TCT和DNA倍體分析技術(shù)在宮頸癌篩查中的應(yīng)用比較

范遠(yuǎn)芳，郭云翼，張 維，雷俊湘，王 敏，郭春紅

TCT和DNA倍體分析技術(shù)在宮頸癌篩查中的應(yīng)用比較

范遠(yuǎn)芳，郭云翼，張 維，雷俊湘，王 敏，郭春紅

（安順市婦幼保健院病理科，貴州安順561000）

宮頸癌是威脅婦女健康的惡性腫瘤之一。早期發(fā)現(xiàn)或意外發(fā)現(xiàn)宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌，使死亡率明顯下降［1］。我院自2010起采用DNA含量的定量分析方法和液基薄層細(xì)胞學(xué)（TCT）技術(shù)對(duì)子宮頸癌及癌前病變進(jìn)行診斷，并用于婦科手術(shù)前常規(guī)檢查，現(xiàn)將其臨床結(jié)果進(jìn)行分析、比較，探討兩種方法在宮頸癌篩查中的臨床價(jià)值，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1．1 臨床資料

選擇2010年07月至2012年12月在我院進(jìn)行婦科宮頸疾病篩查的患者578例，其中，接觸性出血203例，宮頸息肉11例，納氏囊腫7例，宮頸糜爛61例，宮頸肥大31例，HPV高危陽性患者18例。門診或入院后行常規(guī)細(xì)胞學(xué)TBS分類檢查及DNA倍體分析，如TCT或DNA倍體分析檢測(cè)報(bào)告有異常的患者，再行宮頸多點(diǎn)組織活檢。本組婦女年齡18歲－71歲，平均42歲。

1．2 檢查方法

要求患者月經(jīng)干凈后3－7天來檢查，檢查前3天內(nèi)不做陰道沖洗，不使用陰道內(nèi)藥物，48h內(nèi)禁止性行為，并在非經(jīng)期。在窺陰器直視下手持特制宮頸刷，將刷頭中央較長刷絲從宮頸外口插入宮頸管內(nèi)，兩邊較短刷絲抵住宮頸黏膜面，順時(shí)針或逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)3圈－5圈，取出宮頸刷，拔下刷頭，浸泡在樣本收集管中，送病理科行上述檢測(cè)。

1．3 診斷標(biāo)準(zhǔn)

DNA倍體分析判斷標(biāo)準(zhǔn)為：①可疑增生或疑似病變細(xì)胞。指DNA指數(shù)在1．5－2．5的細(xì)胞。這類細(xì)胞數(shù)＞被測(cè)上皮細(xì)胞的10%為陽性（異常增生）；5－10%為可疑陽性（少量增生），②DNA倍體異常細(xì)胞：指DNA指數(shù)＞2．5的細(xì)胞。這類細(xì)胞≥3個(gè)為陽性（可見DNA倍體異常細(xì)胞）；1－2個(gè)為可疑陽性（可見少量DNA倍體異常細(xì)胞）。細(xì)胞學(xué)TBS分類根據(jù)1991年美國國家腫瘤研究學(xué)會(huì)制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)為［2］：未明確意義的不典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASC－US）；不典型鱗狀上皮細(xì)胞不排除高度上皮內(nèi)病變（ASC－H）；低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）；高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）；鱗狀細(xì)胞癌（CA）。見到ASC－US細(xì)胞以上級(jí)別為TCT陽性，有異倍體者為異倍體陽性。

1．4 統(tǒng)計(jì)方法

以宮頸活體組織病理學(xué)診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，采用陽性檢出率分析兩種方法的臨床價(jià)值。

2 結(jié)果

2．1 TCT與DNA倍體分析結(jié)果比較 578例中，TCT檢測(cè)陽性者134例，陽性檢出率為23．18%（134／578）；DNA倍體分析中檢查異常301例，陽性檢出率為52．08%（301／578），詳見表1。

表1 578例TCT與DNA倍體分析結(jié)果比較

2．2 TCT檢查與病理診斷的關(guān)系 TCT檢測(cè)陽性的134例，病理活檢確診CIN和宮頸癌106例，陽性預(yù)期值0．79。其中ASC－US 54例，病理活檢確診CIN和癌36例，陽性預(yù)期值0．67%；ASC－H 17例，病理活檢確診CIN和癌16例，陽性預(yù)期值0．94；LSIL28例，病理活檢確診CIN和宮頸癌24例，陽性預(yù)期值0．86；HSIL29例，病理活檢確診CIN和宮頸癌24例，陽性預(yù)期值0．83；CA 6例，病理活檢確診為宮頸癌6例，陽性預(yù)期值1．0。170例病檢陽性病例中，TCT陽性檢出率為62．35%，詳見表2。

表2 578例TCT檢查結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

2．3 DNA倍體分析與病理診斷的關(guān)系 DNA倍體分析異常的301例患者中，病理活檢確診CIN和宮頸癌者167例，陽性預(yù)期值0．55。其中少量細(xì)胞增生（5－10%）14例，病理活檢確診CIN4例，陽性預(yù)期值0．29；少量DNA倍體異常細(xì)胞（1－2個(gè)）83例，病理活檢確診CIN31例，陽性預(yù)期值0．37；細(xì)胞異常增生（＞10%）14例，病理活檢確診CIN和宮頸癌者10例，陽性預(yù)期值0．71；大量DNA倍體異常細(xì)胞（≥3個(gè)）190例，病理活檢確診CIN和宮頸癌者122例，陽性預(yù)期值0．64。181例病檢陽性病例中，DNA倍體分析陽性檢出率為92．27%。詳見表3：

表3 578例DNA倍體分析檢查結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

3 討論

3．1 液基薄層細(xì)胞學(xué)（TCT）的應(yīng)用克服了常規(guī)巴氏涂片因制片質(zhì)量差及取材時(shí)細(xì)胞丟失所帶來的假陰性，大大提高了陽性檢出率和準(zhǔn)確性。Rilke等［3］認(rèn)為，TCT對(duì)CIN及癌100%敏感，對(duì)于發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞具有較高的準(zhǔn)確性。TCT檢查在國際上已普遍應(yīng)用，在國內(nèi)也開始推廣，同時(shí)也為宮頸細(xì)胞異倍體分析創(chuàng)造了條件。

3．2 異倍體細(xì)胞的出現(xiàn)是象征著染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)量出現(xiàn)異常變化，是細(xì)胞惡變的早期特征。DNA倍體分析通過計(jì)算機(jī)系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞核DNA含量與倍體狀況進(jìn)行測(cè)定和分析，可以在細(xì)胞核DNA含量與倍體狀況改變而細(xì)胞學(xué)形態(tài)未發(fā)生改變前發(fā)現(xiàn)癌前病變，是近十年來在惡性腫瘤超早期診斷中發(fā)展的一種新方法。DNA異倍體的出現(xiàn)是遺傳基因變異所致，也是染色體異常改變的標(biāo)志。DNA圖文報(bào)告分析系統(tǒng)通過對(duì)DNA［4］含量測(cè)定來掌握和了解腫瘤細(xì)胞遺傳基因變異過程。因此，DNA異倍體的定量分析可作為一種評(píng)估腫瘤預(yù)后的指標(biāo)。

3．3 本組宮頸鱗狀細(xì)胞癌及高級(jí)鱗狀上皮內(nèi)皮病變（HSIL）病例中均發(fā)現(xiàn)DNA倍體異常細(xì)胞。。有報(bào)道，在HSIL組織中如有DNA倍體異常細(xì)胞，最終可發(fā)展成浸潤性宮頸癌。在癌變過程中，染色體異倍體的出現(xiàn)反映了非常重要的信息。

3．4 本組TCT檢查和陽性預(yù)期值明顯高于DNA倍體分析，尤其ASC－H和CA達(dá)0．9以上，表明TCT對(duì)宮頸高級(jí)別病變和宮頸癌有較高的特異性，但由于其陽性檢出率不高，具有容易漏診的局限性。而DNA倍體分析的陽性率和陽性檢出率均明顯高于TCT，表明DNA倍體分析有較高的敏感性，可提前2－3年發(fā)現(xiàn)宮頸癌前病變，用于宮頸癌前病變超早期診斷。尤其當(dāng)宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本中出現(xiàn)大量的DNA異倍體細(xì)胞和細(xì)胞異常增生時(shí)，其CIN和宮頸癌陽性檢出率更高，表明DNA倍體異常細(xì)胞的數(shù)量與CIN和宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)，對(duì)宮頸癌的臨床診斷有重要指導(dǎo)意義。為減少漏診、誤診，彌補(bǔ)TCT和DNA單項(xiàng)檢查的不足，我們將TCT檢測(cè)與異倍體分析相結(jié)合，以提高檢查的敏感性和準(zhǔn)確性。有作者認(rèn)為ASC－US的病變可能導(dǎo)致過度診斷過度治療，另一方面可能低估存在的CIN病變。有學(xué)者建議：ASC－US可以行細(xì)胞學(xué)或HPV監(jiān)測(cè)隨診，其他類型異常細(xì)胞學(xué)均應(yīng)行陰道鏡檢查和組織學(xué)檢查［5］。

3．5 我們的資料顯示，ASC－H、HSIL和CA的陽性預(yù)期值上均較高，其病檢檢出陽性率達(dá)到83%以上，所以TCT檢查為ASC－H、HSIL和CA的患者不應(yīng)繼續(xù)細(xì)胞學(xué)復(fù)查隨診，也應(yīng)直接行陰道鏡和組織學(xué)檢查，以早期確定病變性質(zhì)并給予恰當(dāng)?shù)奶幚?，以免延誤病情。

［1］Grote HJ，Nguyen HV，Leick AG，et al．Identification of Progressive Cervical epithelial cell abnormalities using DNA imagecytometry［J］．Cancer，2004，102：373．

［2］顧美皎．TBS系統(tǒng)中異常上皮細(xì)胞的診斷和處理［J］．中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科學(xué)，2003，19（8）：466．

［3］Rilke F，Mango I，Alasio I．Sensitivity of the PAPNET cytological screening system to a routine mixture of conventional pap smears［J］．Mad Pathol，1993，6：31a．

［4］Horn LC，Raptis G，Nenning H．DNA cytometric analysis of surgically treated squamous cell cancer of the uterine cervis，StagepT1b1－pT2b［J］．Anal Quant Cytol Histol，2002，24：23．

［5］趙小麗．子宮頸病變的診斷和治療建議 ［J］．中華婦產(chǎn)科雜志，2001，36（5）：320．

范遠(yuǎn)芳，42歲，男，副主治醫(yī)師，病理科主任，研究方向：婦產(chǎn)科病理。

2013－05－06）

1007－4287（2014）02－0288－03

安順市科技人才資助專項(xiàng)基金（2010112）