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    培養(yǎng)基基本成分對太行菊不定芽增殖與生長的影響

    2014-07-16 14:38:31趙元增等
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年3期

    趙元增等

    摘要:以太行菊的無菌不定芽為材料,以MS、N6、B5、Nitsch基本培養(yǎng)基為基礎(chǔ),研究不同培養(yǎng)基及其基本成分組合處理對太行菊不定芽增殖與生長的影響。結(jié)果表明:不同類型基本培養(yǎng)基對太行菊不定芽增殖與生長影響較大,在MS基本培養(yǎng)基上太行菊不定芽增殖與生長的表現(xiàn)最好,N6培養(yǎng)基次之,而在Nitsch、B5基本培養(yǎng)基上的培養(yǎng)效果很差,芽塊較小且不定芽枯死嚴(yán)重;培養(yǎng)基中大量元素構(gòu)成對太行菊不定芽的增殖與生長影響最大,而培養(yǎng)基中微量元素、有機(jī)物質(zhì)構(gòu)成對其培養(yǎng)的影響較??;糖濃度過高(5%)不利于太行菊不定芽的增殖與生長,而在1.5%~3%糖濃度范圍內(nèi),不定芽增殖與生長狀況相差不大;相同濃度下蔗糖較食糖更適宜太行菊不定芽的增殖與生長。

    關(guān)鍵詞:太行菊;不定芽;離體培養(yǎng);增殖系數(shù)

    中圖分類號:S682.1+10.4+3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:1002-1302(2014)03-0041-03

    太行菊[Opisthopappus taihangensis (Ling) Shih]是菊科太行菊屬多年生宿根草本植物,為我國太行山區(qū)特有珍稀物種,僅見于河南省、陜西省、河北省交界的太行山區(qū)[1-2]。由于分布區(qū)域狹窄,生長環(huán)境險(xiǎn)峻,繁殖能力較弱,太行菊現(xiàn)處于瀕危狀態(tài),已被列為國家珍稀保護(hù)植物及河南省重點(diǎn)保護(hù)植物[1-2]。太行菊兼具觀賞價(jià)值與較高的醫(yī)療保健價(jià)值[3],也是菊花雜交育種的理想遺傳材料[4]。有關(guān)太行菊的研究主要集中于太行菊花粉形態(tài)、減數(shù)分裂、菊屬遠(yuǎn)緣雜交等[4-8],而對太行菊離體繁殖方面的研究極少,僅見姚連芳等[9]、王建博等[10]的2篇報(bào)道。這些研究中均以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,而關(guān)于其他培養(yǎng)基(如N6、B5、Nitsch等)及培養(yǎng)基中成分組成對太行菊離體培養(yǎng)作用的研究還未見報(bào)道。由于太行菊多生長于向陽裸露崖壁或巖石縫隙中[2-3],所處生境土壤稀少,有機(jī)質(zhì)、全氮含量較低,鈣含量較高[11]??紤]太行菊的獨(dú)特生境,MS基本培養(yǎng)基成分對太行菊的生長發(fā)育并不一定完全適宜。本研究以MS培養(yǎng)基為對照,研究 3種常用培養(yǎng)基(N6、B5、Nitsch)及不同基本培養(yǎng)基的成分組合對太行菊不定芽增殖與生長的影響,以期篩選出適于太行菊增殖與生長的理想培養(yǎng)條件,進(jìn)而建立高效穩(wěn)定的太行菊離體繁殖技術(shù)體系。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    太行菊采自新鄉(xiāng)關(guān)山國家地質(zhì)公園,接種材料為太行菊無菌不定芽。

    1.2 培養(yǎng)基配制

    各培養(yǎng)基編號及其基本成分見表1。

    1.3 接種與培養(yǎng)

    在超凈工作臺上選擇長勢旺盛且大小一致的太行菊不定芽塊,將其切成1 cm3大小,然后分別接種于以上各種培養(yǎng)基中,每種培養(yǎng)基接種20瓶,每瓶接種3塊不定芽塊。接種時(shí)不定芽塊基部嵌入培養(yǎng)基,但不定芽生長點(diǎn)要外露。

    培養(yǎng)溫度24~26 ℃,光照強(qiáng)度1 500~2 000 lx,光照時(shí)間12 h/d。

    1.4 調(diào)查項(xiàng)目與方法

    接種后7 d觀察、記錄不定芽開始增殖的情況,以后定期觀察不定芽增殖情況及其長勢。接種培養(yǎng)40 d時(shí)記錄各處理的接種不定芽塊總數(shù)、芽塊大小、不定芽長勢(不定芽的葉色、葉片長度、葉片枯死情況等)等項(xiàng)目。然后將增殖后的不定芽塊切割成與接種時(shí)一致大小(1 cm3),統(tǒng)計(jì)各處理增殖后芽塊的分割總塊數(shù),并計(jì)算各處理不定芽增殖系數(shù)。

    不定芽增殖系數(shù)=增殖后芽塊的分割總塊數(shù)/接種芽塊總數(shù)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同基本培養(yǎng)基對太行菊不定芽增殖與生長的影響

    由表2可見,在4種不同基本培養(yǎng)基上太行菊不定芽增殖與生長狀況存在較大差異。在MS基本培養(yǎng)基(Ⅰ-1)上太行菊不定芽增殖與生長狀況表現(xiàn)最好,芽塊上產(chǎn)生大量不定芽,芽塊大小與不定芽增殖系數(shù)均達(dá)到最大值。并且在該培養(yǎng)基上,不定芽生長正常,長勢旺盛,較大不定芽葉片長度可以達(dá)到5~10 mm。不定芽塊中雖有黃褐色的枯死葉片,但數(shù)量極少。與Ⅰ-1處理相比,N6基本培養(yǎng)基(Ⅰ-2)處理最顯著的變化是形成的不定芽較小,芽塊變小。雖然在該培養(yǎng)基上也有大量不定芽的分化,但不定芽細(xì)小,葉色淡黃,葉片長度多為3~4 mm,甚至更小。在B5基本培養(yǎng)基(Ⅰ-3)、Nitsch基本培養(yǎng)基(Ⅰ-4)中,太行菊不定芽增殖與生長狀況表現(xiàn)更差,不僅芽塊小,不定芽增殖系數(shù)低,且不定芽長勢弱,不定芽葉片卷曲,呈水浸狀,黃色至褐色,芽塊中夾雜較多的枯死葉片。特別是B5培養(yǎng)基上芽塊中夾雜大量褐色枯死葉片,甚至整個(gè)芽塊變褐枯死。

    由此可知,在所采用的4種基本培養(yǎng)基中,MS基本培養(yǎng)基較適合太行菊不定芽的增殖與生長,N6基本培養(yǎng)基次之,而Nitsch、B5基本培養(yǎng)基不適合太行菊的離體培養(yǎng)。特別是B5基本培養(yǎng)基不僅使不定芽增殖嚴(yán)重受阻,而且還會導(dǎo)致大量不定芽枯死。

    在大量元素與有機(jī)物質(zhì)構(gòu)成相同,僅存在微量元素構(gòu)成差異的2組培養(yǎng)基(Ⅱ-1、Ⅱ-4、Ⅱ-5為1組,Ⅱ-2、Ⅱ-6為1組)中,就太行菊不定芽的增殖與生長狀況而言,雖然組別間存在較大差異,但在每組內(nèi)各處理間太行菊不定芽的增殖與生長狀況差異很小。這進(jìn)一步表明,不同培養(yǎng)基間微量元素構(gòu)成差異對太行菊離體培養(yǎng)的影響較小,而培養(yǎng)基間大量元素的種類與含量差異對太行菊不定芽增殖與生長起關(guān)鍵作用。

    同樣,在大量元素與微量元素構(gòu)成相同,僅存在有機(jī)物質(zhì)構(gòu)成差異的2組培養(yǎng)基中(Ⅱ-1、Ⅱ-7為1組,Ⅱ-2、Ⅱ-8為1組),同組內(nèi)不同培養(yǎng)基間的離體培養(yǎng)結(jié)果差異均很小。這表明,培養(yǎng)基中有機(jī)物質(zhì)的構(gòu)成差異對太行菊不定芽增殖與生長的影響較小。

    2.3 糖種類與濃度對太行菊不定芽增殖與生長的影響

    MS基本培養(yǎng)基中糖種類與濃度對太行菊不定芽的增殖與生長狀況影響較大。由表4可知,當(dāng)培養(yǎng)基中添加蔗糖時(shí),不同蔗糖濃度處理對太行菊不定芽增殖與生長均有影響。當(dāng)蔗糖濃度為1.5%、3%時(shí)(Ⅲ-1、Ⅲ-2處理),芽塊上均有大量不定芽分化,不定芽增殖系數(shù)與芽塊大小在2個(gè)處理間相近。但在蔗糖濃度較低的Ⅲ-1培養(yǎng)基上,太行菊不定芽生長狀況更好,芽塊蓬松鮮綠,不定芽生長整齊、旺盛,富有生機(jī),芽塊中幾乎看不到黃化枯死的葉片。當(dāng)培養(yǎng)基中蔗糖濃度提高到5%時(shí)(Ⅲ-3處理),不定芽分化與生長嚴(yán)重受阻,整個(gè)芽塊呈淡黃色,芽塊表面布滿大量淡黃色的顆粒狀小芽或點(diǎn)狀突起。較大的不定芽數(shù)量少,并且葉片呈水浸狀,黃色至黃褐色,葉片長度也僅有3~5 mm。

    當(dāng)培養(yǎng)基中添加食糖時(shí),不同食糖濃度下太行菊不定芽的增殖與生長表現(xiàn)與不同蔗糖濃度下的表現(xiàn)相類似。在較低食糖濃度下(1.5%、3%),太行菊不定芽增殖與生長較好;在過高的食糖濃度(5%)下,太行菊不定芽增殖與生長表現(xiàn)很差。當(dāng)食糖、蔗糖濃度相同時(shí),太行菊不定芽增殖與生長狀況差異較小,除在蔗糖培養(yǎng)基上的不定芽稍大外,對應(yīng)糖濃度下的芽塊大小、不定芽增殖系數(shù)等都相差不大。

    綜合分析,無論是使用蔗糖還是食糖,糖濃度過高(5%)將嚴(yán)重抑制太行菊不定芽的生長,引起不定芽生長停滯,分化數(shù)量減少;1.5%、3%糖濃度對太行菊不定芽的增殖與生長較適宜,特別是在1.5%糖濃度下不定芽生長更為旺盛,芽塊中枯死葉片極少。在培養(yǎng)基中添加適宜濃度蔗糖的培養(yǎng)效果稍好于食糖,但差別并不大。

    3 結(jié)論與討論

    有關(guān)太行菊離體培養(yǎng)的研究報(bào)道很少,在已有研究中,研究者一般采用MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基。從理論上講,MS培養(yǎng)基中無機(jī)鹽濃度較高,微量元素及有機(jī)成分齊全而豐富,對多數(shù)植物的增殖培養(yǎng)而言,是較為理想的一種基本培養(yǎng)基。但太行菊生境土壤貧瘠,缺乏植物生長所需的營養(yǎng),何種類型培養(yǎng)基更適合太行菊的離體培養(yǎng),有必要進(jìn)一步研究。

    本研究以MS培養(yǎng)基(高無機(jī)鹽培養(yǎng)基)為對照,研究B5、N6(高硝酸鉀含量培養(yǎng)基,其中B5培養(yǎng)基有機(jī)物質(zhì)含量高)和Nitsch(中等無機(jī)鹽含量培養(yǎng)基,有機(jī)物質(zhì)種類較全)3種基本培養(yǎng)基及其基本成分(大量元素、微量元素、有機(jī)物質(zhì))的不同搭配組合對太行菊離體培養(yǎng)的影響。

    研究結(jié)果表明,太行菊不定芽在MS、B5、N6、Nitsch 4種基本培養(yǎng)基上的增殖與生長狀況存在較大差異:在MS、N6基本培養(yǎng)基上,接種芽塊均產(chǎn)生大量不定芽,并且不定芽生長基本正常,葉色鮮綠,芽塊中黃化枯死的葉片都很少。不定芽在這2種培養(yǎng)基上生長的主要差異是N6培養(yǎng)基處理的不定芽較小,葉片窄短。在Nitsch、B5培養(yǎng)基上太行菊不定芽分化數(shù)量大幅度減少,增殖系數(shù)降低,且不定芽長勢差,出現(xiàn)較多黃色至褐色的枯死不定芽。特別是在B5培養(yǎng)基上,芽塊中不定芽枯死更嚴(yán)重,甚至整個(gè)芽塊變褐枯死。B5、N6培養(yǎng)基都屬于高無機(jī)鹽含量、高KNO3含量培養(yǎng)基,按照本研究結(jié)果,不同培養(yǎng)基中微量元素與有機(jī)物質(zhì)的構(gòu)成差異對不定芽增殖與生長的影響較小,那么在這2種基本培養(yǎng)基上太行菊不定芽離體培養(yǎng)的差異應(yīng)當(dāng)是由于兩者在大量元素組成上的差異引起。相對于N6、MS基本培養(yǎng)基,B5培養(yǎng)基的大量元素中CaCl2·2H2O用量顯著降低,不含KH2PO4,硝態(tài)氮與銨態(tài)氮比例加大,是否由其中1種或多種因素以及其他因素造成太行菊離體培養(yǎng)差異,還須要進(jìn)一步研究。

    不同基本培養(yǎng)基大量元素、微量元素、有機(jī)成分的種類與含量各有特點(diǎn),基本培養(yǎng)基之間基本成分的不同搭配組合,有望獲得最適宜太行菊不定芽增殖與生長的基本培養(yǎng)基。與標(biāo)準(zhǔn)MS、B5、N6、Nitsch基本培養(yǎng)基相比,基于這4種基本培養(yǎng)基的4種組合培養(yǎng)基(Ⅱ-1、Ⅱ-4、Ⅱ-5、Ⅱ-7培養(yǎng)基)對太行菊不定芽增殖與生長有明顯促進(jìn)作用,太行菊在這些組合培養(yǎng)基上的離體培養(yǎng)效果均好于未改動的基本培養(yǎng)基。而由N6培養(yǎng)基大量元素與B5培養(yǎng)基微量元素、有機(jī)物質(zhì)組合而成的Ⅱ-5培養(yǎng)基,在本研究中對太行菊離體培養(yǎng)的效果最好。

    培養(yǎng)基中糖濃度對太行菊不定芽的增殖與生長有較大影響。糖濃度過高對太行菊不定芽的分化與生長產(chǎn)生抑制,在芽塊表面往往形成大量顆粒狀突起或芽點(diǎn),而缺少伸長生長的不定芽。在一定范圍內(nèi),適當(dāng)降低培養(yǎng)基中糖濃度有利于不定芽的生長,減少枯死葉片的發(fā)生。在相同糖濃度下,在培養(yǎng)基中添加蔗糖的培養(yǎng)效果要稍好于食糖,但兩者相差不大。食糖價(jià)格遠(yuǎn)低于蔗糖,若能用食糖替代蔗糖作為培養(yǎng)基碳源,將會大大降低離體培養(yǎng)中的生產(chǎn)成本。1.5%、3%食糖都可以用于太行菊不定芽的離體培養(yǎng),3%食糖處理的太行菊不定芽增殖系數(shù)稍高,但1.5%食糖處理的不定芽長勢更旺,芽塊中枯葉更少。在兼顧太行菊不定芽增殖與生長的前提下,若進(jìn)行太行菊組培苗的規(guī)?;a(chǎn),在培養(yǎng)基中添加1.5%食糖是較理想的選擇。

    參考文獻(xiàn):

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    當(dāng)培養(yǎng)基中添加食糖時(shí),不同食糖濃度下太行菊不定芽的增殖與生長表現(xiàn)與不同蔗糖濃度下的表現(xiàn)相類似。在較低食糖濃度下(1.5%、3%),太行菊不定芽增殖與生長較好;在過高的食糖濃度(5%)下,太行菊不定芽增殖與生長表現(xiàn)很差。當(dāng)食糖、蔗糖濃度相同時(shí),太行菊不定芽增殖與生長狀況差異較小,除在蔗糖培養(yǎng)基上的不定芽稍大外,對應(yīng)糖濃度下的芽塊大小、不定芽增殖系數(shù)等都相差不大。

    綜合分析,無論是使用蔗糖還是食糖,糖濃度過高(5%)將嚴(yán)重抑制太行菊不定芽的生長,引起不定芽生長停滯,分化數(shù)量減少;1.5%、3%糖濃度對太行菊不定芽的增殖與生長較適宜,特別是在1.5%糖濃度下不定芽生長更為旺盛,芽塊中枯死葉片極少。在培養(yǎng)基中添加適宜濃度蔗糖的培養(yǎng)效果稍好于食糖,但差別并不大。

    3 結(jié)論與討論

    有關(guān)太行菊離體培養(yǎng)的研究報(bào)道很少,在已有研究中,研究者一般采用MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基。從理論上講,MS培養(yǎng)基中無機(jī)鹽濃度較高,微量元素及有機(jī)成分齊全而豐富,對多數(shù)植物的增殖培養(yǎng)而言,是較為理想的一種基本培養(yǎng)基。但太行菊生境土壤貧瘠,缺乏植物生長所需的營養(yǎng),何種類型培養(yǎng)基更適合太行菊的離體培養(yǎng),有必要進(jìn)一步研究。

    本研究以MS培養(yǎng)基(高無機(jī)鹽培養(yǎng)基)為對照,研究B5、N6(高硝酸鉀含量培養(yǎng)基,其中B5培養(yǎng)基有機(jī)物質(zhì)含量高)和Nitsch(中等無機(jī)鹽含量培養(yǎng)基,有機(jī)物質(zhì)種類較全)3種基本培養(yǎng)基及其基本成分(大量元素、微量元素、有機(jī)物質(zhì))的不同搭配組合對太行菊離體培養(yǎng)的影響。

    研究結(jié)果表明,太行菊不定芽在MS、B5、N6、Nitsch 4種基本培養(yǎng)基上的增殖與生長狀況存在較大差異:在MS、N6基本培養(yǎng)基上,接種芽塊均產(chǎn)生大量不定芽,并且不定芽生長基本正常,葉色鮮綠,芽塊中黃化枯死的葉片都很少。不定芽在這2種培養(yǎng)基上生長的主要差異是N6培養(yǎng)基處理的不定芽較小,葉片窄短。在Nitsch、B5培養(yǎng)基上太行菊不定芽分化數(shù)量大幅度減少,增殖系數(shù)降低,且不定芽長勢差,出現(xiàn)較多黃色至褐色的枯死不定芽。特別是在B5培養(yǎng)基上,芽塊中不定芽枯死更嚴(yán)重,甚至整個(gè)芽塊變褐枯死。B5、N6培養(yǎng)基都屬于高無機(jī)鹽含量、高KNO3含量培養(yǎng)基,按照本研究結(jié)果,不同培養(yǎng)基中微量元素與有機(jī)物質(zhì)的構(gòu)成差異對不定芽增殖與生長的影響較小,那么在這2種基本培養(yǎng)基上太行菊不定芽離體培養(yǎng)的差異應(yīng)當(dāng)是由于兩者在大量元素組成上的差異引起。相對于N6、MS基本培養(yǎng)基,B5培養(yǎng)基的大量元素中CaCl2·2H2O用量顯著降低,不含KH2PO4,硝態(tài)氮與銨態(tài)氮比例加大,是否由其中1種或多種因素以及其他因素造成太行菊離體培養(yǎng)差異,還須要進(jìn)一步研究。

    不同基本培養(yǎng)基大量元素、微量元素、有機(jī)成分的種類與含量各有特點(diǎn),基本培養(yǎng)基之間基本成分的不同搭配組合,有望獲得最適宜太行菊不定芽增殖與生長的基本培養(yǎng)基。與標(biāo)準(zhǔn)MS、B5、N6、Nitsch基本培養(yǎng)基相比,基于這4種基本培養(yǎng)基的4種組合培養(yǎng)基(Ⅱ-1、Ⅱ-4、Ⅱ-5、Ⅱ-7培養(yǎng)基)對太行菊不定芽增殖與生長有明顯促進(jìn)作用,太行菊在這些組合培養(yǎng)基上的離體培養(yǎng)效果均好于未改動的基本培養(yǎng)基。而由N6培養(yǎng)基大量元素與B5培養(yǎng)基微量元素、有機(jī)物質(zhì)組合而成的Ⅱ-5培養(yǎng)基,在本研究中對太行菊離體培養(yǎng)的效果最好。

    培養(yǎng)基中糖濃度對太行菊不定芽的增殖與生長有較大影響。糖濃度過高對太行菊不定芽的分化與生長產(chǎn)生抑制,在芽塊表面往往形成大量顆粒狀突起或芽點(diǎn),而缺少伸長生長的不定芽。在一定范圍內(nèi),適當(dāng)降低培養(yǎng)基中糖濃度有利于不定芽的生長,減少枯死葉片的發(fā)生。在相同糖濃度下,在培養(yǎng)基中添加蔗糖的培養(yǎng)效果要稍好于食糖,但兩者相差不大。食糖價(jià)格遠(yuǎn)低于蔗糖,若能用食糖替代蔗糖作為培養(yǎng)基碳源,將會大大降低離體培養(yǎng)中的生產(chǎn)成本。1.5%、3%食糖都可以用于太行菊不定芽的離體培養(yǎng),3%食糖處理的太行菊不定芽增殖系數(shù)稍高,但1.5%食糖處理的不定芽長勢更旺,芽塊中枯葉更少。在兼顧太行菊不定芽增殖與生長的前提下,若進(jìn)行太行菊組培苗的規(guī)?;a(chǎn),在培養(yǎng)基中添加1.5%食糖是較理想的選擇。

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    當(dāng)培養(yǎng)基中添加食糖時(shí),不同食糖濃度下太行菊不定芽的增殖與生長表現(xiàn)與不同蔗糖濃度下的表現(xiàn)相類似。在較低食糖濃度下(1.5%、3%),太行菊不定芽增殖與生長較好;在過高的食糖濃度(5%)下,太行菊不定芽增殖與生長表現(xiàn)很差。當(dāng)食糖、蔗糖濃度相同時(shí),太行菊不定芽增殖與生長狀況差異較小,除在蔗糖培養(yǎng)基上的不定芽稍大外,對應(yīng)糖濃度下的芽塊大小、不定芽增殖系數(shù)等都相差不大。

    綜合分析,無論是使用蔗糖還是食糖,糖濃度過高(5%)將嚴(yán)重抑制太行菊不定芽的生長,引起不定芽生長停滯,分化數(shù)量減少;1.5%、3%糖濃度對太行菊不定芽的增殖與生長較適宜,特別是在1.5%糖濃度下不定芽生長更為旺盛,芽塊中枯死葉片極少。在培養(yǎng)基中添加適宜濃度蔗糖的培養(yǎng)效果稍好于食糖,但差別并不大。

    3 結(jié)論與討論

    有關(guān)太行菊離體培養(yǎng)的研究報(bào)道很少,在已有研究中,研究者一般采用MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基。從理論上講,MS培養(yǎng)基中無機(jī)鹽濃度較高,微量元素及有機(jī)成分齊全而豐富,對多數(shù)植物的增殖培養(yǎng)而言,是較為理想的一種基本培養(yǎng)基。但太行菊生境土壤貧瘠,缺乏植物生長所需的營養(yǎng),何種類型培養(yǎng)基更適合太行菊的離體培養(yǎng),有必要進(jìn)一步研究。

    本研究以MS培養(yǎng)基(高無機(jī)鹽培養(yǎng)基)為對照,研究B5、N6(高硝酸鉀含量培養(yǎng)基,其中B5培養(yǎng)基有機(jī)物質(zhì)含量高)和Nitsch(中等無機(jī)鹽含量培養(yǎng)基,有機(jī)物質(zhì)種類較全)3種基本培養(yǎng)基及其基本成分(大量元素、微量元素、有機(jī)物質(zhì))的不同搭配組合對太行菊離體培養(yǎng)的影響。

    研究結(jié)果表明,太行菊不定芽在MS、B5、N6、Nitsch 4種基本培養(yǎng)基上的增殖與生長狀況存在較大差異:在MS、N6基本培養(yǎng)基上,接種芽塊均產(chǎn)生大量不定芽,并且不定芽生長基本正常,葉色鮮綠,芽塊中黃化枯死的葉片都很少。不定芽在這2種培養(yǎng)基上生長的主要差異是N6培養(yǎng)基處理的不定芽較小,葉片窄短。在Nitsch、B5培養(yǎng)基上太行菊不定芽分化數(shù)量大幅度減少,增殖系數(shù)降低,且不定芽長勢差,出現(xiàn)較多黃色至褐色的枯死不定芽。特別是在B5培養(yǎng)基上,芽塊中不定芽枯死更嚴(yán)重,甚至整個(gè)芽塊變褐枯死。B5、N6培養(yǎng)基都屬于高無機(jī)鹽含量、高KNO3含量培養(yǎng)基,按照本研究結(jié)果,不同培養(yǎng)基中微量元素與有機(jī)物質(zhì)的構(gòu)成差異對不定芽增殖與生長的影響較小,那么在這2種基本培養(yǎng)基上太行菊不定芽離體培養(yǎng)的差異應(yīng)當(dāng)是由于兩者在大量元素組成上的差異引起。相對于N6、MS基本培養(yǎng)基,B5培養(yǎng)基的大量元素中CaCl2·2H2O用量顯著降低,不含KH2PO4,硝態(tài)氮與銨態(tài)氮比例加大,是否由其中1種或多種因素以及其他因素造成太行菊離體培養(yǎng)差異,還須要進(jìn)一步研究。

    不同基本培養(yǎng)基大量元素、微量元素、有機(jī)成分的種類與含量各有特點(diǎn),基本培養(yǎng)基之間基本成分的不同搭配組合,有望獲得最適宜太行菊不定芽增殖與生長的基本培養(yǎng)基。與標(biāo)準(zhǔn)MS、B5、N6、Nitsch基本培養(yǎng)基相比,基于這4種基本培養(yǎng)基的4種組合培養(yǎng)基(Ⅱ-1、Ⅱ-4、Ⅱ-5、Ⅱ-7培養(yǎng)基)對太行菊不定芽增殖與生長有明顯促進(jìn)作用,太行菊在這些組合培養(yǎng)基上的離體培養(yǎng)效果均好于未改動的基本培養(yǎng)基。而由N6培養(yǎng)基大量元素與B5培養(yǎng)基微量元素、有機(jī)物質(zhì)組合而成的Ⅱ-5培養(yǎng)基,在本研究中對太行菊離體培養(yǎng)的效果最好。

    培養(yǎng)基中糖濃度對太行菊不定芽的增殖與生長有較大影響。糖濃度過高對太行菊不定芽的分化與生長產(chǎn)生抑制,在芽塊表面往往形成大量顆粒狀突起或芽點(diǎn),而缺少伸長生長的不定芽。在一定范圍內(nèi),適當(dāng)降低培養(yǎng)基中糖濃度有利于不定芽的生長,減少枯死葉片的發(fā)生。在相同糖濃度下,在培養(yǎng)基中添加蔗糖的培養(yǎng)效果要稍好于食糖,但兩者相差不大。食糖價(jià)格遠(yuǎn)低于蔗糖,若能用食糖替代蔗糖作為培養(yǎng)基碳源,將會大大降低離體培養(yǎng)中的生產(chǎn)成本。1.5%、3%食糖都可以用于太行菊不定芽的離體培養(yǎng),3%食糖處理的太行菊不定芽增殖系數(shù)稍高,但1.5%食糖處理的不定芽長勢更旺,芽塊中枯葉更少。在兼顧太行菊不定芽增殖與生長的前提下,若進(jìn)行太行菊組培苗的規(guī)?;a(chǎn),在培養(yǎng)基中添加1.5%食糖是較理想的選擇。

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