慢乙肝患者拉米夫定治療過程中HBV DNA定量結(jié)果的變化分析

摘要：目的 探討CHB（慢乙肝）患者拉米夫定治療過程中HBV DNA定量結(jié)果的變化分析。方法 選取CHB患者254例，按拉米夫定藥物治療時間長短的不同進(jìn)行分組，分別采用PCR熒光法進(jìn)行乙型肝炎病毒核酸的定量檢測，對測定獲得的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果 拉米夫定治療不同時間分段的乙肝病毒基因陽性率分別為38.89%、52.31%、66.67%、80.00%，隨著拉米夫定藥物治療時間的延長，乙肝病毒基因的陽性率逐漸上升。結(jié)論 長時間應(yīng)用拉米夫定治療慢性乙型肝炎可以導(dǎo)致部分患者HBV DNA定量結(jié)果反彈性升高。

關(guān)鍵詞：慢性乙型肝炎；拉米夫定；HBV DNA定量

拉米夫定作為國內(nèi)首批的抗病毒藥物之一，因其在抑制病毒方面效果良好、不良反應(yīng)少、患者的耐受性好、價格適宜以及副作用少等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于臨床治療[1]。拉米夫定抵抗乙肝病毒基因的主要作用機(jī)制是抑制HBVR DNA聚合酶的形成，終止DNA鏈的進(jìn)一步延伸，阻止HBV的復(fù)制，但拉米夫定藥物并不能清除肝細(xì)胞核內(nèi)的cccDNA，cccDNA在體內(nèi)含量雖然很少但其半衰期很長，因此長時間使用拉米夫定可導(dǎo)致HBVR DNAR P區(qū)發(fā)生YMDD變異[2]。本實(shí)驗(yàn)通過對拉米夫定藥物治療時間不同的患者進(jìn)行病毒含量檢測，探討患者抗病毒治療期間乙肝病毒含量變化，為臨床醫(yī)生合理選擇用藥提供有效依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2011年～2014年大連市第六人民醫(yī)院慢性乙型肝炎254例（均為住院患者）；其中男性病例192例，女性病例62例，年齡20～75歲，所有患者均已接受拉米夫定治療不等時間（1～96w）。入選標(biāo)準(zhǔn)：所有患者進(jìn)行治療前表面抗原陽性6個月（36w）以上，體內(nèi)乙型肝炎病毒含量要大于105拷貝/mL，生化指標(biāo)中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的含量要大于2倍的正常值上限。慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)均參照《慢性乙型肝炎防治指南》（2012版）[3]；排除標(biāo)準(zhǔn)：其中有酒精性肝炎、自身免疫性肝炎、藥物性肝炎、相關(guān)酶類缺乏性肝炎以及其它臟器的炎癥發(fā)作等；以及有妊娠情況、腎臟系統(tǒng)疾病、血液相關(guān)性疾病以及艾滋病等。

1.2實(shí)驗(yàn)室檢查

1.2.1標(biāo)本采集 空腹抽取靜脈血3ml，置于一次性真空采血管后自然凝固待檢。血清標(biāo)本的存放條件為2℃～8℃（72h內(nèi)）。

1.2.2乙型肝炎病毒核酸定量檢測：由實(shí)時熒光定量PCR儀Mx3000P（美國-ROCHE）測定。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用SPSS19.0對使用拉米夫定治療不同時間患者血清的檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料采取t檢驗(yàn)，計數(shù)資料采取χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1血清中乙型肝炎病毒定量測定結(jié)果分析 254例患者在進(jìn)行拉米夫定藥物治療前血清中乙型肝炎病毒含量水平（1.04±0.16）×107，在接受拉米夫定藥物治療96w后，其中有94例患者的乙肝病毒基因轉(zhuǎn)為陰性，其余160例患者乙肝病毒基因仍為陽性。將本次選取拉米夫定藥物治療后的患者根據(jù)其治療時間的長短進(jìn)行分組后討論，見表1。

2.2對患者進(jìn)行時間段分組后，從測定的結(jié)果可以看出藥物療效的時間長短與乙肝病毒基因陽性率之間具有相關(guān)性，整體的變化趨勢為：隨著拉米夫定藥物治療時間的延長，乙肝病毒基因的陽性率逐漸上升，說明隨著患者治療時間的不斷增加，發(fā)生耐藥突變的幾率變大，導(dǎo)致患者體內(nèi)病毒含量再次上升，出現(xiàn)反彈，致使陽性患者數(shù)增加。

3 討論

本文通過對拉米夫定治療時間長短不同對乙型肝炎病毒耐藥變化情況進(jìn)行研究分析，對此次數(shù)據(jù)統(tǒng)計后得出：藥物療效的時間長短與乙肝病毒基因陽性率之間具有相關(guān)性，整體的變化趨勢為：不同時間分段HBV DNA患者陽性率分別為38.89%、52.31%、66.67%、80.00%。結(jié)果表明隨著拉米夫定藥物治療時間的不斷延長，乙肝病毒基因的陽性率逐漸上升，說明隨著患者治療時間的不斷增加，發(fā)生耐藥突變的幾率變大，導(dǎo)致患者體內(nèi)病毒含量再次上升，出現(xiàn)反彈，致使陽性患者數(shù)增加，此實(shí)驗(yàn)結(jié)果與李佳[4]等人研究結(jié)果一致。

傳統(tǒng)治療過程中所應(yīng)用的抗核苷酸類藥物[5]如拉米夫定、恩替卡韋以及類核苷酸類藥物例如阿德福韋酯等，其中以拉米夫定的應(yīng)用最為廣泛。因其長期治療可以幫助減輕炎癥的發(fā)生進(jìn)展，同時會降低肝臟纖維化以及肝硬化發(fā)生率，其對血清中ALT水平的復(fù)常以及血清中乙肝病毒基因的下降都有顯著效果[6]；然而長期使用拉米夫定進(jìn)行治療會導(dǎo)致HBV聚合酶基因YMDD基序突變的產(chǎn)生，變異類型主要為YIDD、YVDD，其變異產(chǎn)生原因有：藥物本身情況，多重耐藥菌株的產(chǎn)生，病毒復(fù)制發(fā)生反彈現(xiàn)象。關(guān)于YMDD基序突變的基因型分析會在后續(xù)的研究中進(jìn)行討論分析。

參考文獻(xiàn)：

[1]中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會、感染病學(xué)分會.慢性乙型肝炎防治指南2010年更新版[J]. 中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志（電子版），2011，2；5（1）：79-97.

[2]信芝，宋家武. 乙肝病毒P基因區(qū)YMDD變異的臨床檢測技術(shù)進(jìn)展[J].世界感染雜志，2007，7（6）：456-459.

[3]中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會、感染病學(xué)分會.慢性乙型肝炎防治指南[J]. 中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志（電子版），2012，40（4）：66-78.

[4]李佳，曹新鮮.拉米夫定治療前后乙型肝炎病毒YMDD變異的相關(guān)因素分析[J].中國肝臟病雜志，2009，17（9）：641-644.

[5]Chinese Society of Hepatology and Chinese Society of infectious Disease.Chinese Medical Association[J].Chin J Hepatol，2011， 19：13-24.

[6]盛秀勝，徐玲娟.拉米夫定抗乙型肝炎治療中發(fā)生YMDD變異的因素研究[J].國際流行病傳染病學(xué)雜志，2009，36（5）：305-307.

編輯/哈濤