復(fù)方地舍平片有效成分含量的測(cè)定

羅德全

復(fù)方地舍平片有效成分含量的測(cè)定

羅德全

目的 采用高效液相法中的外標(biāo)法，測(cè)定復(fù)方地舍平片有效成分的含量。方法用乙腈以水為流動(dòng)相，超聲提取，波長(zhǎng)267nm，檢測(cè)甲氯噻嗪的含量。用甲醇以水為流動(dòng)相，超聲提取，波長(zhǎng)217nm，檢測(cè)去甲氧利血平的含量。結(jié)果甲氯噻嗪項(xiàng)在0.0525～0.2625μg 范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。去甲氧利血平在0.0606～0.3030μg 范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好（r=1.00000），平均回收率99.43%，RSD1.3%（＜2.0 %）。結(jié)論該方法處理方便、省時(shí)、計(jì)算簡(jiǎn)單，結(jié)果準(zhǔn)確，檢驗(yàn)成本低。

復(fù)方羊角片；白芷；超聲提??；HPLC法

復(fù)方地舍平片為復(fù)方制劑，有效成分為甲氯噻嗪、去甲氧利血平，參閱相關(guān)文獻(xiàn)[1]，復(fù)方地舍平片有效成分的含量測(cè)定是采用了高效液相色譜的內(nèi)標(biāo)法。本實(shí)驗(yàn)采用高效液相的外標(biāo)法測(cè)定復(fù)方地舍平片有效成分含量，結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)建立的方法，具有良好的準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性、重復(fù)性，而且操作簡(jiǎn)單，成本低，現(xiàn)將其闡述如下。

1 儀器

高效液相色譜儀（LC-2010C，日本島津公司）；紫外分光光度計(jì)（UV-2550，日本島津公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 流速選擇流速為1m l/m in。

2.2 流動(dòng)相選擇①分別用乙腈:水為（40:60）、（45:55）、（50:50）三種比例流動(dòng)相檢測(cè)同一樣品的甲氯噻嗪項(xiàng)，進(jìn)樣量 10μl，檢測(cè)波長(zhǎng) 267nm。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)方地舍平片中甲氯噻嗪項(xiàng)，采用流動(dòng)相乙腈:水（40:60）配比時(shí)理論塔板數(shù)、拖尾因子及出峰時(shí)間滿足要求，能準(zhǔn)確檢出甲氯噻嗪的含量。②分別甲醇：水為（80:20）、（85:15）、（90:10）三種比例流動(dòng)相檢測(cè)同一樣品的去甲氧利血平項(xiàng)，進(jìn)樣量 10μl，檢測(cè)波長(zhǎng) 217nm。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)方地舍平片中去甲氧利血平項(xiàng)，采用流動(dòng)相甲醇:水（85:15）配比時(shí)理論塔板數(shù)、拖尾因子及出峰時(shí)間滿足要求，能準(zhǔn)確檢出去甲氧利血平的含量。

2.3 溶解方法取一批樣品，兩組平行樣。測(cè)定甲氯噻嗪項(xiàng)時(shí)分別超聲15m in和振搖15m in，超聲提取平均含量101.04%，振搖提取平均含量99.38%；測(cè)定去甲氧利血平項(xiàng)時(shí)分別超聲 30m in和振搖30min，超聲提取平均含量96.85%，振搖提取平均含量95.37。實(shí)驗(yàn)結(jié)果有明顯差異，因而選擇用超聲方法比較好，能完全溶解樣品。

2.4 溶解時(shí)間取一批樣品，甲氯噻嗪項(xiàng)分別超聲10、15、20min，含量檢測(cè)結(jié)果分別為 99.32%、102.38%、1001.96%；去甲氧利血平項(xiàng)分別超聲25、30、35m in，含量檢測(cè)結(jié)果分別為95.32%、94.62%、96.34%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，甲氯噻嗪項(xiàng)超聲15m in時(shí)，其有效成分就溶解完全。去甲氧利血平項(xiàng)超聲30min時(shí)，其有效成分就溶解完全。

2.5 線性關(guān)系配制一定濃度的對(duì)照品溶液，分別精密吸取對(duì)照品溶液5、10、15、20、25μl依次進(jìn)樣，結(jié)果見表1，以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，找出進(jìn)樣量線性范圍建立方程。

甲氯噻嗪項(xiàng)回歸方程為 Y=3.07565e+006X+ 2820.80000，r=1.00000，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，甲氯噻嗪項(xiàng)在0.0525～0.2625μg 范圍內(nèi)，進(jìn)樣量與其峰面積呈良好的線性關(guān)系。去甲氧利血平項(xiàng)回歸方程為Y=7.10050e+006X+900.700000，r=1.00000，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，去甲氧利血平在 0.0606～0.3030μg 范圍內(nèi)，進(jìn)樣量與其峰面積呈良好的線性關(guān)系。

表1 測(cè)樣結(jié)果

2.6 準(zhǔn)確度取已知有效成分含量的樣品，分別測(cè)定甲氯噻嗪、去甲氧利血平各項(xiàng)回收率。精密稱取兩項(xiàng)樣品各9份，加入定量的甲氯噻嗪、去甲氧利血平對(duì)照品，設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度各分別制備3份供試品溶液，在已確定的色譜條件下測(cè)定甲氯噻嗪項(xiàng)平均回收率99.78%，RSD0.48%（＜2.0%）；去甲氧利血項(xiàng)平均回收率99.43%，RSD1.3%（＜2.0%）。從回收率可以看出，該方法測(cè)定結(jié)果與真實(shí)值接近程度好。

2.7 穩(wěn)定性取一批樣品制成供試品溶液，分別放置0、3、6、12、24h后，在上述色譜條件下進(jìn)樣分析，測(cè)定峰面積積分值，共測(cè)定5次，甲氯噻嗪項(xiàng)RSD0.14%（＜2.0%），去甲氧利血平項(xiàng)RSD1.5%（＜2.0%）。從數(shù)據(jù)可看出，甲氯噻嗪項(xiàng)、去甲氧利血平項(xiàng)均小于2.0%，結(jié)果表明復(fù)方地舍平片樣品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 重復(fù)性取一批樣品，甲氯噻嗪、去甲氧利血平項(xiàng)分別精密稱取9個(gè)樣，各自制成9份供試品進(jìn)樣檢測(cè)。甲氯噻嗪含量結(jié)果為99.76%、99.28%、98.96%、99.86 %、99.06%、98.76%、99.54%、99.86%、98.80%；去甲氧利血平含量結(jié)果：94.80%、94.75%、94.81%、94.90 %、95.09%、94.80%、94.80%、95.02%、95.10%。從結(jié)果可看出，甲氯噻嗪、去甲氧利血平項(xiàng)RSD分別為0.44%和0.16%均小于2.0%，符合重復(fù)性要求。

3 小結(jié)

通過實(shí)驗(yàn)可以看出，復(fù)方地舍平片有效成分的含量采用了外標(biāo)法進(jìn)行測(cè)定，同樣可以滿足復(fù)方地舍平片有效成分含量檢驗(yàn)準(zhǔn)確度要求，而且能極大地節(jié)約化驗(yàn)成本，樣品處理省時(shí)、省力。

[1] 金鵬飛,閆小燕.HPLC測(cè)定復(fù)方利血平氨苯喋啶片中利血平的含量[J].藥物分析雜志,2010(7):1242-1244.

R927.2

A

1673-5846(2014)05-0217-02

黑龍江省哈爾濱市哈藥集團(tuán)制藥六廠，黑龍江哈爾濱 150056