二倍體和四倍體雜交蘭幼苗對(duì)低溫脅迫的生理響應(yīng)差異分析

王園園,葉志琴,劉　容,王廣東

(南京農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,江蘇南京210095)

二倍體和四倍體雜交蘭幼苗對(duì)低溫脅迫的生理響應(yīng)差異分析

王園園,葉志琴,劉容,王廣東①

(南京農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,江蘇南京210095)

為探究不同倍性雜交蘭(Cymbidium hybrid)對(duì)低溫脅迫的生理響應(yīng)差異,對(duì)低溫脅迫下(晝溫10℃、夜溫4℃)二倍體雜交蘭以及四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗葉片中脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)、MDA和葉綠素含量,產(chǎn)生速率以及SOD、POD和CAT活性的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行了測(cè)定和分析;在此基礎(chǔ)上,比較了二倍體和四倍體雜交蘭的耐低溫特性差異。結(jié)果顯示:隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng),二倍體雜交蘭和四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗葉片中脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)和MDA含量,產(chǎn)生速率以及POD和CAT活性總體呈逐漸增加的趨勢(shì);葉綠素含量呈逐漸下降的趨勢(shì);SOD活性呈先上升后下降的趨勢(shì),并分別在脅迫后第9天和第6天達(dá)到峰值。在常溫(25℃)下恢復(fù)生長(zhǎng)3 d后,二倍體雜交蘭和四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗葉片中脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)和MDA含量,產(chǎn)生速率以及SOD、POD和CAT活性均降低,而葉綠素含量升高?？傮w上,二倍體雜交蘭葉片中脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白質(zhì)含量以及SOD、POD和CAT活性的增幅明顯小于四倍體雜交蘭,MDA含量和產(chǎn)生速率的增幅則大于四倍體雜交蘭,而葉綠素含量的降幅則明顯大于四倍體雜交蘭。綜合分析結(jié)果表明:在低溫脅迫下,四倍體雜交蘭葉片中滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量和保護(hù)酶活性均較高,其對(duì)低溫的耐性強(qiáng)于二倍體雜交蘭。

雜交蘭;二倍體;四倍體;低溫脅迫;滲透調(diào)節(jié)物質(zhì);抗氧化酶活性

雜交蘭(Cymbidium hybrid)是蘭屬(Cymbidium Sw.)溫帶地生種和熱帶附生種雜交后形成的后代,具備親本的優(yōu)點(diǎn),觀賞價(jià)值高,為重要的蘭花產(chǎn)品之一[1]。但與大花蕙蘭(蘭屬附生種反復(fù)雜交形成的品種)相比,雜交蘭品種相對(duì)較少,因而,培育優(yōu)良雜交蘭新品種是豐富蘭花品種的途徑之一[2]。受冬、春季低溫影響,蘭花長(zhǎng)勢(shì)緩慢,嚴(yán)重影響其營(yíng)養(yǎng)積累及開花[3],因此,培育耐低溫的雜交蘭新品種可以改善低溫期其生長(zhǎng)狀態(tài)、縮短生產(chǎn)周期。

植物多倍體通常具有植株巨大、內(nèi)含物增多和抗逆性增強(qiáng)等特性[4-5],并在一定程度上可增強(qiáng)其觀賞價(jià)值和商品價(jià)值[6],例如:揚(yáng)花蘿卜(Raphanus sativus‘Radculus’)[7]、西瓜〔Citrullus lanatus(Thunb.) Matsum.et Nakai〕[8]、何首烏(Polygonum multiflorum Thunb.)[9]、生姜(Zingiber officinale Rosc.)[10]和不結(jié)球白菜(Brassica campestris ssp.chinensis Makino)[11]等植物的多倍體均有這些特性,但蘭科(Orchidaceae)植物的多倍體是否具有這些特性尚未見報(bào)道。

作者研究了二倍體和四倍體雜交蘭植株對(duì)低溫脅迫的生理響應(yīng),以明確二倍體雜交蘭和四倍體雜交蘭抗低溫特性的差異,并探明染色體加倍對(duì)雜交蘭抗低溫特性的影響,以期為抗低溫雜交蘭的育種及低溫季節(jié)雜交蘭的溫室栽培提供理論依據(jù)。

1　材料和方法

1.1材料

供試二倍體雜交蘭為本實(shí)驗(yàn)室采用雜交蘭品種‘韓國(guó)桃花’(Cymbidium hybrid‘Korea peach’)與蕙蘭(C.faberi Rolfe)雜交后篩選獲得,2n=2x=40[12];四倍體雜交蘭株系T1和T2由二倍體雜交蘭根狀莖通過(guò)秋水仙素誘導(dǎo)加倍后獲得,2n=4x=80[13]。

1.2方法

1.2.1低溫處理方法 從生長(zhǎng)3個(gè)月的二倍體雜交蘭、四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗中各選取45株,移至溫度25℃、光照度1 000 lx、光照時(shí)間16 h·d-1的GXZ型智能光照培養(yǎng)箱(寧波江南儀器廠)中生長(zhǎng)15 d,然后于晝/夜溫度10℃/4℃、光照度1 000 lx、光照時(shí)間12 h·d-1條件下低溫處理12 d,再置于溫度25℃、光照度1 000 lx、光照時(shí)間12 h·d-1條件下培養(yǎng)3 d。從低溫處理開始,分別在處理0、3、6、9、12和15 d的8:00至10:00取樣。二倍體雜交蘭、四倍體雜交蘭株系T1和T2各隨機(jī)取6株,采集從上往下第5片葉,混合后分成3份(即3次重復(fù)),用于指標(biāo)測(cè)定。

1.2.2生理指標(biāo)測(cè)定方法 采用酸性茚三酮法[14]測(cè)定脯氨酸含量;采用蒽酮比色法[12]測(cè)定可溶性糖含量;采用考馬斯亮藍(lán)法[15]測(cè)定可溶性蛋白質(zhì)含量;采用TCA-TBA法[16]測(cè)定MDA含量;采用乙醇浸提法[17]測(cè)定葉綠素含量;參照Ke等[18]的方法測(cè)定超氧陰離子自由基(O-·2)產(chǎn)生速率;采用氮藍(lán)四唑(NBT)光還原法[19]測(cè)定超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用愈創(chuàng)木酚顯色法[20]測(cè)定過(guò)氧化物酶(POD)活性;參照Aebi[21]的方法測(cè)定過(guò)氧化氫酶(CAT)活性。各指標(biāo)均重復(fù)測(cè)定3次,結(jié)果取平均值。

1.3數(shù)據(jù)處理

采用EXCEL 2007和SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。

2　結(jié)果和分析

2.1低溫脅迫條件下二倍體和四倍體雜交蘭幼苗生長(zhǎng)差異分析

低溫脅迫前,二倍體和四倍體雜交蘭幼苗均生長(zhǎng)正常,二倍體雜交蘭幼苗葉片呈嫩綠色,四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗葉片均為深綠色。低溫脅迫12 d后,二倍體雜交蘭幼苗心葉枯萎死亡,四倍體雜交蘭株系T1幼苗葉尖焦枯且葉片輕微變黃,而四倍體雜交蘭株系T2的少數(shù)葉尖焦枯且顏色無(wú)明顯變化。

2.2二倍體和四倍體雜交蘭幼苗對(duì)低溫脅迫的生理響應(yīng)差異分析

2.2.1葉片中滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的變化 低溫脅迫條件下二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白質(zhì)含量的動(dòng)態(tài)變化見圖1。

如圖1-A所示:在低溫脅迫過(guò)程中,二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中脯氨酸含量均呈緩慢上升的趨勢(shì)。處理前,二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中脯氨酸含量差異較小,低溫處理結(jié)束時(shí),脯氨酸含量均達(dá)到最大值,其中四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗葉片中脯氨酸含量分別較低溫處理前提高了95.2%和103.8%,分別為同一時(shí)間二倍體雜交蘭的1.2和1.3倍。常溫下恢復(fù)生長(zhǎng)3 d后(處理第15天),供試雜交蘭幼苗葉片中脯氨酸含量急劇下降,其中二倍體雜交蘭葉片中脯氨酸含量基本恢復(fù)到脅迫前水平。由此說(shuō)明,在低溫脅迫下四倍體雜交蘭合成大量脯氨酸以抵御脅迫,從而降低受傷害程度。

如圖1-B所示:在低溫脅迫過(guò)程中,供試二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中可溶性糖含量變化趨勢(shì)一致,即在脅迫的0～9 d持續(xù)增加、9～12 d下降。脅迫結(jié)束時(shí),四倍體雜交蘭株系T1和T2的可溶性糖含量分別比脅迫前提高了286.7%和431.5%,分別是同一時(shí)間二倍體雜交蘭的3.0和4.5倍。常溫下恢復(fù)生長(zhǎng)3 d后(處理第15天),供試二倍體和四倍體雜交蘭葉片中可溶性糖含量均呈下降趨勢(shì),這可能是由于低溫傷害嚴(yán)重,雜交蘭葉片中可溶性糖含量短期內(nèi)無(wú)法恢復(fù)正常。

圖1　低溫脅迫條件下二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中脯氨酸(A)、可溶性糖(B)和可溶性蛋白質(zhì)(C)含量的動(dòng)態(tài)變化Fig.1　Dynamic change in contents of proline(A),soluble sugar (B)and soluble protein(C)in leaf of diploid and tetraploid seedlings of Cymbidium hybrid under low temperature stress

如圖1-C所示:在低溫脅迫過(guò)程中,供試二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中可溶性蛋白質(zhì)含量總體呈持續(xù)上升趨勢(shì),且2個(gè)四倍體雜交蘭株系幼苗葉片中可溶性蛋白質(zhì)含量總體高于二倍體雜交蘭。脅迫結(jié)束時(shí),四倍體雜交蘭株系T1和T2葉片中可溶性蛋白質(zhì)含量的增幅分別比同一時(shí)間二倍體雜交蘭高2.4和2.5倍。由此說(shuō)明,在低溫脅迫過(guò)程中,四倍體雜交蘭葉片中可溶性蛋白質(zhì)的合成速率較快,對(duì)低溫的調(diào)節(jié)能力強(qiáng)于二倍體雜交蘭,適應(yīng)能力更強(qiáng)。常溫下恢復(fù)生長(zhǎng)3 d后(處理第15天),供試二倍體和四倍體雜交蘭葉片中可溶性蛋白質(zhì)含量均下降,但由于低溫脅迫的嚴(yán)重傷害,導(dǎo)致此時(shí)二倍體雜交蘭、四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗葉片中可溶性蛋白質(zhì)含量仍分別比脅迫前高64.7%、145.6%和193.9%。

2.2.2葉片中MDA含量的變化 低溫脅迫條件下二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中MDA含量的動(dòng)態(tài)變化見圖2。如圖2所示:在低溫脅迫過(guò)程中,二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中MDA含量均逐漸上升,且在整個(gè)低溫脅迫過(guò)程中二倍體雜交蘭幼苗葉片中MDA含量均高于四倍體雜交蘭株系T1和T2。低溫脅迫的第12天,二倍體雜交蘭、四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗葉片中的MDA含量分別較脅迫前增加了33.5%、21.0%和12.1%,由此說(shuō)明,四倍體雜交蘭因低溫脅迫而引起的質(zhì)膜損傷程度較低。常溫下恢復(fù)生長(zhǎng)3 d后(處理第15天),二倍體和四倍體雜交蘭葉片中MDA含量基本恢復(fù)至脅迫前的水平。

圖2　低溫脅迫條件下二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中MDA含量的動(dòng)態(tài)變化Fig.2　Dynamic change in MDA content in leaf of diploid and tetraploid seedlings of Cymbidium hybrid under low temperature stress

2.2.3葉片中葉綠素含量的變化 低溫脅迫條件下二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中葉綠素含量的動(dòng)態(tài)變化見圖3。如圖3所示:在整個(gè)脅迫過(guò)程中,供試二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中葉綠素含量均呈逐漸下降的趨勢(shì)。至脅迫結(jié)束時(shí),二倍體雜交蘭和四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗葉片中葉綠素含量分別下降27.7%、18.2%和17.3%。由此顯示,低溫脅迫對(duì)四倍體雜交蘭葉片葉綠體結(jié)構(gòu)的破壞程度較輕,葉綠素的分解速率較慢。常溫下恢復(fù)生長(zhǎng)3 d后(處理第15天),供試二倍體和四倍體雜交蘭葉片中葉綠素含量均有所上升。

圖3　低溫脅迫條件下二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中葉綠素含量的動(dòng)態(tài)變化Fig.3　Dynamic change in chlorophyll content in leaf of diploid and tetraploid seedlings of Cymbidium hybrid under low temperature stress

圖4　低溫脅迫條件下二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中產(chǎn)生速率的動(dòng)態(tài)變化Fig.4　Dynamic change inproduction rate in leaf of diploid and tetraploid seedlings of Cymbidium hybrid under low temperature stress

圖5　低溫脅迫條件下二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中SOD(A)、POD(B)和CAT(C)活性的動(dòng)態(tài)變化Fig.5　Dynamic change in activities of SOD(A),POD(B)and CAT(C)in leaf of diploid and tetraploid seedlings of Cymbidium hybrid under low temperature stress

2.2.5葉片中抗氧化酶活性的變化 低溫脅迫條件下二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中SOD、POD和CAT活性的動(dòng)態(tài)變化見圖5。

如圖5-A所示:在低溫脅迫的0～6 d,四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗葉片的SOD活性急劇上升,在6～9 d有所下降,9～12 d又略微上升;而二倍體雜交蘭幼苗葉片中SOD活性在低溫脅迫0～9 d持續(xù)上升,在9～12 d急劇下降。低溫脅迫處理后,二倍體雜交蘭、四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗葉片中SOD活性較脅迫前均有不同程度的增加,其中,四倍體雜交蘭株系T1和T2的增幅分別為74.8%和88.0%,二者的SOD活性分別為同一時(shí)間二倍體雜交蘭的2.9和3.4倍。常溫下恢復(fù)生長(zhǎng)3 d后(處理第15天),供試二倍體和四倍體雜交蘭葉片中SOD活性基本上恢復(fù)到脅迫前的水平。低溫脅迫后,四倍體雜交蘭葉片中SOD活性總體上高于二倍體雜交蘭,說(shuō)明四倍體雜交蘭具有更強(qiáng)的抗寒性。

如圖5-B所示:在低溫脅迫過(guò)程中,二倍體雜交蘭和四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗葉片中POD活性均呈持續(xù)上升的趨勢(shì)。除脅迫第9天外,二倍體雜交蘭葉片中POD活性始終高于四倍體雜交蘭。脅迫結(jié)束后,二倍體雜交蘭和四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗葉片中POD活性分別較脅迫前增加了39%、51%和54%,四倍體雜交蘭葉片中POD活性的增幅高于二倍體雜交蘭。常溫下恢復(fù)生長(zhǎng)3 d后(處理第15天),供試二倍體和四倍體雜交蘭葉片中POD活性急劇下降。

如圖5-C所示:在低溫脅迫過(guò)程中,四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗葉片中CAT活性的變化曲線一致,均呈先下降后上升的趨勢(shì);二倍體雜交蘭幼苗葉片中CAT活性則呈持續(xù)上升的趨勢(shì)。脅迫結(jié)束時(shí),二倍體雜交蘭和四倍體雜交蘭株系T1和T2幼苗葉片中CAT活性分別較脅迫前增加了81.3%、95.2%和99.0%,四倍體雜交蘭的增幅大于二倍體雜交蘭。常溫下恢復(fù)生長(zhǎng)3 d后(處理第15天),供試二倍體和四倍體雜交蘭葉片中CAT活性均急劇下降。

3　討論和結(jié)論

脯氨酸作為重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì),能緩解因低溫脫水造成的滲透脅迫,其含量升高有利于提高植物的抗寒性[22]。植物體內(nèi)可溶性糖的防脫水作用和可溶性蛋白質(zhì)的強(qiáng)親水膠體性都可以增強(qiáng)細(xì)胞的持水力,而二者的滲透調(diào)節(jié)作用又可以降低細(xì)胞水勢(shì)。因此,植物體內(nèi)可溶性糖和可溶性蛋白質(zhì)含量的高低與植物的耐寒性強(qiáng)弱密切相關(guān),可作為植物抗寒性的鑒定指標(biāo)[23]。本研究中,低溫脅迫下二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白質(zhì)均大量積累,四倍體雜交蘭幼苗葉片中脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白質(zhì)的積累量明顯高于二倍體雜交蘭,這說(shuō)明四倍體雜交蘭的抗寒性明顯強(qiáng)于二倍體。該結(jié)果與不同倍性揚(yáng)花蘿卜和不結(jié)球白菜的研究結(jié)果一致[7,11]。

MDA是膜脂過(guò)氧化作用的最終產(chǎn)物,MDA的含量反映了植物細(xì)胞膜脂過(guò)氧化的程度[24]。在低溫脅迫后,二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片MDA含量均上升,表明低溫脅迫增強(qiáng)了雜交蘭葉片細(xì)胞膜的過(guò)氧化作用,使細(xì)胞膜受到傷害。低溫脅迫的12 d內(nèi),二倍體雜交蘭幼苗葉片中MDA含量始終高于四倍體雜交蘭,說(shuō)明四倍體雜交蘭的膜脂過(guò)氧化程度低,細(xì)胞受到的傷害較輕。這與對(duì)甘蔗(Saccharum officinarum Linn.)和紅掌(Anthurium andraenum Lind.)的研究結(jié)果相符,即耐低溫品種體內(nèi)MDA的積累量小于不耐低溫品種[25-26]。

低溫脅迫會(huì)導(dǎo)致葉綠體結(jié)構(gòu)破壞、光合色素的含量和比例發(fā)生變化,最終使光合速率下降[27]。本研究中,隨著低溫脅迫時(shí)間的延長(zhǎng),供試二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中葉綠素含量均呈下降趨勢(shì),這可能是低溫脅迫使原有葉綠素被破壞,而新的葉綠素合成速率過(guò)慢所致。低溫脅迫結(jié)束時(shí),二倍體雜交蘭葉片中葉綠體含量的下降幅度明顯大于四倍體雜交蘭,說(shuō)明低溫脅迫下四倍體雜交蘭的葉綠體結(jié)構(gòu)受損程度較小,其對(duì)低溫有更強(qiáng)的適應(yīng)性。這與對(duì)蝴蝶蘭(Phalaenopsis spp.)和辣椒(Capsicum annuum Linn.)的研究結(jié)果一致[28-29]。

逆境脅迫會(huì)引起植物體內(nèi)的活性氧代謝失調(diào),而植物抗逆性的強(qiáng)弱與體內(nèi)抗氧化酶活性的高低有關(guān)[24,26]。SOD和POD活性的共同提高可維持細(xì)胞膜的穩(wěn)定性并保持其光化學(xué)反應(yīng)活性,而SOD是細(xì)胞內(nèi)活性氧和自由基清除系統(tǒng)的第一道防線[30-31],能將歧化成H2O2和O2以降低濃度。本研究中,二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中產(chǎn)生速率減緩時(shí)SOD活性增強(qiáng),而產(chǎn)生速率上升時(shí)SOD活性減弱,產(chǎn)生速率與SOD活性呈負(fù)相關(guān)。POD和CAT的主要作用是酶促降解H2O2,避免H2O2過(guò)量積累對(duì)細(xì)胞膜造成傷害[32]。田丹青等[26]對(duì)低溫脅迫后3個(gè)紅掌品種幼苗的生理特性進(jìn)行了研究,結(jié)果表明:耐寒性強(qiáng)的品種具有較高的SOD和CAT活性及穩(wěn)定的POD活性,不耐寒品種SOD和CAT活性較低、POD活性變化較大。在低溫脅迫期間二倍體和四倍體雜交蘭幼苗葉片中SOD、CAT和POD活性總體上呈大幅上升的趨勢(shì),能有效清除活性氧和自由基,保護(hù)葉片細(xì)胞膜免受氧化傷害,提高了雜交蘭的抗寒性,且四倍體雜交蘭葉片中3種酶活性的增幅均高于二倍體雜交蘭,說(shuō)明四倍體雜交蘭的耐低溫能力更強(qiáng)。

植物染色體組加倍后,由于等位基因的雜合性及染色體的累積效應(yīng)提高了它們的遺傳多樣性及適應(yīng)能力,因此,多倍體對(duì)逆境的適應(yīng)力強(qiáng)于二倍體。本研究結(jié)果表明:低溫脅迫條件下四倍體雜交蘭葉片中滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量及抗氧化酶活性均顯著高于二倍體雜交蘭,而MDA含量則低于二倍體雜交蘭,因此,四倍體雜交蘭的耐寒能力強(qiáng)于二倍體雜交蘭,表明染色體加倍后植株的抗寒性增強(qiáng)。

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(責(zé)任編輯:張明霞)

Analysis on difference in physiological response of diploid and tetraploid of Cymbidium hybrid

seedling to low temperature stress WANG Yuanyuan,YE Zhiqin,LIU Rong,WANG Guangdong①(College of Horticulture,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China),J.Plant Resour.& Environ.2014,23(4):68-74

To inquire into difference in physiological response of Cymbidium hybrid with different ploidies to low temperature stress,dynamic changes in contents of proline,soluble sugar,soluble protein,MDA and chlorophyll,production rate and activities of SOD,POD and CAT in seedling leaf of diploid of Cymbidium hybrid and tetraploid strains T1 and T2 of Cymbidium hybrid under low temperature stress (day temperature 10℃,night temperature 4℃)were determined and analyzed.On this basis, difference in tolerance of diploid and tetraploid of Cymbidium hybrid to low temperature was compared. The results show that with prolonging of stress time,contents of proline,soluble sugar,soluble protein and MDA,production rate and activities of POD and CAT in seedling leaf of diploid of Cymbidium hybrid and tetraploid strains T1 and T2 of Cymbidium hybrid totally appear gradually increasing trend, chlorophyll content appears gradually decreasing trend,and SOD activity appears the trend of firstly increasing and then decreasing and reaches the peak value on the 9th and 6th days of stress, respectively.On the 3rd day of recovery growth under normal temperature(25℃),contents of proline, soluble sugar,soluble protein and MDA,production rate and activities of SOD,POD and CAT in seedling leaf of diploid of Cymbidium hybrid and tetraploid strains T1 and T2 of Cymbidium hybrid alldecrease,while chlorophyll content increases.In general,in seedling leaf of diploid of Cymbidium hybrid,increasing ranges of contents of proline,soluble sugar and soluble protein and activities of SOD, POD and CAT are obviously lower and those of MDA content andproduction rate are higher than those of tetraploid of Cymbidium hybrid,while decreasing range of chlorophyll content is obviously higher than that of tetraploid of Cymbidium hybrid.The comprehensive analysis result shows that both osmoregulation substance content and protective enzyme activity in leaf of tetraploid of Cymbidium hybrid are higher and its tolerance to low temperature is stronger than those of diploid of Cymbidium hybrid under low temperature stress.

Cymbidium hybrid;diploid;tetraploid;low temperature stress;osmoregulation substance; antioxidant enzyme activity

Q945.78;S682.31

A

1674-7895(2014)04-0068-07

10.3969/j.issn.1674-7895.2014.04.10

2014-01-22

江蘇省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(BE2010334)

王園園(1985—),女,河南商丘人,碩士研究生,主要從事觀賞植物生物技術(shù)方面的研究。

①通信作者E-mail:gdwang@njau.edu.cn