MMP－2及MMP－9聯(lián)合檢測(cè)在腦膠質(zhì)瘤中的診斷價(jià)值

隋 銳，張 燁，陳 一，樸浩哲

MMP－2及MMP－9聯(lián)合檢測(cè)在腦膠質(zhì)瘤中的診斷價(jià)值

隋 銳，張 燁，陳 一，樸浩哲＊

（遼寧省腫瘤醫(yī)院神經(jīng)外科，遼寧沈陽110042）

目前，顱內(nèi)最常見的惡性腫瘤是膠質(zhì)瘤，該病的特點(diǎn)是其對(duì)人腦的侵襲性生長(zhǎng)，由于其界限與正常腦組織相比不清晰，手術(shù)切除較困難，患者預(yù)后差。在腦膠質(zhì)瘤漫長(zhǎng)而復(fù)雜的侵襲性生長(zhǎng)過程中，基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix－metallo－proteinase，MMPs）起著關(guān)鍵性的作用［1］。MMPs由結(jié)締組織細(xì)胞分泌而成，依靠蛋白酶家族ZN2＋，降解細(xì)胞基底膜（ECM）和外基質(zhì)，對(duì)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移有促進(jìn)作用。筆者通過對(duì)120例腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本和同期自愿參加的80例健康者采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)MMP－2及MMP－9的表達(dá)情況，分析其對(duì)腦膠質(zhì)瘤的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選擇2010年1月－2012年12月在我院首次手術(shù)并經(jīng)病理證實(shí)的腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本120例作為膠質(zhì)瘤組。其中男性82例，女性38例，年齡23－68歲，平均54．6±7．4歲。TNM分期，Ⅰ期32例，Ⅱ期38例，Ⅲ期29例，Ⅳ期21例，選擇同期自愿參加的健康者80例作為健康組。

1．2 檢測(cè)方法 采用免疫組織化學(xué)SP法進(jìn)行檢測(cè)：10%甲醛固定，石蠟包埋切片，每例標(biāo)本切片5張。染色，二甲苯脫蠟及乙醇水化后孵育10min，水浴鍋加熱至95℃左右，約15 min，滴加鼠抗人MMP－2及MMP－9單克隆抗體，孵育2h，沖洗后滴加生物素標(biāo)記的二抗，經(jīng)DAB顯色、蘇木精復(fù)染并脫水，封片。選擇磷酸鹽緩沖液作為陰性對(duì)照，乳腺癌標(biāo)本染色作為陽性對(duì)照。

1．3 判定標(biāo)準(zhǔn)［2］依據(jù)著色程度評(píng)分：①0分：基本不著色；②1分：淡黃色；③2分：棕黃色；④：3分：深棕色。采用高倍顯微鏡（×400）觀察，每個(gè)標(biāo)本觀察5個(gè)視野，且每個(gè)視野均計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，根據(jù)陽性細(xì)胞的百分比判斷：＜10%記為0分；10%－24%為1分；25%－49%為2分；50%－74%為3分，75%－100%為4分。強(qiáng)度評(píng)分×陽性率評(píng)分＝免疫組化最終評(píng)分：（1）：0分為（－）；1－4分為（＋）；5－8分為（＋＋）；9－12分為（＋＋＋）。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 運(yùn)用SPSS17．0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析處理所得數(shù)據(jù)，并計(jì)數(shù)資料率的比較，采用卡方檢驗(yàn)，當(dāng)P＜0．05時(shí)，認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

2 結(jié)果

2．1 MMP－2檢測(cè)值的表達(dá) 如表1所示，MMP－2在健康組幾乎不表達(dá)，膠質(zhì)瘤組陽性率80．83%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；膠質(zhì)瘤組MMP－2陽性率隨病理分期的增高而增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。

表1 兩組MMP－2檢測(cè)值比較（例，%）

2．2 兩組MMP－9檢測(cè)值比較 如表2所示，MMP－9在健康組陽性表達(dá)值為8．75%，膠質(zhì)瘤組陽性率62．5%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；膠質(zhì)瘤組MMP－9陽性率隨病理分期的增高而增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。

表2 兩組MMP－2得檢測(cè)值（例，%）

3 討論

膠質(zhì)瘤侵襲性生長(zhǎng)漫長(zhǎng)，且涉及多個(gè)過程，腫瘤細(xì)胞侵襲的前提是細(xì)胞外基質(zhì)的降解是，MMPs作為酶類家族系統(tǒng)，分為：間質(zhì)膠原酶、膠原酶、基質(zhì)溶解素和膜型金屬蛋白酶四類。明膠酶又稱為MMP－2，是以ECM中纖維粘連蛋白和Ⅳ、V型膠原為主要底物。Ⅲ、Ⅳ、V型膠原明膠和彈性蛋白等多種底物可被MMP－9降解［3］。人體內(nèi)分布最廣泛的是MMP－2和MMP－9，在腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移和突破基底膜屏障中作用顯著，本研究也證實(shí)，MMP－2在健康組幾乎不表達(dá)，膠質(zhì)瘤組陽性率80．83%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；膠質(zhì)瘤組MMP－2陽性率隨病理分期的增高而增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；MMP－9在健康組陽性表達(dá)值為8．75%，膠質(zhì)瘤組陽性率62．5%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；膠質(zhì)瘤組MMP－9陽性率隨病理分期的增高而增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。其他研究者［4］通過對(duì)78例石蠟包裹的腦膠質(zhì)瘤組織和18例健康者進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：MMP－2及MMP－9聯(lián)合檢測(cè)對(duì)判斷膠質(zhì)瘤的侵襲能力和惡性程度具有重要的意義，其結(jié)果與本結(jié)果相似。

［1］關(guān)麗明，徐 克，戚喜勛，等．腦膠質(zhì)瘤PS值與MMP－2和MMP－9表達(dá)相關(guān)性的實(shí)驗(yàn)研究［J］．中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù)，2008，24（9）：1348．

［2］劉 琦，李 剛，曹培成，等．MMP－2、MMP－9、TIMP－1和TIMP－2在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及臨床意義［J］．中國腫瘤外科雜志，2011，3（2）：86．

［3］居紅格，蔣劍英，沈淑萍，等．CD147、MMP－1、MMP－2、MMP－9、TIMP－1、TIMP－2在不同級(jí)別的腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其意義［J］．泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010（9）：653．

［4］居紅格，王欣欣，謝立平．MMP－1、MMP－2、MMP－9在腦膠質(zhì)瘤中的聯(lián)合檢測(cè)及其意義［J］．包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，27（3）：1．

2013－02－12）

1007－4287（2014）02－0205－02

＊通訊作者