老年冠心病與免疫炎癥反應(yīng)相關(guān)因素分析

李雪松

老年冠心病與免疫炎癥反應(yīng)相關(guān)因素分析

李雪松

（北京市昌平區(qū)醫(yī)院內(nèi)科，北京102200）

目的 本研究通過對老年冠心?。–HD）患者免疫炎癥反應(yīng)相關(guān)指標進行檢測，以探討免疫炎癥反應(yīng)與CHD的關(guān)系。方法 篩選本醫(yī)院2008年7月至2012年9月的老年CHD患者108例，對照組為健康老年人68例。對T淋巴細胞CD3＋及其亞群CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋和可溶性白細胞介素－2受體（sIL－2R）水平進行檢測，測定IgG、IgA、IgM免疫球蛋白含量和補體C3和C4的水平，檢測抗氧化修飾低密度脂蛋白（ox－LDL）抗體，并對超敏C反應(yīng)蛋白（hs－CRP）和腫瘤壞死因子－α（TNF－α）兩炎癥因子水平進行檢測。結(jié)果 老年CHD組活化T淋巴細胞及其亞群的活化比例均低于健康對照組（P＜0．01）；老年CHD組免疫球蛋白的含量顯著高于健康對照組（P＜0．01）；老年CHD組補體C3和C4、ox－LDL抗體及sIL－2R水平均高于健康對照組（P＜0．01）；CHD組hs－CRP、TNF－α水平顯著高于健康對照組（P＜0．01）。結(jié)論 老年CHD患者存在細胞和體液免疫功能亢進，自身抗體增加，并處于高炎癥狀態(tài)，因此，免疫炎癥指標可作為老年CHD的臨床監(jiān)測指標。

老年冠心??；免疫功能；免疫炎癥反應(yīng)

動脈粥樣硬化是在高膽固醇血癥條件下發(fā)生的炎癥疾病，當前研究表明致動脈粥樣硬化的脂蛋白粒子，如低密度脂蛋白和載脂蛋白B－封閉脂蛋白可跨過內(nèi)皮細胞并聚集在內(nèi)皮膜，可被氧化或酶促反應(yīng)修飾，盡管脂蛋白修飾的確切機制仍有爭議，但可以確定這些修飾后的脂蛋白引發(fā)了先天免疫反應(yīng)，從而在動脈壁上產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，先天性免疫是機體防御病原入侵和修飾的宿主腺體的第一防線，適應(yīng)性免疫在病原入侵后數(shù)天產(chǎn)生，主要依靠同源細胞的表達，而先天性免疫反應(yīng)則立即發(fā)生，先天性免疫主要有4個部分組成，可溶性介質(zhì)如補體和自然抗體、上皮細胞、細胞吞噬作用及PRRs，近年相關(guān)研究表明，免疫損傷是As發(fā)生發(fā)展的主要機制之一，其作用也越來越受到研究者的重視，然而，其在As發(fā)生、發(fā)展及惡化直至斑塊破裂的過程中的作用機理是復雜的［1］。As的病理過程發(fā)生在血管壁，病原微生物感染及免疫反應(yīng)是As發(fā)生的初始環(huán)節(jié)，其特征為具有慢性炎癥反應(yīng)，是對各種原因所產(chǎn)生的損害的纖維增生反應(yīng)，這一結(jié)論的正確性得到了臨床、病理和基礎(chǔ)方面的相關(guān)研究的證實［2］。在免疫反應(yīng)中，補體系統(tǒng)、某些炎癥、細胞和淋巴因子及細胞免疫和體液免疫等均與炎癥過程有關(guān)，而且這一過程伴隨As的始終［3］。越來越多的研究也表明，免疫炎癥反應(yīng)是導致As發(fā)生、發(fā)展及斑塊不穩(wěn)定性的重要因素［4］，因而，As發(fā)生機制的焦點也已轉(zhuǎn)向細胞、體液和自體免疫及補體系統(tǒng)等免疫反應(yīng)的作用［5］?；诖耍狙芯客ㄟ^對老年冠心?。–HD）患者免疫炎癥反應(yīng)相關(guān)指標進行檢測，以探討免疫炎癥反應(yīng)與CHD的關(guān)系，為免疫炎癥指標用于診斷和評判老年CHD等臨床應(yīng)用方面提供可靠依據(jù)。

1 研究對象

1．1 病例診斷標準

CHD西醫(yī)診斷標準依據(jù)第6版《內(nèi)科學》［6］和《國際心臟病學會和協(xié)會及世界衛(wèi)生組織臨床命名標準化聯(lián)合專題組報告—缺血性心臟病的命名及診斷標準》［7］。

1．2 病例納入與排除標準

凡符合1．1所述標準且年齡在60－79歲之間的老年CHD患者；心電圖檢查有明顯心肌缺血：經(jīng)冠狀動脈造影證實，或T波倒置，或兩個肢體導聯(lián)或相鄰胸導聯(lián)S－T段壓低≥0．05mv，或運動試驗陽性者納入臨床研究范圍。

合并重度高血壓及心律失常、重度心肺功能不全的患者、全身免疫性疾病、腦血管病或外周血管病、感染、惡性腫瘤、終末期疾病、嚴重肝腎功能不全、服用影響免疫功能的藥物及病例研究資料不全的患者不在本研究范圍。

1．3 一般資料

本研究納入病例來自本院門診及住院患者。病例采集時間自2008年7月至2012年9月。篩選符合本研究納入病例標準的老年CHD患者108例為觀察組，健康對照組為經(jīng)全面檢查后的健康老年人員68例，且其性別比例、年齡、體重指數(shù)（BMI）和吸煙史與觀察組之間無顯著性差異（P＞0．05）。

表1 108例老年CHD患者的基本資料

2 觀察指標及方法

老年CHD觀察組和健康對照組均進行常規(guī)空腹采血，按照各指標的不同檢測要求保存標本。

2．1 細胞免疫指標

采用美國貝克曼庫爾特公司生產(chǎn)的MoFlo XDP型流式細胞儀，法國賽諾泰生物科技有限公司生產(chǎn)的單克隆抗體CD3－FITC、CD4－FITC和CD8－FITC，CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋的測定采用直接熒光免疫標記法；ELISA法測定sIL－2R：sIL－2R測量試劑盒（F01270，上海研謹生物科技有限公司），酶標儀（SpectraMax M5，Molecular Devices），操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

2．2 體液免疫指標

用速率散射免疫法測定IgG、IgA、IgM、C3、C4：全自動特種蛋白分析儀（普朗醫(yī)療器械公司，PA8800），N抗血清人免疫球蛋白A、M及G試劑、N抗血清人補體因子C3、C4試劑（德靈診斷產(chǎn)品有限公司）。

2．3 自體免疫指標

ELISA法測定抗ox－LDL抗體：酶標儀（同2．1），上海信然生物技術(shù)有限公生產(chǎn)抗ox－LDL抗體ELISA檢測試劑盒，操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

2．4 炎癥因子指標

免疫比濁法測定血清hs－CRP濃度：全自動特種蛋白分析儀（同2．2）及英國RANDOX Laboratories有限公司生產(chǎn)的hs－CRP免疫比濁法試劑盒；放射免疫法測定血清TNF－α濃度：微機多探頭γ計數(shù)儀（BH1－FT603G，北京核儀器廠），TNF－α放免測量試劑盒購于上海酶聯(lián)生物科技有限公司。操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

3 統(tǒng)計方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 14．0統(tǒng)計分析軟件處理，計量資料數(shù)據(jù)用（_x±s）表示，兩樣本比較采用t檢驗，統(tǒng)計檢驗值P＜0．05被認為所檢驗的差別有統(tǒng)計學意義。

4 結(jié)果

4．1 細胞免疫指標比較

老年CHD觀察組和健康對照組T淋巴細胞及其亞群活化比例和sIL－2R水平見表2。前者活化T淋巴細胞CD3＋比例顯著高于后者（P＜0．01）；前者活化T淋巴細胞亞群CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋比例也顯著高于后者（P＜0．01）；前者sIL－2R水平顯著高于后者（P＜0．01）。因此，說明老年CHD患者的細胞免疫功能亢進。

表2 兩組細胞免疫指標水平比較（_x±s）

4．2 體液免疫指標比較

老年CHD觀察組與健康對照組免疫球蛋白IgG、IgA、IgM含量和補體C3、C4水平的比較見表3。前者各免疫球蛋白含量和補體C3、C4水平均顯著高于后者（P＜0．01），因此，說明老年CHD患者的體液免疫功能亢進。

表3 兩組免疫球蛋白IgG、IgA、IgM含量和補體C3、C4水平（_x±s）

4．3 自體免疫指標比較

老年CHD觀察組與健康對照組抗ox－LDL抗體水平的比較見表4。前者抗ox－LDL抗體水平顯著高于后者（P＜0．05）。因此，說明老年CHD患者存在自身抗體水平升高。

表4 兩組自體免疫指標水平比較（_x±s）

4．4 炎癥因子hs－CRP、TNF－α水平比較

老年CHD觀察組與健康對照組hs－CRP、TNF－α的水平見表5。前者hs－CRP、TNF－α水平均顯著高于后者（P＜0．01）。因此，說明老年CHD患者存在或處于高炎癥狀態(tài)。

表5 兩組hs－CRP、TNF－α水平（_x±s）

5 討論

巨噬細胞和淋巴細胞浸潤是動脈粥樣硬化（As）的基本病理改變之一。在人類As的不同時期均有發(fā)生，雖有少許的B淋巴細胞，但以T淋巴細胞為主［8］。T淋巴細胞在As中的所起的作用尚不明確，但T細胞免疫反應(yīng)的最終是促使As發(fā)生的。As斑塊中的T淋巴細胞主要為CD4＋，疾病早期T淋巴細胞含量比晚期要少，呈散在分布。本研究中可以看出老年CHD患者T淋巴細胞增加顯著，且部分被激活，而活化狀態(tài)下的T淋巴細胞激活巨噬細胞并促進炎癥的發(fā)生有賴于自身分泌細胞因子及表面抗原和受體的表達，從而促使As進行性發(fā)展。mIL－2R與sIL－2R競爭性結(jié)合IL－2，sIL－2R可使活化T細胞周圍的IL－2中和，受IL－2／IL－2R調(diào)節(jié)的生物學反應(yīng)被封閉，T細胞的增殖也就受到抑制，基于其在心血管疾病發(fā)生和發(fā)展中的重要性，對闡明老年CHD發(fā)病的相關(guān)免疫機理具有重要的參考價值。

研究表明，在As斑塊中存在大量的巨噬細胞，其在免疫反應(yīng)和炎癥中起重要作用。另外，外源性抗原經(jīng)巨噬細胞處理并將其片段和主要組織相容性復合物呈遞于T淋巴細胞，然后誘發(fā)T淋巴細胞激活、細胞毒性作用、細胞因子分泌、B細胞抗體產(chǎn)生，抗原由巨噬細胞處理時，還能高表達清道夫受體，吞噬ox－LDL，As斑塊上一種主要的自身抗原就是ox－LDL，能促使機體對修飾后的產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng)［9］。通過將分離克隆人體As斑塊內(nèi)的T細胞并鑒定發(fā)現(xiàn)，25%的CD4＋T細胞可對ox－LDL進行識別，因此ox－LDL是As細胞免疫反應(yīng)中主要的自身抗原。分析As斑塊中的免疫球蛋白的抗體發(fā)現(xiàn)As斑塊中的IgG含有抗ox－LDL的抗體［10］。因此，在As斑塊內(nèi)中ox－LDL作為自身抗原，可誘發(fā)體液和細胞免疫反應(yīng)。

補體系統(tǒng)系由多樣的血漿蛋白成分組成，是體液免疫的一部分，活化補體系統(tǒng)可導致級聯(lián)反應(yīng)產(chǎn)生，從而產(chǎn)生不同種類的促炎因子，其在As的發(fā)病過程中也發(fā)揮著重要作用，研究顯示，活化補體可能是As斑塊沉積并導致病變的紐帶［11］。

As的實質(zhì)是一種炎癥增生的慢性疾病，其標志物CRP與As關(guān)系密切，不但能夠參與As疾病各階段的發(fā)生，而且還能促進As的進一步發(fā)展。由于巨噬細胞產(chǎn)生活性氧自由基可受到CRP的影響，因而CRP亦能夠促進ox－LDL的產(chǎn)生，巨噬細胞通過清道夫受體識別ox－LDL，吞噬后轉(zhuǎn)化為泡沫細胞，泡沫細胞是AS斑塊中一含脂類細胞，而巨噬細胞源泡沫細胞又是斑塊中泡沫細胞的主要成分，大量研究顯示，ox－LDL對巨噬泡沫細胞的形成具有重要作用。CRP可絡(luò)合產(chǎn)生多種復合物，諸如CRP和C多糖絡(luò)合及CRP與磷脂絡(luò)合所產(chǎn)生的絡(luò)合物可激活補體，再經(jīng)補體系統(tǒng)間接清除外來細胞或分子，不但能夠殺死或清除病原微生物，還可增強機體細胞尤其是白細胞的吞噬作用等，從而達到清除各種病原微的目的。TNF－α是一種主要由巨噬細胞和單核細胞分泌產(chǎn)生的細胞因子炎性介質(zhì)，并能夠參與正常炎癥及免疫反應(yīng)，在炎癥反應(yīng)中的可增加內(nèi)皮細胞粘附分子表達，增加血小板活化因子的合成，從而促進血小板活化。

綜上，通過對括細胞、體液和自體免疫、補體系統(tǒng)及炎癥因子在內(nèi)的免疫應(yīng)答反應(yīng)在As中的機制進行系統(tǒng)、全面地探討，從中不難發(fā)現(xiàn)本研究中老年CHD患者存在著免疫功能紊亂，因此，免疫炎癥指標可作為老年CHD的臨床監(jiān)測指標。

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R541．4

A

李雪松（1971－），男，北京人，大學?？疲髦吾t(yī)師，主要從事心血管病的預(yù)防與研究。

2013－02－26）

1007－4287（2014）02－0239－04