葛根炮制機理的研究

摘要：目的 研究溫度對葛根中葛根素的影響。方法 以條件甲醇：水（25：75）為流動相；檢測波長為254nm，流速：1.0mL/min，用HPLC方法對其進行測定，對葛根生品及不同溫度下處理的葛根進行測定和比較。結果 所確定的含測方法穩(wěn)定可行，實驗表明溫度對葛根中的葛根素有影響，隨溫度的升高葛根素會有所降低，提示葛根的炮制過程應注意對溫度控制。

關鍵詞：葛根素；葛根；HPLC；烘制

葛根為豆科植物野葛Pueraria lobata （Wild.）Ohwi的干燥根。味甘、辛，涼。歸脾、胃、肺經(jīng)。具有解肌退熱，生津止渴，透疹，升陽止瀉等功效[1]。葛根臨床應用生熟有別。本文以葛根素為指標，研究溫度對葛根影響。

1 儀器與試劑

P230II大連依利特（UV230II紫外檢測器，EC2006-色譜數(shù)據(jù)處理工作站），1100 Series高效液相色譜儀（Agilent，美國）KQ3200超聲波清洗器（江蘇昆山）等。葛根藥材（購于開發(fā)區(qū)保健大藥房，經(jīng)鑒定符合藥典要求）；葛根素對照品（批號110721-201014，中國藥品生物制品檢定所）；高效液相色譜用水為純凈水，甲醇為色譜純；其他試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1葛根素的含量測定方法

2.1.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇：水（25：75）為流動相；檢測波長為254nm，流速：1.0mL/min；柱溫：30℃。理論板數(shù)按葛根素峰計算應不低于2000。

2.1.2供試品溶液的制備 取本品粉末（過三號篩）約0.1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入30%乙醇50ml，稱定重量，加熱回流30min，放冷，再稱定重量，加30%乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.1.3對照品溶液制備 精密稱取葛根素對照品，加甲醇制成每1ml含0.08mg，即得。

2.1.4 空白試驗 即溶劑。

2.1.5 測定結果 分別精密吸取對照品、供試品和空白試驗各20μL。依次進樣，在上述色譜條件下測定，記錄色譜圖。

2.2含量測定方法學考察

2.2.1標準曲線的繪制 精密稱取葛根素對照品適量，加甲醇制成0.4mg/ml的溶液。精密量取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分別至于10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。分別量取20μl，注入HPLC色譜儀中，按上述色譜條件測定，測定峰面積。以對照品溶液的進樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。得回歸方程：Y=251.0X-9.2，r=0.9998。結果表明，葛根素在0.8～4.0μg之間峰面積于進樣質(zhì)量有良好的線性關系。

2.2.2精密度試驗 依法連續(xù)測定6次，RSD 為1.00%，表明本方法精密度良好。

2.2.3穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液，于0、2、4、6、8、10h測定葛根素色譜峰面積，測定結果RSD為0.98%，結果表明，溶液在10h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.2.4重復性試驗 取樣品，按2.1項下供試品溶液制備，根據(jù)2.3項下色譜條件及檢測方法測定5次，記錄峰面積，測定結果RSD為1.33%，表明方法重復性良好。

2.2.5回收率試驗 分別精密稱取葛根樣品0.1g，加4.05mg/ml對照品1ml，按2.1.2項下方法處理，按2.1.1項下色譜條件進行測定，按外標法以峰面積計算回收率，結果RSD值為1.14%，表明方法的回收率試驗符合相關要求。

2.3葛根加熱處理的方法 供試品藥材的制備[2]取凈葛根生品50g，于粉碎機中粉碎，過篩，將粉末分成3份，留取一份作為對照，不做任何處理，編號為葛根1，其余2份分別置于玻璃皿中，編號為葛根2，3，于電熱鼓風恒溫干燥箱內(nèi)分別于100℃，120℃，烘制35min。將上述3份樣品于相同溫度、濕度條件下放置24h后，精密稱量葛根粉末1g，按前述方法進行含量測定。見表1。

2.4不同溫度對葛根素含量的影響結果 取葛根不同樣品，按2.1.2方法進行處理，按2.1.1色譜條件進行含量測定，見表2。

3 討論與結論

3.1本研究結果表明，所確定的含量測定方法，適合樣品的含量測定。

3.2目前葛根的炮制有煨制，炒制等法。其中麩煨是：①取麥麩置鍋內(nèi)，用文火加熱，投入葛根片，適當翻動，至葛根片呈焦黃色，取出篩去麥麩，放涼。每葛根片100kg，用麥麩30kg（《規(guī)范》）；②取葛根片，用麩炒法，炒至黃色為度（《四川》）?；垤?取滑五粉，置鍋內(nèi)加熱，倒入凈葛根片，文火微炒至表面呈黃色，取出，篩凈滑石粉（《寧夏》）。紙煨 取葛根塊，用紙裹煨法煨至紙呈焦黑色為度（《四川》）。米湯煨 取葛根片用米湯拌浸，以吸潤為度；連藥和米湯一同入鍋內(nèi)炒干，至色轉(zhuǎn)深黃褐色，即稱煨葛根。葛根16kg，用米湯6kg（《集成》）。其炒制的方法是取凈葛根片或塊，用文火炒至表面呈黃色，稍帶焦斑，取出，篩去灰屑（《江蘇》）。以上炮制過程均有加熱過程。本實驗通過烘制的方法對葛根進行作用，發(fā)現(xiàn)不同溫度作用下的葛根素的含量與未加熱葛根相比較，結果： 未加熱樣品>100℃烘品>120℃烘品，說明在不同溫度作用下，對葛根素有不同程度的影響。隨溫度的升高葛根素會有所降低，提示葛根的炮制過程應注意對溫度控制。

參考文獻：

[1]王鵬，黃偉，彭宇生.葛根炮制工藝研究[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2007，8：15-16.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：312-313.

編輯/哈濤