薰衣草離體培養(yǎng)研究

蔣新明　 王樸　 王自健等

摘要 [目的]對薰衣草的離體培養(yǎng)進(jìn)行研究，為薰衣草新品種新薰二號優(yōu)良種苗的快速推廣種植奠定基礎(chǔ)。[方法]以薰衣草莖尖或帶腋芽的莖段為外植體，研究不同激素種類與濃度對初代培養(yǎng)、不定芽增殖和不定根形成的影響，并通過試管苗移栽篩選適宜的練苗基質(zhì)。[結(jié)果]初代培養(yǎng)采用MS+0.1 mg/L 6BA+0.1 mg/L NAA有利于植株生長；增殖培養(yǎng)采用MS+2.0 mg/L 6BA+0.1 mg/L NAA有利于芽的發(fā)生；生根階段采用1/2MS+0.5 mg/L NAA有利于生根培養(yǎng)；以蛭石作為練苗基質(zhì)幼苗成活率可達(dá)95%以上。[結(jié)論]采用組培法進(jìn)行薰衣草優(yōu)良種苗的擴(kuò)繁，能有效加快新品種的推廣。

關(guān)鍵詞 薰衣草（Lavandula angustifolia Mill.）；離體培養(yǎng)；培養(yǎng)基

中圖分類號 S573+.9 文獻(xiàn)標(biāo)識碼

A 文章編號 0517-6611（2014）08-02271-02

Study on in vitro Culture of Lavandula angustifolia Mill.

JIANG Xinming， WANG Pu et al （Agricultural Research Institute of the Fourth Division Xinjiang Production and Construction Corps， Yining， Xinjiang 835000）

Abstract [Objective] Through studying on in vitro culture of Lavandula angustifolia Mill.， so as to lay a foundation for rapid breeding of good varieties of “Xinxun 2”. [Method] Taking stem or tip bud of L. angustifolia as explants， the effects of different external hormone types and concentrations in medium on acclimatization of explants， multiplication of adventitious buds， formation of adventitious roots were studied， and suitable ground substance for transplantation of seedling was screened out. [Result] MS+6BA0.1+NAA0.1 was favorable for acclimatization of explants； MS+6BA2.0+NAA0.1 was good for multiplication of adventitious buds； 1/2 MS+NAA0.5 was suitable for adventitious roots formation. Using vermiculite as transplantation ground substance was beneficial and its seedling survival rate can reach more than 95%. [Conclusion] Taking the way of tissue culture is fit for good seedling production， it can effectively accelerate the promotion of new variety.

Key words Lavandula angustifolia Mill.； in vitro cultivation； Medium

薰衣草（Lavandula angustifolia Mill.）是唇形科薰衣草屬（Lavandula）多年生常綠亞灌木，原產(chǎn)于地中海沿岸、歐洲各地及大洋洲列島，20世紀(jì)60年代由國外引入我國，后經(jīng)多點(diǎn)試種落戶于新疆兵團(tuán)第四師。薰衣草精油被廣泛地應(yīng)用于醫(yī)藥、美容、洗滌和食品等行業(yè)。新疆兵團(tuán)第四師地處伊犁河谷，薰衣草的栽培種植已有50多年的歷史，并成為我國最重要的薰衣草栽培基地，歷史和規(guī)模在全世界排名第4。割取薰衣草花穗可用于制作干花和提練精油。為了能大面積推廣種植新薰二號，讓種植戶早日增產(chǎn)增收，筆者利用現(xiàn)代生物技術(shù)組培法進(jìn)行優(yōu)良種苗快繁體系，以期為對薰衣草優(yōu)良種苗的種質(zhì)栽培提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 研究對象。四師農(nóng)科所選育的薰衣草新品種新薰二號，經(jīng)鑒定為唇形科薰衣草屬（Lavandula）多年生常綠亞灌木薰衣草（Lavandula angustifolia Mill.）。

1.1.2 主要試劑。所用試劑均為國產(chǎn)分析純，市售。

1.2 方法

1.2.1 無菌材料的獲取。選取新薰二號嫩枝，用流水沖洗30 min，然后剪取新薰二號帶腋芽莖段或莖尖1.0 cm左右，用濃度70%的酒精浸泡40 s，然后用濃度0.1%的升汞消毒浸泡5～6 min，取出材料用無菌蒸餾水沖洗5～6次，每次1 min，沖洗完畢用無菌濾紙吸干水分待用。

1.2.2 培養(yǎng)條件。以上培養(yǎng)基均以MS為基本培養(yǎng)基，加入蔗糖3%，瓊脂0.7%，PH值調(diào)制6.0，在121 ℃高溫下滅菌30 m。培養(yǎng)條件為：溫度24±2 ℃下培養(yǎng)，光照1 500 Lx，光照時(shí)間13 h/d。

1.2.3 初代培養(yǎng)。將切好的外植體材接種到初代培養(yǎng)基上，添加不同濃度6BA（0.1和0.5 mg/L）和NAA（0、0.05和0.1 mg/L），5 d觀察1次，培養(yǎng)25 d后統(tǒng)計(jì)芽苗生長情況。

1.2.4 繼代增殖培養(yǎng)。將長出的嫩芽接種到增殖培養(yǎng)基上，添加不同濃度的6BA（1.0、2.0和3.0 mg/L）和NAA（0.05、0.1和0.5 mg/L），5 d觀察一次，培養(yǎng)15 d后統(tǒng)計(jì)萌芽率，觀察新芽生長情況。

1.2.5 生根培養(yǎng)。將伸長的芽剪成3～4 cm左右的莖段，接種到添加不同激素IBA（0.1、0.5和1.0 mg/L）或NAA（0.1、0.5和1.0 mg/L）的1/2MS培養(yǎng)基上，5 d觀察一次，25 d后統(tǒng)計(jì)生根數(shù)。

1.2.6 試管苗練苗移栽。當(dāng)試管苗不定根長0.5～1.5 cm，苗高4～7 cm時(shí)，從培養(yǎng)瓶中取出，洗凈基部培養(yǎng)基.用600～800倍多菌靈稀釋液浸泡基部1～2 min后，移栽于不同基質(zhì)中，3 d觀察1次，12 d后統(tǒng)計(jì)成活率。試管苗移栽到基質(zhì)上以后，上方可用塑料薄膜和枝條搭建小型拱棚，保證拱棚內(nèi)濕度，防止水分過度流失，有效提高薰衣草試管苗成活率。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同激素組合對薰衣草初代培養(yǎng)的影響 圖1表明，接種5 d后，各處理莖段基部膨大，芽尖萌動(dòng)；10 d后莖節(jié)伸長明顯，葉片伸展良好；25 d后芽苗長1.5～3.0 cm，有2～4個(gè)莖節(jié)。由表1可知，25 d后不同處理嫩芽生長情況均比較良好，不同濃度的6BA對芽的增殖數(shù)量有一定的影響。經(jīng)試驗(yàn)比較，初代培養(yǎng)階段采用MS+0.1 mg/L 6BA+0.1 mg/L NAA有利于植株生長。

2.2 不同激素組合對薰衣草不定芽誘導(dǎo)的影響 根據(jù)初代培養(yǎng)階段不同濃度激素組合作用下芽苗的生長情況，在繼代增殖培養(yǎng)過程中增加了6BA濃度。圖2表明，接種后5 d后，各處理均出現(xiàn)莖節(jié)基部膨大，有少量愈傷組織，嫩芽開始萌動(dòng)；15 d后，愈傷組織明顯增加，各處理叢芽生長正常。由表2可知，芽苗增殖率與6BA的濃度密切相關(guān)，在合理范圍內(nèi)，增殖率隨著6NA濃度的增加而增加，但6BA濃度過高增殖率反而有所下降。當(dāng)6BA濃度達(dá)到3.0 mg/L時(shí)，后期叢芽生長受到抑制，出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象，蘇琛在此前的不定芽增殖試驗(yàn)中也出現(xiàn)過類似現(xiàn)象[1]。經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)，不定芽誘導(dǎo)階段采用MS+2.0 mg/L 6BA+0.1 mg/L NAA有利于不定芽的產(chǎn)生，增殖效果好。

2.3 不同激素組合對薰衣草生根培養(yǎng)的影響 圖3表明，接種5 d后莖節(jié)基部膨大，10 d后出現(xiàn)明顯的白色根系，25 d后進(jìn)行觀察對比，處理1和處理4生根效果較差，而且根系較短，其他4個(gè)處理生根效果較好，差異不明顯。由表3可知，生根階段采用MS+0.5 mg/L NAA有利于根系生長，與王嬋的研究結(jié)果相似[2]。

2.4 試管苗練苗移栽 由表4可知，珍珠巖材質(zhì)較輕，保水能力不強(qiáng)；泥炭土保水能力較強(qiáng)，但用水量不好控制，易發(fā)生粘稠現(xiàn)象；蛭石材質(zhì)疏松，保水能力較強(qiáng)，適宜作為練苗基質(zhì)