• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    頸椎后縱韌帶骨化癥與BMP-2、BMP-4基因多態(tài)性的關(guān)聯(lián)性研究

    2014-07-02 01:45:44耀魏威陳春悅?cè)~
    關(guān)鍵詞:骨化外顯子多態(tài)性

    周 耀魏 威陳春悅?cè)~ 楊

    1浙江省奉化市中醫(yī)醫(yī)院 奉化 315500 2浙江省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院

    頸椎后縱韌帶骨化癥與BMP-2、BMP-4基因多態(tài)性的關(guān)聯(lián)性研究

    周 耀1魏 威2陳春悅2葉 楊2

    1浙江省奉化市中醫(yī)醫(yī)院 奉化 315500 2浙江省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院

    目的探討頸椎后縱韌帶骨化癥(OPLL)與BMP-2基因第3外顯子的rs79417223和BMP-4基因第4外顯子的rs147822607兩個(gè)SNP位點(diǎn)的相關(guān)性。方法選取47例浙江地區(qū)漢族頸椎后縱韌帶骨化癥患者,以100名正常個(gè)體作為對(duì)照組,采用PCR+Sanger DNA測(cè)序,統(tǒng)計(jì)分析2個(gè)位點(diǎn)基因型的分布信息。結(jié)果BMP-2基因第3外顯子的rs79417223G→A患者、BMP-4第4外顯子的rs147822607A→C患者與正常組呈現(xiàn)明顯差異(P<0.05,P<0.01)。結(jié)論BMP-2基因第3外顯子的rs79417223G→A、BMP-4基因、第4外顯子的rs147822607A→C,這2個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)與OPLL的發(fā)病具有強(qiáng)烈相關(guān)性。

    頸椎后縱韌帶骨化癥;單核苷酸多態(tài)性;易感基因;BMP-2基因;BMP-4基因

    頸椎后縱韌帶骨化癥(ossification of the posterior longitudinal ligament,OPLL)屬于一種骨成形病,表現(xiàn)為頸椎后縱韌帶內(nèi)異位骨的形成,主要壓迫脊髓產(chǎn)生臨床癥狀以及病理?yè)p害。OPLL為一種遺傳因素和環(huán)境因素共同作用所致的復(fù)雜疾病(多基因疾?。1-6],高發(fā)于日本人以及亞洲人。通過(guò)檢索國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn),我們選取2個(gè)可疑的OPLL易感基因多態(tài)性SNP位點(diǎn),BMP-2基因第 3外顯子的 rs79417223和BMP-4基因第4外顯子的rs147822607,進(jìn)行多態(tài)性分析,以期獲得這2個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)與浙江地區(qū)漢族OPLL患者發(fā)病之間的關(guān)聯(lián)性。

    1 資料與方法

    1.1臨床資料 2010年7月—2013年9月就診于浙江省奉化市中醫(yī)院、浙江省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院、解放軍一一七醫(yī)院等骨科的漢族OPLL患者47例,男30例,女17例,平均年齡(45.4±11.2)歲,病程0.3~8年,平均(4.1±1.2)年。根據(jù)頸部CT或者M(jìn)RI明確診斷[7]。患者籍貫均在浙江地區(qū)。同時(shí),以100名無(wú)血緣關(guān)系的浙江地區(qū)漢族正常個(gè)體作為對(duì)照組,男50名,女50名,平均年齡(43.1±7.3)歲。每位參與者均簽署書(shū)面知情同意書(shū)。

    1.2方 法 ①DNA制備:入組者均在無(wú)菌環(huán)境下抽取外周血10mL(EDTA抗凝)。用外周血DNA純化試劑盒(德國(guó)Qiagen公司)提取和純化基因組DNA。②PCR引物的合成:參考NCBI等人類基因組SNP數(shù)據(jù)庫(kù),用Primer Premier 5.0軟件設(shè)計(jì)2個(gè)基因SNP位點(diǎn)的PCR引物序列。引物由上海生工生物工程公司合成,引物序列見(jiàn)表1。③DNA測(cè)序分型對(duì)各多態(tài)性SNP位點(diǎn)分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增,通過(guò)Sanger DNA測(cè)序進(jìn)行基因分型。PCR產(chǎn)物的DNA測(cè)序委托上海生工生物工程公司進(jìn)行。根據(jù)基因分型結(jié)果,計(jì)算基因型頻率和等位基因頻率。

    1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,采用χ2檢驗(yàn),P<0.05,表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié) 果

    2個(gè)多態(tài)性SNP位點(diǎn)的基因型分布經(jīng)χ2檢驗(yàn),符合Hardy-Weinberg遺傳平衡[8]。BMP-2基因第3外顯子的rs79417223G→A患者與正常組呈現(xiàn)明顯差異(P<0.05)。BMP-4第4外顯子的rs147822607A→C患者與正常組呈現(xiàn)明顯差異(P<0.01)。各等位基因在患者組與正常對(duì)照組中的分布和分析結(jié)果,見(jiàn)表2。

    表2 兩組rs79417223和rs147822607分布及比較 例

    3 討論

    OPLL是一種高發(fā)于日本人以及亞洲人的常見(jiàn)病。日本人的發(fā)病率約為1.9%~4.3%,韓國(guó)人約為3.6%,我國(guó)臺(tái)灣省約為2.8%,我國(guó)北方人群的OPLL發(fā)病率約為0.44%~8.92%,而北美白人僅為0.12%[1-3]。OPLL是引起脊髓病的重要原因,大部分可保持長(zhǎng)期穩(wěn)定狀態(tài),起病隱匿,進(jìn)展緩慢,呈現(xiàn)惡性發(fā)展趨勢(shì),可引起脊髓不可逆性損害,其中部分患者的脊髓功能出現(xiàn)急劇惡化[1]。OPLL的致癱風(fēng)險(xiǎn)顯著高于其他頸椎退行性疾病,其原因包括缺乏有效的早期篩選方法和診斷方法,自然史不明,無(wú)法確定手術(shù)時(shí)機(jī),術(shù)后骨化物持續(xù)生長(zhǎng)等。目前,臨床上尚無(wú)有效的方法延緩和改善OPLL的骨化過(guò)程,手術(shù)療法仍然是最主要的治療手段,但風(fēng)險(xiǎn)系數(shù)較高[1]。1989年,Terayama等發(fā)現(xiàn),日本OPLL家系中先證者親屬的發(fā)病率顯著高于普通人群[4]。在北美OPLL患者中,盡管大部分病例為散發(fā)性,但仍可見(jiàn)部分病例具有家族聚集性[5]。目前已經(jīng)達(dá)成共識(shí),OPLL是一種嚴(yán)重危害人體健康的復(fù)雜性多基因遺傳病,其發(fā)病機(jī)制不詳,迄今沒(méi)有可靠的生物學(xué)識(shí)別指標(biāo)[1-2]。許多學(xué)者已做了大量的醫(yī)學(xué)研究來(lái)揭示OPLL發(fā)病的分子醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)[9]。

    骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)為多功能蛋白,具有獨(dú)特的骨形成作用和其他形態(tài)發(fā)生過(guò)程。BMP-2基因定位于20p12,而B(niǎo)MP-4基因位于14q22-q23。Kawaguchi等[10]曾發(fā)現(xiàn)某例OPLL患者術(shù)后標(biāo)本中的BMP-2僅表達(dá)于骨質(zhì)化的基質(zhì)、軟骨細(xì)胞以及鄰近OPLL軟骨的成纖維細(xì)胞中,而不在未骨質(zhì)化的頸椎后縱韌帶中表達(dá)。Kon等[11]對(duì)從OPLL和非OPLL患者的脊柱韌帶中分離到的成纖維細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)后,也發(fā)現(xiàn)BMP-2優(yōu)先誘導(dǎo)OPLL患者的成纖維細(xì)胞的成骨分化。Wang等[12]對(duì)192例漢族OPLL患者和304名健康對(duì)照的研究表明,具有BMP-2基因第3外顯子SNP TC和CC基因型的男性更易罹患OPLL。Karasugi等[2]最新的一項(xiàng)對(duì)214例日本OPLL患病同胞對(duì)的大規(guī)模全基因組連鎖分析研究顯示,OPLL最有可能的易感基因區(qū)域位于20p12的微衛(wèi)星標(biāo)記D20S894附近(NPL= 3.43,P=0.000,27)。而Furushima等[13]對(duì)126例日本OPLL患病同胞對(duì)進(jìn)行了的大規(guī)模候選基因篩查發(fā)現(xiàn),僅BMP-4基因與OPLL顯著關(guān)聯(lián)(NPL=2.230,P=0.035)。本研究分別選取了BMP-2第3外顯子的rs79417223和BMP-4第4外顯子的rs147822607兩個(gè)SNP位點(diǎn)進(jìn)行分析,研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)BMP-2基因第3外顯子的rs79417223G→A患者與正常組呈現(xiàn)明顯差異(P<0.05)。BMP-4第4外顯子的rs147822607A→C患者與正常組呈現(xiàn)明顯差異(P<0.01)。本研究提示BMP-2基因第3外顯子的rs79417223G→A、BMP-4基因第4外顯子的rs147822607A→C,這2個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)與OPLL的發(fā)病具有強(qiáng)烈相關(guān)性。

    由于取材等方面的原因,目前直接在人頸椎后縱韌帶組織細(xì)胞水平上探討OPLL的易感基因表達(dá)水平還比較困難,加之該病呈復(fù)雜性多基因遺傳方式,并表現(xiàn)出強(qiáng)烈的遺傳異質(zhì)性和表型異質(zhì)性,因而尚無(wú)法準(zhǔn)確地確定致病基因,并闡釋易感基因的基因-基因、基因-環(huán)境之間的相互作用及其在OPLL發(fā)病中的地位[1-3,9]。因此,對(duì)大樣本患者群體進(jìn)行可疑易感基因的SNP分型,尋找和鑒定相關(guān)的致病基因,是切實(shí)可行的研究方法之一。由于受時(shí)間、地點(diǎn)限制,本研究只收集到了47例浙江地區(qū)漢族OPLL患者,選擇了2個(gè)基因多態(tài)性SNP位點(diǎn)進(jìn)行了初步研究。研究結(jié)果提示此位點(diǎn)與OPLL的發(fā)病具有強(qiáng)烈相關(guān)性。但本研究的患者均來(lái)自于中國(guó)浙江地區(qū),而且研究的樣本數(shù)又相對(duì)偏小,所以研究結(jié)果與以前文獻(xiàn)報(bào)道可能會(huì)存在有一些差異。在今后的研究中,可以將樣本再擴(kuò)大化,并且運(yùn)用目前先進(jìn)的外顯子捕獲二代測(cè)序技術(shù)運(yùn)用于OPLL基因外顯子組水平的分析研究,以獲得OPLL發(fā)生的分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)[9]。

    [1]Saetia K,Cho D,Lee S,et al.Ossification of the posterior longitudinal ligament:a review[J].Neurosurg Focus,2011,30(3):E1.

    [2]Karasugi T,Nakajima M,Ikari K,et al.A genome-wide sibpair linkage analysis of ossification of the posterior longitudinal ligament of the spine[J].J Bone Miner Metab,2013,31(2):136-143.

    [3]魏威,張永華,石仕元.頸椎后縱韌帶骨化癥的易感基因研究現(xiàn)狀[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志,2010,18(4):11-13.

    [4]Terayama K.Genetic studies on ossification of the posterior longitudinal ligament of the spine[J].Spine,1989,14(11):1184-1191.

    [5]Tanabe J,Sarin H,Kindt G.Familial ossification of the posterior longitudinal ligament(OPLL)in the thoracic spine:Case report[J].Surg Neurol,2002,58(6):403-405.

    [6]Washio M,Kobashi G,Okamoto K,et al.Sleeping habit and other life styles in the prime of life and risk for ossification of the posterior longitudinal ligament of the spine(OPLL):Acase-control study in Japan[J].J Epidemiol,2004,14(5):168-173.

    [7]Tsuyama N.Ossification of the posterior longitudinal ligament of the spine[J].Clin Orthop Relat Res,1984,18(4):71-84.

    [8]Guo SW,Thompson E.Performing the exact test of Hardy-Weinberg proportion for multiple alleles[J].Biometrics,1992,48:361-372.

    [9]Wei W,He HL,Chen CY,et al.Whole exome sequencing implicates PTCH1 and COL17A1 genes in ossification of the posterior longitudinal ligament of the cervical spine in Chinese patients[J].Genet Mol Res,2014,(in press).

    [10]Kawaguchi H,Kurokawa T,Hoshino Y,et al.Immunohistochemical demonstration of bone morphogenetic protein-2 and transforming growth factor-β in the ossification of the posterior longitudinal ligament of the cervical spine[J]. Spine,1992,17(Suppl 3):S33-S36.

    [11]Kon T,Yamazaki M,Tagawa M,et al.Bone morphogenetic protein-2 stimulates differentiation of cultured spinal ligament cells from patients with ossification of the posterior longitudinal ligament[J].Calcif Tissue Int,1997,60(3):291-296.

    [12]Wang H,Yang ZH,Liu DM,et al.Association between two polymorphisms of the bone morpho-genetic protein-2 gene with genetic susceptibility to ossification of the posterior longitudinal ligament of the cervical spine and its severity[J].Chin Med J,2008,121(18):1806-1810.

    [13]Furushima K,Shimo-Onoda K,Maeda S,et al.Large-scale screening for candidate genes of ossification of the posterior longitudinal ligament of the spine[J].J Bone Miner Res,2002,17(1):128-137.

    Relationship Between the Gene Polymorphisms of BMP-2 and BMP-4 with Ossification of Posterior Longitudinal Ligament of the Spine in a Chinese population

    ZHOU Yao1,WEI Wei2,CHEN Chunyue2,YE Yang2. 1 Fenghua Chinese Medical Hospital of Zhejiang Province,Fenghua(315500),China;2 Integrated Chinese and Western Medicine Hospital of Zhejiang Province

    ObjectiveTo explore the relationship between 2 single nucleotide polymorphisms(SNPs)of BMP-2 and BMP-4 and ossification of posterior longitudinal ligament of the spine(OPLL)in a Chinese population.MethodsForty-seven sporadic OPLL patients and 100 healthy controls in Zhejiang area were recruited for association analysis.The SNP regions of BMP-2 and BMP-4 genes were amplified by PCR and Sanger sequencing.Genotype frequencies of the SNPs were compared between the cases and control subjects with SPSS 13.0 software.ResultsBoth Of the rs79417223 G→A site in the exon 3 of BMP-2 and the rs147822607 A→C site in the exon 4 of BMP-4,the patient and normal control groups showed significant differences(P<0.05,P<0.01).ConclusionsThe rs79417223 and rs147822607 have a strong correlation to OPLL.

    ossification of posterior longitudinal ligament;single nucleotide polymorphism;susceptibility gene;BMP-2 gene;BMP-4 gene

    2013-12-01

    浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.2010KY168),浙江省寧波市科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.2013C50023)

    葉楊,E-mail:dagou1234@163.com

    猜你喜歡
    骨化外顯子多態(tài)性
    外顯子跳躍模式中組蛋白修飾的組合模式分析
    單核苷酸多態(tài)性與中醫(yī)證候相關(guān)性研究進(jìn)展
    仙靈骨葆膠囊聯(lián)合阿法骨化醇片治療骨質(zhì)疏松癥的臨床觀察
    外顯子組測(cè)序助力產(chǎn)前診斷胎兒骨骼發(fā)育不良
    外顯子組測(cè)序助力產(chǎn)前診斷胎兒骨骼發(fā)育不良
    膝關(guān)節(jié)脛側(cè)副韌帶Ⅲ度損傷并發(fā)異位骨化的臨床研究①
    馬鈴薯cpDNA/mtDNA多態(tài)性的多重PCR檢測(cè)
    GlobalFiler~? PCR擴(kuò)增試劑盒驗(yàn)證及其STR遺傳多態(tài)性
    創(chuàng)傷性骨化性肌炎中醫(yī)治療概述
    人類組成型和可變外顯子的密碼子偏性及聚類分析
    亚洲18禁久久av| 日日夜夜操网爽| 天天躁日日操中文字幕| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 叶爱在线成人免费视频播放| 日本免费一区二区三区高清不卡| 久久久精品大字幕| 两性夫妻黄色片| 99久久精品热视频| 色老头精品视频在线观看| 人妻久久中文字幕网| а√天堂www在线а√下载| 亚洲国产精品999在线| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 99在线人妻在线中文字幕| 悠悠久久av| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 久久精品91无色码中文字幕| 国产精品久久久人人做人人爽| 国语自产精品视频在线第100页| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产成人精品无人区| 岛国在线观看网站| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 在线观看66精品国产| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 一区二区三区高清视频在线| 亚洲一区二区三区色噜噜| 搡老熟女国产l中国老女人| 欧美日韩精品网址| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 免费在线观看日本一区| 一级a爱片免费观看的视频| 精品日产1卡2卡| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 在线视频色国产色| 日本熟妇午夜| 国产v大片淫在线免费观看| 欧美激情在线99| 一区福利在线观看| 黄色日韩在线| av黄色大香蕉| 国产亚洲av嫩草精品影院| 丰满人妻一区二区三区视频av | 日本 欧美在线| 一进一出好大好爽视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 天堂网av新在线| 日韩有码中文字幕| or卡值多少钱| 国产成人系列免费观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 色尼玛亚洲综合影院| 桃红色精品国产亚洲av| 男女床上黄色一级片免费看| 悠悠久久av| 中文资源天堂在线| 成人三级做爰电影| 亚洲五月天丁香| 99热只有精品国产| 999久久久国产精品视频| 亚洲av片天天在线观看| 变态另类丝袜制服| 黄色日韩在线| 欧美一级a爱片免费观看看| 在线观看日韩欧美| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 午夜影院日韩av| 成人国产综合亚洲| 国产综合懂色| 操出白浆在线播放| 久久久国产精品麻豆| 亚洲av成人一区二区三| 极品教师在线免费播放| 国产精品亚洲美女久久久| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 在线观看66精品国产| 免费观看的影片在线观看| 国产午夜福利久久久久久| 麻豆成人午夜福利视频| 欧美又色又爽又黄视频| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 欧美3d第一页| 男插女下体视频免费在线播放| 综合色av麻豆| 在线观看一区二区三区| 动漫黄色视频在线观看| 国产亚洲精品av在线| 国产精品永久免费网站| 麻豆国产av国片精品| 制服丝袜大香蕉在线| 国产精品一及| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产亚洲欧美98| 桃红色精品国产亚洲av| 黄色视频,在线免费观看| 99久久精品热视频| 好男人电影高清在线观看| 一个人看的www免费观看视频| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 亚洲黑人精品在线| 国产成人福利小说| 99re在线观看精品视频| 一区二区三区高清视频在线| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 中文字幕av在线有码专区| 日本三级黄在线观看| 午夜激情欧美在线| 精品久久久久久久末码| 舔av片在线| 免费电影在线观看免费观看| 亚洲精品一区av在线观看| 女同久久另类99精品国产91| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 欧美一级毛片孕妇| 真人一进一出gif抽搐免费| 18禁美女被吸乳视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 一区福利在线观看| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 日本成人三级电影网站| 久久精品国产综合久久久| 日韩欧美国产在线观看| 国产亚洲欧美98| 精品一区二区三区视频在线 | 中文字幕熟女人妻在线| 国产伦精品一区二区三区视频9 | 两个人看的免费小视频| 欧美黄色淫秽网站| 国产淫片久久久久久久久 | 欧美黄色淫秽网站| 1024手机看黄色片| 中亚洲国语对白在线视频| 国产精品女同一区二区软件 | 麻豆一二三区av精品| 成人18禁在线播放| 狂野欧美激情性xxxx| av女优亚洲男人天堂 | 亚洲自偷自拍图片 自拍| 怎么达到女性高潮| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 给我免费播放毛片高清在线观看| 一夜夜www| a级毛片a级免费在线| 亚洲,欧美精品.| 亚洲国产看品久久| 午夜免费成人在线视频| 亚洲精品在线美女| 白带黄色成豆腐渣| 无限看片的www在线观看| 真人做人爱边吃奶动态| 久久热在线av| 成人亚洲精品av一区二区| 99热6这里只有精品| 麻豆成人午夜福利视频| 俺也久久电影网| 亚洲av熟女| 黄色视频,在线免费观看| 国产一区二区激情短视频| 欧美黄色片欧美黄色片| 日本 av在线| 亚洲国产精品999在线| 欧美+亚洲+日韩+国产| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲熟女毛片儿| 国语自产精品视频在线第100页| 特级一级黄色大片| 成人精品一区二区免费| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 成熟少妇高潮喷水视频| 女人被狂操c到高潮| 精品一区二区三区四区五区乱码| tocl精华| 亚洲成av人片免费观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 狠狠狠狠99中文字幕| 舔av片在线| or卡值多少钱| 久久久国产精品麻豆| 床上黄色一级片| 欧美黑人欧美精品刺激| 黄片小视频在线播放| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 国产一区二区在线观看日韩 | 一区二区三区国产精品乱码| 天堂网av新在线| 天堂网av新在线| 天堂网av新在线| 亚洲在线自拍视频| 99热这里只有是精品50| 国产人伦9x9x在线观看| 日本三级黄在线观看| 国产激情久久老熟女| 国产激情久久老熟女| 亚洲avbb在线观看| 精品午夜福利视频在线观看一区| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产亚洲欧美98| 国产精品亚洲av一区麻豆| 成年免费大片在线观看| 国产亚洲欧美98| 久久久国产成人精品二区| 国产精品亚洲av一区麻豆| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产亚洲欧美98| 欧美中文日本在线观看视频| 首页视频小说图片口味搜索| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 日本一二三区视频观看| 综合色av麻豆| 欧美一区二区国产精品久久精品| 一进一出好大好爽视频| 午夜视频精品福利| 不卡av一区二区三区| 成人一区二区视频在线观看| 精品国产乱子伦一区二区三区| 亚洲在线观看片| 99精品在免费线老司机午夜| 看免费av毛片| 国产激情偷乱视频一区二区| 国产精品野战在线观看| 中文字幕av在线有码专区| 亚洲av片天天在线观看| 亚洲成av人片在线播放无| 亚洲成av人片在线播放无| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲一区二区三区不卡视频| 无人区码免费观看不卡| 熟女人妻精品中文字幕| 美女 人体艺术 gogo| 免费在线观看亚洲国产| 两人在一起打扑克的视频| 欧美中文日本在线观看视频| 成人三级做爰电影| 黄色丝袜av网址大全| 国产成人av激情在线播放| 国产1区2区3区精品| 人人妻人人看人人澡| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲欧美日韩东京热| 成人国产综合亚洲| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 一进一出抽搐gif免费好疼| 又粗又爽又猛毛片免费看| 人人妻人人澡欧美一区二区| 欧美av亚洲av综合av国产av| 五月伊人婷婷丁香| 1024香蕉在线观看| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 成在线人永久免费视频| 亚洲av熟女| 午夜福利视频1000在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| bbb黄色大片| 99久国产av精品| 欧美大码av| 国产精品野战在线观看| 又黄又粗又硬又大视频| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 午夜福利高清视频| 亚洲国产精品999在线| 他把我摸到了高潮在线观看| 久久精品影院6| 国产亚洲欧美在线一区二区| 免费看美女性在线毛片视频| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 久久久久久大精品| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 日本黄大片高清| 中文资源天堂在线| 精品久久久久久成人av| 国产成人影院久久av| 成人特级av手机在线观看| 无遮挡黄片免费观看| 国产黄片美女视频| 可以在线观看毛片的网站| 成年女人毛片免费观看观看9| 国产精品久久视频播放| 成年女人永久免费观看视频| 亚洲成人精品中文字幕电影| 欧美日韩精品网址| 欧美最黄视频在线播放免费| 成年免费大片在线观看| 成人无遮挡网站| 久久久国产精品麻豆| 午夜a级毛片| 亚洲乱码一区二区免费版| 国产又色又爽无遮挡免费看| 久久久久久久久久黄片| 90打野战视频偷拍视频| 岛国在线免费视频观看| 欧美乱妇无乱码| 成年免费大片在线观看| 99久久成人亚洲精品观看| 看片在线看免费视频| 国产毛片a区久久久久| 999精品在线视频| 亚洲欧美日韩无卡精品| 丰满人妻一区二区三区视频av | 久久国产精品影院| 亚洲 国产 在线| 男人舔女人下体高潮全视频| www.999成人在线观看| 俄罗斯特黄特色一大片| 又大又爽又粗| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产综合懂色| 91九色精品人成在线观看| 曰老女人黄片| 色哟哟哟哟哟哟| 2021天堂中文幕一二区在线观| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 一本久久中文字幕| 国产成人av教育| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 麻豆一二三区av精品| 色老头精品视频在线观看| 12—13女人毛片做爰片一| 日本与韩国留学比较| 99热只有精品国产| 亚洲九九香蕉| 好男人在线观看高清免费视频| 性欧美人与动物交配| 午夜精品一区二区三区免费看| 不卡av一区二区三区| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产 一区 欧美 日韩| 欧美日韩国产亚洲二区| 熟女电影av网| 在线视频色国产色| 久久久水蜜桃国产精品网| 色播亚洲综合网| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 在线播放国产精品三级| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲电影在线观看av| www日本黄色视频网| 99在线人妻在线中文字幕| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 99精品久久久久人妻精品| x7x7x7水蜜桃| 久久久国产成人免费| 中国美女看黄片| а√天堂www在线а√下载| 中文字幕熟女人妻在线| www.999成人在线观看| 丰满的人妻完整版| 一a级毛片在线观看| 丁香欧美五月| 男女午夜视频在线观看| 波多野结衣高清无吗| 免费在线观看影片大全网站| 小说图片视频综合网站| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 激情在线观看视频在线高清| 国产伦在线观看视频一区| 国产成人精品久久二区二区免费| 看免费av毛片| 一级毛片女人18水好多| 久久久久久久久免费视频了| 又黄又粗又硬又大视频| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产高清激情床上av| 黄频高清免费视频| 亚洲成a人片在线一区二区| 窝窝影院91人妻| 日韩中文字幕欧美一区二区| 日韩欧美精品v在线| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 高清毛片免费观看视频网站| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲av成人一区二区三| 成人av一区二区三区在线看| 久久天堂一区二区三区四区| 免费搜索国产男女视频| 91麻豆av在线| 超碰成人久久| 亚洲自拍偷在线| 最近视频中文字幕2019在线8| 麻豆成人午夜福利视频| 九色国产91popny在线| 国产精品1区2区在线观看.| 男人舔女人下体高潮全视频| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 夜夜夜夜夜久久久久| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产精品亚洲一级av第二区| 精华霜和精华液先用哪个| 极品教师在线免费播放| 黄色片一级片一级黄色片| 免费观看精品视频网站| 欧美日韩黄片免| 国产高清视频在线观看网站| 久久性视频一级片| 国产在线精品亚洲第一网站| 九九在线视频观看精品| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| av视频在线观看入口| 欧美3d第一页| 亚洲一区二区三区不卡视频| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产精品精品国产色婷婷| 国产视频内射| 国产熟女xx| 少妇人妻一区二区三区视频| 一个人免费在线观看电影 | 午夜福利高清视频| 成年女人永久免费观看视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 亚洲欧美日韩东京热| 美女午夜性视频免费| 亚洲av第一区精品v没综合| 91麻豆av在线| 欧美日韩精品网址| 他把我摸到了高潮在线观看| 99riav亚洲国产免费| 亚洲人成网站高清观看| 999久久久精品免费观看国产| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 久久久色成人| 脱女人内裤的视频| 国产三级中文精品| 欧美性猛交黑人性爽| 国产精华一区二区三区| 亚洲人成网站高清观看| 1000部很黄的大片| 国产精品日韩av在线免费观看| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲av成人一区二区三| 午夜福利18| 免费搜索国产男女视频| 伦理电影免费视频| 一区二区三区激情视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 中文字幕高清在线视频| 精品国产亚洲在线| 哪里可以看免费的av片| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲午夜理论影院| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 精品免费久久久久久久清纯| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 国产亚洲精品综合一区在线观看| 亚洲自拍偷在线| 亚洲五月天丁香| 欧美大码av| av在线蜜桃| 午夜福利免费观看在线| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| h日本视频在线播放| 国产精品,欧美在线| 国产淫片久久久久久久久 | 黄色成人免费大全| 宅男免费午夜| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 欧美成狂野欧美在线观看| xxx96com| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 日韩有码中文字幕| 看片在线看免费视频| 国产午夜福利久久久久久| 最新中文字幕久久久久 | 欧美日韩一级在线毛片| 国产成人精品久久二区二区免费| 国产野战对白在线观看| 国产成人精品无人区| 欧美大码av| 又粗又爽又猛毛片免费看| 俄罗斯特黄特色一大片| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 欧美日韩黄片免| 听说在线观看完整版免费高清| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 99视频精品全部免费 在线 | 色尼玛亚洲综合影院| 两个人的视频大全免费| 久久久久久久午夜电影| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 亚洲国产欧美人成| 精品午夜福利视频在线观看一区| 午夜两性在线视频| 舔av片在线| 国产av一区在线观看免费| 精品电影一区二区在线| 91在线精品国自产拍蜜月 | 少妇的丰满在线观看| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产一区二区激情短视频| 99久久综合精品五月天人人| 全区人妻精品视频| 俄罗斯特黄特色一大片| 99久久成人亚洲精品观看| 大型黄色视频在线免费观看| 天天添夜夜摸| 亚洲天堂国产精品一区在线| www.自偷自拍.com| 欧美黑人巨大hd| 日日夜夜操网爽| 国产又色又爽无遮挡免费看| 精品欧美国产一区二区三| 老司机深夜福利视频在线观看| 黄片小视频在线播放| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 一个人看的www免费观看视频| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 成人三级做爰电影| 一进一出抽搐gif免费好疼| 亚洲七黄色美女视频| 精品国内亚洲2022精品成人| av国产免费在线观看| 麻豆国产av国片精品| 韩国av一区二区三区四区| 国产精品久久久久久精品电影| 在线免费观看不下载黄p国产 | 成人精品一区二区免费| 婷婷六月久久综合丁香| 很黄的视频免费| 一区二区三区激情视频| 午夜亚洲福利在线播放| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 99re在线观看精品视频| 可以在线观看的亚洲视频| 国产乱人伦免费视频| 露出奶头的视频| 最近最新中文字幕大全电影3| 久久久国产欧美日韩av| 两性夫妻黄色片| 免费看光身美女| 老汉色av国产亚洲站长工具| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 午夜福利高清视频| 这个男人来自地球电影免费观看| 国产伦一二天堂av在线观看| 亚洲av免费在线观看| 校园春色视频在线观看| 国产精品影院久久| 欧美乱妇无乱码| h日本视频在线播放| 听说在线观看完整版免费高清| 最新美女视频免费是黄的| 亚洲成人中文字幕在线播放| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 午夜两性在线视频| 两个人视频免费观看高清| 真人做人爱边吃奶动态| 丰满人妻一区二区三区视频av | 国产精品九九99| 级片在线观看| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 久久这里只有精品19| 999久久久精品免费观看国产| 亚洲国产精品成人综合色| 欧美乱码精品一区二区三区| 久久精品影院6| 中文字幕最新亚洲高清| 五月伊人婷婷丁香| xxxwww97欧美| 精品电影一区二区在线| 高清毛片免费观看视频网站| 激情在线观看视频在线高清| 偷拍熟女少妇极品色| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲av美国av| 黄色丝袜av网址大全| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产视频内射| 两个人的视频大全免费| 桃红色精品国产亚洲av| 亚洲色图av天堂| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 亚洲最大成人中文| 舔av片在线| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产成年人精品一区二区| 欧美黄色淫秽网站| 成人国产一区最新在线观看| 最近在线观看免费完整版| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 69av精品久久久久久| 无限看片的www在线观看| 中文字幕熟女人妻在线| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 色综合亚洲欧美另类图片| 亚洲avbb在线观看| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲一区高清亚洲精品| 神马国产精品三级电影在线观看| 午夜精品久久久久久毛片777| 久久精品91蜜桃| 在线观看午夜福利视频| h日本视频在线播放| 日韩av在线大香蕉| 又黄又爽又免费观看的视频| 免费观看人在逋| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 日韩欧美一区二区三区在线观看| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产一区在线观看成人免费| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 成人国产一区最新在线观看|