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    芪參口服液的急性毒性試驗(yàn)

    2014-06-07 05:50:46王建舫高會(huì)軍
    獸醫(yī)導(dǎo)刊 2014年12期
    關(guān)鍵詞:小鼠劑量

    王建舫 高會(huì)軍

    (1.北京農(nóng)學(xué)院 獸醫(yī)學(xué)(中醫(yī)藥)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 102206;2.石家莊華牧牧業(yè)有限責(zé)任公司獸藥分公司,河北石家莊 050061)

    芪參口服液的急性毒性試驗(yàn)

    王建舫1高會(huì)軍2

    (1.北京農(nóng)學(xué)院 獸醫(yī)學(xué)(中醫(yī)藥)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 102206;2.石家莊華牧牧業(yè)有限責(zé)任公司獸藥分公司,河北石家莊 050061)

    給小鼠灌服不同濃度的芪參口服液進(jìn)行急性毒性試驗(yàn),評(píng)價(jià)該口服液的安全性。實(shí)驗(yàn)組小鼠灌服不同濃度的芪參口服液,觀察給藥后小鼠的臨床表現(xiàn)與死亡情況。結(jié)果芪參口服液最大劑量一次性給40g/kg,1周后未見明顯中毒癥狀,且沒有死亡病例出現(xiàn)。結(jié)果提示,芪參口服液的毒性較低,臨床用藥安全可靠,為芪參口服液的臨床前和臨床研究提供了安全的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

    芪參口服液;小鼠;急性毒性

    芪參口服液是由北京農(nóng)學(xué)院獸醫(yī)學(xué)(中醫(yī)藥)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和石家莊華牧牧業(yè)有限責(zé)任公司獸藥分公司共同開發(fā)的獸用中藥復(fù)方制劑,本方由黃芪、黨參、白術(shù)和甘草按一定的配比經(jīng)科學(xué)組方而成。方中黃芪為豆科植物膜莢黃芪或蒙古黃芪的干燥根,具有補(bǔ)氣升陽(yáng)、固表止汗、托毒生肌、利水退腫之功效[1]。前期的藥效學(xué)研究表明,小鼠口服芪參口服液后可顯著提高免疫力低下小鼠的胸腺系數(shù)和脾臟系數(shù)、能夠增強(qiáng)免疫力低下小鼠的非特異性免疫能力、能夠提高免疫力低下小鼠的體液免疫能力[2]。前期的臨床試驗(yàn)也表明,芪參口服液能夠提高雞免疫新城疫疫苗的抗體滴度。為了確保該口服液的安全性,本試驗(yàn)對(duì)其進(jìn)行了小鼠的急性毒性試驗(yàn)。

    1 材料

    1.1 藥物

    “芪參口服液”,每1 mL藥液折合含1 g生藥材,由北京農(nóng)學(xué)院獸醫(yī)學(xué)(中醫(yī)藥)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室制備。

    1.2 動(dòng)物

    清潔級(jí)昆明種小鼠,雌雄各半,體重18~22 g,由北京大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。在人工照明12 h、通風(fēng)良好的情況下對(duì)小鼠進(jìn)行3 d 的喂養(yǎng)觀察,觀察小鼠自由采食、飲水等有無(wú)異常。給藥前16 h內(nèi)禁食,但不禁水。

    1.3 儀器

    旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,購(gòu)自上海亞榮生化儀器廠。

    2 方法和結(jié)果

    2.1 芪參口服液的制備

    將黃芪、黨參、白術(shù)和甘草藥材按照一定的配比,加10倍水,煮沸2次,第一次2 h,第二次1h,合并藥液,放冷,過濾,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至1g/ml。

    2.2 預(yù)試驗(yàn)

    2.2.1 試驗(yàn)分組及處理

    取昆明小鼠20只,隨機(jī)分成5組,每組4只,雌雄各半。采用灌胃給藥,設(shè)定5個(gè)劑量組進(jìn)行(見表1),給藥容量0.8 mL/20 g,連續(xù)觀察7 d并記錄小鼠的體重、精神狀態(tài)、飲水、采食及行為活動(dòng)等情況。

    2.2.2 試驗(yàn)結(jié)果

    灌服5個(gè)劑量的芪參口服液后,連續(xù)觀察7d,小鼠飲食、飲水、體重及精神狀態(tài)正常,未出現(xiàn)死亡(結(jié)果見表1)。

    表1 小鼠灌胃試驗(yàn)結(jié)果

    2.2.3 討論

    本實(shí)驗(yàn)的高劑量組達(dá)到40g/kg,其實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡率為0,已經(jīng)達(dá)到了無(wú)毒的標(biāo)準(zhǔn)。因此,我們將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)增加到10只(雌雄各半),采用此劑量進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。

    2.3 驗(yàn)證試驗(yàn)

    2.3.1 試驗(yàn)分組及處理

    健康昆明小鼠30只,雌雄各半,分為3組,10只/組。給藥前12 h禁食,但不禁水。1組和2組灌胃給藥40 g/kg,對(duì)照組灌服等量的自來(lái)水。連續(xù)觀察7d并記錄小鼠的飲水、體重、精神狀態(tài)和行為活動(dòng)等情況。第8天處死,觀察主要臟器的病理變化。

    2.3.2 試驗(yàn)結(jié)果

    小鼠灌胃給藥,觀察7d,其精神狀態(tài)正常,行為活動(dòng)等未發(fā)現(xiàn)異常,體重和飲水與對(duì)照組相比無(wú)顯著性變化,未出現(xiàn)死亡(結(jié)果見表2)。

    表2 灌胃給藥驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

    2.3.3 急性毒性試驗(yàn)小鼠剖解結(jié)果

    試驗(yàn)期內(nèi)小鼠全部存活。第8d頸椎脫臼致死法處死小鼠并解剖,肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎等主要臟器,未見明顯的病理變化。

    3 小結(jié)

    以上試驗(yàn)表明:小鼠灌胃劑量達(dá)到40g/kg時(shí),死亡率為0,且將數(shù)量增至10只,并進(jìn)行2次重復(fù)試驗(yàn),小鼠均未出現(xiàn)死亡。因此,可以結(jié)束整個(gè)急性毒性試驗(yàn)。該試驗(yàn)為芪參口服液的臨床使用提供了理論依據(jù)。

    [1] 劉鐘杰,許劍琴.中獸醫(yī)學(xué)[M].北京: 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2002:353-354.

    [2] 王建舫,賈夢(mèng)然,胡艷姣,等.芪參口服液對(duì)免疫功能低下小鼠的保護(hù)作用[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2013,29(11):24-28.

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