青藤堿在器官移植免疫耐受方面的研究進展

高紅強 黃江波

青藤堿在器官移植免疫耐受方面的研究進展

高紅強 黃江波

器官移植術是當前公認的治療各種終末期器官衰竭的有效學科甚至是常規(guī)手段。半個多世紀以來器官移植的手術技術已經(jīng)非常成熟, 目前影響器官移植患者術后生存率及生活質(zhì)量的主要因素是器官間的免疫排斥反應。隨著技術的進步, 越來越多的新藥物應用于抗免疫排斥反應。其中中藥提取物具備有效且毒性低的優(yōu)點, 受到廣泛關注。青藤堿是從中藥青風藤中提純出來的一種生物堿單體, 其具有免疫抑制、抗炎、鎮(zhèn)痛等作用, 當前在器官抗免疫排斥反應的基礎研究越來越廣泛, 是一種有良好應用前景的新型免疫抑制劑。

青藤堿；器官移植；免疫排斥

自20世紀中葉以來, 器官移植手術技術和圍手術期治療水平不斷提高, 器官移植的免疫學理論逐漸建立并完善,新型免疫抑制藥物大量出現(xiàn)并應用于臨床。隨著腎、心臟、肝、角膜移植等相繼獲得成功, 術后患者的生存率和生活質(zhì)量得到明顯提高, 器官移植術已成為治療器官衰竭的重要手段。但是移植術后首先面臨的問題就是免疫排斥反應。中醫(yī)是我國的傳統(tǒng)醫(yī)學, 中醫(yī)藥已廣泛用于移植的科學, 特別是在腎移植中應用最廣泛的。國內(nèi)一些研究者對抗排斥的藥物進行了大量研究, 一些抑制免疫功能的藥物, 被廣泛應用于移植領域, 并取得了一定的成果。現(xiàn)對青藤堿在器官移植免疫耐受方面的研究予以綜述。

1 青藤堿的作用

青藤堿(alkaloid sinomenine, SIN)是從中藥防己科植物青風藤中提取的一種生物堿單體, 現(xiàn)已廣泛應用于臨床, 藥用多為其鹽酸鹽, 主要用于對類風濕性關節(jié)炎及系統(tǒng)性紅斑狼瘡等各種風濕免疫性疾病以及治療心律失常,它具有免疫抑制、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗心律失常、抗炎等藥理作用。風濕性疾病的治療主要就是利用了青藤堿的免疫抑制作用, 隨著免疫抑制作用研究的逐步深入,近年來, 逐漸開始被用于青藤堿移植免疫耐受研究的各種方面。

2 青藤堿在器官移植免疫排斥研究中的作用

2. 1 青藤堿在腎移植免疫排斥中的研究現(xiàn)狀 腎移植是目前最成熟的器官移植手術之一, 是治療腎功能衰竭的主要手段, 術后大量的免疫抑制劑也應用于腎移植后的抗免疫排斥等的治療, 常用的如環(huán)孢素A等。但CsA毒副作用如肝、腎毒性等問題一直困擾臨床醫(yī)生及患者。青藤堿作為中藥成分現(xiàn)受到廣泛研究。廖德懷等［1］利用青藤堿、環(huán)孢素A作用于腎移植術后的大鼠, 檢測受體鼠血中的白細胞介素6, 證明青藤堿對同種異體大鼠腎移植急性排斥反應有確切的抗免疫排斥作用,其能明顯降低白細胞介素6的濃度。秦國慶等［2］構(gòu)建大鼠腎移植模型, 術后予以青藤堿等處理, 檢測外周血淋巴細胞PFP表達水平, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)青藤堿能下調(diào)受體大鼠血中淋巴細胞穿孔素的表達水平,進一步影響參與急性排斥反應的淋巴細胞起作用。王毅等［3］構(gòu)建大鼠腎移植模型, 術后予以青藤堿、環(huán)孢素A等作用, 取移植腎組織, 檢測其中腫瘤壞死因子(TNF)-α、CD80分子表達水平的變化。結(jié)果表明SIN可能通過調(diào)低移植腎組織中TNF-α及CD80分子的表達水平而產(chǎn)生抗免疫排斥作用；并與CsA存在協(xié)同作用。王毅等［4］還結(jié)果證明SIN可能通過抑制受體鼠外周血CD4+細胞增殖 ,降低TNFα、IFNγ的表達水平 ,從而對同種異體大鼠腎移植起抗免疫排斥作用。楊龐等［5］利用大鼠腎移植模型術后給予青藤堿等處理, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)SIN能顯著降低腎移植大鼠外周血T淋巴細胞 ,且主要是降低CD4+T細胞 ,并與CsA有協(xié)同作用。楊龐等［6］還發(fā)現(xiàn)青藤堿作用后受體鼠外周血IL - 2水平較對照組下降。

2. 2 青藤堿在肝移植免疫排斥中的研究 肝移植已經(jīng)成為當前臨床上治療急慢性肝衰竭的唯一有效的途徑。但抗免疫排斥藥物及應用方案仍存在很多弊端,找尋低毒、高效及價格低廉的抗免疫排斥藥物受到廣泛關注。蔡振剛等［7］利用大鼠原位肝移植模型, 術后予以青藤堿等處理, 并檢測相關指標, 結(jié)果顯示青藤堿能夠抑制促炎性因子IL-2和sICAM-1的分泌,促進抑炎性因子IL-10及TGF-β1的表達上調(diào),抑制炎癥反應。蔡振剛等［8］大鼠實驗發(fā)現(xiàn)青藤堿能抑制IL-2分泌, 降低TGF-β表達, 增強IL-10分泌；同時受體肝臟病理結(jié)果證明SIN能夠減輕移植術后的肝臟損害。蔡振剛等［9］利用彩色多普勒血流成像技術觀測大鼠原位肝移植術后肝臟的血流情況, 結(jié)合病理切片情況, 結(jié)果表明青藤堿處理后的大鼠門靜脈血流速度高于空白對照組, 而病理損害程度低于空白對照組；證明青藤堿減輕了移植排斥反應, 對肝臟有保護作用。林峰等［10］在研究大鼠肝移植缺血再灌注損傷的過程中發(fā)現(xiàn)：相較于對照組青藤堿高低劑量術后7 d存活率顯著提高, 青藤堿治療組的ALT水平明顯低于對照組；肝組織中的TNF-α、IL-1βmRNA表達與對照組相比均顯著降低,說明青藤堿可以抑制組織中TNF-α、IL-1β等炎癥性細胞因子表達,抑制肝臟細胞凋亡, 起到保護肝移植過程中缺血再灌注損傷的效果。

2. 3 青藤堿在心臟移植免疫排斥中的研究 陳明寶等［11］在研究青藤堿對大鼠心臟移植急性排斥反應的影響過程中發(fā)現(xiàn), 血清透明質(zhì)酸在青藤堿組與對照組間有明顯差異, 說明血清透明質(zhì)酸可以作為心臟移植排斥的指標之一。王海東等［12］在研究青藤堿聯(lián)合環(huán)孢素A對大鼠移植心術后存活時間的研究中發(fā)現(xiàn)青藤堿對Con A和MLC激活的單個核細胞增殖具有顯著的抑制作用,并與CsA有協(xié)同作用；能一定程度延長術后移植心的存活時間。楊帆等［13］在研究大鼠心臟移植排斥反應中發(fā)現(xiàn)青藤堿組炎癥反應有所減輕,同時較少淋巴細胞浸潤;組織僅極少量表達ICAM-1和IL-2,證明青藤堿能減輕排斥反應,明顯延長移植物的存活。同樣王煒等［14］也發(fā)現(xiàn)在小鼠心臟移植術后, 青藤堿處理組較對照組IL-2mRNA表達水平明顯減低。徐廣全等［15］研究發(fā)現(xiàn)現(xiàn)在相比于對照組, 青藤堿組移植物的存活時間顯著延長, 炎癥、血管炎癥、心肌水腫和心肌壞死顯著減少, COX-2蛋白和mRNA表達在移植后第5天均減少, 所以青藤能延長心臟同種異體移植物的存活時間, 減輕炎癥反應和保護心肌損傷。

2. 4 青藤堿在小腸移植免疫排斥中的研究 馮舟等［16］在研究青藤堿對小腸移植術后腸活動功能影響時發(fā)現(xiàn)青藤堿治療組較生理鹽水治療組能明顯提高小腸的活動功能、減少小腸的炎性損傷程度。靳小石等［17］通過青藤堿作用于小腸移植術后的大鼠實驗發(fā)現(xiàn)青藤堿處理組在慢性排斥反應病理評分、CD68的表達水平、TGFβ1和PDGF mRNA的轉(zhuǎn)錄水平及蛋白定量及免疫組化結(jié)果上均明顯高于同系對照組, 說明青藤堿對小腸移植有影響, 尚需進一步研究其具體效應及機制。2. 5 青藤堿在眼結(jié)膜移植免疫排斥中的研究 我國每年約有數(shù)萬因角膜疾病導致失明的患者, 角膜移植術是這些患者復明非常重要的手段。但是手術后1年的角膜成活率仍然不是很理想, 而尋找高效低毒且經(jīng)濟的免疫抑制劑是當前研究熱點之一。姚建兵等［18］在研究鹽酸青藤堿滴眼液對角膜移植術后排斥反應的影響中利用大鼠同種異體穿透性角膜移植動物模型, 術后予以青藤堿高中低不同劑量青藤堿作用, 結(jié)果表明不同濃度青藤堿對大鼠在角膜移植排斥指數(shù)及發(fā)生角膜移植排斥時間指標上均較對照組有顯著性差異, 說明青藤堿可以對角膜移植免疫排斥反應有防治作用, 且以中濃度效果更好。

3 小結(jié)

近年來, 學者們通過大量實驗已證明青藤堿的免疫抑制、抗炎、鎮(zhèn)痛等作用, 但是青藤堿具體的免疫治療機制仍然不是十分清楚, 嚴重影響其在國內(nèi)外尤其是歐美的廣泛推廣應用。作為一種新生免疫抑制劑, 青藤堿已顯示其抗免疫排斥能力強, 不良反應小的特點, 隨著研究的不斷推進, 必將在抗移植免疫排斥方面甚至更廣的臨床領域有重要用途。

［1］ 廖德懷,陳正,羅志剛,等.青藤堿對腎移植大鼠靜脈血白細胞介素6的影響.中國組織工程研究與臨床康復, 2009,35(9): 521-524.

［2］ 秦國慶,王毅,姜黎明,等.青藤堿對腎移植模型大鼠外周血淋巴細胞穿孔素表達水平的影響.醫(yī)學臨床研究, 2006,57(1): 48-52.

［3］ 王毅, 宋珺,姜黎明,等；青藤堿對腎移植大鼠移植腎組織腫瘤壞死因子-α和CD80的影響.中華實驗外科雜志, 2005 (12):123-126.

［4］ 王毅,陳正,熊烈,等.青藤堿對腎移植大鼠急性排斥反應及T細胞增殖的影響.中華實驗外科雜志, 2004,05(5):365-368.

［5］ 楊龐,楊羅艷,羅志剛,等.青藤堿對腎移植大鼠T細胞亞群的影響.臨床泌尿外科雜志, 2003,26(10):512-514.

［6］ 楊龐,楊羅艷,羅志剛,等.青藤堿對腎移植大鼠IL-2的影響.中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志, 2003,36(8):61-64.

［7］ 蔡振剛,王忠裕,等. Sinomenine對移植肝急性排斥反應影響及CDFI、IBS對肝臟病理損害評價的實驗研究.優(yōu)秀博士論文庫

［8］ 蔡振剛,于志軍,溫爽,等.王忠裕青藤堿對大鼠肝移植急性排斥反應的影響.遼寧中醫(yī)藥大學學報, 2010,40(4):85-87

［9］ 蔡振剛,劉曉黎,高曉軍,等.彩色多普勒技術對肝移植大鼠急性排斥反應監(jiān)測的研究.大連醫(yī)科大學學報, 2009,31(6):657-660.

［10］ 林峰,慕寧,王海梁,等.青藤堿對大鼠原位肝移植缺血再灌注損傷的保護作用.第二軍醫(yī)大學學報, 2008,48(12):241-245.

［11］ 陳明寶, 向道康, 張建卿, 等. 青藤堿對大鼠心臟移植急性排斥反應及血清透明質(zhì)酸的影響//中華醫(yī)學會第七次全國胸心血管外科學術會議暨 2007 中華醫(yī)學會胸心血管外科青年醫(yī)師論壇論文集心血管外科分冊. 2007.

［12］ 王海東,張宏生,張平,等.青藤堿和環(huán)孢素A聯(lián)合應用延長大鼠移植心的存活時間.中華器官移植雜志, 2007(8):542-545.

［13］ 楊帆,季剛,陳彥彬,等.青藤堿對大鼠心臟移植排斥反應期間ICAM-1和IL-2的影響.細胞與分子免疫學雜志, 2007,23(3):240-241.

［14］ 王煒,劉彤,朱理瑋,等.青藤堿在小鼠心臟移植中的抗排斥作用.天津醫(yī)科大學學報, 2006,12(3):401-403.

［15］ 徐廣全,王斌,金相元,等.青藤堿對心臟移植大鼠急性排斥反應及環(huán)氧化酶2活性的影響.中華醫(yī)學雜志, 2006,86(13): 911-914.

［16］ 馮舟,朱理瑋,王鵬志,等. 青藤堿改善移植大鼠術后早期腸運動功能障礙的研究.優(yōu)秀碩士論文.

［17］ 靳小石, 劉彤, 梁曉宇, 等. 中藥預防大鼠小腸移植慢性排斥反應的實驗研究. 2007 中國外科周暨第16屆亞洲外科年會論文摘 要集, 2007.

［18］ 姚建兵,陸曉和.青藤堿防治角膜移植排斥反應的實驗研究.廣東醫(yī)學, 2005,26(12):1646-1648.

421001 衡陽, 南華大學附屬第二醫(yī)院泌尿外科