超高倍顯微系統(tǒng)咽拭子鏡檢法在兒童呼吸道支原體感染早期診斷中的價(jià)值

陳繼良 曾榮榮 張強(qiáng)

江蘇省泗洪兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科 江蘇 泗洪 223900

超高倍顯微系統(tǒng)咽拭子鏡檢法在兒童呼吸道支原體感染早期診斷中的價(jià)值

陳繼良 曾榮榮 張強(qiáng)

江蘇省泗洪兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科 江蘇 泗洪 223900

目的:探討超高倍顯微系統(tǒng)檢測(cè)咽拭子中支原體活體對(duì)兒童呼吸道支原體感染早期診斷的臨床價(jià)值。方法:采用上海復(fù)星公司提供的超高倍光電顯微系統(tǒng)，對(duì)本院313例已確診的肺炎支原體肺炎的住院患兒進(jìn)行咽拭子鏡檢。結(jié)果:咽拭子法鏡檢的陽(yáng)性檢出率為86.9%。結(jié)論:超高倍顯微系統(tǒng)咽拭子鏡檢簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確、無(wú)創(chuàng)傷，為兒童呼吸道支原體感染早期診斷及治療提供了依據(jù)。

超高倍顯微系統(tǒng);咽拭子;肺炎支原體

肺炎支原體肺炎是兒童呼吸系統(tǒng)的常見(jiàn)病、多發(fā)病，以秋、冬季發(fā)病多見(jiàn)，占小兒肺炎的20%左右，流行年份可達(dá)30%［1］，起病緩慢，潛伏期2～3周，病程1～3周，患兒大多表現(xiàn)為發(fā)熱、咳嗽、呼吸困難，發(fā)病初期有全身不適、乏力、頭痛，2～3天后出現(xiàn)發(fā)熱，咳嗽為本病突出的癥狀，一般于發(fā)病后2～3天開(kāi)始，初為干咳，后轉(zhuǎn)為頑固性劇咳，常有黏稠痰液，可持續(xù)1～4周，由于肺部體征不明顯，與劇咳、發(fā)熱等臨床表現(xiàn)不一致，為本病特點(diǎn)之－，而嬰幼兒起病急，病程長(zhǎng)，病情較重，表現(xiàn)為呼吸困難，喘鳴音較為突出，肺部啰音多，部分患兒可出現(xiàn)溶血性貧血、腦膜炎、心肌炎、腎炎、格林－巴利綜合征等肺外表現(xiàn)，由于肺炎支原體肺炎在出現(xiàn)并發(fā)癥之前的治療比較簡(jiǎn)單，所以早期診斷顯得尤為重要。我院采用超高倍顯微系統(tǒng)咽拭子法檢查支原體活體，所有咽拭子標(biāo)本MP核酸檢測(cè)陽(yáng)性，探討該方法在兒童呼吸道支原體感染早期診斷中的臨床價(jià)值。

1.資料與方法

1.1 資料來(lái)源:我院自2012年6月～2014年5月診斷為肺炎支原體肺炎的患兒313例，男181例，女132例，其中0～1歲51例，1～3歲112例，3歲以上150例，患兒均有完整病史，肺炎支原體肺炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)來(lái)自第7版諸福棠《實(shí)用兒科學(xué)》［2］，主要依據(jù)臨床癥狀，如高熱、干咳、呼吸困難等，咽拭子肺炎支原體核酸檢測(cè)陽(yáng)性。

1.2 儀器:采用上海復(fù)星公司提供的超高倍光電顯微系統(tǒng)，放大倍率為20000倍，分辨率為0.25μm。

1.3 方法:入院當(dāng)日或次日用一次性無(wú)菌拭子采集患兒咽峽部及咽后壁分泌物，放入裝有0.5ml無(wú)菌生理鹽水的無(wú)菌試管中，充分混勻，用一次性無(wú)菌吸管吸取一滴懸滴于潔凈的載玻片上，蓋上24×50mm的蓋玻片，蓋玻片的厚度為0.13～0.16mm，于超高倍顯微鏡暗視野或相差視野下鏡檢，由于支原體無(wú)細(xì)胞壁，形態(tài)不斷變化，可見(jiàn)小球狀支原體活體明顯的旋轉(zhuǎn)及跳動(dòng)，同時(shí)伴隨數(shù)量不等的白細(xì)胞［3］，報(bào)告為陽(yáng)性，并報(bào)告活潑程度。

2.結(jié)果

313 例咽拭子肺炎支原體核酸檢測(cè)陽(yáng)性的患者咽拭子標(biāo)本中，超高倍顯微系統(tǒng)咽拭子鏡檢陽(yáng)性標(biāo)本272例，陽(yáng)性檢出率為86.9%，男167例，女105例，其中病程7天以?xún)?nèi)的陽(yáng)性標(biāo)本217例，7～14天的陽(yáng)性標(biāo)本55例，14天以上的陽(yáng)性標(biāo)本0例，結(jié)果表明超高倍顯微系統(tǒng)咽拭子鏡檢法陽(yáng)性檢出率高，與咽拭子肺炎支原體核酸檢測(cè)結(jié)果無(wú)明顯差異，尤其是發(fā)病早期的患兒咽拭子陽(yáng)性檢出率更為明顯。見(jiàn)表1

表1 不同病程時(shí)間段患兒支原體檢測(cè)陽(yáng)性人數(shù)及比例

3.討論

肺炎支原體(MP)無(wú)細(xì)胞壁，可通過(guò)濾菌器，是介于細(xì)菌與病毒之間的最小原核細(xì)胞型微生物，生命力強(qiáng)。是引起人類(lèi)原發(fā)性非典型肺炎的常見(jiàn)病原微生物，肺炎支原體肺炎多發(fā)于兒童、青年，潛伏期2～3周，以秋冬季發(fā)病多見(jiàn)，臨床表現(xiàn)以發(fā)熱、咳嗽、頭痛、咽喉痛和肌肉痛為主，咳嗽是本病的突出癥狀，先干咳，后轉(zhuǎn)為頑固性劇咳。嬰幼兒感染者起病急，病程長(zhǎng)，病情較重，表現(xiàn)為呼吸困難、喘憋、喘鳴音較為突出、肺部啰音多。

傳統(tǒng)的肺炎支原體檢測(cè)方法主要有肺炎支原體抗體(IgG與IgM)檢測(cè)、培養(yǎng)法、咽拭子肺炎支原體核酸定性檢測(cè)，肺炎支原體抗體(IgG與IgM)檢測(cè)是目前醫(yī)院常用的檢測(cè)方法，但由于抗體產(chǎn)生的時(shí)間較長(zhǎng)，且個(gè)體差異明顯，特別是嬰幼兒感染者，由于免疫系統(tǒng)發(fā)育不完善，免疫功能低下，部分重癥患者抗體產(chǎn)生的效價(jià)較低，影響肺炎支原體感染的早期診斷［3］;培養(yǎng)法雖然特異性高，但易出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性;咽拭子肺炎支原體核酸定性檢測(cè)對(duì)實(shí)驗(yàn)室條件及檢測(cè)人員要求較高，檢測(cè)周期較長(zhǎng)，一般大多數(shù)醫(yī)院難以提供相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室條件，不能作為常規(guī)檢查;而超高倍顯微系統(tǒng)具有多種光學(xué)模式，分辨率高，無(wú)極共軛放大倍率高，可以快速檢出咽拭子標(biāo)本中的支原體，尤其感染早期的標(biāo)本，陽(yáng)性檢出率更高，并且可以利用計(jì)算機(jī)屏幕觀察涂片，易于保存和檢索。我院采用超高倍顯微系統(tǒng)的相差視野及暗視野對(duì)313例肺炎支原體核酸定性檢測(cè)陽(yáng)性的患兒咽拭子標(biāo)本涂片鏡檢，檢出陽(yáng)性標(biāo)本272例，陽(yáng)性率86.9%，陽(yáng)性符合率高，特別的發(fā)病早期的患兒咽子標(biāo)本，陽(yáng)性檢出率明顯高于中后期。

本文結(jié)果表明，超高倍顯微系統(tǒng)咽拭子鏡檢支原體活體簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、無(wú)創(chuàng)傷，發(fā)病早期陽(yáng)性檢出率高，為肺炎支原體肺炎的早期診斷及治療提供了可靠的臨床依據(jù)，該方法適合基層醫(yī)院的開(kāi)展。

［1］趙冬梅超高倍顯微鏡下咽拭子法檢測(cè)兒童肺炎支原體活體在臨床中的應(yīng)用［J］.求醫(yī)問(wèn)藥雜志，2012，10(2):85－86.

［2］周利俠咽拭子超高倍鏡檢肺炎支原體在肺炎支原體肺炎早期診斷中的應(yīng)用［J］.臨床誤診誤治雜志，2008，21(11):16－17.

［3］蒲秀紅，郭曉清，邱萌等超高倍顯微鏡在呼吸道支原體感染早期診斷中的價(jià)值［J］.臨床軍醫(yī)雜志，2011，39(5):943－945.

R446.1

B

1009－6019(2014)11－0053－02