脈君安膠囊中氫氯噻嗪的溶出度研究

李博然，黃志軍，，向陽，陳鵬，徐紹新，翟莉

(1.武漢理工大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院，武漢 430070；2.武漢健民藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，武漢 430052)

脈君安膠囊中氫氯噻嗪的溶出度研究

李博然1，黃志軍1，2，向陽2，陳鵬2，徐紹新2，翟莉2

(1.武漢理工大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院，武漢 430070；2.武漢健民藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，武漢 430052)

目的 建立脈君安膠囊中氫氯噻嗪的溶出度測定方法。方法采用小杯法,以鹽酸溶液為溶出介質(zhì)、轉(zhuǎn)速50 r·min-1測定溶出度,采用高效液相色譜法測定有效成分氫氯噻嗪的溶出量。結(jié)果氫氯噻嗪在2.48～12.40mg·L-1濃度內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.999 9),平均回收率為99.1%。結(jié)論該方法簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,可用于該藥的溶出度測定。

脈君安膠囊；溶出度；小杯法；色譜法,高效液相

脈君安膠囊為中西藥復(fù)方制劑,具有平肝熄風(fēng)、解痙鎮(zhèn)痛的功效,臨床用于高血壓癥、頭痛眩暈、頸項(xiàng)強(qiáng)痛、失眠心悸、冠心病。氫氯噻嗪為處方中的化藥活性成分,由于難溶于水,故在體內(nèi)的有效溶出是保證制劑生物利用度的關(guān)鍵之一。目前,對于中藥膠囊還只限于測定崩解時限,僅能反映藥物是否崩解,而不能反映出藥物的溶出量。因此筆者通過對脈君安膠囊中氫氯噻嗪溶出度的研究,建立了適宜的溶出系統(tǒng),并采用高效液相色譜(HPLC)法測定氫氯噻嗪的體外溶出度,為評價和控制脈君安膠囊的質(zhì)量提供了依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 ZRS-8G智能溶出實(shí)驗(yàn)儀(天津大學(xué)無線電廠)；Shimadzu 10A型高效液相色譜儀(日本)；BP211D型1/10萬電子分析天平(德國Sartorius公司)。

1.2 試藥 脈君安膠囊(武漢健民中藥工程有限責(zé)任公司,批號:060701,060702,060703)；氫氯噻嗪對照品(中國食品藥品檢定研究院,批號:100309-200702)；鹽酸(分析純,武漢市亞泰化工試劑有限公司)；乙腈(色譜純,美國Tedia公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶出度測定方法的建立

2.1.1 色譜條件 色譜柱為Hypersil BDS C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)；流動相為乙腈-0.06 mol·L-1磷酸二氫銨溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.5)(10∶90)；檢測波長為272 nm；柱溫為30℃；流速為1 mL·min-1［1-2］。在此色譜條件下測定陰性樣品、氫氯噻嗪對照品及脈君安膠囊樣品,色譜圖見圖1,待測指標(biāo)成分與其他成分分離度良好。

圖1 陰性樣品(A)、對照品(B)和樣品(C)HPLC色譜圖1.氫氯噻嗪

2.1.2 線性關(guān)系考察 精密稱取氫氯噻嗪對照品4.96 mg,置200 mL量瓶中,加溶出介質(zhì)振搖使溶解,并定容至刻度,作為對照品溶液。精密量取對照品溶液1,2,3,4,5 mL,分別置10 mL量瓶中,加溶出介質(zhì)稀釋至刻度,搖勻,照上述色譜條件分別進(jìn)樣20μL,記錄色譜圖。以峰面積(Y)對濃度(X)進(jìn)行線性回歸。結(jié)果表明,氫氯噻嗪濃度在2.48～12.40 mg·L-1范圍時,與峰面積呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,回歸方程為: Y=67 843X+2 046.4,r=0.999 9。

2.1.3 回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取氫氯噻嗪對照品7.52 mg,置100 mL量瓶,加溶出介質(zhì)振搖使溶解,并定容至刻度,搖勻。精密量取0,1,3,5 mL分別置50 mL量瓶中,加氫氯噻嗪陰性對照液稀釋至刻度,制成陰性溶液和20%,60%,100%溶出濃度的4組溶液各3份,照上述色譜條件分別進(jìn)樣20μL,測定峰面積,計(jì)算出3個濃度的回收率(n=3)分別為99.8% (RSD=0.69%),98.7%(RSD=1.35%),98.9% (RSD=1.40%),平均回收率為99.1%。

2.1.4 精密度實(shí)驗(yàn) 取脈君安膠囊45 min溶出液,重復(fù)連續(xù)進(jìn)樣6次,每次20μL,記錄色譜峰面積,RSD為1.33%,表明儀器精密度良好。

2.1.5 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取脈君安膠囊45 min溶出液,分別在0,2,4,6,8,10 h進(jìn)樣20μL,記錄色譜峰面積, RSD為1.52%,表明溶出液在10 h內(nèi)保持穩(wěn)定。

2.2 溶出實(shí)驗(yàn)條件的選擇

2.2.1 溶出度方法的選擇 在本品處方中,氫氯噻嗪為難溶性有效成分,含量較低,在進(jìn)行溶出度測定時考慮到含量測定方法的線性范圍和檢測靈敏度的要求,并參考相關(guān)文獻(xiàn)［3］,采用小杯法。

2.2.2 溶出介質(zhì)的選擇 參照《中華人民共和國藥典》二部中氫氯噻嗪片的溶出度測定方法［4］,本品選用鹽酸溶液(稀鹽酸24 m L加水至1 000 m L)200 mL作為溶出介質(zhì)。

2.2.3 轉(zhuǎn)速的選擇 取樣品(批號:060701),以鹽酸溶液(稀鹽酸24 mL加水至1 000 mL)200 m L為溶出介質(zhì),分別以25,50,75 r·min-1進(jìn)行實(shí)驗(yàn),經(jīng)45 min時取樣,進(jìn)行測定。結(jié)果表明樣品在50 r·min-1即溶出良好,故確定轉(zhuǎn)速為50 r·min-1。

2.3 100%溶出量測定 取樣品1粒(批號: 060701),置200 m L量瓶中,加溶出介質(zhì)適量,超聲使完全溶解,加溶出介質(zhì)定容至刻度,搖勻,用微孔濾膜(孔徑0.45μm)迅速濾過,取濾液作為100%溶出液。

2.4 溶出曲線的均一性 取樣品(批號:060701),按照《中華人民共和國藥典》二部溶出度測定法第三法,以鹽酸溶液(稀鹽酸24 mL加水至1 000 mL)200 mL為溶出介質(zhì),轉(zhuǎn)速50 r·min-1,每個溶出杯中加入1粒樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn),共6杯,分別在5,15,30,45,60,90 min時取樣2 m L(每次取樣后立即補(bǔ)充同體積的溶出介質(zhì)),用微孔濾膜(孔徑0.45μm)迅速濾過,精密吸取濾液20μL,注入液相色譜儀,測定,計(jì)算累計(jì)溶出量與時間的溶出曲線,見圖2。結(jié)果表明,樣品溶出度的均一性良好。

2.5 樣品的溶出度測定結(jié)果 按照《中華人民共和國藥典》2005年版二部附錄ⅩC第三法(小杯法),以鹽酸溶液(稀鹽酸24 m L加水至1 000 m L)200 mL為溶出介質(zhì),轉(zhuǎn)速50 r·min-1,每個溶出杯中加入1粒樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn),經(jīng)45 min時取樣,溶出液用微孔濾膜(孔徑0.45μm)迅速濾過,濾液作為供試品溶液。按上述方法測定3批脈君安膠囊45 min時的溶出度,結(jié)果批號為060701,060702,060703的3批樣品溶出度分別為91.7%(RSD=2.7%),90.2%(RSD=1.9%),92.1% (RSD=3.0%)。

圖2 樣品的溶出曲線

3 討論

脈君安膠囊為中西藥復(fù)方制劑,筆者尚未見其溶出度測定方法的報道,建立了以氫氯噻嗪為溶出指標(biāo),并參考有關(guān)文獻(xiàn),采用HPLC法對目標(biāo)峰進(jìn)行分離,測定其含量,結(jié)果峰形良好,分離度好,整個方法簡單、結(jié)果準(zhǔn)確,可適用于脈君安膠囊的溶出度測定及質(zhì)量控制。

由于氫氯噻嗪在本品中含量較低,在進(jìn)行溶出度測定時采用了小杯法。并參照《中華人民共和國藥典》二部中氫氯噻嗪片的溶出度測定方法,選用了鹽酸溶液為溶出介質(zhì)。

加樣回收率實(shí)驗(yàn)采用了空白加入法［5］,以對照品加入陰性對照液中,減少了操作和計(jì)算誤差,結(jié)果更加準(zhǔn)確。

［1］張火旺.HPLC法測定復(fù)方羅布麻片(Ⅱ)中氫氯噻嗪的含量[J].中國藥事,2007,21(9):727-728.

［2］朱衛(wèi)翔,楊紹華.反相高效液相色譜法測定珍菊降壓片中氫氯噻嗪和蘆丁的含量[J].中南藥學(xué),2005,3(5):279-281.

［3］譚芳,姜鴿.酚氨咖敏片溶出度測定方法[J].醫(yī)藥導(dǎo)報, 2007,26(8):950-951.

［4］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:556.

［5］曾彬,易進(jìn)海.左金分散片的溶出度測定[J].華西藥學(xué)雜志,2006,21(2):190-191.

DOI 10.3870/yydb.2014.01.031

R286;R927

A

1004-0781(2014)01-0106-02

2012-08-13

2012-09-27

李博然(1984-),男,湖北武漢人,碩士,主要從事藥物新劑型與新技術(shù)研發(fā)。電話：(0)13100647537,E-mail：hblbr@sina.com。

向陽(1979-),男,湖北武漢人,高級工程師,碩士,主要從事中藥新藥研發(fā)工作。電話：027-84514002,E-mail：xiangy79@sohu.com。