頭孢氨芐片溶出度的光纖過程分析

李 欣， 朱 瑾， 耿 晶， 楊淑梅， 李新霞

(新疆醫(yī)科大學(xué)1藥學(xué)院， 2第五附屬醫(yī)院藥劑科， 烏魯木齊 830011)

藥物從固體劑型中釋放可涉及3個(gè)主要步驟：崩解、溶解并最終溶解[1]。以上3個(gè)過程同時(shí)發(fā)生，且對劑型有很強(qiáng)的依賴性，使溶解速度最終決定了藥物的釋放和它的吸收[2-3]。因此，體外溶出研究是確保固體形式制劑的質(zhì)量控制和工藝優(yōu)化的重要手段。頭孢氨芐為第一代口服頭孢類抗生素，對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌均有抗菌作用，具有抗菌譜廣、抗菌作用強(qiáng)、耐青霉素酶、臨床療效高、毒性低、過敏反應(yīng)少等優(yōu)點(diǎn)，臨床應(yīng)用廣泛[4-5]?！吨袊幍洹?010年版[6]收載了頭孢氨芐的干混懸劑、片劑、膠囊和顆粒7個(gè)劑型，其中對片劑和膠囊的體外溶出度檢查進(jìn)行了規(guī)定：照溶出度測定法第一法，限度為標(biāo)示量的80%，應(yīng)符合規(guī)定。頭孢氨芐片的國內(nèi)生產(chǎn)廠家眾多，但臨床反映效果不一，影響其臨床療效的主要原因在于頭孢氨芐片溶出行為的差異。

溶出曲線的測試已成為評價(jià)固體制劑內(nèi)在品質(zhì)的一種科學(xué)手段與方法[7]。光纖化學(xué)傳感器(fiber optic chemical sensors，F(xiàn)OCS)用于體外溶出曲線的檢測是光纖、光譜和計(jì)算機(jī)技術(shù)結(jié)合形成的新技術(shù)，現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用[8-10]。本研究旨在建立應(yīng)用該儀器基礎(chǔ)上研發(fā)的FOCS-601型光纖藥物溶出度實(shí)時(shí)測定儀原位監(jiān)測頭孢氨芐片溶出過程的方法。

1 儀器與試劑

FODT-601型光纖藥物溶出度實(shí)時(shí)測定儀(新疆醫(yī)科大學(xué)-新疆富科思生物技術(shù)公司聯(lián)合研制)，真空脫氣儀(ZKT-18，天大天發(fā)科技有限公司)，紫外可見分光光度計(jì)(UV-2550，日本島津公司)，頭孢氨芐對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)：130408-200710，純度94.4%)。試藥：頭孢氨芐片(廠家：北京京豐制藥有限公司，規(guī)格：250 mg，批號(hào)：120310)。

2 方法與結(jié)果

2.1檢測波長及光程的選擇根據(jù)2010年版《中國藥典》，采用脫氣蒸餾水作為溶出介質(zhì)，以脫氣蒸餾水為空白，掃描約25 μg/mL的對照品及完全釋放的待測頭孢氨芐片供試品的紫外吸收光譜(圖1)。對照品溶液在262 nm處有最大吸收，且在550 nm處無吸收；供試品溶液同樣在262 nm處有最大吸收，在300～600 nm處沒有特征吸收，為1條與X軸平行的直線。溶出度測試條件符合2010年版《中國藥典》二部規(guī)定，因此選擇262 nm作為測定波長，選擇550 nm作為參比波長，參比波長可以消除溶液中不溶賦形劑顆粒的干擾。選擇1 mm探頭，使溶液的吸光度在0.8～1.2范圍內(nèi)。

2.2線性與范圍精密稱取頭孢氨芐對照品194.4 mg于25 mL容量瓶中，加水溶解，定容至刻度，搖勻即得濃度為7 776 μg/mL的頭孢氨芐儲(chǔ)備液。分別精密量取0.7、1.4、2.1、2.9、3.6、4.3 mL儲(chǔ)備液于100 mL容量瓶中，加水稀釋定容至刻度，搖勻，得系列濃度分別為55.6、111.1、166.8、222.2、277.8、333.4 μg/mL的對照品溶液(相對百分溶出率分別為20%、40%、60%、80%、100%、120%)。

將該系列標(biāo)準(zhǔn)溶液分別加入1～6 號(hào)10 mL測量管中，于37℃預(yù)熱后將6個(gè)光纖探頭同時(shí)浸入標(biāo)準(zhǔn)溶液中，掃描系列標(biāo)準(zhǔn)溶液得到紫外吸收光譜。選擇測定波長為262 nm， 參比波長為550 nm；探頭間距1.0 mm。儀器采集得到在各通道測定各組溶液的吸光度，以吸光度(A)為橫坐標(biāo)，相對百分溶出率(C %)為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得到6條標(biāo)準(zhǔn)曲線，由表1可知，頭孢氨芐在百分溶出度為20%～120%范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

表1 各通道探頭回歸方程

2.3日內(nèi)、日間精密度試驗(yàn)分別取相對溶出率為40%、80%和120%的標(biāo)準(zhǔn)溶液在光纖藥物溶出儀的6個(gè)通道進(jìn)行精密度考察，結(jié)果顯示其日內(nèi)精密度與日間精密度RSD分別為1.87%和0.85%，見表2。

表2 日內(nèi)及日間精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.4回收率試驗(yàn)取濃度約為250 μg/mL(溶出百分率90%)頭孢氨芐本底溶液10 mL共12份于50 mL量瓶中，分為4組，分別加入對照品溶液0、10、20、30 mL，用脫氣蒸餾水稀釋至刻度，進(jìn)行測定，計(jì)算回收率。結(jié)果平均回收率為100.03%，RSD為3.91%，見表3。

表3 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.5樣品測定根據(jù)2010年版《中國藥典》規(guī)定的頭孢氨芐片溶出度的測定條件，采用轉(zhuǎn)籃法，100 r/min，以脫氣蒸餾水900 mL為溶出介質(zhì)進(jìn)行試驗(yàn)，溫度 37℃，測定時(shí)間為連續(xù)45 min。取6片依法測定，由光纖藥物溶出儀原位過程監(jiān)測得到溶出曲線(圖 2)，藥物于2～3 nim開始釋放，在38 min左右達(dá)到平臺(tái)。同時(shí)，于45 min按照藥典方法取樣，以紫外-可見分光光度法(2010年版《中國藥典》附錄IV A)測定頭孢氨芐片的吸光度，計(jì)算各溶出杯中頭孢氨芐片的累計(jì)溶出率，結(jié)果與光纖傳感過程分析結(jié)果無明顯差異，見表4。

表4 FODT法與紫外-可見分光光度法結(jié)果比較

3 討論

利用光纖溶出儀測定頭孢氨芐片溶出度實(shí)驗(yàn)精密度較高，數(shù)據(jù)可靠，具有重要的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，本研究建立的方法可對膠囊、緩釋等多種劑型的頭孢氨芐藥品的溶出行為進(jìn)行過程分析。

《中國藥典》只采用一點(diǎn)法控制藥品質(zhì)量，無法對藥物溶出的全過程進(jìn)行評價(jià)。對于前期崩解且溶出較快的片劑，有可能會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)的血藥濃度突增，超出安全濃度，引起不良反應(yīng)。此外，遲釋程度的不同，決定了藥物的起效時(shí)間，對于抗生素類藥物，如果藥物釋放迅速，血藥濃度很快達(dá)到峰值，治療作用快；若釋放緩慢，除起效慢、治療效果較差外，還容易產(chǎn)生耐藥性。因此，對于這些片劑來說，僅僅按照藥典規(guī)定來判斷其質(zhì)量是否合格顯然是不全面的，而應(yīng)該在確定了參比制劑和實(shí)時(shí)在線全程測定的基礎(chǔ)上對以下3個(gè)指標(biāo)進(jìn)行分析：(1) 溶出曲線的相似性比較及其與參比制劑的溶出曲線比對；(2) 藥物制劑溶出速度的指標(biāo)；(3) 藥物制劑溶出程度的指標(biāo)。光纖傳感溶出儀測定固體制劑的溶出度優(yōu)勢明顯，適合制劑工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，考察制劑處方溶出曲線的不同，進(jìn)而優(yōu)化處方工藝，達(dá)到更好地控制藥物質(zhì)量的目的。

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