agilent 1100高效液相色譜儀，測得溶液液相色譜圖，供試品色譜圖中，在與對照品色譜圖相同的保留時間上有相應的色譜峰，而陰性對照色譜圖在與對照品色譜圖相同的保留時間附近無干擾峰。

2.5 方法學考察

2.5.1 線性關系考察 精密吸取對照品溶液（葛根素：0.0408 mg/ml）1、5、10、15、20 μl，按上述色譜條件分別注入高效液相色譜儀，測定峰面積，見表1。

表1 葛根素對照品標準曲線數據

以峰面積為縱坐標，進樣量（μg）為橫坐標，繪制關系曲線見圖1，回歸方程為：y＝5357.9x+ 9.2163，R2＝1，結果表明，葛根素在0.0408～0.8160 μg范圍內呈較好的線性關系。

圖1 線性關系曲線圖

2.5.2 精密度試驗 取脈絡通顆粒，按含量測定方法制得供試品溶液，連續(xù)進樣6次（表2），RSD為0.35%，表明精密度良好。

表2 精密度試驗結果

2.5.3 穩(wěn)定性試驗 取脈絡通顆粒，按含量測定方法制得供試品溶液，每隔4小時進樣1次（表3），在進樣16 h內，供試品峰面積RSD為1.26%，結果表明，該方法穩(wěn)定性好。

表3 穩(wěn)定性試驗結果

2.5.4 重復性試驗 取樣品，依正文方法獨立提取測定6次，結果證明，該方法重復性較好，見表4。

表4 重復性試驗結果

2.5.5 回收率試驗 取葛根素對照品溶液（10.2 mg/25 ml甲醇溶液），精密吸取1.2 ml，置三角瓶中，水浴加熱蒸干，再取已知含量的制劑0.5 g，精密稱定，加入該三角瓶中，按含量測定方法操作，依法測定，見表5。

表5 回收率試驗結果

如表5所示，本法平均回收率為104.6%，RSD= 0.7%。

2.6 按照含量測定方法測定不同批號樣品十批，其含量測定結果見表6。

表6 十批不同批號樣品含量測定結果(mg/g)

3 討論

脈絡通顆粒具有活血通脈、通絡止痛的功效。本文測定的葛根素為方中主藥葛根的主要成分，高效液相色譜法測定該成分操作簡便，結果準確，適合作為該藥物的質量標準控制其生產質量。

[1] 中華人民共和國藥典委員會.中國藥典[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:312-313.

[2] 陳發(fā)奎.常用中草藥有效成分含量測定[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:720-723.

[3] 趙陸華.中藥高效液相色譜法應用[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版,2004:1026-1028.

[4] 田菁,黃閣,趙懷清,等.反相高效液相色譜法測定3種中成藥中的葛根素[J].色譜,2001,19(5):457-460.

[5] 苗明三,李振國.現(xiàn)代實用中藥質量控制技術[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:994-997.

R927.2

A

1673-5846(2014)08-0022-03

1吉林省長春市食品藥品檢驗所，吉林長春 130012

2吉林省食品藥品檢驗所，吉林長春 130012