多重人乳頭瘤病毒感染與宮頸癌及癌前病變的相關(guān)性探討

摘要：目的 探討人乳頭瘤病毒（Human papilloma virus，HPV）感染與宮頸癌及癌前病變之間的相關(guān)性。方法 將收集到的300例患有宮頸疾病的女性患者，采用HybriMax醫(yī)用核酸分子快速雜交基因技術(shù)及第二代雜交捕獲法（HC-2）對(duì)患者的HPV進(jìn)行檢測(cè)，陽(yáng)性者之后行陰道鏡下多點(diǎn)活檢加頸管診刮術(shù)，將檢查結(jié)果進(jìn)行比對(duì)， HPV檢測(cè)陽(yáng)性212例，陽(yáng)性率高達(dá)70.67%。宮頸癌的病理類(lèi)型中鱗癌發(fā)病率最高，其次是腺癌約占宮頸癌的15%～20%，腺鱗癌僅占3%～5%，高危型HPV16和18與宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)高度病變（CINII/III）的發(fā)生密切相關(guān)。HPV-DNA檢測(cè)陽(yáng)性患者中，細(xì)胞學(xué)異常者比細(xì)胞學(xué)為良性反應(yīng)性細(xì)胞者的DNA含量高（P<0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果 HPV-DNA陽(yáng)性感染率隨宮頸病變程度的不斷加重而升高，高危型HPV在宮頸癌前病變和宮頸癌中的病毒含量隨病情程度的加重呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。結(jié)論 人乳頭瘤病毒感染與宮頸癌前病變和宮頸癌的發(fā)生有密切的關(guān)系，可作為重要的檢測(cè)指標(biāo)。

關(guān)鍵詞：人乳頭瘤病毒；癌前病變；宮頸癌

宮頸癌是全球女性惡性腫瘤較為常見(jiàn)的，發(fā)病率僅次于乳腺癌，位居全球第2，約占其總數(shù)的50%以上，在中國(guó)女性發(fā)病率居第1位。我國(guó)自20世紀(jì)70年代開(kāi)展全國(guó)性的婦科普查和宮頸癌癌前病變的診治，一些大城市宮頸癌的發(fā)病率明顯下降。近年來(lái)子宮頸癌出現(xiàn)年輕化趨勢(shì)，因此對(duì)宮頸癌及癌前病變的研究成為醫(yī)學(xué)界關(guān)注的熱點(diǎn)[1]。許多研究表明人乳頭瘤病毒感染與宮頸癌及癌前病變有關(guān)，目前發(fā)現(xiàn)的HPV達(dá)100余種，約有20余與腫瘤有關(guān)，本文章主要從宮頸癌及癌前病變與人乳頭瘤病毒的型別相關(guān)性入手研究。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2011年1月～2013年6月來(lái)我院就診的女性患者進(jìn)行宮頸癌的篩查，提取其中的300例作為本次的研究對(duì)象。年齡在20～65歲，進(jìn)行HybriMax醫(yī)用核酸分子快速雜交基因技術(shù)及第二代雜交捕獲法（HC-2）檢測(cè)，并對(duì)其中212例陽(yáng)性患者進(jìn)行陰道鏡檢查及組織活檢加頸管診刮術(shù)。同時(shí)對(duì)其他138例患者進(jìn)行陰道脫落細(xì)胞涂片檢查，進(jìn)而進(jìn)行相應(yīng)的對(duì)照。

1.2方法

1.2.1 HybriMax醫(yī)用核酸分子快速雜交基因分型試劑盒 從篩查患者中提取樣本，按常規(guī)宮頸細(xì)胞學(xué)進(jìn)行取材，把采集到的脫落細(xì)胞放置存盛有細(xì)胞保存液的小瓶里待用。HPV的分型步驟：首先對(duì)標(biāo)本的DNA進(jìn)行擴(kuò)增，然后將擴(kuò)增后的產(chǎn)物進(jìn)行導(dǎo)流雜交，整個(gè)雜交過(guò)程保持在45℃，最后芯片顯色進(jìn)行分型。整個(gè)過(guò)程的操作均按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。凱普醫(yī)用核酸分子快速雜交儀可以檢測(cè)HPV-DNA的21種亞型，高危型13種（HPV16、31、33、35、39、45、 51、52、56、58、59、68），低危型5種（HPV6、11、42、43、44） 及中國(guó)人群常見(jiàn)的亞型（HPV53，66，CP8304），不論高危型還是低危型，只要是兩種或兩種以上者均為多重感染[2]。

1.2.2陰道脫落細(xì)胞涂片檢查 通過(guò)經(jīng)典的Pap涂片染色法進(jìn)行檢測(cè)，由于宮頸癌好發(fā)于移行帶，故取材必須在鱗-柱上皮交界處，結(jié)果按TBS分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷，診斷標(biāo)準(zhǔn)分類(lèi)：①正常細(xì)胞及良性改變；②鱗狀細(xì)胞異常，包括非典型鱗狀細(xì)胞（ASC）、低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）、鱗狀細(xì)胞癌（SCC）；③意義不明的非典型腺細(xì)胞（AGUC）和腺癌（AC）。

1.2.3宮頸組織活檢及頸管診刮術(shù) 對(duì)上述56例高危型人群及陰道脫落細(xì)胞涂片檢查提示惡性的患者進(jìn)行組織活檢。在子宮頸上作多點(diǎn)活檢，至少取4塊組織分瓶送病理檢查。宮頸活檢和經(jīng)管診刮術(shù)同時(shí)進(jìn)行有助于早期發(fā)現(xiàn)宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）和早期宮頸癌，進(jìn)一步提高診斷陽(yáng)性率。

2 結(jié)果

2.1人乳頭瘤病毒（HPV）感染是宮頸癌的主要危險(xiǎn)因素，在300例篩查人員中，其中212例HPV檢測(cè)陽(yáng)性，含有1種或1種以上感染，總陽(yáng)性率70.67%。

2.2 HPV的檢測(cè)結(jié)果，在300例CIN中，HPV陰性88例，占29.33%；HPV陽(yáng)性212例，占70.67%。最多為3種型別同時(shí)感染，其中單一基因型感染126例，占59.43%，二重感染75例，占35.37%，三重感染11例，占5.2%。在300例CIN所感染HPV-DNA的亞型涉及21型，其中感染頻度最高的HPV-16（32.15%），從正常組織到宮頸上皮瘤樣變CIN不同病變患者中，正常組織52例，炎癥患者212例，CINI43例，CINII15例，CINIII11例，癌5例，各病變之間與正常者相比存在差異性，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（P<0.05），見(jiàn)表1。

2.3 HPV-DNA分型聯(lián)合細(xì)胞學(xué)檢測(cè)與細(xì)胞學(xué)檢測(cè)結(jié)果比較 在300例患者當(dāng)中，HPV-DNA分型聯(lián)合細(xì)胞學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性者212例，其中LSIL52例，HISL21例，癌5例，而而通過(guò)細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的145例患者中LSIL38例，HISL9例，癌2例，兩者比較存在顯著性差異（P<0.05），具有可比性。見(jiàn)表2。

3 討論

3.1隨著宮頸癌的發(fā)病率有年輕化的發(fā)展趨勢(shì)，對(duì)宮頸癌的篩查成為重點(diǎn)。許多研究結(jié)果表明HPV感染是宮頸癌的主要危險(xiǎn)因素，目前對(duì)HPV檢測(cè)有許多種方法，本文章使用HybriMax醫(yī)用核酸分子快速雜交基因技術(shù)及第二代雜交捕獲法（HC-2）對(duì)HPV進(jìn)行檢測(cè)，提高檢測(cè)準(zhǔn)確性高，并且簡(jiǎn)單易操作，耗時(shí)短，可廣泛用于研究教學(xué)和臨床診斷。本文章研究顯示，HPV-DNA分型聯(lián)合細(xì)胞學(xué)檢測(cè)要比單純細(xì)胞學(xué)檢測(cè)效果好，病變檢出率較高，且各級(jí)別宮頸病變率均高于細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的結(jié)果[2]。

3.2通過(guò)采用HybriMax醫(yī)用核酸分子快速雜交儀及第二代雜交捕獲法（HC-2）可以檢測(cè)H PV-DNA的21種亞型，高危型13種（HPV16、31、33、35、39、45、 51、52、56、58、59、68），低危型5種（HPV6、11、42、43、44） 及中國(guó)人群常見(jiàn)的亞型（HPV53，66，CP8304）。由于HPV有許多亞型，對(duì)宮頸疾病的威脅，不僅僅有單一型病毒感染，可能同時(shí)會(huì)出現(xiàn)多型病毒感染，但是不一定多型病毒感染會(huì)增加宮頸病變，目前對(duì)觀(guān)點(diǎn)沒(méi)有一個(gè)明確的說(shuō)法。國(guó)際癌癥研究協(xié)會(huì)（IARC）的最新研究結(jié)果顯示，最常見(jiàn)的亞型為HPV-16、HPV-18等，HPV-45在非洲較多、HPV-33主要集中于歐洲國(guó)家，而亞洲國(guó)家主要是HPV-52、58常見(jiàn)。在眾多亞型中，以HPV-16、HPV-18，HPV-33型與子宮頸癌關(guān)系最為密切，有研究表明，不同亞型的感染其致病性、治療效果及后果等方面存在差異，其中HPV-16是感染頻度最高的亞型，可達(dá)32.15%，從而說(shuō)明了HPV-16對(duì)宮頸癌的致病性要高于其他亞型。

3.3目前HPV的致癌機(jī)制認(rèn)為是病毒DNA通過(guò)共價(jià)鍵與細(xì)胞學(xué)DNA序列聯(lián)絡(luò)，這種聯(lián)絡(luò)使病毒DNA或以多拷貝串聯(lián)狀態(tài)，或以單拷貝形式整合入宿主細(xì)胞DNA中，結(jié)果導(dǎo)致E2基因抑制E6，E7基因啟動(dòng)，從而使E6，E7基因表達(dá)不正常，導(dǎo)致細(xì)胞增殖失去控制[3]。此外，HPV-16型E6蛋白能與P53蛋白結(jié)合形成復(fù)合物，從而使細(xì)胞生長(zhǎng)的負(fù)調(diào)節(jié)功能喪失，引起細(xì)胞無(wú)控制性生長(zhǎng)而導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生。通過(guò)HPV致癌機(jī)制不難得出，對(duì)HPV檢測(cè)對(duì)臨床預(yù)防及治療CIN至關(guān)重要。另一方面，HPV感染后是否導(dǎo)致瘤樣病變主要取決于HPV亞型和個(gè)人的免疫力，免疫力低下者HPV感染率要明顯高于正常。因此，不同患者感染HPV的同一亞型和同一患者感染不同亞型HPV，可產(chǎn)生不同結(jié)局。

通過(guò)以上討論可得知，HPV感染從單一型別感染發(fā)展到多型別感染，在一定程度上促進(jìn)了宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN），與宮頸癌及癌前病變的關(guān)系密不可分。

參考文獻(xiàn)：

[1]趙愛(ài)華，張紅華.多重人乳頭瘤病毒感染與宮頸癌及癌前病變的相關(guān)性研究[J]，寧夏醫(yī)學(xué)雜志，2009，31（8），684-686.

[2]饒海英.劉五高，王艷，人乳頭瘤病毒基因型在宮頸癌及癌前病變中的分布[J]，中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2012，22（1），121-122.

[3]張衛(wèi).人乳頭瘤病毒與宮頸癌的關(guān)系[J]，中外健康文摘，2011，29.

編輯/哈濤