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    高危HPV結(jié)合分型檢測(cè)與宮頸癌生物學(xué)的相關(guān)性研究

    2014-06-30 19:54:26黃光豪
    藥物與人 2014年9期
    關(guān)鍵詞:危型鱗癌分型

    黃光豪

    摘要:目的:探討高危HPV結(jié)合分型檢測(cè)與宮頸癌生物的相關(guān)性。方法:選擇2010年5月~2013年5月為我院收治的宮頸癌患者279例,采用HC II技術(shù)以及HybriMax技術(shù)檢測(cè)HPV DNA病毒載量以及病毒分型,分析高危型HPV分型與宮頸癌生物學(xué)的相關(guān)性。結(jié)果:本組279例患者中,其中檢出高危HPV DNA陽(yáng)性患者258例,檢出陽(yáng)性率為92.47%;在HPV DNA基因型多重感染上,I-II期患者檢出陽(yáng)性率為13.27%、III-IV期患者檢出陽(yáng)性率為23.53%,二者比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);在HPV 18基因型上,鱗癌患者檢出陽(yáng)性率為6.8%、非鱗癌患者檢出陽(yáng)性率為18.75%,二者比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);在各HPV DNA基因型上,不同組織分化患者檢出陽(yáng)性率之間差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。結(jié)論::宮頸癌患者病情越嚴(yán)重其多重感染的檢出率越高,且不同高危HPV分型與宮頸癌生物學(xué)行為具有著一定的相關(guān)性。

    關(guān)鍵詞:高危HPV;宮頸癌;相關(guān)性Abstract:Objective: To investigate the correlation of HPV with high risk genotypes and cervical cancer biology. Methods: in 2010 May ~2013 year in May 279 cases with cervical cancer patients, using the HC II technology and HybriMax technology in detection of HPV DNA viral load and virus types, analysis of the correlation between high-risk HPV subtypes and cervical cancer biology. Results: This group of 279 patients, including 258 cases of high-risk HPV detection of DNA positive patients, the positive rate was 92.47%; in the HPV genotype DNA infected patients with multiple, I-II positive rate was 13.27%, III-IV positive rate was 23.53% in patients, a comparison of the two, the difference was statistically significant (p<0.05); HPV genotype in 18 patients with squamous cell carcinoma, the positive rate was 6.8%, the positive rate in patients with non squamous cell carcinoma was 18.75% two, comparison, the difference was statistically significant (p<0.05); in the HPV genotype of DNA gene, the difference between different tissue differentiation in patients with positive rate were not statistically significant (p>0.05). Conclusion: the patients with cervical cancer disease severity of the multiple infection rate is higher, and different high risk type of HPV and the biological behavior of cervical cancer have a certain correlation.

    Key words:High risk HPV; Cervical cancer; Correlation

    【中圖分類號(hào)】R453【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A【文章編號(hào)】1002-3763(2014)09-0053-02宮頸癌是僅次于乳腺癌的全球第二常見的婦女癌癥。現(xiàn)代研究已經(jīng)公認(rèn)了人乳頭狀瘤病毒(HPV)的感染是造成宮頸癌的一個(gè)主要病因[1]。由于高危型人乳頭狀瘤病毒的持續(xù)感染能夠造成子宮癌前期病變以及宮頸癌的發(fā)生[2]。而HPV其具有著多種基因型,但是不同基因分型與宮頸癌生物學(xué)之間的相關(guān)性仍然未能獲得研究者的共識(shí)。本研究探討高危HPV結(jié)合分型檢測(cè)與宮頸癌生物學(xué)行為之間的相關(guān)性,現(xiàn)報(bào)告如下:

    1 資料與方法

    1.1 臨床資料

    選擇2010年5月~2013年5月為我院收治的宮頸癌患者279例,患者年齡在24~68歲之間,平均年齡為41.49歲,79例入組患者均經(jīng)過病理學(xué)診斷確診為宮頸癌。按照國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟標(biāo)準(zhǔn)臨床分期[3],其中I期患者97例、II期患者114例、III期患者67例、IV期患者1例;按照WHO組織學(xué)類型標(biāo)準(zhǔn)[4],其中鱗癌患者247例、非鱗癌患者32例;按照WHO組織分化標(biāo)準(zhǔn)[5],其中高分化患者19例、中分化患者185例、低分化患者75例。

    1.2 儀器與試劑

    ABI7700熒光定量PCR儀、凱普HybriMax雜交儀;DNA提取試劑盒(德國(guó)QIAGEN)、PCR擴(kuò)增試劑盒(購(gòu)于新朝陽(yáng)生物有限公司)、雜交試劑盒(購(gòu)于新朝陽(yáng)生物有限公司)。

    1.3 研究方法

    1.3.1 標(biāo)本采集

    在非月經(jīng)期進(jìn)行采樣,患者才進(jìn)行采樣的淺3天之內(nèi)不能夠使用陰道栓劑、采用的前一天禁止性生活。采樣時(shí)由醫(yī)生使用窺器將患者子宮頸暴露,將其宮頸分泌物擦去后用專用GPV采用刷與宮頸口順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5周后停留10秒鐘,將其立即放入專用試管中(內(nèi)含細(xì)胞保存劑),封蓋后將其置于4℃冰箱內(nèi)保存待檢測(cè),需在2周之內(nèi)完成檢測(cè)。

    1.3.2 病毒載量檢測(cè)

    采用HC II 檢測(cè)患者HPV DNA載量,共檢測(cè)13種高危型HPV,他們是:16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68。檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行,當(dāng)RLU/陽(yáng)性對(duì)照RLU在1.0以上時(shí)則作為HPV DNA 陽(yáng)性。

    1.3.3 病毒分型檢測(cè)

    采用HybriMax技術(shù)檢測(cè)患者HPV DNA分型,共檢測(cè)21種亞型,其中低危亞型6種,分別是:6、11、42、43、44、HPVcp8340;高危亞型15種,分別為:16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 19.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,結(jié)果采用X2檢驗(yàn),以p<0.05作為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 高危型HPV DNA陽(yáng)性率

    本組279例患者中,其中檢出高危HPV DNA陽(yáng)性患者258例,檢出陽(yáng)性率為92.47%。

    2.2 不同臨床分期患者HPV DNA分型分別情況

    不同臨床分期患者HPV DNA分型分布情況見表1, 在HPV DNA基因型多重感染上,I-II期患者檢出陽(yáng)性率為13.27%、III-IV期患者檢出陽(yáng)性率為23.53%,二者比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);而在其他HPV DNA基因型上,不同臨床分期患者之間陽(yáng)性率不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)。

    表1 不同臨床分期患者HPV DNA分型情況 [n(%)]

    HPV基因型臨床分期I-II期(n=211)III-IV期(n=68)X2P值16109(51.66)32(47.06)0.4350.0591816(7.58)8(11.76)1.1440.2855812(5.69)4(5.82)0.0040.9525211(5.21)3(4.41)0.0690.792337(3.32)2(2.94)0.0230.879其他8(3.79)2(4.41)0.1080.743多重感染28(13.27)16(23.53)4.0750.0442.3 不同組織學(xué)類型患者HPV DNA 分型分布情況:不同組織學(xué)類型患者HPV DNA分型分布見表2,在HPV 18基因型上,鱗癌患者檢出陽(yáng)性率為6.8%、非鱗癌患者檢出陽(yáng)性率為18.75%,二者比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);在其他各HPV DNA基因型上,不同組織學(xué)類型患者檢出陽(yáng)性率不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(p>0.05)。

    表2 不同組織學(xué)類型患者HPV DNA 分型分布 [n(%)]

    HPV DNA分型不同組織學(xué)類型鱗癌(n=247)非鱗癌(n=32)X2P值16129(52.22)14(43.75)0.8150.3671816(6.8)6(18.75)5.8740.0155815(6.73)2(6.25)0.0020.9695213(5.26)2(6.25)0.0520.820337(2.83)1(3.13)0.0090.926其他17(6.88)2(6.25)0.0180.894多重感染31(12.96)3(9.38)0.2670.6052.3 不同組織分化患者HPV DNA分型:不同組織分化患者HPV DNA分型分布情況見表3,在各HPV DNA基因型上,不同組織分化患者檢出陽(yáng)性率之間差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。

    表3 不同組織分化患者HPV DNA分型分布 [n(%)]

    HPV DNA分型不同組織分化高/中分化(n=204)低分化(n=75)X2P值16103(50.49)36(48.00)0.1360.7121812(5.88)6(8.00)0.4070.5235811(5.39)3(4.00)0.2230.6375213(6.37)6(8.00)0.0460.830336(2.94)3(4.00)0.1970.657其他14(6.86)4(5.33)0.2130.645多重感染29(14.21)12(16.00)0.1390.7093 討論

    現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,發(fā)生宮頸癌及其癌前的病變其中一個(gè)必要條件為高危型HPV的持續(xù)感染,此觀點(diǎn)已經(jīng)獲得全球婦科學(xué)者之間的共識(shí)[6]。通過高危型HPV DNA的檢測(cè),能夠從病因?qū)W的水平將即將發(fā)生或者已經(jīng)發(fā)生的宮頸癌病變篩選出來(lái)[7]。而近些年以來(lái),我國(guó)研究者運(yùn)用分子生物學(xué)的技術(shù)對(duì)高危型HPV DNA 進(jìn)行篩查,其中HC II便是其中發(fā)展較為迅速且運(yùn)用簡(jiǎn)單、可靠的一種分子生物學(xué)技術(shù)[8-9]。在本研究中,運(yùn)用HC II技術(shù)對(duì)我院宮頸癌患者279例進(jìn)行篩查,結(jié)果顯示,我院279例患者中,高危型HPV檢出陽(yáng)性率為92.47%。該陽(yáng)性率略低于文獻(xiàn)報(bào)道數(shù)據(jù)[10-11],究其原因可能為:①采用HC II僅針對(duì)的是13種特定的HPV高危分型,但是對(duì)于某些高危分型卻未包括;②可能由于臨床醫(yī)生在取樣時(shí)存在操作上的差異,可能對(duì)樣本中獲取的宮頸脫落細(xì)胞數(shù)目造成影響,從而使得檢測(cè)結(jié)果有所差異;③由于患者組織細(xì)胞缺氧所造成的組織細(xì)胞壞死可能導(dǎo)致HPV DNA發(fā)生丟失。

    現(xiàn)已確定的發(fā)生宮頸癌最為主要的原因?yàn)楦呶P虷PV持續(xù)性的感染以及反復(fù)感染,而不同的HPV基因亞型其編碼外殼蛋白的基因具有著較大的差異,而在不同HPV基因亞型之間沒有具有交叉保護(hù)抗體,因此患者發(fā)生不同高危型HPV的多重感染以及交叉感染[12]。國(guó)外研究者報(bào)道稱[13],感染單一的HPV患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)較常人增加19.9倍,而若感染多重HPV則使得患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)較常人增加31.8倍;但是同時(shí)也有研究者表示[14-15],HPV多重感染并不會(huì)使得宮頸癌的患病率有所增加。在本研究中,不同臨床分期患者在多重感染上存在差異,III-IV期患者其多重感染檢出率顯著高于I-II期患者,表明了病情越嚴(yán)重的患者其多重感染的檢出率越高。此外研究顯示,在HPV 18基因型上,鱗癌患者檢出陽(yáng)性率為6.8%、非鱗癌患者檢出陽(yáng)性率為18.75%,二者比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。表明了不同高危HPV分型與宮頸癌生物學(xué)行為具有著一定的相關(guān)性,而二者之間明確的關(guān)系還有待進(jìn)一步大樣本研究結(jié)果。

    綜上所述,宮頸癌患者病情越嚴(yán)重其多重感染的檢出率越高,且不同高危HPV分型與宮頸癌生物學(xué)行為具有著一定的相關(guān)性。

    參考文獻(xiàn)

    [1]楊雪, 附艦, 康艷霞, 等. 調(diào)強(qiáng)適形放射治療聯(lián)合每周紫杉醇+ 卡鉑方案在宮頸癌術(shù)前同步放化療的臨床觀察[J]. 中國(guó)腫瘤臨床與康復(fù), 2013 (9): 1027-1028.

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