中藥制劑聯(lián)合磁、熱療應(yīng)用于乳腺增生大鼠模型的實(shí)驗(yàn)研究

摘要：目的 研究中藥制劑聯(lián)合磁、熱療對(duì)乳腺增生大鼠模型的治療作用。方法 成功建立乳腺增生大鼠模型，35只乳腺增生SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、中藥組、磁療組、熱療組及聯(lián)合組，治療30 d后測(cè)量大鼠乳頭的直徑以及高度，抽血檢測(cè)肝功能、腎功能、雌二醇、孕酮、泌乳素水平；取大鼠心臟以及乳腺行病理學(xué)檢測(cè)，觀察大鼠乳腺導(dǎo)管變化情況。結(jié)果 各治療組與對(duì)照組比較，大鼠乳腺的高度均下降，直徑均縮小，且聯(lián)合組較各單一治療組乳腺高度的下降更加明顯，直徑更加縮小，各單一治療組組間相互比較，大鼠乳腺高度以及直徑變化不明顯。各治療組與對(duì)照組比較，雌二醇、泌乳素水平下降，孕酮水平升高，且聯(lián)合組較各單一治療組雌二醇、泌乳素水平下降更明顯，孕酮水平升高，各單一治療組組間比較雌二醇、泌乳素、孕酮水平差異無顯著性。各組大鼠肝、腎功能以及心肌細(xì)胞病理觀察無明顯變化。結(jié)論 中藥制劑聯(lián)合磁、熱療治療SD大鼠乳腺增生效果確切，療效優(yōu)于單獨(dú)應(yīng)用中藥、磁療及熱療。

關(guān)鍵詞：乳腺增生??；中藥；磁療；熱療

乳腺增生癥是中年女性常見的乳房疾病。占全部乳房疾病的75%[1]。乳腺增生癥有多種類型，其中纖維囊性增生伴不典型增生被認(rèn)為是乳腺癌的前期病變[2]。目前乳腺增生癥治療手段主要有西醫(yī)、中醫(yī)和物理治療3類，中醫(yī)藥為目前治療本病的主要手段。物理治療多采用中藥外用與磁療結(jié)合的方法，以及中藥外用結(jié)合乳腺治療儀行離子導(dǎo)入甚或針灸來治療乳腺增生癥，也取得了可喜的療效，但起效相對(duì)較慢且離子導(dǎo)入的實(shí)施需在醫(yī)院才能完成[3-7]。本研究通過建立乳腺增生SD大鼠動(dòng)物模型，將中藥制劑與磁療、熱療三種手段有機(jī)結(jié)合，觀察其治療效果，并檢測(cè)其毒副作用，為下一步臨床研究提供理論基礎(chǔ)。

1資料與方法

1.1一般資料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD雌性大鼠40只清潔級(jí)，體重（210±10）g，75～85日齡。購(gòu)于南華大學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物部且體重和周齡統(tǒng)計(jì)學(xué)上無差異，按標(biāo)準(zhǔn)飲食，分籠飼養(yǎng)于相同的環(huán)境中。

1.1.2藥物及試劑 雌二醇注射液，黃體酮注射液，雌二醇放免試劑盒，孕酮放免試劑盒，泌乳素放免試劑盒，中藥制劑，靜磁磁鐵，暖洋洋熱帖。

1.2方法

1.2.1建立SD大鼠乳腺增生模型 40只SD大鼠后肢內(nèi)側(cè)肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5 mg/Kg，1次/d，連續(xù)25 d，續(xù)用肌肉注射黃體酮5 mg/Kg，1次/d，連續(xù)5 d。隨機(jī)處死5只大鼠，通過病理組織學(xué)檢查確認(rèn)造模成功。

1.2.2實(shí)驗(yàn)分組及干預(yù) 將剩余35只SD大鼠按干預(yù)方法不同隨機(jī)分為5組，分別為A組：對(duì)照組；B組：中藥組；C組：磁療組；D組：熱療組；E組：聯(lián)合組。參考正常SD雌性大鼠胸圍、腹圍平均值設(shè)計(jì)外用治療衣。大鼠中藥制劑配制：草烏 0.6 g，干姜0.6 g，赤芍0.2 g，白芷0.2 g，肉桂0.1 g，研細(xì)末混勻黃酒調(diào)敷。A組：僅僅用治療衣包裹，未做其他處理。B組：用中藥制劑放入治療衣內(nèi)側(cè)中藥外用袋內(nèi)使用，24 h/d，共30 d。C組：將磁塊固定在上乳腺上，磁場(chǎng)強(qiáng)度約為6～9 mT，30 min/次，1次/d，15 d為1療程，共30 d。D組：將暖洋洋熱帖貼在治療衣外側(cè)，照射溫度39℃～45℃，5 h/次，1次/d，共30 d。E組：以中藥制劑聯(lián)合磁療、熱療，30 min后去掉磁鐵，5 h后取掉熱帖，保留中藥制劑于治療衣內(nèi)側(cè)中藥外用袋內(nèi)，共30 d。

1.2.3結(jié)果觀察及判斷標(biāo)準(zhǔn) 第31 d測(cè)量各組大鼠乳腺高度以及直徑，然后將各組動(dòng)物麻醉后，切取大鼠心臟及第2對(duì)完整的乳房，常規(guī)石蠟切片HE染色后光鏡下組織學(xué)觀察；從心臟中抽取5 mL血液作生殖激素3項(xiàng)（雌二醇、泌乳素、孕酮）以及肝、腎功能檢測(cè)。目前國(guó)內(nèi)通常采用楊國(guó)漢等[8]設(shè)立乳房的大體形態(tài)判別標(biāo)準(zhǔn)：：改變不明顯者為（-）、單純腫大者為（+）、紅腫大者為（++）。達(dá)麗卿等[9]建立了乳頭形態(tài)學(xué)判斷標(biāo)準(zhǔn)：無變化，光鏡下基本恢復(fù)到正常乳腺結(jié)構(gòu)為（-）；乳頭大，光鏡下可見結(jié)締組織增生者為（+）；乳頭腫大，光鏡下可見結(jié)締組織及腺導(dǎo)管增生者為（++）；乳頭紅、腫、大，光鏡下可見結(jié)締組織成纖維細(xì)胞增生，腺導(dǎo)管增生可見數(shù)目增加，管腔擴(kuò)大，腺導(dǎo)管上皮增生者為（+++）。李建國(guó)等[10]將乳腺增生按病理程度不同分為四級(jí)：（-）乳腺小葉不增生，腺體數(shù)量極少，腺泡不擴(kuò)張，處于靜止?fàn)顟B(tài)；（+）乳腺小葉無明顯增生，個(gè)別腺泡有輕度增生，無擴(kuò)張；（++）乳腺小葉大部分增生，部分腺泡明顯擴(kuò)張；（+++）乳腺小葉明顯增生，腺泡處于極度擴(kuò)張狀態(tài)，腺上皮細(xì)胞呈扁平狀，腺泡內(nèi)及導(dǎo)管內(nèi)有大量的分泌物。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13. 0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。組間比較采用單因素方差分析t檢驗(yàn)：P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

各組大鼠乳頭肉眼觀顯示：對(duì)照組大鼠乳頭突出皮毛，脫毛后，可見乳頭增大、充血豎起，顏色暗紅，觸之較硬。其它各治療組均見大鼠乳頭較前縮小，成米粒狀，稍隆起，顏色稍紅潤(rùn)，觸之較硬。各組大鼠第2對(duì)乳頭直徑和高度的結(jié)果見表1，可見各治療組與A組比較，大鼠乳腺的高度均下降，直徑均縮小，且聯(lián)合組與各單一治療組比較大鼠乳腺的高度均下降，直徑均縮小，但各單一治療組組間相互比較，大鼠乳腺高度以及直徑變化不明顯。

各治療組與對(duì)照組比較，雌二醇、泌乳素下降、孕酮水平升高，且聯(lián)合組與各單一治療組比較，雌二醇、泌乳素下降更明顯，孕酮水平升高，但各單一治療組組間比較雌二醇、泌乳素、孕酮含量變化不大。各組大鼠雌二醇、孕酮、泌乳素水平，見表2。

對(duì)照組大鼠乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞增生明顯，管腔明顯擴(kuò)張，有分泌物，小葉明顯增多，腺泡增生明顯；各個(gè)治療組大鼠小葉增大不明顯，腺泡腔和腺導(dǎo)管腔少數(shù)擴(kuò)張，分泌物減少。各組對(duì)模型大鼠乳腺病理組織學(xué)的影響，見表3。

各組間比較，血清肌酐、尿素氮及谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素含量無明顯變化，差異無顯著性。各組心肌肌纖維均排列整齊，無心肌纖維的破壞，細(xì)胞質(zhì)豐富均勻，細(xì)胞間隙正常，未見水腫。

3討論

乳腺增生病是乳腺組織的良性增生性疾病，既非炎癥，也非腫瘤，以乳房疼痛和腫塊為主要臨床表現(xiàn)，并且隨著月經(jīng)周期或情緒波動(dòng)呈現(xiàn)周期性變化。乳腺增生病是育齡期女性最常見的乳房疾病，發(fā)病率占育齡婦女的80%～90%左右，而且發(fā)病率有逐年上升的趨勢(shì)，嚴(yán)重影響女性身心健康。

本實(shí)驗(yàn)選用SD雌性大鼠作為造模動(dòng)物，采用苯甲酸雌二醇和黃體酮干預(yù)進(jìn)行動(dòng)物建模[11-12]。造模后所有大鼠均表現(xiàn)為乳腺體積增大，腺泡和導(dǎo)管腔擴(kuò)張，腺體增生，腺泡和小葉數(shù)量增加，脂肪和結(jié)締組織減少等，成功率達(dá)100%。

磁場(chǎng)影響人體電流分布、荷電微粒的運(yùn)動(dòng)、膜系統(tǒng)的通透性和生物高分子的磁矩取向等，使組織細(xì)胞的生理、生化過程改變，產(chǎn)生鎮(zhèn)痛、消腫、促進(jìn)血液及淋巴循環(huán)等作用。磁療安全、無創(chuàng)也沒有毒性，它可以使身體得到溫順和漸進(jìn)的平衡和營(yíng)養(yǎng)。熱療可增加組織血流速度和血管滲透性熱療改變藥物在體內(nèi)的代謝；熱療影響藥物在肝臟和組織線粒體中代謝為活性基團(tuán)或影響肝、腎對(duì)活性組成部分的滅活。熱療最大優(yōu)點(diǎn)是無創(chuàng)或微創(chuàng)，能有效緩解患者疼痛，提高患者生活質(zhì)量[13]。明代陳實(shí)功所著外科專著《外科正宗》記載，處方草烏、干姜各30 g，赤芍、白芷、南星各10 g，肉桂5 g，研細(xì)末調(diào)敷，功用：溫陽解凝、活血化痰。主治：陽虛寒凝之局部腫硬。本組研究發(fā)現(xiàn)，三種干預(yù)因素?zé)o論單用還是聯(lián)用對(duì)大鼠增生的乳腺都有治療作用，且聯(lián)用的治療效果優(yōu)于單獨(dú)。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，乳腺增生病與機(jī)體雌激素水平過高而黃體酮拮抗不足有著密切的關(guān)系。雌激素的過度刺激可使乳腺上皮細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞增生，使結(jié)締組織水、鈉儲(chǔ)留增加，進(jìn)而導(dǎo)致小葉間水腫。臨床上發(fā)現(xiàn)原發(fā)性無月經(jīng)癥患者用雌激素治療，可見乳腺肥大，治療停止后，乳腺萎縮。孕酮（P）可促使腺泡發(fā)育，在一定條件下可以對(duì)抗雌二醇（E2）對(duì)乳腺組織的刺激作用，還可以降低雄激素轉(zhuǎn)變?yōu)榇萍に豙14]。而且孕激素能通過抑制垂體促性腺激素的分泌及卵巢的分泌，降低血漿E2水平及乳腺內(nèi)雌激素受體（ER）含量，在靶細(xì)胞上通過增加17-輕類固醇脫氫酶的活性，使E2轉(zhuǎn)化為活性較弱的雌酮（EI）[15]。所以孕酮在乳腺增生病中的作用常被作為一種有效的保護(hù)劑而認(rèn)識(shí)的。雌激素水平正?；蜻^高而孕酮分泌過少或兩者之間不平衡，便可引起乳腺的復(fù)舊不完全，組織結(jié)構(gòu)發(fā)生紊亂，導(dǎo)致乳腺導(dǎo)管上皮和纖維組織不同程度的增生和末梢腺管或腺泡形成囊腫[16]。乳腺增生病患者雌二醇水平顯著高于正常婦女，而孕酮水平偏低，因而認(rèn)為雌孕激素平衡失調(diào)，可使雌激素長(zhǎng)期刺激乳腺組織，而無孕激的節(jié)制和保護(hù)作用是導(dǎo)致乳腺增生的重要原因。本組研究顯示：中藥制劑外用、磁療、熱療均可以調(diào)節(jié)大鼠激素水平，使模型大鼠異常升高的血清E2明顯降低，使血清P含量明顯升高，使血清中PRL下降。聯(lián)合治療組與各個(gè)單用組比較差異顯著性明顯，但是各個(gè)單用組間無顯著性差異。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)大鼠的肝腎功能和心肌細(xì)胞進(jìn)行了檢測(cè)和觀察。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：各組與對(duì)照組比較肝、腎功能無顯著性差異。對(duì)于心肌細(xì)胞：各組間比較纖維排列整齊，無心肌纖維的破壞，細(xì)胞質(zhì)豐富均勻，細(xì)胞間隙正常，未見水腫。

總之，不論中藥制劑、磁療、熱療或者聯(lián)合應(yīng)用三者，對(duì)乳腺增生大鼠有內(nèi)分泌的調(diào)節(jié)作用，也可以降低模型大鼠乳頭的高度以及直徑，而且較為安全。三者聯(lián)合治療乳腺增生大鼠的效果優(yōu)于各個(gè)單一治療方法。

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編輯/張燕