Ki—67、P53在前列腺腺泡腺癌組織中的表達(dá)及意義

摘要：目的 探討Ki-67及P53在前列腺腺泡腺癌（Pca）組織中的表達(dá)及意義。方法 采用免疫組織化學(xué)MaxvisonTM 方法檢測60例Pca與20例BPH（BPH）組織中Ki-67及P53的表達(dá)情況。結(jié)果 Ki-67及P53在Pca中陽性表達(dá)率均高于BPH，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，Ki-67在不同分化程度的Pca組織中表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義，而P53在不同分化癌組織中表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 Ki-67在Pca中的表達(dá)與其Gleason分級相關(guān)，Ki-67可協(xié)助判斷Pca的分級及評估預(yù)后。

關(guān)鍵詞：前列腺腺泡腺癌；Ki67；P53；免疫組化

前列腺癌是男性泌尿生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，其中95%以上為前列腺腺泡腺癌，在美國其發(fā)病率居男性惡性腫瘤的第1位，死亡率僅次于肺癌。近年來我國前列腺癌的發(fā)病率和檢出率也呈明顯上升趨勢。目前最能反映Pca患者的預(yù)后是Gleason評分，而Pca的診斷尤其是Gleason分級是病理診斷的難點(diǎn)，研究表明Ki-67及P53在多種腫瘤組織中表達(dá)，與腫瘤的分化程度及患者的預(yù)后相關(guān)，其能否協(xié)助判斷Pca的分級及判斷患者預(yù)后，目前研究得不夠透徹，本研究將進(jìn)一步分析，以期為Pca的診斷和分級及預(yù)后提供一定的依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2001～2010 年我院外科住院患者Pca存檔石蠟標(biāo)本及HE切片共計60例，年齡50～101歲，平均年齡72歲。所有病例經(jīng)主任醫(yī)師確診，對于可疑的Pca采用免疫組化MaxvisonTM方法標(biāo)記34βE12、P63、AMACR 輔助診斷及鑒別診斷。本研究中將相同Gleason級別的組織學(xué)結(jié)構(gòu)作為一組進(jìn)行研究，其中含有Gleason3級的25例，Gleason4級的30例，Gleason5級的38例。收集我院2010年間BPH的存檔HE切片及石蠟標(biāo)本20例做對照研究，年齡59～83歲，平均年齡70歲。

1.2方法 所有試劑購自福州邁新生物科技有限公司，所有標(biāo)本均經(jīng)10%福爾馬林固定，石蠟包埋 ，4μm切片，采用免疫組化MaxvisonTM方法檢測，實驗嚴(yán)格按照說明書操作。在本研究中，在低倍鏡下觀察細(xì)胞核表達(dá)較高的區(qū)域，換在400高倍鏡觀察，計數(shù)100個細(xì)胞核陽性表達(dá)數(shù)，陽性細(xì)胞占癌細(xì)胞數(shù)的百分比，以陽性細(xì)胞數(shù)≥3%定義為陽性。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS統(tǒng)計軟件，計數(shù)資料的組間的比較采用Chi-Square（χ2）檢驗，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.01表示差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05表示差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Pca中Ki-67的表達(dá) Ki-67陽性蛋白產(chǎn)物定位于細(xì)胞核，為粗細(xì)不一的棕黃色顆粒，陽性細(xì)胞呈彌漫分布，陽性率大多在2%～10%，以陽性細(xì)胞數(shù)>3%定義為陽性，Ki-67在Pca、BPH組織中表達(dá)陽性率分別為（33/60）55%、（1/20）5%，兩組間比較差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），在Gleason3、4、5級別組中表達(dá)陽性率分別為（8/25）32%、（13/30）43.33%、（20/38）52.63%，隨著Glason分級的升高，Ki-67陽性率逐漸升高，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

2.2 Pca中P53的表達(dá) P53蛋白在癌細(xì)胞核陽性，呈黃色至棕黃色，在本項目中，P53細(xì)胞核陽性表達(dá)數(shù)率為1%～30%，大多在3%～10%，以大于3%為陽性。在Pca、BPH組織中的表達(dá)陽性率分別（21/60）35%、（2/20）10%，兩組間比較有顯著差異（P<0.01）。而P53在Gleason3、4、5級別組中表達(dá)陽性率分別為（7/25）28%、（10/30）33.33%、（15/38）39.37%，組間比較表達(dá)陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

3 討論

腫瘤的異質(zhì)性是某些惡性腫瘤的特征之一。在組織形態(tài)方面，腫瘤的異質(zhì)性表現(xiàn)為同一種腫瘤有多種不同組織結(jié)構(gòu)的腫瘤細(xì)胞組成，Pca就是一種異質(zhì)性明顯的腫瘤。大多Pca由多種組織學(xué)結(jié)構(gòu)亞型交替重疊，由分化好的1級到未分化的5級，將腫瘤組織內(nèi)占主要和次要組織結(jié)構(gòu)的分級數(shù)相加得出Gleason評分，研究表明，Gleason評分與患者的預(yù)后有較好的相關(guān)性。因Pca由多種Gleason分級組織混合存在，在本研究不同于其他研究而是將相同Gleason級別的組織結(jié)構(gòu)歸為一組進(jìn)行研究。

本研究未將Gleason1～2級列入，因為，Gleaons1級腫瘤由均一圓形至卵圓形中等大小的腺體構(gòu)成邊界清楚的腺瘤樣結(jié)節(jié)，腺體排列緊密，腺體之間的間質(zhì)成分少，腫瘤不浸潤周圍良性前列腺組織，Gleason2級腫瘤邊界比較清楚，但邊緣有微小浸潤，腺體排列比較松散，腺體之間的間質(zhì)成分開始增多，腺體大小形態(tài)也較不一致。本研究項目中Pca大多為穿刺標(biāo)本，少數(shù)為經(jīng)尿道前列腺內(nèi)鏡切除的標(biāo)本，僅2例為手術(shù)切除標(biāo)本，應(yīng)用基底細(xì)胞標(biāo)記抗體的免疫組織化學(xué)檢查后，未見Gleason1級組織結(jié)構(gòu)，而穿刺活檢不能看到病變的邊界，穿刺標(biāo)本中未能明確判斷Gleason2級組織，僅在2例經(jīng)尿道內(nèi)鏡電切標(biāo)本中有Gleason2級，因組織少范圍少，本組未納入研究。根據(jù)Helpap B報道[1]，當(dāng)前穿刺活檢Gleason評分2～4分的比例從降至0%，同樣，在穿刺中Gleason5分也降至0.3%。

增殖細(xì)胞核抗原Ki-67是一種較為理想的評價細(xì)胞增生活性的標(biāo)記物，在所有增殖細(xì)胞（正常及腫瘤）核的細(xì)胞周期表達(dá)，其表達(dá)隨細(xì)胞周期的不同而不同。國內(nèi)外研究[2]發(fā)現(xiàn)Ki-67抗原與淋巴瘤、肺癌、消化道癌相關(guān)，且與腫瘤的分級和預(yù)后相關(guān)，陽性率與預(yù)后呈反比。多數(shù)學(xué)者研究證實[3-7]，Ki-67在前列腺癌中有明顯表達(dá)，與前列腺癌的分化程度相關(guān)，而在正常前列組織中不表達(dá)。研究表明[8]，Ki-67增殖指數(shù)與腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和疾病相關(guān)存活率有相關(guān)關(guān)系，當(dāng)Ki-67增殖指數(shù)是≤3.5%和>3.5時，5年內(nèi)腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的風(fēng)險由顯著性差異。本研究結(jié)果顯示，Ki-67 在前列腺腺泡癌中表達(dá)顯著高于BPH，在高級別前列腺癌中表達(dá)高于低級別的前列腺癌，說明Ki-67能為前列腺癌的診斷和預(yù)后提供依據(jù)。

P53基因位于人類第17號染色體短臂上，分為野生型和突變型P53，野生型P53的半衰期短，突變型P53半衰期長，在腫瘤組織中用免疫組織化學(xué)檢測到的是突變型P53蛋白的表達(dá)。野生型P53能抑制細(xì)胞的增殖，監(jiān)視損傷和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，是一種抑癌基因。在多種腫瘤和癌家族中，P53蛋白突變時腫瘤形成的重要原因。許多研究[3，5]表明，在前列腺癌中P53蛋白的表達(dá)的陽性率高于前列腺增生組織，其在前列腺癌中的表達(dá)與前列腺癌的分級無關(guān)，與本研究結(jié)果基本一致。有研究表明，P53表達(dá)陰性的前列腺癌的預(yù)后比陽性的要好。本研究結(jié)果顯示P53 尚不能做為前列腺癌預(yù)后的指標(biāo)。

綜上所述：增殖細(xì)胞核抗原Ki-67可作為Pca輔助分級診斷和判斷預(yù)后的分子標(biāo)記物，其在前列腺各種級別組織中的表達(dá)有待更大樣本量的進(jìn)一步研究。

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