• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    高速逆流色譜分離純化波棱瓜子中化學(xué)成分

    2014-06-05 15:27:32杭偉宋騰飛段文娟王曉耿巖玲楊丙田張欽德
    山東科學(xué) 2014年1期
    關(guān)鍵詞:逆流瓜子石油醚

    杭偉,宋騰飛,段文娟,王曉,耿巖玲,楊丙田,張欽德

    (1.山東中醫(yī)藥大學(xué),山東 濟(jì)南 250355;2.山東省分析測試中心,山東 濟(jì)南 250014;

    3.濟(jì)南三峰生物工程技術(shù)有限公司,山東 濟(jì)南 251400;4.山東中醫(yī)藥高等??茖W(xué)校,山東煙臺264000)

    高速逆流色譜分離純化波棱瓜子中化學(xué)成分

    杭偉1,2,宋騰飛1,段文娟2,王曉2,耿巖玲2,楊丙田3,張欽德4*

    (1.山東中醫(yī)藥大學(xué),山東 濟(jì)南 250355;2.山東省分析測試中心,山東 濟(jì)南 250014;

    3.濟(jì)南三峰生物工程技術(shù)有限公司,山東 濟(jì)南 251400;4.山東中醫(yī)藥高等??茖W(xué)校,山東煙臺264000)

    采用高速逆流色譜對波棱瓜子乙酸乙酯提取物進(jìn)行分離純化,以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(體積比2:6:3:5)為溶劑,上相為固定相,下相為流動相,流速2mL/min,轉(zhuǎn)速850 r/min,共分離得到2個(gè)高純度化合物,經(jīng)過高效液相色譜檢測,純度均高于95%。該方法簡便、快速、節(jié)省溶劑,可以對波棱瓜子中的化學(xué)成分進(jìn)行快速有效的分離純化。

    高速逆流色譜;波棱瓜子;分離純化

    波棱瓜子,為葫蘆科一年生攀緣草本植物波棱瓜(Herpetospermum pedunculosum(Ser.)C.B.Clarke)的干燥成熟種子[1],主要分布于我國西藏、云南以及印度、尼泊爾等地。本品性寒、味苦,具有清熱解毒、去火降熱及柔肝的功效,是一種傳統(tǒng)常用藏藥材,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)常用于治療黃疸型傳染性肝炎、膽囊炎、消化不良及赤巴病等[2],目前國內(nèi)外對藏藥波棱瓜子的化學(xué)成分研究相對較少。

    高速逆流色譜法(high-speed counter-current chromatography,HSCCC)是一種不需要固態(tài)載體的液-液分配色譜技術(shù),具有操作簡便、可避免因不可逆吸附而引起的樣品損失等優(yōu)點(diǎn),已被廣泛應(yīng)用于天然產(chǎn)物的分離純化當(dāng)中[3-4]。本文首次采用高速逆流色譜對波棱瓜子乙酸乙酯提取物進(jìn)行分離純化,得到了2個(gè)純度大于95%的化合物,并采用質(zhì)譜和核磁共振波譜法鑒定其結(jié)構(gòu),實(shí)現(xiàn)了對波棱瓜子中化學(xué)成分快速、有效的分離純化。

    1 材料、儀器與試劑

    材料:波棱瓜子在四川康定地區(qū)一帶收集,經(jīng)四川中醫(yī)藥科學(xué)院方青茂研究員鑒定,為葫蘆科一年生攀緣草本植物波棱瓜的干燥成熟種子。

    儀器:TBP泵、GS10A型高速逆流色譜儀、多層聚四氟乙烯螺旋管(直徑2.3 mm,分離體積230 mL,β值為0.5~0.8)、3057-11記錄儀、8823B-紫外檢測器;Waters 600-996高效液相色譜系統(tǒng)(配有光電二極管陣列檢測器(PDA),Agilent 1100 Series6320 ion-trap質(zhì)譜儀;Varian INOVA-600核磁共振波譜儀。

    試劑:逆流色譜用乙酸乙酯、石油醚、氯仿和甲醇均為分析純,所用水為純凈水;高效液相色譜用甲醇為色譜純,所用水為純凈水。

    2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.1 波棱瓜子乙酸乙酯提取物的制備

    波棱瓜子藥材5 kg,粉碎后用石油醚回流提取3次,每次2 h,將提取液過濾、合并、減壓濃縮,得石油醚提取物234 g;殘?jiān)^續(xù)用乙酸乙酯回流提取3次,每次2 h,將提取液過濾、合并、減壓濃縮,得到乙酸乙酯提取物185 g。

    2.2 HSCCC分離

    2.2.1 溶劑體系的配制

    本實(shí)驗(yàn)溶劑體系為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(體積比2:6:3:5),配約1.5 L,置于分液漏斗中,振蕩使其完全混合后靜置分層,平衡后將上下兩相體系分開,上相作為固定相,下相作為流動相,分別超聲脫氣5~10 min,備用。稱取波棱瓜子乙酸乙酯提取物200 mg,加入上下相各5 m L,振蕩使其完全溶解,備用。

    2.2.2 HSCCC制備分離過程

    將溶劑體系中的上相(固定相)以20 mL/min的流速泵入HSCCC分離管內(nèi),待上相充滿分離管后,調(diào)至主機(jī)轉(zhuǎn)速為850 r/min,順時(shí)針旋轉(zhuǎn),待轉(zhuǎn)速穩(wěn)定后,以2 mL/min流速泵入下相(流動相),檢測波長254 nm。當(dāng)流動相從主機(jī)口流出時(shí),體系達(dá)到流體動力學(xué)平衡,再將已準(zhǔn)備好的樣品注入HSCCC儀器內(nèi),采集數(shù)據(jù),根據(jù)圖譜收集目標(biāo)成分。

    2.2.3 分配系數(shù)(Kd)的測定

    根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的Kd值測定方法[5-6],取波棱瓜子乙酸乙酯提取物樣品置于試管內(nèi),加入上下相各3 m L振蕩,使樣品完全溶解,靜置分層,各取上下相5μL,用高效液相色譜進(jìn)行檢測,上相峰面積為A1,下相峰面積為A2,Kd=A1/A2。

    2.3 高效液相色譜條件

    C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流動相A:甲醇,流動相B:水;等度洗脫:0~30 min,60%A,40%B;流速:1 m L/min;檢測波長:255 nm;進(jìn)樣量:5μL,柱溫:室溫。

    3 結(jié)果與討論

    3.1 HSCCC分離條件優(yōu)化

    在高速逆流色譜法分離中,選擇溶劑體系是分離中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),溶劑體系是否合適是由該目標(biāo)化合物在其中的分配系數(shù)Kd來衡量的,對于目標(biāo)化合物適宜的溶劑系統(tǒng)分配系數(shù)應(yīng)在0.5~2之間[7]。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)目標(biāo)化合物的極性采用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水體系,因?yàn)檫@個(gè)兩相體系具有較寬的極性范圍以及良好的溶解度。如表1所示,選擇了幾種不同的溶劑系統(tǒng),進(jìn)行Kd值測量。當(dāng)采用體積比為2:6:5:3及2:6:4:4的溶劑體系時(shí),會導(dǎo)致分離的時(shí)間短,達(dá)不到良好的分離效果,難以實(shí)現(xiàn)目標(biāo)化合物的分離純化。采用體積比2:6:2:6的體系時(shí),Kd值偏大,雖然取得了很好的分離效果,但是分離時(shí)間較長,分離效率低。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)采用體積比為2:6:3:5的石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水體系時(shí),目標(biāo)化合物才能得到比較理想的分離效果,而且分離的時(shí)間較為合適。

    表1 目標(biāo)成分在不同溶劑系統(tǒng)中的分配系數(shù)Table 1 Kdof compounds in different solvent system

    3.2 HSCCC分離純化結(jié)果

    選擇石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(體積比2:6:3:5)體系,按照2.2節(jié)所述的方法對波棱瓜子乙酸乙酯提取物進(jìn)行HSCCC分離,根據(jù)HSCCC譜圖分別收集,結(jié)果如圖1所示。經(jīng)過HPLC檢測,分別得到2個(gè)高純度化合物,經(jīng)冷凍干燥,得化合物1為11.4 mg,化合物2為15.7mg。結(jié)果如圖2所示。

    圖1 波棱瓜子乙酸乙酯提取物高速逆流色譜圖Fig.1 HSCCC chromatogram of Herpetospermum pedunculosum seeds ethyl acetate extract

    圖2 波棱瓜子乙酸乙酯提取物及各化合物HPLC圖Fig.2 HPLC chromatograms of extracts and individual compound from Herpetospermum pedunculosum seeds ethyl acetate extract

    3.3 化合物結(jié)構(gòu)鑒定

    化合物1:ESI-MS(m/z):551.6[M-H]-.1H-NMR(CDCl3,600 MHz)δ:7.60(1H,dd,J=8.4 Hz,1.8 Hz,H-6),7.57(1H,d,1.8 Hz,H-2),6.87(1H,d,J=8.4 Hz,H-5),6.81(1H,dd,J=8.4 Hz,1.8 Hz,H-6″),6.77(1H,d,J=8.4 Hz,H-5″),6.60(1H,d,J=1.8 Hz,H-2″),6.19(1H,d,J=2.4 Hz,H-2′),5.69(1H,d,J=2.4 Hz,H-6′),5.20(1H,dd,J=7.8 Hz,4.8 Hz,H-8),4.68(1H,d,J=4.8 Hz,H-7),4.60(1H,d,J=4.8 Hz,H-7′),4.20(3H,m,-OCH3),3.85(2H,m,CH2OH),3.48(2H,s,3-OCH3),3.03(1H,m,H-9′),2.97(1H,m,H-9″).13C-NMR(CDCl3,600 MHz)δ:199.08(C-7),150.58(C-4),146.96(C-3″),146.71(C-3),146.38(C-3′),145.22(C-4″),142.16(C-1″),132.85(C-1′),132.82(C-1),128.88(C-6),124.22(C-5′),122.27(C-6′),118.94(C-6″),118.09(C-5″),114.25(C-5),114.05(C-2),108.56(C-2″),107.51(C-2′),85.81(C-7′),85.69(C-7″),71.67(C-9′),71.57(C-9″),63.89(CH2OH),56.09(3-OCH3),55.96(3′-OCH3),55.94(3″-OCH3),54.18(C-8″),54.06(C-8′),47.87(C-8).化合物1的ESI-MS、1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]報(bào)道基本一致,故鑒定化合物1為Herpetrione。

    化合物2:ESI-MS(m/z):301.3[M-H]-.1H-NMR(DMSO,600 MHz)δ:10.04(1H,brs,-OH),8.04(1H,s,H-1′),7.60(1H,s,4′),7.07(1H,d,J=2.4 Hz,H-6),6.95(1H,d,J=2.4 Hz,H-8),5.78(1H,t,J=2.4 Hz,CH2OH),4.90(2H,d,J=2.4 Hz,CH2OH),3.98(3H,s,2′-OCH3),3.85(3H,s,7-OCH3);13C-NMR(DMSO,600 MHz)δ:160.49(C-2),159.24(C-7),154.25(C-2′),152.82(C-8a),147.05(C-3′),140.08(C-5),128.92(C-4),114.97(C-6),114.52(C-4′),113.61(C-3),111.05(C-4a),109.64(C-1′),101.34(C-8),63.78(CH2OH),56.15(2′-OCH3),56.04(7-OCH3).化合物2的ESIMS、1H-NMR和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報(bào)道基本一致,故鑒定化合物2為Herpetolide A。

    4 討論

    本文首次采用高速逆流色譜法對波棱瓜子乙酸乙酯提取物進(jìn)行分離純化,以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(體積比2:6:3:5)溶劑體系,分離得到2個(gè)化合物,其純度經(jīng)高效液相色譜檢測均高于95%。該方法簡便、快速并節(jié)省溶劑,可以對波棱瓜子乙酸乙酯提取物進(jìn)行快速有效的分離純化,具有較好的實(shí)用價(jià)值。波棱瓜子化學(xué)成分研究是進(jìn)一步進(jìn)行活性研究及產(chǎn)品開發(fā)的必要步驟,建立相關(guān)成分快速有效的分離純化方法,可以為波棱瓜子資源的開發(fā)應(yīng)用提供技術(shù)支持。

    [1]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)藏藥第一冊[M].北京:中華人民共和國衛(wèi)生部,1995:64.

    [2]張梅,董小萍,王慧,等.藏藥波棱瓜子脂肪油成分的氣相色譜-質(zhì)譜分析[J].成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2004,27(4):49-50.

    [3]張?zhí)煊?,王曉.高速逆流色譜技術(shù)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2011.

    [4]FANG L,LIU YQ,YANG B,et al.Separation of alkaloids from herbs using high-speed counter-current chromatography[J].Journal of Separation Science,2011,34(19),2545-2558.

    [5]FANG L,LIU Y Q,ZHUANG H Y,et al.Combined microwave-assisted extraction and high-speed counter-current chromatography for separation and purification of xanthones from Garciniamangostana[J].Journal of Chromatography B,2011,879(28)3023-3027.

    [6]WANG D J,GENG Y L,F(xiàn)ANG L,etal.An efficient combination of supercritical fluid extraction and high-speed counter-currentchromatography to extract and purify(E)-and(Z)-diastereomers of a-asarone and b-asarone from Acorus tatarinowii Schott[J].Journal of Separation Science,2011,34(23):3339-3343.

    [7]ITO Y.Golden rules and pitfalls in selecting optimum conditions for high-speed counter-current chromatography[J].Journal of Chromatography A.2005,1065(2)145-168.

    [8]KAOUADJIM,F(xiàn)AVRE-BONVIN J.Herpetrione,a trimeric lignoide isolated from Herpetospermum caudigenum Wall[J].Tetrahedron Letters,1983,24(52):5881-5884.

    [9]ZHANG M,DENG Y,ZHANG H B,et al.Two new coumarins fromHerpetospermum caudigerum[J].Chemical and Pharmaceutical Bulletin,2008,56(2):192-193.

    Separation and purification of chem ical constituents in Herpetospermum pedunculosum seeds by high-speed counter-current chromatography

    HANG Wei1,2,SONG Teng-fei1,DUAN W en-juan2,WANG Xiao2,GENG Yan-Iing2,YANG Bing-tian3,ZHANG Qin-de4*
    (1.College of Pharmacy,Shandong University of Traditional Chinese Medicine,Jinan 250355,China;2.Shandong Analysis and Test Center,Jinan 250014,China;3.Three peak biological engineering technology Co.Ltd.,Jinan 250014,China;4.Shandong College of Traditional Chinese Medicine,Yantai 264000,China)

    We originally employed high speed counter-current chromatog raphy(HSCCC)to separate and purify chemical constituents in ethyl acetate dissolvedHerpetospermum pedunculosumseeds.We separated two high-purity chemical compounds with petroleum ether-ethyl acetate-methanol-water(volume ratio of 2:6:3:5)as solvent,upper organic stationary phase and lower aqueous mobile phase,flow rate of 2 mL/min and rotation speed of 850 r/min.Their HPLC detected purities were more than 95%.The method is simple,rapid,solvent-saving and can rapidly and effectively separate and purify the chemical constituents inHerpetosperm um pedunculosumseeds.

    high-speed counter-current chromatography;Herpetospermum pedunculosum seed;separation and purification

    R284.2;O657.7

    A

    1002-4026(2014)01-0040-05

    10.3976/j.issn.1002-4026.2014.01.007

    2013-11-18

    杭偉(1986-),碩士研究生,研究方向?yàn)橹兴幓钚猿煞帧?/p>

    *通訊作者,張欽德,教授,研究方向?yàn)橹兴庂|(zhì)量控制與中藥資源研究。Email:zhangqinde0929@163.com

    猜你喜歡
    逆流瓜子石油醚
    吃蟹黃瓜子
    揪出瓜子大盜
    玫瑰花茶飲 可緩解胃食道逆流
    錦燈籠宿萼與果實(shí)的石油醚部位化學(xué)成分及抗氧化活性比較①
    逆流游泳比賽
    村莊逆流成詩
    散文詩(2017年18期)2018-01-31 02:43:49
    補(bǔ)腎活血湯石油醚提取物對BMSCs遷移過程中Wnt5a/PKC通路的影響
    中成藥(2017年12期)2018-01-19 02:06:26
    吐瓜子
    煙草石油醚含量研究
    姐嗑的不是瓜子,是寂寞
    九九热线精品视视频播放| 精品福利观看| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 久久人妻av系列| xxxwww97欧美| 免费观看的影片在线观看| 男女视频在线观看网站免费| 久久久久久久久久黄片| 国产伦精品一区二区三区视频9| 国产一区二区在线观看日韩| 午夜免费成人在线视频| 亚洲成人久久性| 成人av一区二区三区在线看| 久久久久久九九精品二区国产| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产免费男女视频| 日韩亚洲欧美综合| 国产黄色小视频在线观看| 免费观看人在逋| 成年女人永久免费观看视频| 色吧在线观看| 97超视频在线观看视频| 国产精品,欧美在线| 久久中文看片网| 在线免费观看的www视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 少妇被粗大猛烈的视频| 午夜免费成人在线视频| av天堂中文字幕网| 99久久九九国产精品国产免费| 国产精品国产高清国产av| 国产免费男女视频| 国产精品98久久久久久宅男小说| 成年版毛片免费区| h日本视频在线播放| 麻豆一二三区av精品| 精品国内亚洲2022精品成人| 十八禁国产超污无遮挡网站| 亚洲在线观看片| 少妇的逼水好多| netflix在线观看网站| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 真人做人爱边吃奶动态| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 真实男女啪啪啪动态图| 成人精品一区二区免费| 少妇熟女aⅴ在线视频| 看十八女毛片水多多多| 婷婷精品国产亚洲av| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 久久精品国产亚洲av天美| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产人妻一区二区三区在| 免费观看的影片在线观看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 欧美日韩国产亚洲二区| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲午夜理论影院| 亚洲无线观看免费| 免费av观看视频| 国产免费男女视频| 亚洲专区国产一区二区| 日本黄色视频三级网站网址| 免费观看在线日韩| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 熟女电影av网| 成人av一区二区三区在线看| 最好的美女福利视频网| 男人舔女人下体高潮全视频| 一区福利在线观看| 一级a爱片免费观看的视频| 村上凉子中文字幕在线| 国产91精品成人一区二区三区| 99九九线精品视频在线观看视频| 两个人视频免费观看高清| 亚洲国产精品成人综合色| 午夜亚洲福利在线播放| 欧美激情在线99| 国模一区二区三区四区视频| 国产淫片久久久久久久久| 日韩 亚洲 欧美在线| 久久久国产成人精品二区| 国产色爽女视频免费观看| 可以在线观看毛片的网站| 少妇的逼水好多| 久久久久久久久久成人| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 色哟哟哟哟哟哟| 日韩欧美 国产精品| 国产高清视频在线播放一区| 日韩欧美 国产精品| 波多野结衣高清无吗| 午夜影院日韩av| 久久精品国产自在天天线| 亚洲乱码一区二区免费版| 久久国产乱子免费精品| 亚洲精品成人久久久久久| 久久精品国产自在天天线| 久久99热这里只有精品18| 午夜激情欧美在线| 真人一进一出gif抽搐免费| 特大巨黑吊av在线直播| 国产色婷婷99| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 不卡视频在线观看欧美| 在线a可以看的网站| 一区二区三区高清视频在线| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 99热只有精品国产| 国产男人的电影天堂91| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲av第一区精品v没综合| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 97碰自拍视频| av中文乱码字幕在线| 亚洲精品成人久久久久久| 色吧在线观看| 中文字幕熟女人妻在线| 啪啪无遮挡十八禁网站| 精品人妻熟女av久视频| 99久久成人亚洲精品观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 亚洲午夜理论影院| .国产精品久久| av在线蜜桃| 少妇人妻一区二区三区视频| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 天堂动漫精品| 日韩欧美免费精品| 久久6这里有精品| 国模一区二区三区四区视频| 在线观看午夜福利视频| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 老司机午夜福利在线观看视频| 国产综合懂色| 免费一级毛片在线播放高清视频| 看免费成人av毛片| 12—13女人毛片做爰片一| 国产 一区精品| 我的女老师完整版在线观看| 极品教师在线免费播放| 乱系列少妇在线播放| 成人亚洲精品av一区二区| 男女那种视频在线观看| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 免费看光身美女| 国产精品久久久久久久电影| av在线观看视频网站免费| 国产私拍福利视频在线观看| 国产亚洲91精品色在线| or卡值多少钱| 一区二区三区免费毛片| 一本一本综合久久| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 国产精品永久免费网站| 真人做人爱边吃奶动态| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 在线观看av片永久免费下载| 国产精品一及| 最近中文字幕高清免费大全6 | 亚洲人成伊人成综合网2020| 99久久成人亚洲精品观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 日本黄色视频三级网站网址| 美女大奶头视频| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲五月天丁香| 麻豆国产av国片精品| 亚洲av电影不卡..在线观看| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 日本成人三级电影网站| 精品人妻视频免费看| 久久久久久久午夜电影| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产精品嫩草影院av在线观看 | netflix在线观看网站| 日本黄色视频三级网站网址| 国产 一区精品| 免费观看在线日韩| 最新中文字幕久久久久| 成人特级av手机在线观看| 成人无遮挡网站| 无人区码免费观看不卡| 九色国产91popny在线| 特级一级黄色大片| 97碰自拍视频| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 亚洲av熟女| 午夜激情福利司机影院| 高清在线国产一区| 国产伦一二天堂av在线观看| 亚洲专区国产一区二区| 深夜a级毛片| 亚洲av成人av| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 欧美色欧美亚洲另类二区| 又爽又黄a免费视频| netflix在线观看网站| 在线a可以看的网站| 免费看a级黄色片| 亚洲av.av天堂| 制服丝袜大香蕉在线| 亚洲va在线va天堂va国产| 极品教师在线视频| 色5月婷婷丁香| 在线天堂最新版资源| 少妇人妻一区二区三区视频| 亚洲av免费在线观看| 黄色视频,在线免费观看| 午夜老司机福利剧场| 成人鲁丝片一二三区免费| 欧美最黄视频在线播放免费| 在线a可以看的网站| 深夜a级毛片| or卡值多少钱| 在现免费观看毛片| 午夜久久久久精精品| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 国产精品无大码| 国产成人福利小说| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 黄色欧美视频在线观看| 亚洲性久久影院| 国产乱人视频| 88av欧美| 夜夜爽天天搞| 亚洲图色成人| 国产午夜精品论理片| 国产三级中文精品| 他把我摸到了高潮在线观看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 免费搜索国产男女视频| 在线看三级毛片| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 在线观看66精品国产| 村上凉子中文字幕在线| 色综合站精品国产| 一进一出抽搐动态| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 18+在线观看网站| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产不卡一卡二| 日本免费a在线| 在线看三级毛片| 国产精品不卡视频一区二区| 日本黄大片高清| 一a级毛片在线观看| 观看美女的网站| 韩国av在线不卡| 国产av麻豆久久久久久久| 一区二区三区激情视频| 久久精品国产自在天天线| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 极品教师在线视频| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 人妻久久中文字幕网| 国内精品一区二区在线观看| 草草在线视频免费看| 欧美性感艳星| 久久久国产成人精品二区| 中文字幕av在线有码专区| 国产精品一区二区性色av| 一a级毛片在线观看| 欧美成人a在线观看| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲欧美日韩东京热| av女优亚洲男人天堂| 亚洲精品久久国产高清桃花| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲av五月六月丁香网| av国产免费在线观看| 嫩草影院新地址| 亚洲美女搞黄在线观看 | 成人精品一区二区免费| 又粗又爽又猛毛片免费看| 日韩强制内射视频| 51国产日韩欧美| 看黄色毛片网站| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲av免费在线观看| 性色avwww在线观看| 久久久久精品国产欧美久久久| 免费无遮挡裸体视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产精品永久免费网站| 国产精品1区2区在线观看.| 久久精品国产自在天天线| 欧美激情在线99| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产精品乱码一区二三区的特点| 一级a爱片免费观看的视频| 久久久久久久精品吃奶| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 黄色配什么色好看| 国产精品一区二区性色av| 97超视频在线观看视频| 桃红色精品国产亚洲av| 男女那种视频在线观看| 老熟妇仑乱视频hdxx| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产精华一区二区三区| 99久久成人亚洲精品观看| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 国产亚洲精品久久久久久毛片| 久久精品国产清高在天天线| 男插女下体视频免费在线播放| 国产精品永久免费网站| 国产精品1区2区在线观看.| 丰满的人妻完整版| 日韩欧美精品免费久久| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 日韩av在线大香蕉| 国产真实乱freesex| 精品久久久噜噜| 一区二区三区高清视频在线| 床上黄色一级片| 一进一出抽搐动态| 中文字幕高清在线视频| 97碰自拍视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲国产精品久久男人天堂| 网址你懂的国产日韩在线| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| av黄色大香蕉| 成人av一区二区三区在线看| 亚洲精品国产成人久久av| 无人区码免费观看不卡| 国产精品人妻久久久久久| 免费看a级黄色片| 69av精品久久久久久| 亚洲天堂国产精品一区在线| 欧美三级亚洲精品| 久久精品国产自在天天线| 欧美日韩乱码在线| 久久草成人影院| а√天堂www在线а√下载| 国产日本99.免费观看| 在线观看舔阴道视频| 日韩欧美国产一区二区入口| 免费观看人在逋| 在线播放国产精品三级| 伦理电影大哥的女人| 人人妻人人澡欧美一区二区| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 桃色一区二区三区在线观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 俺也久久电影网| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产精品无大码| 日本免费a在线| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 欧美三级亚洲精品| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产69精品久久久久777片| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| av国产免费在线观看| 免费搜索国产男女视频| 日韩欧美国产在线观看| 男人舔奶头视频| 欧美成人a在线观看| 成人亚洲精品av一区二区| 日韩欧美 国产精品| 免费观看人在逋| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产免费一级a男人的天堂| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 51国产日韩欧美| 日韩在线高清观看一区二区三区 | 男女下面进入的视频免费午夜| 久久午夜福利片| 精品国内亚洲2022精品成人| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产精品久久久久久av不卡| 精品国内亚洲2022精品成人| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲黑人精品在线| 国产成人a区在线观看| 神马国产精品三级电影在线观看| 一夜夜www| 黄色丝袜av网址大全| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产精华一区二区三区| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲av第一区精品v没综合| 色综合婷婷激情| 久久精品影院6| 一本精品99久久精品77| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产精品久久久久久精品电影| 亚洲精品456在线播放app | 嫁个100分男人电影在线观看| netflix在线观看网站| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 一级黄片播放器| 亚洲av二区三区四区| 国产成年人精品一区二区| 国产亚洲欧美98| 一个人看的www免费观看视频| 国产亚洲91精品色在线| 99久国产av精品| 国内精品美女久久久久久| 欧美性感艳星| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲av中文av极速乱 | 成人永久免费在线观看视频| 香蕉av资源在线| 最新在线观看一区二区三区| 白带黄色成豆腐渣| 亚洲av成人av| 久久久国产成人精品二区| av.在线天堂| 观看美女的网站| 看片在线看免费视频| 搡老岳熟女国产| 日韩亚洲欧美综合| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 日本精品一区二区三区蜜桃| 人妻少妇偷人精品九色| 网址你懂的国产日韩在线| 亚洲精品国产成人久久av| 成熟少妇高潮喷水视频| 久久久久久九九精品二区国产| 免费人成视频x8x8入口观看| 精品一区二区三区av网在线观看| av天堂在线播放| 亚洲最大成人手机在线| 少妇的逼水好多| 色吧在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 日韩精品青青久久久久久| 日本一二三区视频观看| 欧美+日韩+精品| 国产av不卡久久| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 日韩欧美国产一区二区入口| 国产精华一区二区三区| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 波多野结衣高清作品| 99久久成人亚洲精品观看| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 高清毛片免费观看视频网站| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 精品人妻视频免费看| 人妻少妇偷人精品九色| 一个人看的www免费观看视频| 91精品国产九色| 色视频www国产| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 国产人妻一区二区三区在| 亚洲av五月六月丁香网| 极品教师在线免费播放| 国产精品一区二区免费欧美| 欧美日本亚洲视频在线播放| 亚洲欧美日韩高清专用| 在线a可以看的网站| 99九九线精品视频在线观看视频| 成人一区二区视频在线观看| 高清日韩中文字幕在线| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 男人舔奶头视频| 男人和女人高潮做爰伦理| 免费无遮挡裸体视频| 国产精品99久久久久久久久| 高清日韩中文字幕在线| 一进一出抽搐动态| 日本-黄色视频高清免费观看| 国产精品久久久久久av不卡| 欧美高清成人免费视频www| 丰满人妻一区二区三区视频av| 久久久国产成人精品二区| 欧美一区二区精品小视频在线| 免费搜索国产男女视频| 国产精品99久久久久久久久| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 久久国产精品人妻蜜桃| 他把我摸到了高潮在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 2021天堂中文幕一二区在线观| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产免费一级a男人的天堂| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲成人免费电影在线观看| 一夜夜www| 国产伦一二天堂av在线观看| 精品久久久久久久久av| 亚洲av成人精品一区久久| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 亚洲av不卡在线观看| 色在线成人网| bbb黄色大片| 成人毛片a级毛片在线播放| 国模一区二区三区四区视频| h日本视频在线播放| 亚洲黑人精品在线| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产精品爽爽va在线观看网站| 99精品在免费线老司机午夜| 久久久久久久久久黄片| 高清在线国产一区| 亚洲精品日韩av片在线观看| 韩国av在线不卡| 亚洲专区中文字幕在线| 男人的好看免费观看在线视频| 黄色日韩在线| 两个人视频免费观看高清| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲无线在线观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲精品色激情综合| 国产 一区 欧美 日韩| 99久久精品热视频| 日本在线视频免费播放| 婷婷色综合大香蕉| 男人狂女人下面高潮的视频| 日韩一本色道免费dvd| 好男人在线观看高清免费视频| 不卡一级毛片| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 一级黄色大片毛片| 亚洲国产精品成人综合色| 欧美激情久久久久久爽电影| 亚洲七黄色美女视频| 欧美精品啪啪一区二区三区| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 中文资源天堂在线| 色哟哟·www| 联通29元200g的流量卡| 国产精品人妻久久久影院| 最近最新中文字幕大全电影3| 免费电影在线观看免费观看| 日本三级黄在线观看| 成人国产麻豆网| 黄色丝袜av网址大全| 亚洲综合色惰| av黄色大香蕉| 99久久中文字幕三级久久日本| 欧美国产日韩亚洲一区| 午夜福利欧美成人| 亚洲男人的天堂狠狠| 精华霜和精华液先用哪个| 成年免费大片在线观看| 国产三级在线视频| 午夜激情欧美在线| 国产精品福利在线免费观看| 免费在线观看成人毛片| 99国产极品粉嫩在线观看| 成人二区视频| 亚洲美女黄片视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 乱系列少妇在线播放| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产精品一区www在线观看 | 欧美黑人巨大hd| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 欧美zozozo另类| 精品福利观看| 欧美成人a在线观看| 成年版毛片免费区| 国产精品久久久久久av不卡| 伦理电影大哥的女人| 欧美激情在线99| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 久久亚洲真实| 久久精品91蜜桃| 男人和女人高潮做爰伦理| 三级国产精品欧美在线观看| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产精品综合久久久久久久免费| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 22中文网久久字幕| 美女 人体艺术 gogo| 人人妻人人澡欧美一区二区| aaaaa片日本免费| 日韩欧美精品v在线| 91麻豆av在线| 色噜噜av男人的天堂激情| 国产精品永久免费网站| 亚洲精品色激情综合| 久久久久久久久中文| 久久久精品欧美日韩精品| 在线观看舔阴道视频| 男女之事视频高清在线观看| 欧美不卡视频在线免费观看| 免费搜索国产男女视频| 欧美最新免费一区二区三区| 午夜老司机福利剧场| 国产午夜福利久久久久久| 精品人妻熟女av久视频| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产单亲对白刺激| 美女大奶头视频| 日韩欧美在线二视频| 日本精品一区二区三区蜜桃| 精品国内亚洲2022精品成人| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 色综合婷婷激情| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 欧美激情久久久久久爽电影| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| av.在线天堂| 国产真实乱freesex| 国产精品福利在线免费观看| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产精品一及| 可以在线观看毛片的网站| 国产精品女同一区二区软件 |