羊水胎糞污染新生兒外周血中的GM—CSF、IL—6檢測(cè)及其臨床意義

摘要：目的 探討血清中的GM-CSF、IL-6含量在診斷新生兒感染性疾病中的價(jià)值，為臨床提供早期發(fā)現(xiàn)早期診治新生兒感染的理論依據(jù)。方法 分別對(duì)出生時(shí)羊水有無胎糞污染初分娩的新生兒外周血血清中的GM-CSF、IL-6含量進(jìn)行測(cè)定，并與常規(guī)檢查進(jìn)行比較。結(jié)果 兩組新生兒感染發(fā)生率有顯著性差異，GM-CSF、IL-6含量升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論 羊水胎糞污染與新生兒感染有密切關(guān)系；羊水胎糞污染新生兒的GM-CSF、IL-6含量顯著升高臨床意義顯著，應(yīng)給予干預(yù)抗感染治療措施。

關(guān)鍵詞：羊水胎糞污染；感染；IL-6；GM-CSF；新生兒

羊水污染是新生兒出生時(shí)比較常見的現(xiàn)象，近年來，國(guó)內(nèi)外研究表明羊水污染與新生兒患感染性疾病的關(guān)系密切，尤其是重度羊水污染患兒。對(duì)臨床來講早診斷、早治療至為重要。炎癥因子GM-CSF、IL-6含量的檢測(cè)是早期診斷和預(yù)測(cè)感染的重要指標(biāo)，本研究擬測(cè)定初分娩新生兒血GM-CSF、IL-6含量，結(jié)合常規(guī)血檢對(duì)于亞臨床表現(xiàn)新生兒感染起鑒別預(yù)測(cè)作用。

1資料與方法

1.1一般資料 2012年9月～2013年7月在我院婦產(chǎn)科分娩的足月新生兒，出生后即入住新生兒科，共計(jì)44例，根據(jù)出生時(shí)有無羊水胎糞污染分為兩組，無羊水污染者為對(duì)照組共計(jì)24例，男：女為1∶1.4，剖宮產(chǎn)：順產(chǎn)為1∶1.3，平均出生時(shí)胎齡（38±1.9）W、平均出生體重（3.1±0.6）kg，其中輕度窒息6例，重度窒息3例；羊水污染Ⅲ°污染為實(shí)驗(yàn)組共20例，男：女為1∶1，剖宮產(chǎn)：順產(chǎn)為1∶2.3，平均出生時(shí)胎齡（38±1.5）W、平均出生體重（2.9±0.6）Kg，其中輕度窒息7例，重度窒息6例。

所有新生兒均無先天性畸形，無免疫系統(tǒng)疾病等，新生兒生后感染臨床表現(xiàn)，①對(duì)照組：新生兒感染表現(xiàn)體溫低、反應(yīng)差、皮膚花斑、喂養(yǎng)困難、血培養(yǎng)陽性各1例，其他，感染率4.2%。②Ⅲ°組：新生兒感染表現(xiàn)皮膚花斑、喂養(yǎng)困難各4例、發(fā)熱、體溫低各2例、反應(yīng)差3例、肺炎4例、血培養(yǎng)陽性各1例，其他，感染率25%。

1.2標(biāo)本采集與測(cè)定 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組均于出生后24 h內(nèi)采集血標(biāo)本3 mL置于EDTA試管中，2 h內(nèi)送檢驗(yàn)科用自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血常規(guī)檢測(cè)，并分裝離心置于Eppendorf管中，-20℃凍存待測(cè)。CRP含量測(cè)定：采用C-反應(yīng)蛋白測(cè)定試劑盒（顆粒增強(qiáng)免疫透射比濁法），GM-CSF、IL-6水平測(cè)定：采用高靈敏度的雙抗體夾心ELISA法。由上海逸峰生物科技有限公司分裝檢測(cè)。

2結(jié)果

2.1實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組新生兒出生前后感染情況、常規(guī)炎癥檢測(cè)、GM-CSF、IL-6含量的比較，兩組新生兒感染：實(shí)驗(yàn)組20例感染率25%，對(duì)照組24例感染率4.2%，分別比較進(jìn)行χ2統(tǒng)計(jì)分析，P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)價(jià)值。

本實(shí)驗(yàn)采用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)白細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組新生兒外周血中的計(jì)數(shù)和CRP檢測(cè)，兩組新生兒血的白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類、CRP含量均數(shù)不相等，組間分別進(jìn)行比較t檢驗(yàn)分析，見表1。

2.2預(yù)后 20例Ⅲ°羊水污染新生兒均給予病因治療、對(duì)癥治療和經(jīng)驗(yàn)性抗菌藥物抗感染治療均痊愈出院；其中1例足月小樣兒治療后加重轉(zhuǎn)上級(jí)醫(yī)院。24例對(duì)照組42%患兒給予上述對(duì)癥治療和經(jīng)驗(yàn)性抗感染治療，均痊愈出院。

3討論

3.1羊水污染對(duì)新生兒的影響 多數(shù)醫(yī)師認(rèn)為胎兒宮內(nèi)窘迫致羊水污染，但目前認(rèn)為把羊水胎糞污染當(dāng)作一個(gè)獨(dú)立的胎兒缺氧指標(biāo)證據(jù)不足。新生兒先天性敗血癥的死亡率高，Carroll等[1]報(bào)道33%羊水培養(yǎng)陽性的胎兒和4%羊水培養(yǎng)陰性的胎兒患有菌血癥，因此胎兒亞臨床感染遠(yuǎn)比傳統(tǒng)認(rèn)識(shí)的常見和嚴(yán)重得多。

3.2新生兒外周血常規(guī)和CRP含量變化及其意義 白細(xì)胞通過吞噬和產(chǎn)生抗體等方式來抵御和消滅入侵的病原微生物，新生兒感染發(fā)生血小板減少下降的發(fā)病機(jī)制是當(dāng)機(jī)體發(fā)生炎癥時(shí)循環(huán)中血小板淹沒在炎癥介質(zhì)中，激活凝血因子。CRP是第一個(gè)被認(rèn)為是急性時(shí)相反應(yīng)蛋白的，這種急性反應(yīng)蛋白在過去10年中常作為感染的常規(guī)標(biāo)志物應(yīng)用。血常規(guī)和CRP含量作為傳統(tǒng)常規(guī)細(xì)菌感染指標(biāo)，因其檢測(cè)方法簡(jiǎn)便、快捷、經(jīng)濟(jì)，是各級(jí)醫(yī)院尤其是基層醫(yī)院感染鑒別的主要指標(biāo)，具有一定的臨床價(jià)值。本研究結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比WBC、N%、CRP顯著上調(diào)，PLT顯著下調(diào)，按照第3版金漢珍《實(shí)用新生兒學(xué)》新生兒常用化驗(yàn)正常值：出生24 h內(nèi)血常規(guī)均在正常范圍內(nèi)，所以無法真正判斷感染，只有動(dòng)態(tài)檢測(cè)對(duì)比才能體現(xiàn)臨床價(jià)值，對(duì)診斷實(shí)用價(jià)值不夠理想，特異性和敏感度不高，有待進(jìn)一步深入研究解決。

3.3 GM-CSF 和IL-6在新生兒細(xì)菌感染中的作用 當(dāng)機(jī)體受到炎癥的刺激下通過旁分泌等形式產(chǎn)生炎癥因子，炎癥因子以網(wǎng)絡(luò)的形式發(fā)生相互作用，IL-1、TNF-α可誘導(dǎo)GM-CSF的產(chǎn)生，兩者相互協(xié)調(diào)和級(jí)聯(lián)疊加功能發(fā)揮重要促炎作用。\"GM-CSF的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)假說\"明確GM-CSF除了起促炎反應(yīng)，還有抗炎能力。在近幾年GM-CSF對(duì)炎癥作用機(jī)理的研究中有GM-CSF含量增高也有GM-CSF含量下降的報(bào)告，總之GM-CSF在炎癥反應(yīng)中的確有著重要的作用，但是其精確的作用機(jī)理尚需進(jìn)一步明確。IL-6有調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、急性期反應(yīng)和血細(xì)胞生成， 在疾病和損傷過程早期， 炎癥細(xì)胞因子（ 包括TNF、IL-6、IL-1和IL-8） 很快被誘導(dǎo)產(chǎn)生出來，對(duì)許多炎癥和損傷的愈合過程起介導(dǎo)和調(diào)節(jié)作用，在膿毒癥中存在雙重效應(yīng)。IL-6水平升高作為一個(gè)信號(hào)調(diào)動(dòng)機(jī)體防御反應(yīng)， 對(duì)某些前炎癥反應(yīng)有分化和下調(diào)作用，對(duì)TNF的作用發(fā)揮負(fù)反饋調(diào)節(jié)效應(yīng)。宿主免疫力受損害可促進(jìn)細(xì)菌的遷移， 用IL-6治療后可減少細(xì)菌的遷移， 從而減少并發(fā)的膿毒癥[2]。但極高水平的IL-6可能導(dǎo)致免疫功能失調(diào)，加劇疾病的嚴(yán)重程度，Kanangat等[5]研究發(fā)現(xiàn)了這一現(xiàn)象。致炎因子對(duì)于細(xì)菌生長(zhǎng)的這種雙向效應(yīng)也許可以幫助解釋難以解決的急性呼吸窘迫綜合征患者的頻繁發(fā)生的醫(yī)院感染。本實(shí)驗(yàn)旨在探討GM-CSF、IL-6在羊水污染新生兒血清中含量的臨床意義，研究結(jié)果表明：實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，GM-CSF、IL-6在血清中的含量顯著上升，與類似的炎癥反應(yīng)表現(xiàn)相似，GM-CSF、IL-6上升與分娩后新生兒感染率上升體現(xiàn)了一致性，因此有理由認(rèn)為在新生兒分娩后GM-CSF、IL-6的含量上升與羊水Ⅲ°污染密切相關(guān)，亦與新生兒細(xì)菌感染緊密相關(guān)。

3.4總結(jié) 既往觀察認(rèn)為白細(xì)胞總數(shù)上升可能是感染或者窒息等應(yīng)激反應(yīng)所致，但很難鑒別，通過定時(shí)復(fù)查白細(xì)胞或CRP等指標(biāo)進(jìn)行粗略評(píng)價(jià)。近3年的衛(wèi)生部抗菌藥物的合理使用對(duì)新生兒的診治提出了更高診斷技術(shù)水平的要求，同時(shí)患兒家屬對(duì)剛出生新生兒存活及后遺癥等方面預(yù)期值較高，要求臨床醫(yī)生在診治上要有充分的理論依據(jù)，而忽略新生兒早期感染的炎癥指標(biāo)將帶來患兒自身及醫(yī)療質(zhì)量等方面的嚴(yán)重后果。根據(jù)新生兒免疫的特殊性大部分新生兒感染與菌血癥有關(guān)，血培養(yǎng)是感染診斷金標(biāo)準(zhǔn)，但國(guó)內(nèi)血培養(yǎng)陽性率低，只有7%～8%。根據(jù)上述統(tǒng)計(jì)分析筆者認(rèn)為聯(lián)合GM-CSF、IL-6炎癥因子檢測(cè)可以更早、更準(zhǔn)確鑒別羊水污染患兒是否感染，為臨床醫(yī)生早期發(fā)現(xiàn)提供有力佐證。聯(lián)合CRP和GM-CSF、IL-6測(cè)定更是為了配合衛(wèi)生部抗菌藥物專項(xiàng)整治活動(dòng)中合理使用抗菌藥物的要求，因新生兒各項(xiàng)臟器尚未發(fā)育成熟，作為兩項(xiàng)炎癥追蹤指標(biāo)，可以為醫(yī)師減少或不使用抗菌藥物以及及早停用抗菌藥物提出指導(dǎo)性意見。

參考文獻(xiàn)：

[1] Carroll SG， Papaioannou S， Ntumazah IL，et al. Lower genital tract swabs in the prediction of intrauterine infection in preterm prelabour rupture of the membranes[J].Bri J Obstetr Gynecol，1996，103（1）：54-59.

[2]Liu Q，Djuricin G，Nathan C，et al.The effect of interleukin-6 on bacterial translocation in acute canine pancreatitis [J].Int J Pancreatol，2000，27：157-165.

[3]Kanangat S，Meduri GU，Tolley EA，et al.Effects of cytokines and endotoxin on the intracellular growth of bacteria[J].Infect Immun，1999，67：2834-2840.

[4]Keyworth N，Millar MR，Holland KT.Development of cutaneous microflora in premature neonates[J].Arch Dis Child，1992，67（7 Spec No）：797-801.

編輯/肖慧