三種藥物對孔雀魚的急性毒性試驗

徐亞超

DOI:10.3969/j.issn.1004-6755.2014.05.001

摘 要：用高錳酸鉀、孔雀石綠和亞甲基蘭三種藥物對孔雀魚開展急性毒性試驗，并記錄了它們在24 h、48 h、72 h和96 h出現(xiàn)的中毒癥狀和死亡數(shù)。結(jié)果顯示：三種藥物的96 h LC50分別為1.27 mg/L，0.73 mg/L和273.5 mg/L；三種藥物的SC分別為0.13 mg/L ，0.07 mg/L和23.75mg/L。相比較而言，亞甲基藍(lán)是最安全和理想的治療藥物。

關(guān)鍵詞：孔雀魚；急性毒性；高錳酸鉀；孔雀石綠；亞甲基蘭

隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和養(yǎng)殖技術(shù)的普及，人們對魚用藥物的選擇和藥效的研究日益深入。通過不同藥物對某種魚類的急性毒性試驗[1-3]，可以檢測該種魚類對某種藥物的敏感程度，從而篩選出藥效較好的藥物。

孔雀魚（Poecilia reticulata）隸屬于硬骨魚綱（ Actinopterygi）、鳉形目( Cyprinodontiformes)、花鳉科也稱胎鳉科( Poecilidae)、花鳉屬（Poecilia）[4]。它適應(yīng)性強(qiáng)，體形嬌小，色彩艷麗，價格便宜，是卵胎生魚類的代表品種，也是熱帶觀賞魚中養(yǎng)殖最普遍、觀賞價值較高的種類之一。在孔雀魚養(yǎng)殖過程中，各種疾病時有發(fā)生。本實驗擬選用對觀賞魚廣泛使用的高錳酸鉀、孔雀石綠和亞甲基藍(lán)開展急性毒性試驗。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗魚 從遼寧省盤錦市花鳥魚觀賞市場購買后，經(jīng)過繁殖培育的馬賽克孔雀魚，試驗魚雌雄各半，雄魚平均體長3.10 cm，體重平均210 mg；雌魚全長平均3.42 cm，體重平均460 mg。試驗前在規(guī)格為100 cm×400 cm×26 cm水族箱中生活良好，挑選其中規(guī)格基本一致的健壯個體作為試驗魚，正式試驗每組用孔雀魚10尾。

1.1.2 試驗用水及容器 實驗用水為晾曬2 d之后的自來水，水質(zhì)指標(biāo)：pH值7.2～8.0，溶氧量4.2～5.6 mg/L，水溫（20±1）℃。試驗容器為30 cm×15 cm×15 cm的塑料桶，每個塑料桶放入1 L藥液，放養(yǎng)受試實驗魚10尾。

1.1.3 試驗藥物 孔雀石綠（分析純晶體），高錳酸鉀（分析純），亞甲基藍(lán)（分析純），將準(zhǔn)確稱量的實驗藥物用試驗用水按比例稀釋成所需濃度，藥液現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.2 試驗方法

為了確定孔雀魚對藥物的急性毒性反應(yīng)，先按急性毒性試驗方法進(jìn)行預(yù)試驗，確定孔雀魚全死和不死的試驗范圍，再按等濃度梯度進(jìn)行正式試驗[5]。試驗設(shè)置五個濃度組和一個對照組，另外，每組設(shè)兩個重復(fù)。試驗分組和濃度設(shè)置見表1。試驗期間不投喂，先做8 h 的連續(xù)觀察，為保證試驗期間藥液濃度基本一致，每12 h 更換一次藥液，詳細(xì)記錄孔雀魚24 h、48 h、72 h和96 h的活動和死亡情況[6]。

采用直線內(nèi)插法求取其半致死濃度（LC50）。安全濃度（Safe Concentration SC）用公式[6]：安全濃度（SC）=96 h LC50×0.1。以鰓蓋是否停止活動和對輕微刺激有無反應(yīng)作為判斷依據(jù)。用玻璃棒或小鑷子輕刺尾柄部位，5 min內(nèi)仍無反應(yīng)的，即可確定其死亡。

表1 各種試驗藥物濃度

mg?L-1

組別 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ

高錳酸鉀 1.0 1.8 2.6 3.4 4.2

孔雀石綠 0.7 0.9 1.1 1.3 1.5

亞甲基藍(lán) 230 245 260 275 290

對照組 0 0 0 0 0

2 結(jié)果

2.1 高錳酸鉀

試驗表明：孔雀魚對高錳酸鉀的中毒反應(yīng)因藥液濃度不同而異。當(dāng)濃度為1.0 mg/L時，觀察孔雀魚72 h 存活狀態(tài)基本正常；當(dāng)濃度為1.8 mg/L時，72 h 有3尾死亡。96 h 死亡率70%；當(dāng)濃度為3.4 mg/L時，24 h 有2尾試驗魚死亡，48 h死亡率70%；當(dāng)濃度為4.2 mg/L以上時，24 h 死亡率60%。對照組試驗魚生活正常。

肉眼觀察死亡魚體為透明的黃色，尾柄彎曲，眼球黑而大，非常突出于頭部。解剖觀察魚體：頭部鰓絲充血，有紅褐色沉積。膽囊綠色、腫大為正常的幾倍?？兹隔~在不同濃度條件下的急性毒性試驗結(jié)果見表2。

表2 高錳酸鉀急性毒性試驗結(jié)果

分組 濃度/

mg?L-1 死亡數(shù)/尾

24 h48 h 72 h 96 h

96 h LC50

/mg?L-1SC/

mg?L-1

高錳酸鉀

對照組

1.0 0 0 0 4

1.8 0 0 3 7

2.6 0 3 8 10

3.4 2 7 10 10

4.2 6 10 10 10

0 0 0 0 0

1.270.13

2.2 孔雀石綠

濃度為0.7 mg/L試驗組中，試驗魚72 h 無死亡出現(xiàn)；濃度0.9 mg/L試驗組中，試驗魚48 h 內(nèi)死亡7尾，其余個體尾柄彎曲，活力減弱；濃度為1.1 mg/L的試驗魚，24 h 死亡1尾，48 h 死亡率達(dá)100% ；在1.3 mg/L試驗組中，24 h 死亡率60%，48 h 死亡率100%；在1.5 mg/L試驗組中，12 h 死亡率60%， 24 h 死亡率100%。對照組試驗魚存活正常。

中毒癥狀：尾柄彎曲，魚體做大幅度的搖擺游動，死亡前同浮頭癥狀，最后沉到水底死亡。各鰭基部附著深綠色孔雀石綠，眼球黑而大，非常突出于頭部。孔雀魚在不同孔雀石綠濃度下的試驗結(jié)果見表3。

表3 孔雀石綠急性毒性試驗結(jié)果

分組 濃度/

mg?L-1 死亡數(shù)/尾

24 h48 h 72 h 96 h

96 h LC50

/mg?L-1SC/

mg?L-1

孔雀石綠

對照組

0.7 0 0 0 4

0.9 0 7 10 10

1.1 1 10 10 10

1.3 6 10 10 10

1.510 10 10 10

0 0 0 0 0

0.730.07

2.3 亞甲基藍(lán)

濃度230 mg/L和245 mg/L時，48 h 內(nèi)都無死魚出現(xiàn)；當(dāng)溶液濃度為260 mg/L時，24 h 無死魚出現(xiàn)；濃度275 mg/L時，24 h 試驗魚出現(xiàn)死亡或浮頭癥狀，48 h 死亡率為100%；濃度290 mg/L時，48 h 死亡率為100%。對照組試驗魚存活正常。

中毒癥狀：魚體似缺氧到水表面呼吸，受驚不下沉，碰觸時下沉。死亡時體表附著深藍(lán)色，眼球黑而大，非常突出于頭部?？兹隔~對不同濃度亞甲基藍(lán)的試驗結(jié)果見表4。

表4 亞甲基藍(lán)急性毒性試驗結(jié)果

分組 濃度/

mg?L-1 死亡數(shù)/尾

24 h48 h 72 h 96 h

96 h LC50

/mg?L-1SC/

mg?L-1

亞甲基藍(lán)

對照組

230 0 0 0 3

245 0 0 3 7

260 0 5 10 10

275 3 10 10 10

290 8 10 10 10

0 0 0 0 0

237.523.75

3 討論

試驗結(jié)果表明：高錳酸鉀、孔雀石綠、亞甲基藍(lán)這三種藥物的安全濃度分別為0.13 mg/L，007 mg/L，23.75 mg/L。所以，這三種藥物相比較，孔雀魚對亞甲基藍(lán)的耐受力最強(qiáng)，最適合對孔雀魚疾病的防與治，高錳酸鉀次之，孔雀魚對孔雀石綠最敏感。其敏感性排列次序為：孔雀石綠＞高錳酸鉀＞亞甲基藍(lán)。

孔雀石綠是漁業(yè)禁用藥物之一，但對觀賞魚不涉及食品安全問題，主要用于防治觀賞魚的水霉病、爛鰓爛鰭病及寄生蟲病，價格便宜且治療效果較好。但孔雀魚對孔雀石綠非常敏感，安全濃度僅0.07 mg/L。因此，對孔雀魚要慎用此藥。

高錳酸鉀是一種外用消毒劑，在養(yǎng)殖漁業(yè)應(yīng)用廣泛，對池塘和養(yǎng)殖容器具有很好的消毒作用，能夠有效地殺滅原生蟲類和吸蟲類寄生蟲，對魚病具有很好的防治效果，孔雀魚對高錳酸鉀敏感性較孔雀石綠差，在孔雀魚的養(yǎng)殖中，是很好的藥物消毒劑。

孔雀魚對亞甲基藍(lán)的敏感性最差，安全濃度為23.75 mg/L，漁業(yè)生產(chǎn)上治療魚病時0.4～05 g/m3全池潑灑，即使用0.4～0.5 mg/L亞甲基藍(lán)就可達(dá)到治病效果。所以，在預(yù)防水霉病和小瓜蟲病等方面，對孔雀魚來說是一種非常安全和理想的治療藥物。

參考文獻(xiàn)：

[1] 丁淑荃，萬全，馬艷，等.7種常規(guī)藥物對鱖魚苗的急性毒性試驗[J].水利漁業(yè)，2006（2）：99-100

[2] 段彪，肖建光，葉英，等幾種重金屬離子對淡水石斑胚胎及仔魚的毒性試驗[J].重慶水產(chǎn)，2003（1）：32-34

[3] 何高明，項黃，張素華.青霉素、硫酸慶大霉素對紅劍魚、孔雀魚的急性毒性實驗[J].北京農(nóng)業(yè)，2007（6）：22-24

[4] 宋憬愚編著.觀賞魚養(yǎng)殖—熱帶魚[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2001：37-45

[5] 張海賓.5種消毒劑對錦鯉的急性毒性試驗[J].水利漁業(yè)，2005.6

[6] 房英春，李越，李勝男，等.二溴海因和三氯異氰尿酸對孔雀魚的急性毒性試驗[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2005（11）：38-39

Acute toxicity testing of three drugs in Guppy fish

XU Ya

--------------------------------------------------------------------------------

chao

(Economic Management Department,Panjin Vocational and Technical College,Panjin 124010,china)

Abstract：In the acute toxicity testings of three drugs in the guppy fish Poecilia reticulate,the toxicity symptom and the amount of death shows that, the 96 h half lethal dose of Potassium permanganate, Malachite green and Methylene Blue in Guppy is 1.27 mg/L, 0.73 mg/L and 273.5 mg/L respectively.Safety concentrations of the above three drugs are 0.13 mg/L,0.07 mg/L and 23.75 mg/L respectively. Thus,methylene blue is the safest among the three druds for guppy.

Key words：Guppy fish(Poecilia reticulate);acute toxicity;Potassium permanganate;Malachite green; Methylene Blue

（收稿日期：2014-01-20）

3 討論

試驗結(jié)果表明：高錳酸鉀、孔雀石綠、亞甲基藍(lán)這三種藥物的安全濃度分別為0.13 mg/L，007 mg/L，23.75 mg/L。所以，這三種藥物相比較，孔雀魚對亞甲基藍(lán)的耐受力最強(qiáng)，最適合對孔雀魚疾病的防與治，高錳酸鉀次之，孔雀魚對孔雀石綠最敏感。其敏感性排列次序為：孔雀石綠＞高錳酸鉀＞亞甲基藍(lán)。

孔雀石綠是漁業(yè)禁用藥物之一，但對觀賞魚不涉及食品安全問題，主要用于防治觀賞魚的水霉病、爛鰓爛鰭病及寄生蟲病，價格便宜且治療效果較好。但孔雀魚對孔雀石綠非常敏感，安全濃度僅0.07 mg/L。因此，對孔雀魚要慎用此藥。

高錳酸鉀是一種外用消毒劑，在養(yǎng)殖漁業(yè)應(yīng)用廣泛，對池塘和養(yǎng)殖容器具有很好的消毒作用，能夠有效地殺滅原生蟲類和吸蟲類寄生蟲，對魚病具有很好的防治效果，孔雀魚對高錳酸鉀敏感性較孔雀石綠差，在孔雀魚的養(yǎng)殖中，是很好的藥物消毒劑。

孔雀魚對亞甲基藍(lán)的敏感性最差，安全濃度為23.75 mg/L，漁業(yè)生產(chǎn)上治療魚病時0.4～05 g/m3全池潑灑，即使用0.4～0.5 mg/L亞甲基藍(lán)就可達(dá)到治病效果。所以，在預(yù)防水霉病和小瓜蟲病等方面，對孔雀魚來說是一種非常安全和理想的治療藥物。

參考文獻(xiàn)：

[1] 丁淑荃，萬全，馬艷，等.7種常規(guī)藥物對鱖魚苗的急性毒性試驗[J].水利漁業(yè)，2006（2）：99-100

[2] 段彪，肖建光，葉英，等幾種重金屬離子對淡水石斑胚胎及仔魚的毒性試驗[J].重慶水產(chǎn)，2003（1）：32-34

[3] 何高明，項黃，張素華.青霉素、硫酸慶大霉素對紅劍魚、孔雀魚的急性毒性實驗[J].北京農(nóng)業(yè)，2007（6）：22-24

[4] 宋憬愚編著.觀賞魚養(yǎng)殖—熱帶魚[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2001：37-45

[5] 張海賓.5種消毒劑對錦鯉的急性毒性試驗[J].水利漁業(yè)，2005.6

[6] 房英春，李越，李勝男，等.二溴海因和三氯異氰尿酸對孔雀魚的急性毒性試驗[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2005（11）：38-39

Acute toxicity testing of three drugs in Guppy fish

XU Ya

--------------------------------------------------------------------------------

chao

(Economic Management Department,Panjin Vocational and Technical College,Panjin 124010,china)

Abstract：In the acute toxicity testings of three drugs in the guppy fish Poecilia reticulate,the toxicity symptom and the amount of death shows that, the 96 h half lethal dose of Potassium permanganate, Malachite green and Methylene Blue in Guppy is 1.27 mg/L, 0.73 mg/L and 273.5 mg/L respectively.Safety concentrations of the above three drugs are 0.13 mg/L,0.07 mg/L and 23.75 mg/L respectively. Thus,methylene blue is the safest among the three druds for guppy.

Key words：Guppy fish(Poecilia reticulate);acute toxicity;Potassium permanganate;Malachite green; Methylene Blue

（收稿日期：2014-01-20）

3 討論

試驗結(jié)果表明：高錳酸鉀、孔雀石綠、亞甲基藍(lán)這三種藥物的安全濃度分別為0.13 mg/L，007 mg/L，23.75 mg/L。所以，這三種藥物相比較，孔雀魚對亞甲基藍(lán)的耐受力最強(qiáng)，最適合對孔雀魚疾病的防與治，高錳酸鉀次之，孔雀魚對孔雀石綠最敏感。其敏感性排列次序為：孔雀石綠＞高錳酸鉀＞亞甲基藍(lán)。

孔雀石綠是漁業(yè)禁用藥物之一，但對觀賞魚不涉及食品安全問題，主要用于防治觀賞魚的水霉病、爛鰓爛鰭病及寄生蟲病，價格便宜且治療效果較好。但孔雀魚對孔雀石綠非常敏感，安全濃度僅0.07 mg/L。因此，對孔雀魚要慎用此藥。

高錳酸鉀是一種外用消毒劑，在養(yǎng)殖漁業(yè)應(yīng)用廣泛，對池塘和養(yǎng)殖容器具有很好的消毒作用，能夠有效地殺滅原生蟲類和吸蟲類寄生蟲，對魚病具有很好的防治效果，孔雀魚對高錳酸鉀敏感性較孔雀石綠差，在孔雀魚的養(yǎng)殖中，是很好的藥物消毒劑。

孔雀魚對亞甲基藍(lán)的敏感性最差，安全濃度為23.75 mg/L，漁業(yè)生產(chǎn)上治療魚病時0.4～05 g/m3全池潑灑，即使用0.4～0.5 mg/L亞甲基藍(lán)就可達(dá)到治病效果。所以，在預(yù)防水霉病和小瓜蟲病等方面，對孔雀魚來說是一種非常安全和理想的治療藥物。

參考文獻(xiàn)：

[1] 丁淑荃，萬全，馬艷，等.7種常規(guī)藥物對鱖魚苗的急性毒性試驗[J].水利漁業(yè)，2006（2）：99-100

[2] 段彪，肖建光，葉英，等幾種重金屬離子對淡水石斑胚胎及仔魚的毒性試驗[J].重慶水產(chǎn)，2003（1）：32-34

[3] 何高明，項黃，張素華.青霉素、硫酸慶大霉素對紅劍魚、孔雀魚的急性毒性實驗[J].北京農(nóng)業(yè)，2007（6）：22-24

[4] 宋憬愚編著.觀賞魚養(yǎng)殖—熱帶魚[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2001：37-45

[5] 張海賓.5種消毒劑對錦鯉的急性毒性試驗[J].水利漁業(yè)，2005.6

[6] 房英春，李越，李勝男，等.二溴海因和三氯異氰尿酸對孔雀魚的急性毒性試驗[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2005（11）：38-39

Acute toxicity testing of three drugs in Guppy fish

XU Ya

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chao

(Economic Management Department,Panjin Vocational and Technical College,Panjin 124010,china)

Abstract：In the acute toxicity testings of three drugs in the guppy fish Poecilia reticulate,the toxicity symptom and the amount of death shows that, the 96 h half lethal dose of Potassium permanganate, Malachite green and Methylene Blue in Guppy is 1.27 mg/L, 0.73 mg/L and 273.5 mg/L respectively.Safety concentrations of the above three drugs are 0.13 mg/L,0.07 mg/L and 23.75 mg/L respectively. Thus,methylene blue is the safest among the three druds for guppy.

Key words：Guppy fish(Poecilia reticulate);acute toxicity;Potassium permanganate;Malachite green; Methylene Blue

（收稿日期：2014-01-20）