重組腺病毒介導的高抵抗素血癥對自發(fā)性高血壓大鼠血壓的影響*

張 衛(wèi) 曾 卓 韓 彬 王 蔚

(1. 廣東藥學院附屬第一醫(yī)院心內(nèi)科，廣東 廣州 510080； 2. 廣東藥學院臨床醫(yī)學院，廣東 廣州 510080)

抵抗素是2001年由Steppan 首次報道由單核細胞分泌的富含半胱氨酸的炎性細胞因子，有研究表明，抵抗素與肥胖、糖尿病、胰島素抵抗有密切相關[1]。但對抵抗素與高血壓的相關關系報道甚少。本研究對重組腺病毒介導后自發(fā)性高血壓大鼠血清抵抗素與血壓水平的相關關系進行探討。

1 材料與方法

1.1 材料

10周齡shr,spf級高血壓大鼠36只，雄性，體重(220±15)g，購自北京維通利華實驗動物技術有限公司。大鼠均在中山大學實驗動物中心SPF級實驗環(huán)境下籠養(yǎng)。

1.2 方法

將36只10周齡高血壓大鼠(雄性)，隨機平均分成病毒組及空白對照組(n=18)。其中病毒組經(jīng)尾靜脈注射載有抵抗素基因的重組腺病毒(上海吉凱基因化學技術有限公司提供)1x10PFu/mouse(用生理鹽水稀釋至0.3 ml)后隨機平均分成第一周組、第四周組、第八周組3組(每組n=6)；而空白對照組則連續(xù)經(jīng)尾靜脈注射等體積生理鹽水后也隨機平均分為第一周組、第四周組、第八周組3組(每組n=6)。

1.2.1采用無創(chuàng)尾動脈儀測血壓 首先開啟大鼠尾動脈血壓計(安徽正華儀器公司)預熱約20分鐘后進行壓力信號校正調(diào)零。根據(jù)大鼠體重將其裝入固定盒內(nèi)固定后放入動物固定架, 大鼠尾部通過加壓套插入至接近尾根部,此時鼠尾應該穿過脈搏傳感器插入尾部加熱器中的加熱管內(nèi), 使鼠尾剛好處于脈搏傳感器的“脈搏信號傳感片”上方, 并調(diào)節(jié)鼠尾壓迫片使傳感片緊貼鼠尾下方的尾動脈,待大鼠脈搏穩(wěn)定后用橡皮球充氣加壓至脈搏完全消失后繼續(xù)加壓20 mmHg左右，然后緩慢放氣減壓至脈搏信號恢復起始水平，從記錄系統(tǒng)中讀取收縮壓、舒張壓。一般連續(xù)測量三次，取平均值。

1.2.2測定血清抵抗素 采集清晨空腹12 h以上的大鼠靜脈血2～3 ml，按試劑盒說明離心后取血清儲存在-70 ℃冰箱中待檢測抵抗素水平用。大鼠抵抗素(Resistin)ELISA檢測試劑盒 (上海朗頓生物科技有限公司提供),采用競爭性酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法，試劑的配置及操作均按照說明書進行。

1.3 統(tǒng)計學處理

2 結 果

2.1 各組高血壓大鼠的收縮壓、舒張壓及血清中抵抗素水平的比較(見表1)。

表1 各組大鼠的血壓及血清抵抗素的比較

注：*與對照組比較，P<0.05；※與對照組比較，P<0.05；#與對照組比較，P<0.05。

2.2 高血壓大鼠血清中抵抗素水平與收縮壓的相關性 相關系數(shù)r=0.639，P=0.000，兩者呈正相關。(見圖1)

2.3 高血壓大鼠血清中抵抗素水平與舒張壓的相關性 相關系數(shù)r=0.613， P=0.000，兩者呈正相關。(見圖2)

圖1 抵抗素與收縮壓的相關性分析

圖2 抵抗素與舒張壓的相關性分析

3 討 論

高血壓病是心血管內(nèi)科常見疾病，易導致心、腦、腎、眼底等靶器官損害。由于其發(fā)病病因及機制涉及到遺傳和環(huán)境相互作用，目前對高血壓病的發(fā)病機制仍未明確[2]。而抵抗素是存在于血漿中的一種脂肪組織特異性激素，與肥胖、胰島素抵抗等有密切相關性，提示其可能與高血壓病的發(fā)生、發(fā)展有密切關系。因此，本研究通過重組腺病毒介導的高抵抗素血癥的自發(fā)性高血壓大鼠模型，來探討抵抗素與血壓水平的相關關系。

本研究顯示，腺病毒介導的高胰島素血癥的自發(fā)性高血壓組的的收縮壓及舒張壓水平高于對照組，以第一周及第四周有統(tǒng)計學差異，其中以第四周血壓升高為更明顯(P<0.05)；病毒組的血清抵抗素水平較對照組升高，以第一周及第四周有統(tǒng)計學差異，其中以第四周升高幅度明顯(P<0.05)；抵抗素與收縮壓(r=0.639,P=0.000)，舒張壓(r=0.613,P=0.000)均呈正相關，提示血清中抵抗素可促進自發(fā)性高血壓大鼠的血壓升高。提示與報道一致[3]。其可能的機制是抵抗素不僅與胰島素抵抗密切相關[4-6]，還可能激活了NF-кB信號通路，誘導血管內(nèi)皮細胞激活，通過促進內(nèi)皮素-1、內(nèi)皮細胞黏附分子-1、基質(zhì)金屬蛋白酶和單核細胞趨化因子1的表達導致血管內(nèi)皮細胞功能失調(diào)[7，8]。其次抵抗素還可以激活細胞外信號調(diào)節(jié)激酶和磷酯酰肌醇-3激酶通路促進血管平滑肌細胞增殖和遷移，使血管內(nèi)膜增厚、硬化，管壁阻力增加，從而參與高血壓的發(fā)生、發(fā)展[9，10]。

綜上所述，本研究結果表明自發(fā)性高血壓大鼠的血清抵抗素升高可促進收縮壓、舒張壓的升高，并且血清中抵抗素的水平與收縮壓、舒張壓呈正相關關系，提示抵抗素在高血壓病的發(fā)生、發(fā)展起一定的作用。因研究樣本量較小，有待進一步擴大樣本量進行前瞻性的研究證實。

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