尿液干化學(xué)分析儀檢測(cè)結(jié)果影響因素探討

摘要：隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)的飛速發(fā)展，檢驗(yàn)技術(shù)的創(chuàng)新，尿液干化學(xué)分析儀以其使用簡(jiǎn)便、怏捷、準(zhǔn)確性好等優(yōu)點(diǎn)在全國(guó)各大中小醫(yī)院普遍使用，尿液分析由常規(guī)手工操作法進(jìn)入自動(dòng)分析儀器時(shí)代，極大地提高了工作效率，其檢驗(yàn)靈敏性和準(zhǔn)確性較高，檢測(cè)的參數(shù)較多，檢測(cè)速度較快，臨床應(yīng)用也越來(lái)越普及。尿液分析對(duì)腎臟疾病，泌尿系統(tǒng)相關(guān)疾病的定位診斷，鑒別診斷及預(yù)后判斷具有重要的臨床意義，因此被稱為\"體外腎活檢\" [1]。但尿液干化學(xué)分析儀檢測(cè)易受到儀器的穩(wěn)定性、靈敏度及試紙條質(zhì)量等因素的影響。尿液分析作為三大常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目之一，廣泛應(yīng)用于臨床，對(duì)泌尿系統(tǒng)疾病、肝臟疾病、代謝性疾病的診斷、治療及療效監(jiān)測(cè)有重要的價(jià)值，為臨床提供許多有價(jià)值的診斷信息。雖然尿檢取樣比較容易，所用檢驗(yàn)設(shè)備比較簡(jiǎn)單，但由于受到儀器、試劑等方法、原理及靈敏度影響，加之標(biāo)本的留取、收集、預(yù)處理等諸多環(huán)節(jié)難以控制，不可避免地存在著假性結(jié)果。須引起我們的高度重視。

關(guān)鍵詞：尿液干化學(xué)分析儀；檢測(cè)；影響因素

1 檢驗(yàn)前標(biāo)本采集的影響因素

1.1 標(biāo)本的采集、收集 負(fù)責(zé)標(biāo)本收集的實(shí)驗(yàn)室工作人員、醫(yī)生和護(hù)士需對(duì)患者留尿進(jìn)行指導(dǎo)，務(wù)必使尿道口保持清潔。收集和運(yùn)送尿液的容器應(yīng)干凈、防漏，并由透明且不與尿液成分發(fā)生反應(yīng)的惰性材料制成，容器及其密封裝置不帶干擾物質(zhì)，用于標(biāo)本收集和運(yùn)送的容器不可重復(fù)使用。尿標(biāo)本須在2 h內(nèi)及時(shí)送檢，以免發(fā)生細(xì)菌繁殖、蛋白變性、細(xì)胞溶解以及尿膽原等物質(zhì)因光照分解或氧化而減少等。收集時(shí)段尿時(shí)，應(yīng)告知患者時(shí)間段的起點(diǎn)和終點(diǎn)，起始時(shí)先排空膀胱，三杯試驗(yàn)留尿時(shí)間要分段明確，做好標(biāo)記。隨機(jī)尿液標(biāo)本的留取無(wú)特殊時(shí)間規(guī)定，但必須在標(biāo)本容器上注明留取時(shí)間，患者必須有足夠的尿量，根據(jù)多年的工作經(jīng)驗(yàn)，尿量最好≥50 ml，最少不得低于15 ml，適用于門診或急診患者。住院患者尿常規(guī)最好留取清晨第一次尿，即晨尿，也可把在上午7時(shí)～8時(shí)留取的尿液作為第二次晨尿，適用于可疑或已知泌尿系統(tǒng)疾病的動(dòng)態(tài)觀察及早期妊娠實(shí)驗(yàn)等[2]。午餐后2 h收集的尿液，即餐后尿，對(duì)病理性糖尿和蛋白尿的檢出更敏感，適用于尿糖、尿蛋白、尿膽原等檢查。

1.2 標(biāo)本的保存、運(yùn)送 檢測(cè)的標(biāo)本應(yīng)新鮮，不需防腐劑，盡可能在2h內(nèi)完成。如果標(biāo)本收集后2 h內(nèi)無(wú)法完成分析，可2 ℃～8 ℃冰箱冷藏，6 h之內(nèi)完成檢測(cè)，在尿標(biāo)本中加適量防腐劑，根據(jù)不同的檢查目的的選用不同類型的防腐劑（目前大多使用400 g/L的甲醛溶液，每升尿液加入5 ml。應(yīng)注意甲醛過(guò)量時(shí)可與尿素產(chǎn)生沉淀物，干擾顯微鏡檢查）。在工作中發(fā)現(xiàn)留取的尿液標(biāo)本在25 ℃下，2 h后有時(shí)會(huì)出現(xiàn)改變，外觀尿液顏色變深，透明度變混或尿氣味帶有氨味；化學(xué)成分出現(xiàn)葡萄糖，膽紅素、尿膽原、維生素C下降，亞硝酸鹽升高，pH與蛋白質(zhì)升高或下降；鏡檢出現(xiàn)RBC、WBC管型下降，結(jié)晶或細(xì)菌升高。所以送檢單上必須注明留尿時(shí)間、送檢時(shí)間。

1.3 標(biāo)本的標(biāo)記與接受 標(biāo)本的容器必須有標(biāo)記，包括：患者姓名、特定編碼（或住院患者的病區(qū)、床號(hào)）、標(biāo)本收集時(shí)間。條碼應(yīng)貼在其蓋上。工作人員在接收標(biāo)本時(shí)，必須檢查標(biāo)本容器是否符合要求，標(biāo)記 內(nèi)容 與醫(yī)生所填寫申請(qǐng)單是否一致；從留尿到接收標(biāo)本的時(shí)間是否過(guò)長(zhǎng)；標(biāo)本中是否被污染；尿標(biāo)本量應(yīng)≥15 ml，在特殊病例（如小兒、燒傷、腎衰無(wú)尿期）不可能達(dá)到此要求時(shí)，應(yīng)在檢驗(yàn)報(bào)告單上注明收到的尿量。

2 干化學(xué)試紙條影響因素

尿液分析中使用的儀器和材料主要是尿液分析儀和尿試條，二者的使用、質(zhì)量以及尿試條的 方法學(xué)在尿液分析中很重要。尿試條的正確使用也至關(guān)重要，影響尿試條的因素很多，為了確保尿液分析的結(jié)果可靠性、準(zhǔn)確性，在使用時(shí)應(yīng)注意以下問(wèn)題 。

2.1 尿液試紙條正確應(yīng)用 不可使用已過(guò)有效期的試帶條；應(yīng)將試帶條保存在生產(chǎn)廠家提供的容器中，不可更換保存容器；不可將試帶條貯存在陽(yáng)光直射或潮濕的地方；貯存試帶條的容器應(yīng)密封，保存溫度應(yīng)遵循廠家建議；每次從裝試帶條的容器中取出少量的試帶條，取出后立即蓋好容器；未用完的試帶條不可再放回容器中，不同容器中的試帶條不可混用，不可觸摸試帶條上的化學(xué)反應(yīng)膜塊。

2.2 室內(nèi)質(zhì)控 尿液分析儀和尿試條的質(zhì)量問(wèn)題也是影響尿液分析結(jié)果準(zhǔn)確性的因素之一，每天在做尿液分析前，應(yīng)做一次質(zhì)控，同時(shí)使用高低值兩種質(zhì)控物應(yīng)先對(duì)尿液分析儀和尿試條進(jìn)行檢測(cè)，以使二者的質(zhì)量得到控制，再檢測(cè)質(zhì)控液看其值是否在可檢測(cè)的范圍內(nèi)。每更換一批試帶條，要對(duì)比兩批試帶條的質(zhì)控結(jié)果，質(zhì)控物的值應(yīng)在所使用方法學(xué)的可檢測(cè)的范圍之內(nèi)，才可對(duì)當(dāng)天的結(jié)果作出以正確的分析。

3 尿液檢測(cè)結(jié)果的正確分析

尿液試紙條本身受方法學(xué)、干化學(xué)等多方面因素的影響 ，是造成尿液分析結(jié)果與實(shí)際臨床不相符的主要原因。

3.1 尿液試紙條的專一性 與傳統(tǒng)手工檢測(cè)有不同之處，最常見(jiàn)的有以下特點(diǎn)：蛋白質(zhì)膜塊只對(duì)白蛋白敏感，對(duì)球蛋白不敏感，對(duì)本周蛋白不反應(yīng)；葡萄糖膜塊只對(duì)葡萄糖產(chǎn)生反應(yīng)，對(duì)乳糖、半乳糖、果糖及蔗糖不反應(yīng)；酮體膜塊對(duì)乙酰乙酸最敏感、丙酮次之，對(duì)β羥丁酸不反應(yīng)；隱血膜塊不但對(duì)完整和破損RBC均有反應(yīng)，而且對(duì)游離Hb和肌紅蛋白也反應(yīng)；白細(xì)胞膜塊只對(duì)中性粒細(xì)胞有反應(yīng)，而對(duì)淋巴細(xì)胞無(wú)反應(yīng)；膽紅素及尿膽原膜塊靈敏度比Harrison手工法低得多；比密膜塊只能反映尿中陽(yáng)離子多少與比密計(jì)結(jié)果不一，對(duì)嬰兒等低比密尿則不敏感[3]。

3.2干化學(xué)試紙條容易受藥物及其他物質(zhì)干擾，可造成一定的假陽(yáng)性或假陰性。常見(jiàn)因素如下：

3.2.1 蛋白質(zhì)測(cè)定的干擾因素 尿蛋白檢測(cè)的常用方法是蛋白誤差法，尿液pH 值對(duì)此法的影響很大，當(dāng)尿液pH> 8時(shí)，易出現(xiàn)假陽(yáng)性，當(dāng)pH<3時(shí)，易出現(xiàn)假陰性。當(dāng)尿液中含有大量無(wú)機(jī)鹽結(jié)晶時(shí)，尿分析儀法會(huì)出現(xiàn)假陰性，本研究發(fā)現(xiàn)用磺基水楊酸法檢測(cè)離后的尿液，可以避免結(jié)晶的干擾?；颊叻每鼘帲鼘幎『袜奏さ人幬镆鸬膹?qiáng)堿尿（pH≥9）時(shí)、季胺鹽可導(dǎo)致假陽(yáng)性；本周氏蛋白、粘蛋白可導(dǎo)致假陰性[4]。另外臨床上大劑量注射青霉素后尿液內(nèi)青霉素對(duì)尿蛋白定性試驗(yàn)有不同程度的干擾作用，可造成假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果。

3.2.2 葡萄糖測(cè)定的干擾因素 雙氧水可造成假陽(yáng)性；維生素C（>750 mg/dl）、乙酰乙酸（>400 mg/dl）、大劑量青霉素、長(zhǎng)期服用左旋多巴、高比重尿（>1.020）可造成假陰性。

3.2.3 酮體測(cè)定的干擾因素 苯丙酮尿癥、服用左旋多巴、頭孢類抗生素、BSP等易造成假陽(yáng)性。

3.2.4 潛血的干擾因素 BLD的檢測(cè)是利用過(guò)氧化物酶的活性，氧化還原而顯色的，而顯微鏡鏡檢必須有完整的紅細(xì)胞，才能檢測(cè)到。所以當(dāng)尿液中的紅細(xì)胞破裂時(shí)，尿液分析儀可以檢測(cè)到尿液中的血紅蛋白，這也給解釋了為什么運(yùn)動(dòng)后體檢會(huì)異常。研究還發(fā)現(xiàn)尿液污染后細(xì)菌能釋放過(guò)氧化物酶等活性物質(zhì)，也可能由于細(xì)菌代謝繁殖過(guò)程中合成了觸酶，過(guò)氧化物酶而使檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性[5]。漂白粉、雙氧水、不耐熱酶等易造成潛血的假陽(yáng)性；另外尿中含有大量蛋白質(zhì)、糖、維生素C>0.1g/L、含有甲醛、亞硝酸鹽等也可干擾造成假陰性。

3.2.5白細(xì)胞的干擾因素 尿液分析儀測(cè)定白細(xì)胞的原理是利用中性粒細(xì)胞中酯酶能將吲哚酚羥基酸酯轉(zhuǎn)變?yōu)檫胚岱?，后者與重氮鹽形成紫色縮合物，其顏色深淺與尿中酯酶含量成正比，從而間接判斷中性粒細(xì)胞數(shù)量。這只能測(cè)定胞質(zhì)內(nèi)含酯酶的粒細(xì)胞，而不能測(cè)定酯酶缺乏的淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。當(dāng)尿液中只有淋巴細(xì)胞或單核細(xì)胞時(shí)會(huì)漏診，從而產(chǎn)生假陰性 ；如果新鮮尿液的中性粒細(xì)胞沒(méi)有（或較少）釋放酯酶，在短時(shí)間則不能快速水解吲哚酚酯，從而造成假陰性；急性尿路感染反復(fù)發(fā)作后可變?yōu)槁?，此時(shí)的尿液可能以淋巴細(xì)胞為主，也會(huì)導(dǎo)致白細(xì)胞檢測(cè)假陰性而使檢測(cè)率降低[6] 。另?yè)?jù)資料顯示尿液pH≤4.4、WBC<10～25個(gè)，L、蛋白質(zhì)≥5 g/L、糖≥30 g/L、高比重尿、維生素c、慶大霉素、先鋒霉素、頭孢氨芐、甲醛、高濃度草酸等也可使結(jié)果偏低或出現(xiàn)假陰性 ，而肌紅蛋白尿、呋喃坦定、膽紅素尿造成假陽(yáng)性；慶大霉素、先鋒霉素、造成假陰性[7]。

3.2.6 膽紅素的干擾因素 服用大劑量氯丙嗪可造成假陽(yáng)性；陽(yáng)光照射、含亞硝酸鹽、維生素C（>250 mg/L）造成假陰性。

3.2.7 尿膽原的干擾因素 膽紅素、吩噻嗪等可造成假陽(yáng)性；服用PAS、陽(yáng)光照射等可造成假陰性。

3.2.8 亞硝酸鹽的干擾因素 標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)未加防腐劑、標(biāo)本受硝酸鹽或偶氮染料污染、食入富含亞硝酸鹽食物過(guò)多等造成假陽(yáng)性；尿量過(guò)多、維生素濃度過(guò)高、葡萄球菌感染、尿液在膀胱停留時(shí)間過(guò)短等可造成假陰性。因此，要做到結(jié)果準(zhǔn)確可靠，就必須堅(jiān)持做到尿液新鮮，容器清潔，及時(shí)檢查，試帶合格，儀器正常，操作規(guī)范，堅(jiān)持質(zhì)控復(fù)核到位，應(yīng)結(jié)合尿液理學(xué) ，化學(xué)檢查及臨床資料綜合分析，才能為臨床提供可靠的依據(jù)。

綜上所述，盡管干化學(xué)尿液分析近年取得了重大發(fā)展，但還不能完全代替尿沉渣鏡檢，由于尿液干化學(xué)法和尿顯微鏡鏡檢法檢測(cè)原理不同，各有優(yōu)缺點(diǎn)。干化學(xué)法適宜初篩檢查，簡(jiǎn)便快捷。顯微鏡檢查是尿沉渣檢查的金標(biāo)準(zhǔn)，在平時(shí)工作中將兩者聯(lián)合應(yīng)用，結(jié)果互補(bǔ)，使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更準(zhǔn)確。做為檢驗(yàn)工作者應(yīng)該對(duì)每個(gè)患者的每一份標(biāo)本負(fù)責(zé)。為了不漏診、不誤診，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該全部進(jìn)行尿沉渣顯微鏡檢查。只有把兩種方法結(jié)合起來(lái)，才能給臨床提供真實(shí)可靠的依據(jù)。

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