普濟(jì)拔毒膏體外抗菌活性的觀察

摘要：目的 觀察普濟(jì)拔毒膏對(duì)常見致病菌的體外抗菌活性，初步判定其體外抗菌譜。方法 精密稱取普濟(jì)拔毒膏1000mg，使用10ml DMSO將藥物溶解，使其終濃度為100mg/ml，備用。采用瓊脂擴(kuò)散法（打孔法） 觀察其對(duì)大腸桿菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、奇異變形桿菌、綠膿桿菌及化膿性鏈球菌的體外抗菌活性，同時(shí)設(shè)置DMSO陰性對(duì)照組、熱毒寧陽性對(duì)照組。 結(jié)果 普濟(jì)拔毒膏體外對(duì)大腸桿菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、綠膿桿菌及鏈球菌具有明顯的抗菌活性。結(jié)論 體外抗感染是普濟(jì)拔毒膏治療瘡瘍火毒的重要機(jī)理之一。

關(guān)鍵詞：普濟(jì)拔毒膏；體外；抗菌活性

普濟(jì)拔毒膏為王樓五官科門診部許永貴醫(yī)師祖?zhèn)魍庥妹胤?，臨床常將其制備成黑膏藥使用，具有清熱解毒、涼血消腫、化腐生肌之效，根據(jù)多年臨床觀察普濟(jì)拔毒膏對(duì)癰疽、疔瘡、癤腫、流痰、流注、瘰疬等瘡瘍相關(guān)性疾病及痄腮（流行性腮腺炎）具有良好效果，但對(duì)該方卻鮮有其現(xiàn)代化研究，為進(jìn)一步說明其作用機(jī)理、促進(jìn)其開發(fā)利用，筆者決定對(duì)其藥理作用展開研究。而根據(jù)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論，痄腮是由腮腺炎病毒引起呼吸道傳染病[1]，火毒瘡瘍是由細(xì)菌感染引起的外科常見病多發(fā)病[2]，故筆者首先觀察了普濟(jì)拔毒膏體外對(duì)常見致病菌的抗菌活性，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下：

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1實(shí)驗(yàn)試劑及藥物 營養(yǎng)瓊脂：上海盛恩生化科技有限公司；營養(yǎng)肉湯：杭州微生物試劑有限公司； DMSO：濟(jì)南世紀(jì)通達(dá)化工有限公司；NS：哈爾濱同一堂藥業(yè)有限公司提供；林可霉素注射液：由浙江濟(jì)民制藥有限公司提供；普濟(jì)拔毒膏：由王樓五官科門診部提供。

1.2實(shí)驗(yàn)儀器 FA1004電子天平：上海天平廠；孵箱：上海分析儀器廠；YXQ-2S-50SⅡ立式壓力蒸汽滅菌器：上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；生物安全柜BSC-1500ⅡA2-x：濟(jì)南鑫貝亞生物技術(shù)有限公司。

1.3實(shí)驗(yàn)菌株 大腸桿菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、奇異變形桿菌、綠膿桿菌及化膿性鏈球菌由漯河醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)訓(xùn)管理中心提供。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1實(shí)驗(yàn)用藥物配制 100mg/ml普濟(jì)拔毒膏溶液：精密稱取普濟(jì)拔毒膏1000mg，使用10ml DMSO將藥物溶解，使其終濃度為100mg/ml，備用。

林可霉素（30ug/ml）：取鹽酸林可霉素注射液一支（2ml：0.6g），無菌條件下取0.01ml，加入10ml蒸餾水中，即為30ug/ml的林可霉素，備用。

2.2增菌培養(yǎng) 取大腸桿菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、綠膿桿菌及鏈球菌菌株少許，接種于肉湯培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)24h，取出用NS稀釋至比濁度為0.5麥比，即1.5×108CFU/ml，15min內(nèi)接種于瓊脂平板中用于實(shí)驗(yàn)。

2.3抗菌活性測(cè)定--瓊脂擴(kuò)散法（打孔法）[3] 將瓊脂培養(yǎng)基熔化后傾注于平皿制備平板，每平皿20ml，待其凝固。用無菌注射器吸取2.2項(xiàng)下制備的試驗(yàn)菌0.1ml均勻涂布于表面已干的上述肉湯瓊脂平板上。待其干燥數(shù)分鐘后用無菌鋼管打四個(gè)孔，每孔注入2.1項(xiàng)下所制備藥液0.1ml，每種藥物4個(gè)復(fù)孔，每塊平板涂布一種試驗(yàn)菌，實(shí)驗(yàn)時(shí)設(shè)置林可霉素陽性對(duì)照組和DMSO陰性對(duì)照組。37℃孵育24h后用直尺測(cè)量抑菌圈直徑，取抑菌圈直徑平均值，評(píng)價(jià)普濟(jì)拔毒膏對(duì)常見致病菌的抗菌活性。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

見表1。

由結(jié)果可見：普濟(jì)拔毒膏藥液對(duì)皮膚及軟組織感染常見致病菌金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化膿性鏈球菌、綠膿桿菌具有良好的抗菌作用，其對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑為18.3mm，對(duì)表皮葡萄球菌的抑菌圈直徑為18.0mm，對(duì)化膿性鏈球菌抑菌圈直徑為11.4mm，對(duì)綠膿桿菌抑菌圈直徑為13.1mm。普濟(jì)拔毒膏除對(duì)皮膚及軟組織感染常見致病菌有良好抗菌活性外，對(duì)大腸桿菌及奇異變形桿菌也具有良好的抗菌活性，對(duì)大腸桿菌的抑菌圈直徑為15.1mm，對(duì)奇異變形桿菌的抑菌圈直徑為12.8mm。提示普濟(jì)拔毒膏對(duì)常見致病菌具有良好的抗菌活性。

4 討論

普濟(jì)拔毒膏為中醫(yī)外用方劑，臨床常將其制備成黑膏藥使用，具有涼血消腫、拔毒化腐生肌之效，對(duì)瘡瘍相關(guān)性疾病及痄腮（流行性腮腺炎）具有良好效果。其中火毒瘡瘍屬于中醫(yī)外科常見病群，包括癰、疔、癤、流痰、流注、瘰疬等，根據(jù)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)機(jī)理該類疾病指一切體表外科疾病的總稱，狹義上指體表化膿性疾病，其常見致病菌包括金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化膿性鏈球菌、綠膿桿菌等[4]，故該類疾病治療主要依靠抗菌藥物 。但部分患者因細(xì)菌毒素、局部炎癥等因素的影響，瘡口經(jīng)久不愈，給患者的生活和工作帶來巨大的不便，西藥對(duì)此類疾病作用微弱[5]，而普濟(jì)拔毒膏在治療此類疾病時(shí)表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢(shì)，根據(jù)臨床經(jīng)驗(yàn)和文獻(xiàn)顯示中藥外治法對(duì)此類疾病的治療是通過多種途徑共同產(chǎn)生作用，包括局部抗菌、增強(qiáng)機(jī)體全身及局部免疫功能、促進(jìn)肉芽組織增生、促進(jìn)瘡面血管再生改善瘡面微循環(huán)、調(diào)節(jié)瘡面分泌、促進(jìn)上皮細(xì)胞生長等[6，7]。

筆者為闡明普濟(jì)拔毒膏的作用機(jī)理，促進(jìn)其開發(fā)利用，初步觀察了其體外抗菌作用，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見：普濟(jì)拔毒膏對(duì)皮膚及軟組織感染常見致病菌具有良好的抗菌活性，其對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑為18.3mm，對(duì)表皮葡萄球菌的抑菌圈直徑為18.0mm，對(duì)化膿性鏈球菌抑菌圈直徑為11.4mm，對(duì)綠膿桿菌抑菌圈直徑為13.1mm、對(duì)大腸桿菌的抑菌圈直徑為15.1mm，對(duì)奇異變形桿菌的抑菌圈直徑為12.8mm，提示其體外具有良好的抗菌活性。但因?qū)嶒?yàn)條件限制本次僅選取了金葡菌、表葡菌、化膿性鏈球菌、綠膿桿菌等為觀察對(duì)象，筆者將在今后工作中繼續(xù)觀察其對(duì)其他致病菌的抗菌活性以明確其體外抗菌譜，指導(dǎo)其在臨床中的合理應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)：

[1]張軍育，李曉波.仙方活命飲治療痄腮的臨床體會(huì)[J].中醫(yī)中藥指南，2013，11（6）：257.

[2]李曉黎，程春生.中藥外治法促進(jìn)慢性感染性創(chuàng)面愈合機(jī)理進(jìn)展[J].中醫(yī)正骨，2007，19（4）：74-76.

[3]王勇，種麗君，宮少 波，等.愈潰膏的藥效作用研究[J].實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合臨床，2009，9（2）：86-87.

[4]曹育春，徐祖森，陳如，等.皮膚及軟組織感染分離菌對(duì)抗菌藥物的敏感性分析[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2007，21（7）：419-421.

[5]李應(yīng)全，張萍，馬劍峰.生肌愈皮膏的實(shí)驗(yàn)與臨床研究[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志，1998，15（2）：3-5.

[6]岳金換，張秦宏，孫忠人.中藥外治瘡瘍的臨床研究現(xiàn)狀及分析[J].中醫(yī)外治雜志，2013，22（4）：55-56

[7]張庚揚(yáng)，李曉軍.瘡瘍疾病相關(guān)的外用中藥研究概述[J].環(huán)球中醫(yī)藥，2010，3（2）：101-105.

編輯/許言