江門地區(qū)乙型肝炎病毒基因型分布與臨床的相關(guān)性

張偉堅(jiān)　陳世豪　李珍瑤等

[摘要] 目的 探討江門地區(qū)乙型肝炎病毒（HBV）基因型分布與臨床的相關(guān)性。 方法 隨機(jī)選取本院2013年4～12月本院收治的診斷為慢性乙型肝炎的患者200例，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR-熒光探針法對HBV的基因型進(jìn)行檢測，并對不同基因型患者的生化學(xué)指標(biāo)及肝功能損害差異進(jìn)行分析。 結(jié)果 200例慢性乙型肝炎患者的基因型檢測結(jié)果顯示，142例B基因型，43例C基因型，15例BC混合型，不存在其他基因型；肝癌患者和重型肝炎患者中主要為B基因型，分別為90.0%和81.1%，明顯高于HBsAg攜帶者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；C基因型患者血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平明顯低于B基因型患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 江門地區(qū)HBV的基因型主要為B型、C型和BC混合型，其中B型基因主要存在于肝癌和嚴(yán)重肝病患者中。

[關(guān)鍵詞] 乙型肝炎病毒基因型；江門地區(qū)；臨床相關(guān)性

[中圖分類號] R181.8+1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2014）04（a）-0110-03

[Abstract] Objective To explore the clinical relevance of genotype distribution of hepatitis B virus（HBV） in Jiangmen region. Methods 200 patients diagnosed with positive chronic hepatitis B admitted to our hospital from April 2013 to December 2013 were randomly selected.The real-time fluorescence quantitative PCR-fluorescence probe method was used to detect the genotypes of HBV.The biochemical indicators of patients with different genotypes were analyzed and the differences in liver function damage of patients with different genotypes were analyzed and explored. Results The genotype detection results of the 200 patients with chronic hepatitis B displayed 142 cases of genotype B，43 cases of genotype C and 15 cases of mixed genotype BC.The main genotype of patients with liver cancer and severe hepatitis was genotype B，accounted for 90.0% and 81.1% respectively，and which were all significantly higher than that of HBsAg carriers，the differences were all statistically significant（P<0.05）.The serum alanine aminotransferase level of patients with genotype C was significantly lower than that of patients with genotype B，the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The main genotypes of hepatitis B virus in Jiangmen region are type B，type C and mixed type BC，of which genotype B mainly exists in patients with liver cancer and severe liver disease.

[Key words] Hepatitis B virus genotypes；Jiangmen regional；Clinical relevance

慢性乙型肝炎在世界范圍內(nèi)普遍存在，根據(jù)相關(guān)報(bào)道，其病毒基因主要分為A～H共8個(gè)類型，且病毒基因型的分布具有一定的地區(qū)性分布特點(diǎn)[1]。有關(guān)臨床研究表明，不同基因型的乙型肝炎病毒（HBV）其致病性也有不同[2]。本次研究通過對近年來本院收治的200例慢性乙型肝炎患者進(jìn)行病毒基因型檢測，并對相關(guān)臨床檢測指標(biāo)進(jìn)行分析，研究本地HBV的基因型分布情況，旨在為臨床治療提供可靠的證據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取2013年4～12月本院PCR實(shí)驗(yàn)室收治的診斷為慢性乙型肝炎患者200例，其中，男性122例，女性78例；年齡22～73歲，平均（36.7±15.2）歲；入院時(shí)對患者進(jìn)行血清檢測發(fā)現(xiàn)，HBsAg攜帶者55例，慢性乙型肝炎57例，肝硬化21例，重型肝炎37例及原發(fā)性肝癌30例。所有入選患者均已排除丙型肝炎及其他肝部病變。

1.2 方法

于清晨對所有患者進(jìn)行空腹靜脈血樣采集，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR-熒光探針法進(jìn)行血清HBV DNA含量及HBV基因類型的檢測，LightCycler熒光定量PCR儀由Roche公司提供，熒光定量試劑盒由深圳PG公司提供，根據(jù)參考品濃度進(jìn)行相關(guān)標(biāo)本HBV DNA濃度測定；采用Alisei自動化酶聯(lián)免疫儀對乙型肝炎e抗原（HBeAg）及前S1含量進(jìn)行測定，相關(guān)試劑由上?？迫A實(shí)業(yè)有限公司提供；采用速率分析法及酶法對血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、膽堿酯酶及天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）進(jìn)行含量測定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 200例入選患者HBV基因型分布結(jié)果的分析

200例慢性乙型肝炎患者中，142例為B基因型（70.5%），43例為C型基因型（21.5%），15例為BC混合基因型（7.5%），其中B基因型所占比例最大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在肝癌及重型肝炎患者中，主要為B基因型，明顯多于其他基因型患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；所有入選患者HBV DNA載量檢測結(jié)果表明，HBsAg攜帶者及慢性肝炎患者HBV DNA載量最高，但是各組數(shù)據(jù)對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表1）。本次研究中未發(fā)現(xiàn)存在其他類型病毒基因型。

3 討論

早期研究者通過采用HBV全基因序列測定，將HBV基因分為A～H型，相關(guān)研究表明，HBV各基因型病毒的分布具有明顯的地域性特征，其中歐洲、非洲及北美地區(qū)主要為A型，大洋洲、亞洲主要為B型和C型，其他類型病毒基因在世界范圍內(nèi)均有分布[3]。有研究顯示，在我國B型病毒主要分布于南方，C型基因主要分布于北方，A型及F型病毒的發(fā)現(xiàn)例數(shù)極少，部分少數(shù)民族地區(qū)存在D型HBV，其他類型HBV尚未發(fā)現(xiàn)。在本次研究中，200例陽性HBV感染者中，141例B基因型，43例C基因型，16例BC混合型，不存在其他基因型，表明在江門地區(qū)HBV的主要基因型為B型，其次為C型和BC混合型，同相關(guān)報(bào)道基本相符[4-5]。

HBV感染不但會導(dǎo)致急慢性病毒性肝炎，同時(shí)在一定程度上會引起肝細(xì)胞癌和肝硬化[6-7]。相關(guān)研究表明，HBV的感染能力一方面同患者的年齡及機(jī)體免疫能力有關(guān)，另一方面同感染的病毒基因類型有著密切的關(guān)系[8-9]。因此，對陽性HBV感染患者進(jìn)行病毒基因型測定，有助于為臨床治療和疾病預(yù)后提供可靠證據(jù)。有研究表明，在我國B型及C型病毒分布占優(yōu)勢的地區(qū)，C型病毒具有更強(qiáng)的致病性，易導(dǎo)致肝硬化等疾病，而B型病毒易導(dǎo)致原發(fā)性肝癌等疾病。有報(bào)道B型HBV易引起慢性乙型肝炎等疾病，但是臨床死亡率較低，表明B型HBV感染具有較好的預(yù)后。在本次研究中，200例各類陽性HBV感染患者的基因分型測定結(jié)果表明，重型肝炎和原發(fā)性肝癌患者中主要為B型病毒，與相關(guān)研究結(jié)果相符。

在本次研究中，C型病毒患者的血清ALT水平明顯低于B基因型患者，同時(shí)發(fā)現(xiàn)在肝癌及重型肝炎患者中，以B基因型最為多見，明顯高于慢性肝炎患者和HBsAg攜帶者，表明B基因型可能同疾病的活動性之間具有一定的相關(guān)性。同時(shí)，在本組研究中，C基因型患者的抗-HBe陽性率明顯低于B基因型，表明B基因型患者具有更高的血清轉(zhuǎn)換率。由于HBeAg的陰轉(zhuǎn)，導(dǎo)致機(jī)體的HBV耐受性降低，引起T細(xì)胞對HBV細(xì)胞發(fā)生免疫應(yīng)答，從而引起肝細(xì)胞損傷，導(dǎo)致血清ALT水平升高，提示對于B基因型HBV感染患者，需要考慮肝癌及肝臟疾病惡化的可能性，在臨床治療過程中須采取合理措施進(jìn)行針對性治療。

綜上所述，江門地區(qū)HBV基因型主要為B型、C型和BC混合型，其中B型基因主要存在于肝癌和嚴(yán)重肝病患者中，在對各類HBV感染者防治時(shí)應(yīng)密切注意。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 馬明炎，廖俐雅，余登瓊，等.某縣204例乙型肝炎病毒基因型及其臨床相關(guān)性分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2012，41（35）：3747-3748.

[2] 林寶祿，姚智.乙型肝炎病毒基因分型與基因變異的臨床相關(guān)性分析[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2012，22（35）：56-59.

[3] 郭曉霞，葉永安，王效紅，等.山西省乙型肝炎病毒基因型分布及臨床相關(guān)性研究[J].醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào)，2013，26（10）：1117-1118.

[4] 劉建湘，蔣黎.戊型肝炎重疊慢性乙型肝炎病毒感染臨床分析[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2012，22（24）：76-78.

[5] 艾敏，趙偉，陶晨，等.乙型肝炎病毒外膜大蛋白檢測在恩替卡韋抗病毒治療中的臨床意義[J].江蘇醫(yī)藥，2012， 38（23）：2809-2811.

[6] 王林川，陳葳，于燕.乙型肝炎病毒B、C基因型與乙肝臨床特征的相關(guān)性[J].西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)·醫(yī)學(xué)版，2012， 33（2）：207-210.

[7] 席云峰，席鵬飛，盧愛桃，等.內(nèi)蒙古科右前旗蒙古族人群乙型肝炎病毒基因型分布[J].中華流行病學(xué)雜志，2011， 32（3）：323.

[8] 黃彬，陳茶，陳利達(dá).乙型肝炎病毒基因型檢測及其臨床意義[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21（9）：1749-1751.

[9] 段建平，朱坤，吳薇佳，等.乙型肝炎病毒基因型與YMDD基因區(qū)序列突變及BCP突變關(guān)系探討[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，34（1）：68-72.

（收稿日期：2014-02-10 本文編輯：袁 成）

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 200例入選患者HBV基因型分布結(jié)果的分析

200例慢性乙型肝炎患者中，142例為B基因型（70.5%），43例為C型基因型（21.5%），15例為BC混合基因型（7.5%），其中B基因型所占比例最大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在肝癌及重型肝炎患者中，主要為B基因型，明顯多于其他基因型患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；所有入選患者HBV DNA載量檢測結(jié)果表明，HBsAg攜帶者及慢性肝炎患者HBV DNA載量最高，但是各組數(shù)據(jù)對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表1）。本次研究中未發(fā)現(xiàn)存在其他類型病毒基因型。

3 討論

早期研究者通過采用HBV全基因序列測定，將HBV基因分為A～H型，相關(guān)研究表明，HBV各基因型病毒的分布具有明顯的地域性特征，其中歐洲、非洲及北美地區(qū)主要為A型，大洋洲、亞洲主要為B型和C型，其他類型病毒基因在世界范圍內(nèi)均有分布[3]。有研究顯示，在我國B型病毒主要分布于南方，C型基因主要分布于北方，A型及F型病毒的發(fā)現(xiàn)例數(shù)極少，部分少數(shù)民族地區(qū)存在D型HBV，其他類型HBV尚未發(fā)現(xiàn)。在本次研究中，200例陽性HBV感染者中，141例B基因型，43例C基因型，16例BC混合型，不存在其他基因型，表明在江門地區(qū)HBV的主要基因型為B型，其次為C型和BC混合型，同相關(guān)報(bào)道基本相符[4-5]。

HBV感染不但會導(dǎo)致急慢性病毒性肝炎，同時(shí)在一定程度上會引起肝細(xì)胞癌和肝硬化[6-7]。相關(guān)研究表明，HBV的感染能力一方面同患者的年齡及機(jī)體免疫能力有關(guān)，另一方面同感染的病毒基因類型有著密切的關(guān)系[8-9]。因此，對陽性HBV感染患者進(jìn)行病毒基因型測定，有助于為臨床治療和疾病預(yù)后提供可靠證據(jù)。有研究表明，在我國B型及C型病毒分布占優(yōu)勢的地區(qū)，C型病毒具有更強(qiáng)的致病性，易導(dǎo)致肝硬化等疾病，而B型病毒易導(dǎo)致原發(fā)性肝癌等疾病。有報(bào)道B型HBV易引起慢性乙型肝炎等疾病，但是臨床死亡率較低，表明B型HBV感染具有較好的預(yù)后。在本次研究中，200例各類陽性HBV感染患者的基因分型測定結(jié)果表明，重型肝炎和原發(fā)性肝癌患者中主要為B型病毒，與相關(guān)研究結(jié)果相符。

在本次研究中，C型病毒患者的血清ALT水平明顯低于B基因型患者，同時(shí)發(fā)現(xiàn)在肝癌及重型肝炎患者中，以B基因型最為多見，明顯高于慢性肝炎患者和HBsAg攜帶者，表明B基因型可能同疾病的活動性之間具有一定的相關(guān)性。同時(shí)，在本組研究中，C基因型患者的抗-HBe陽性率明顯低于B基因型，表明B基因型患者具有更高的血清轉(zhuǎn)換率。由于HBeAg的陰轉(zhuǎn)，導(dǎo)致機(jī)體的HBV耐受性降低，引起T細(xì)胞對HBV細(xì)胞發(fā)生免疫應(yīng)答，從而引起肝細(xì)胞損傷，導(dǎo)致血清ALT水平升高，提示對于B基因型HBV感染患者，需要考慮肝癌及肝臟疾病惡化的可能性，在臨床治療過程中須采取合理措施進(jìn)行針對性治療。

綜上所述，江門地區(qū)HBV基因型主要為B型、C型和BC混合型，其中B型基因主要存在于肝癌和嚴(yán)重肝病患者中，在對各類HBV感染者防治時(shí)應(yīng)密切注意。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 馬明炎，廖俐雅，余登瓊，等.某縣204例乙型肝炎病毒基因型及其臨床相關(guān)性分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2012，41（35）：3747-3748.

[2] 林寶祿，姚智.乙型肝炎病毒基因分型與基因變異的臨床相關(guān)性分析[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2012，22（35）：56-59.

[3] 郭曉霞，葉永安，王效紅，等.山西省乙型肝炎病毒基因型分布及臨床相關(guān)性研究[J].醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào)，2013，26（10）：1117-1118.

[4] 劉建湘，蔣黎.戊型肝炎重疊慢性乙型肝炎病毒感染臨床分析[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2012，22（24）：76-78.

[5] 艾敏，趙偉，陶晨，等.乙型肝炎病毒外膜大蛋白檢測在恩替卡韋抗病毒治療中的臨床意義[J].江蘇醫(yī)藥，2012， 38（23）：2809-2811.

[6] 王林川，陳葳，于燕.乙型肝炎病毒B、C基因型與乙肝臨床特征的相關(guān)性[J].西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)·醫(yī)學(xué)版，2012， 33（2）：207-210.

[7] 席云峰，席鵬飛，盧愛桃，等.內(nèi)蒙古科右前旗蒙古族人群乙型肝炎病毒基因型分布[J].中華流行病學(xué)雜志，2011， 32（3）：323.

[8] 黃彬，陳茶，陳利達(dá).乙型肝炎病毒基因型檢測及其臨床意義[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21（9）：1749-1751.

[9] 段建平，朱坤，吳薇佳，等.乙型肝炎病毒基因型與YMDD基因區(qū)序列突變及BCP突變關(guān)系探討[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，34（1）：68-72.

（收稿日期：2014-02-10 本文編輯：袁 成）

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 200例入選患者HBV基因型分布結(jié)果的分析

200例慢性乙型肝炎患者中，142例為B基因型（70.5%），43例為C型基因型（21.5%），15例為BC混合基因型（7.5%），其中B基因型所占比例最大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在肝癌及重型肝炎患者中，主要為B基因型，明顯多于其他基因型患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；所有入選患者HBV DNA載量檢測結(jié)果表明，HBsAg攜帶者及慢性肝炎患者HBV DNA載量最高，但是各組數(shù)據(jù)對比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表1）。本次研究中未發(fā)現(xiàn)存在其他類型病毒基因型。

3 討論

早期研究者通過采用HBV全基因序列測定，將HBV基因分為A～H型，相關(guān)研究表明，HBV各基因型病毒的分布具有明顯的地域性特征，其中歐洲、非洲及北美地區(qū)主要為A型，大洋洲、亞洲主要為B型和C型，其他類型病毒基因在世界范圍內(nèi)均有分布[3]。有研究顯示，在我國B型病毒主要分布于南方，C型基因主要分布于北方，A型及F型病毒的發(fā)現(xiàn)例數(shù)極少，部分少數(shù)民族地區(qū)存在D型HBV，其他類型HBV尚未發(fā)現(xiàn)。在本次研究中，200例陽性HBV感染者中，141例B基因型，43例C基因型，16例BC混合型，不存在其他基因型，表明在江門地區(qū)HBV的主要基因型為B型，其次為C型和BC混合型，同相關(guān)報(bào)道基本相符[4-5]。

HBV感染不但會導(dǎo)致急慢性病毒性肝炎，同時(shí)在一定程度上會引起肝細(xì)胞癌和肝硬化[6-7]。相關(guān)研究表明，HBV的感染能力一方面同患者的年齡及機(jī)體免疫能力有關(guān)，另一方面同感染的病毒基因類型有著密切的關(guān)系[8-9]。因此，對陽性HBV感染患者進(jìn)行病毒基因型測定，有助于為臨床治療和疾病預(yù)后提供可靠證據(jù)。有研究表明，在我國B型及C型病毒分布占優(yōu)勢的地區(qū)，C型病毒具有更強(qiáng)的致病性，易導(dǎo)致肝硬化等疾病，而B型病毒易導(dǎo)致原發(fā)性肝癌等疾病。有報(bào)道B型HBV易引起慢性乙型肝炎等疾病，但是臨床死亡率較低，表明B型HBV感染具有較好的預(yù)后。在本次研究中，200例各類陽性HBV感染患者的基因分型測定結(jié)果表明，重型肝炎和原發(fā)性肝癌患者中主要為B型病毒，與相關(guān)研究結(jié)果相符。

在本次研究中，C型病毒患者的血清ALT水平明顯低于B基因型患者，同時(shí)發(fā)現(xiàn)在肝癌及重型肝炎患者中，以B基因型最為多見，明顯高于慢性肝炎患者和HBsAg攜帶者，表明B基因型可能同疾病的活動性之間具有一定的相關(guān)性。同時(shí)，在本組研究中，C基因型患者的抗-HBe陽性率明顯低于B基因型，表明B基因型患者具有更高的血清轉(zhuǎn)換率。由于HBeAg的陰轉(zhuǎn)，導(dǎo)致機(jī)體的HBV耐受性降低，引起T細(xì)胞對HBV細(xì)胞發(fā)生免疫應(yīng)答，從而引起肝細(xì)胞損傷，導(dǎo)致血清ALT水平升高，提示對于B基因型HBV感染患者，需要考慮肝癌及肝臟疾病惡化的可能性，在臨床治療過程中須采取合理措施進(jìn)行針對性治療。

綜上所述，江門地區(qū)HBV基因型主要為B型、C型和BC混合型，其中B型基因主要存在于肝癌和嚴(yán)重肝病患者中，在對各類HBV感染者防治時(shí)應(yīng)密切注意。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 馬明炎，廖俐雅，余登瓊，等.某縣204例乙型肝炎病毒基因型及其臨床相關(guān)性分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2012，41（35）：3747-3748.

[2] 林寶祿，姚智.乙型肝炎病毒基因分型與基因變異的臨床相關(guān)性分析[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2012，22（35）：56-59.

[3] 郭曉霞，葉永安，王效紅，等.山西省乙型肝炎病毒基因型分布及臨床相關(guān)性研究[J].醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào)，2013，26（10）：1117-1118.

[4] 劉建湘，蔣黎.戊型肝炎重疊慢性乙型肝炎病毒感染臨床分析[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2012，22（24）：76-78.

[5] 艾敏，趙偉，陶晨，等.乙型肝炎病毒外膜大蛋白檢測在恩替卡韋抗病毒治療中的臨床意義[J].江蘇醫(yī)藥，2012， 38（23）：2809-2811.

[6] 王林川，陳葳，于燕.乙型肝炎病毒B、C基因型與乙肝臨床特征的相關(guān)性[J].西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)·醫(yī)學(xué)版，2012， 33（2）：207-210.

[7] 席云峰，席鵬飛，盧愛桃，等.內(nèi)蒙古科右前旗蒙古族人群乙型肝炎病毒基因型分布[J].中華流行病學(xué)雜志，2011， 32（3）：323.

[8] 黃彬，陳茶，陳利達(dá).乙型肝炎病毒基因型檢測及其臨床意義[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21（9）：1749-1751.

[9] 段建平，朱坤，吳薇佳，等.乙型肝炎病毒基因型與YMDD基因區(qū)序列突變及BCP突變關(guān)系探討[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，34（1）：68-72.

（收稿日期：2014-02-10 本文編輯：袁 成）