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    奶牛乳房炎的生物學(xué)防治

    2014-05-26 20:20:17李春龍武瑞
    農(nóng)家科技下旬刊 2014年1期
    關(guān)鍵詞:水蛭抗菌肽鐵蛋白

    李春龍+武瑞

    一、細菌素

    細菌素是通過分子生物學(xué)技術(shù)生產(chǎn)出來的天然細菌蛋白質(zhì), 能殺死一些細菌, 國外已用于治療葡萄球菌病和乳頭藥浴, 其中溶葡萄球菌素、 鏈球菌素也已用分子生物學(xué)技術(shù)獲得, 不久可能用于臨床。由乳酸菌產(chǎn)生的廣譜細菌素為代替抗生素治療乳房炎提供了一種新的選擇。這種天然物質(zhì)有非常獨特的抑菌作用, 并且能夠加在飼料中做預(yù)防用藥。其中乳酸鏈球菌肽由乳酸鏈球菌產(chǎn)生, 具有廣泛的抗革蘭氏陽性 菌的作用, 包括乳房炎病 原體。用乳酸鏈球菌肽代替抗生素治療乳房炎, 不會對人體造成任何傷害, 并且在體內(nèi)可以被消化酶所降解。但是這種細菌素在生理 p H 范圍內(nèi)可溶性較差。盡管如此, 乳酸鏈球菌肽與溶葡萄球菌素合用治療乳房炎仍然達到顯著療效。據(jù)報道, 對金黃色葡萄球菌、 無乳鏈球菌、 乳房鏈球菌感染病例的治愈率分別達到了 66% 、 9 5% 和 100% 。

    二、生物制劑

    生物制劑是治療乳房炎的理想制劑, 由多種有益微生物或天然活性物質(zhì)所組成。微生態(tài)制劑能夠提高飼料的消化率, 促進營養(yǎng)物質(zhì)的吸收, 加強機體的防御能力, 清除氧自由基及修復(fù)被損傷的乳腺細胞等。微生態(tài)制劑中的有益菌進入動物機體后, 很快形成優(yōu)勢菌群, 與有害菌爭奪氧、 附著位點和營養(yǎng)系, 競爭性地抑制有害菌的生長, 從而調(diào)節(jié)腸內(nèi)菌群趨于正常; 微 生物代謝產(chǎn)生 的有機酸, 降低 腸內(nèi)的pH , 殺滅不耐酸的有害菌; 產(chǎn)生溶菌酶、 過氧化氫等物質(zhì), 并可殺滅潛在的病原菌; 產(chǎn)生代謝物抑制腸內(nèi)胺和氨; 直接刺激腸道免疫細胞而增加局部免疫力,增強機體抗病力, 從而起到防治奶牛隱性乳房炎及其他疾病的作用。微生態(tài)制劑對奶牛乳中體細胞降低具有一定的作用, 因而對奶牛隱性乳房炎有一定的防治作用。

    三、基因療法

    基因療法是在基因工程的基礎(chǔ)上建立的一種新的乳房炎防治方法, 目前已經(jīng)有利用基因工程生產(chǎn)的疫苗用于預(yù)防奶牛乳房炎。另外, 有試驗將兩種自行構(gòu)建的表達人溶菌酶基因的重組質(zhì)粒注射到患病奶牛的乳腺, 經(jīng) CM T 試驗證明對臨床型和隱性乳房炎的作用, 結(jié)果表明, 表達人溶菌酶基因的重組質(zhì)粒對奶牛乳房炎具有可靠、 持久的治療效果, 可以代替抗生素使用。

    四、生物療法

    生物療法 是直接利 用活的生 物治療疾 病的方法。在人醫(yī)方面多有報道, 但在動物疾病防治方面所做的研究較少。國外學(xué)者利用水蛭素具有抗凝、抗水腫、 止痛和預(yù)防生成血栓、 降低血管痙攣和小動脈壓、 提高組織供氧、 使免疫系統(tǒng)活化、 抑制致病性微生物等作用治療母牛隱性乳腺炎。用水蛭( 在生物制劑廠繁殖) 放進長 10 cm~ 20 c m , 直徑 5 c m 的特制試管內(nèi), 用吸濕的棉花填滿, 然后打開試管的一端使試管緊貼病變?nèi)槿~的皮膚上, 在水蛭吸住皮膚以后( 一次 3 個水蛭) , 經(jīng)過25 m i n ~ 30 m in, 水蛭吸飽血液便自發(fā)地脫落。一個療程治療 3 次, 每次間隔 24 h, 經(jīng)過 7 d 以后進行臨床檢查和乳汁的實驗室檢驗, 結(jié)果 15 頭隱性乳腺炎母牛( 20個病變?nèi)槿~) 均痊愈, 療效 100%。

    五、抗菌肽

    抗菌肽是 一類具有 抗微生物活性的小分子多肽, 廣泛存在于生物體內(nèi), 包括細菌、真菌、 植物、昆蟲、魚類、鳥類、甲殼動物、兩棲動物和哺乳動物等,已有超過 750種之多, 其中絕大部分為陽離子抗菌肽, 也有少量陰離子抗菌肽??咕木哂袕V譜抗微生物活性, 對革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細菌、 真菌和被膜病毒都有抑殺作用。其作用機制主要是帶正電的抗菌肽與帶負電的微生物細胞膜發(fā)生作用, 按作用特點可分為膜結(jié)構(gòu)破壞型和非膜結(jié)構(gòu)破壞型。大量體外試驗已經(jīng)證明, 抗菌肽能殺死細菌、 真菌、 原蟲等病原微生物, 其最小抑殺濃度( M I C) 約為 0. 25 g/ m L~ 4 g/ m L, 特別對一些耐藥菌, 如傷寒桿菌、 金黃色葡萄球菌等同樣敏感。各種動物在長期自然進化過程中, 其體內(nèi)已建立了一套維持菌群穩(wěn)態(tài)的機制。抗菌肽是這一機制的主要因子之一, 廣泛存在于所有脊椎動物和無脊椎動物機體中。牛奶中已分離到 3 種抗菌肽, 它們具有抑制腸毒性大腸埃希菌和產(chǎn)單核李期特菌生長的作用??咕木哂袕V譜殺菌作用、 相對分子質(zhì)量較小、 熱穩(wěn)定、 水溶性好等優(yōu)點, 更為重要的是抗菌肽對真核細胞幾乎沒有作用, 僅 作用 于原 核細胞 和發(fā) 生病 變的 真 核細胞。但目前將抗菌肽直接應(yīng)用于奶牛 乳房炎進行防治在國內(nèi)外報道較少, 在當(dāng)前不少病原菌對原有抗生素逐步產(chǎn)生耐藥性的情況下, 對動物體內(nèi)自然產(chǎn)生的抗菌肽功能的了解, 以及設(shè)計一種方法來調(diào)節(jié)動物體內(nèi)自然抗菌肽的功能以替代抗生素的研究便顯得極為重要。

    六、乳鐵蛋白和乳鐵素

    乳鐵蛋白(LF)是一種相對 分子質(zhì)量約為 80 k u 的鐵結(jié)合性糖蛋白, 主要存在于哺乳動物的各種外分泌物如乳汁、 眼淚、 唾液等。LF 具有許多獨特的生物學(xué)功能, 如增強鐵的傳遞和吸收、廣譜的抗菌性、 免疫作用、 抗氧化作用、 促進腸道菌群的平衡、 作為生長因子、 抗炎癥、 抗病毒、 抗癌癥作用等。乳鐵蛋白是一種乳質(zhì)蛋白, 也有調(diào)理素性質(zhì), 在它的影響下, 中性粒細胞的吞噬活性加強。乳房發(fā)炎時, 乳鐵蛋白可增加 2 0 倍~ 3 0 倍, 在大腸埃希菌型乳房炎, 增加的趨向較葡萄球菌型和鏈球菌型乳房炎顯著?;既榉垦椎呐H橹腥殍F蛋白含量高達 1 mg/ mL ~ 8 mg / mL , 表明乳腺在遭到病原攻擊時能產(chǎn)生大量的乳鐵蛋白, 以抵御疾病的侵襲。正常情況下, 血清中乳鐵蛋白含量低于 1 g / mL , 感染時乳鐵蛋白合成明顯增加, 每天可高達 30 g , 其中約30% 釋放于血中, 發(fā)揮其各種生理作用。血清乳鐵蛋白的濃度升高可作為炎癥反應(yīng)的一個指標(biāo)。通常存在于中性粒細胞中的乳鐵蛋白大多數(shù)不含 3 價鐵離子, 因 此具 有 較強 的 殺 ( 抑) 菌 作 用。

    乳鐵素( lac t o fer r ic in B, L Fb ) 是從 牛乳鐵蛋白N 端水解下來的 25 個氨基酸殘基。它們具有多種生物學(xué)功能, 其中的廣譜抗菌性尤為引人注目。以牛初乳中提取的乳鐵蛋白及其水解產(chǎn)物乳鐵素為研究對象, 選取大腸埃希菌為實驗菌株,進行鐵飽和乳鐵蛋白和缺鐵性乳鐵蛋白、 乳鐵素對大腸埃希菌生長抑制的比較研究。結(jié)果表明, 鐵飽和乳鐵蛋白、 缺鐵性乳鐵蛋白和乳鐵素的最小抑菌濃度分別為 6、 3、 15 g / mL 。乳鐵素的最小殺菌濃度為 30 g/ mL 。乳鐵蛋白水解后, 經(jīng)純化獲得的乳鐵素, 其抗菌能力較缺鐵性乳鐵蛋白增加 200 倍, 較鐵飽和乳鐵蛋白增加 400 倍。endprint

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